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Estudio Preliminar para la evaluacin de riesgo de la enfermedad Huanglongbing, para la importacin de Ctricos de Guatemala a El Salvador.
Elaborado por: Andrs Wilfredo Rivas Flores 1 Rafael Antonio Menjvar Rosa2 Consultores Fitosanitarios I. Introduccin El Huanlongbing es una enfermedad devastadora de ctricos, que destruye los rboles, no tiene cura y afecta todos los tipos de ctricos. La enfermedad es diseminada a travs de el injerto de tejido enfermo de la planta por su vector,el pslido de los ctricos. La enfermedad tiene su origen en China (Grafton-Cardwel et al., 2006, Davis et al., 2005, Halbert and Manjunath, 2004). El Psyllidae asitico de los ctricos (PAC) Diaphorina citri Kawayama, es una plaga de ctricos y de sus parientes cercanos (por ejemplo plantas del gnero Murraya, tales como el ornamental jasmn naranja o el gnero Bergera, la hoja de curry de la India, usada en cocina. Los Psyllidae, son insectos chupadores, similares en tamao a un fido. El PAC oviposita sus huevos en el borde de las hojas nuevas, los cuales tienen forma de almendra, color amarillo-naranja brillante. Los huevos eclosionan en una pequea ninfa amarillo-naranja, que se alimenta exclusivamente en hojas nuevas. Una caracterstica nica de este Psyllidae es que la ninfa produce un tbulo de cera en su extremo posterior, el cual dirige lejos de su cuerpo las mielecillas que excretan. Los Psyllidae adultos son parduzcos y se alimentan con su cabeza tocando la superficie de la hoja, de tal modo, que su extremo caudal se levanta en un ngulo de ms de 45. El PAC daa ctricos al succionar grandes cantidades de savia y producir copiosas cantidades de mielecillas, la cual posteriormente se cubre de moho negro. En adicin, PAC inyecta una toxina que causa la malformacin de hojas y brotes; sin embargo, el dao ms serio causado por PAC, es debido a su habilidad como vector eficiente de la bacteria Candidatus Liberibacter africanus y americanus, que causa la enfermedad Huanglongbing (HLB) de los ctricos, anteriormente conocida como greening de los ctricos (Grafton-Cardwell y Vidalakis sf., Halbert, S.E.H. y Manjunath, 2004).

II. Taxonoma del agente causal del Huanglongbing Nombre Cientfico: Candidatus Liberibacter De acuerdo a CAB (2007), la taxonoma es la siguiente: Dominio: Bacteria Filo: Proteobacteria
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Andrs Rivas. E-mail: awrivas@yahoo.com Rafael Menjvar. E-mail: rafaelmenjivarrosa@yahoo.com

tel: (503) 2225-6903, Ext. 4616 tel: (503) 2225-6903, Ext. 4609

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Clase: Alphaproteobacteria Orden: Rhizobiales Familia: Phyllobacteriaceae Nombres comunes de la enfermedad: Enverdecimiento de los Ctricos, citrus greening, greening yellow branch disease, yellow shoot, leaf mottling of Citrus, blotchy mottle disease of Citrus, yellow dragon disease. III. Taxonoma del vector Segn CAB (2007), la taxonoma es la siguiente: Nombre Cientfico: Diaphorina citri Kuwayana Sin.: Euphalerus citri Phylum: Artrpoda Clase: Insecta Orden: Hemptera Suborden: Sternorrhyncha Superfamilia: Psylloidea Familia: Psyllidae Nombres Comunes: Pslido de los Ctricos (espaol), Asian Citrus Psyllid (ingls).

IV. Pases donde est presente la enfermedad

De acuerdo a Jepson (2009), Tapia y Esquivel (2009) y Dardares (2009), la distribucin geogrfica de la enfermedad es la siguiente: Ca. L. africanus se encuentra en frica del este, del centro y del sur. Ca. L. americanus se encuentra en el estado de Sao Paulo, Brasil. Ca. L. asiaticus se encuentra en Asia desde Japn hasta el sur de China, SE de Asia y del sub-continente India hasta Pakistn, la pennsula Arbiga (sin incluir Irn), Brasil, Cuba (2009), Repblica Dominicana (2009), Mxico (2009). En los Estados Unidos se reportan los siguientes estados Florida (2005) y Louisiana (Junio 2008). Dardares (2009), registra la enfermedad para Belice (2009). En El Salvador, el MAG (2010) reporta la enfermedad para Honduras (2009) y Guatemala (2010), pero, no se registra an para El Salvador.

V. Pases donde est presente el vector

Segn Bov (2006), Jepson (2009) y Teixeira et al., (2005), el vector D. citri, est ms ampliamente diseminado en Sur y Centro Amrica, incluyendo Mxico (al menos desde 2004), la cuenca del Caribe y en los Estados Unidos, en Texas (2001), Louisiana (Mayo 2008), Alabama (Agosto 2008), Georgia (Agosto 2008), Mississippi (Agosto 2008), Carolina del Sur (Agosto 2008) y California (Septiembre 2008), volvindose una seria amenaza para la industria de los ctricos en estas reas. Tapia (2009), reporta la presencia del vector en la regin de OIRSA, a la cual pertenece El Salvador. VI. Sintomatologa de la Enfermedad La enfermedad se caracteriza por ocasionar reas moteadas en las hojas, frutos mal formados, mal coloreados y con sabor anormal. En reas donde la enfermedad es endmica, los rboles de ctricos pueden vivir por solamente 5-8 aos y nunca dar frutos provechosos.

Los Sntomas son muy variables (Fig. 1): brotes amarillos, muerte regresiva de ramas, cada de hojas, hojas con moteado asimtrico verde-amarillento, similar a los sntomas de la deficiencia nutricional de zinc, venas agrandadas de aspecto corchoso, cada excesiva de frutos, frutos pequeos y deformes, los frutos maduran primeramente en un extremo (por el pednculo), frutos con moteado verde amarillento, pequeas semillas negras abortadas dentro de los mismos, el jugo es bajo en slidos solubles, cido y anormalmente amargo.

Figura 1. Arbol de ctrico, frutos y hojas mostrando los sntomas de Huanglogbing. Fuente: http://www.caes.gov.tw/english/images/plant_02_5.jpg

El tiempo desde la infeccin hasta el aparecimiento de los sntomas es variable, dependiendo de la poca del ao, condiciones ambientales, edad del rbol, hospedero; pudiendo tener un rango desde menos de uno hasta muchos aos (Polek 2009, Grafton-Cardwell sf, Tapia y Esquivel, 2009). VII. Agente Causal El patgeno de HLB, probablemente es originario de frica, en asociacin con Trioza erytreae y un hospedero asintomtico: Vepris lanceolata (Beattie et al. Sf.).. El agente causal de la enfermedad es una bacteria fastidiosa de tipo pleomrfica y en contraste a Spiroplasma citri y los micoplasmas tiene tres membranas que componen la pared celular, aproximadamente de 25nm de ancho (Garnsey, 1989). Es una bacteria limitada al floema, no puede cultivarse. Ha sido caracterizada mediante el estudio de su ARN ribosmico 16S y de los genes del opern , que codifica protenas ribosmicas y la subunidad de la ARN) polimerasa (Garnier, 2000). Candidatus Liberibacter spp., son bacterias gram-negativas, no pueden ser cultivadas en el laboratorio, en otras palabras, no es posible obtener cultivos puros en medios artificiales (Das 2007, Polek 2007, Bov 2006). Tiene la capacidad de multiplicarse en la hemolinfa y las glndulas salivares de los pslidos vectores. Dentro de estos insectos, cruza la pared intestinal hasta llegar a las glndulas salivares, va hemolinfa, tomndole de 1 a 3 semanas segn la virulencia de la variante. En la actualidad se reconocen tres variantes de este patgeno: Candidatus Liberibacter asiaticus, es la ms severa y diseminada geogrficamente: Presente en Asia, Brasil y Florida, EE.UU. Los sntomas de la enfermedad para esta forma, ocurren a bajas elevaciones (360 m.s.n.m.), baja humedad relativa y a temperaturas fras y clidas (arriba de 35 C). Candidatus Liberibacter africanus, presente en frica y sur del Sahara es menos severa, ms restringida geogrficamente (frica y el sur del Sahara) y es considerada sensible al calor. Los sntomas de

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la enfermedad, son producidos en condiciones un tanto hmedas y frescas (20-27C) y a mayor elevacin (900 msnm). Despus de la aparicin de la enfermedad en Brasil las investigaciones realizadas demostraron que el agente causal que afecta los ctricos en Brasil, es una variante ms virulenta de la raza asitica por lo que se propuso denominarla C. L. americanus (Robles et al. Sf., Bov 2006, Polek 2007, Das 2007, Halbert and Manjunath, 2004) Los agentes de la enfermedad (Candidatus Liberibacter spp.) no son distinguibles uno del otro, basndose en los sntomas producidos y probablemente se reproduzcan en el vector (Halbert y Manjunath, 2004). La introduccin de L. asiaticus y el descubrimiento de L. americanus en Brasil, ha resultado en la remocin de cientos de miles de rboles en plantaciones de ctricos en dicho pas. La erradicacin de L. asiaticus de la Florida, USA, no se considera posible (CABI, 2007). VIII. Insecto Vector Candidatus L. asiaticus y Candidatus L. americanus son transmitidos por los adultos de Diaphorina citri Kuwayana(Fig. 2), que prospera en climas secos, de clidos a calientes y est adaptada a altos dficit de saturacin de humedad. Candidatus L. africanus es transmitida por Trioza erytreae (Del Guercio) Fig. 3, la cual est adaptada a bajos dficit de saturacin de humedad y su poblacin incrementa conforme aumenta la altitud (Polek 2007, Bov 2006, Halbert y Manjunath, 2004).

Fig. 2. Diaphorina citri (Imagen de Universidad de Florida)

Fig. 3. Trioza erytreae (imagen www. Invasive.org\image)

Por otro lado, Cicero et al., (2009) cita adems de Diaphorina citri (Kuwayama), a Bactericera cockerelli (Sulc)(Hemiptera: Psyllidae), como vector de Candidatus Liberibacter spp. IX. Plantas Hospederas del Patgeno y del Vector. Hospederos del Patgeno Halbert y Manjunath (2004), reportan a los siguientes hospederos: Aegle marmelos (L.), Aeglopsis chevalieri Swingle, Afraegle gabonensis Engl., Afraegle paniculata (Schaum.) Engl., Atalantia missionis Oliver, Atalantia monophylla (L.) Corr., Atalantia sp., Balsamocitrus dawei Stapf., Citropsis gilletiana Swingle & M. Kellerman, Citropsis schweinfurthii (Engl.)Swingle & Kellerman, Citrus aurantifolia (Christm.) Swingle, Citrus aurantium L., Citrus deliciosa Tenore, Citrus grandis (L.) Osbeck, (C. maxima) Citrus hystrix DC., Citrus jambhiri Lushington, Citrus limon (L.) Burm., Citrus madurensis Loar., Citrus maxima (Burm.) Merr., Citrus medica L., Citrus meyeri Tan, Citrus x nobilis Lour. Citrus obovoidea Hort. ex Tanaka cv Kinkoji, Citrus x paradisi Macfad., Citrus reticulata Blanco, Citrus sinensis (L.) Osbeck Aubert, Citrus spp., Clausena anisum-olens Merrill, Clausena excavata Burm, Clausena indica Oliver, Clausena lansium (Lour.) Skeels, Eremocitrus glauca

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(Lindley) Swingle, Eremocitrus hybrid, Fortunella crassifolia Swingle, Fortunella margarita (Lour.) Swingle, Fortunella polyandra (Ridley) Tanaka, Fortunella spp., Limonia acidissima L., Merrillia caloxylon (Ridley) Swingle, Microcitrus australasica (F.J. Muell.) Swingle, Microcitrus australis (Planch.) Swingle, Microcitrus papuana H.F. Winters, Microcitrus sp. Sidney, Murraya exotica L., Murraya koenigii (L.) Sprengel, Murraya paniculata (L.) Jack, Naringi crenulata (Royb.) Nicholson, Pamburus missionis (Wight) Swingle, Poncirus trifoliata (L.) Raf., Severinia buxifolia (Poiret) Ten., Swinglea glutinosa (Blanco) Merr., Toddalia asiatica (L.) Lam., Triphasia trifolia (Burm. f.) P. Wilson, Vepris lanceolata G. Don, Zanthoxylum fagara (L.) Sarg. Hospederos No Aparentes: Casimiroa edulis Llave & Lex., Zanthoxylum clava-herculis L. Hospederos del vector Halbert y Manjunath (2004), reportan los siguientes hospederos: Aeglopsis chevalieri Swingle, Atalantia missionis Oliver, Balsamocitrus dawei Stapf., Calodendrum capensis Thunb., Catharanthus roseus (L.) G. Don, X Citroncirus webberi J. Ingram & H. E. Moore, Citrus amblycarpa Ochse, Citrus aurantiifolia (Christm.) Swingle, Citrus aurantium L., Citrus depressa Hayata, Citrus grandis (L.) Osbeck, Citrus hassaku Hort. ex Tanaka, Citrus hystrix DC., Citrus ichangensis Swingle, Citrus jambhiri Lushington, Citrus junos Sieb. ex Tanaka, Citrus kabuchi Hort. ex Tanaka, Citrus limon (L.) Burm., Citrus limonia Osbeck, Citrus x nobilis Lour. Ortanique, Citrus maxima (pummelo/shaddock), Citrus x nobilis Lour., Citrus oto Hort. ex Tanaka, Citrus x paradisi Macfad., Citrus reticulata Blanco, Citrus sinensis (L.) Osbeck, Citrus sunki Hort. ex Tanaka, Citrus unshiu (Mack.) Marc, Clausena indica Oliver, Clausena lansium (Lour.) Skeels, Cuscuta australis R. Br. (Convolvulaceae, Cuscutaceae), Fortunella spp., Limonia acidissima L., Microcitrus australasica (F. J. Muell.) Swingle, Murraya koenigii (L.), Murraya paniculata (L.) Jack, Nicotiana tabacum L. Xanthii, Poncirus trifoliata (L.) Raf., Swinglea glutinosa (Blanco) Merr., Toddalia lanceolata Lam., Triphasia trifolia (Burm. f.) P. Wilson., Severinia buxifolia (Poiret) Ten. Posible no hospederos: Citrus indica Tanaka, Citrus limetta Risso, Citrus macroptera Montrons. X. Observaciones y Recomendaciones Aunque no se registra todava la presencia de Hanglongbing en El Salvador, si se reporta al vector y la presencia de muchas de las plantas hospederas, tanto del patgeno como del vector, ser muy difcil evitar la introduccin de dicha enfermedad; por otro lado, dado que el patgeno no sigue la va de ingreso (fruto), se sugiere que las importaciones se hagan exigiendo limpieza, frutos sanos y embalado correcto de los frutos; sin embargo, mientras no se reporte formalmente la presencia de la enfermedad, se sugieren tomar en cuenta las siguientes directrices segn Tapia y Esquivel (2009), para prevenir el ingreso de la enfermedad y controlar al vector y la enfermedad. 1. No introducir plantones, material vegetativo, semillas de ctricos, procedentes de pases con HLB. 2. No introducir plantones, material vegetativo, semillas de ctricos u otras plantas Rutceas hospedantes de HLB. 3. Mantener actualizados a los Inspectores de Cuarentena Agropecuaria, mediante capacitacin en servicio, sobre la enfermedad y sus vectores.

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4. Prohibir la importacin de plantas Rutceas ornamentales hospedantes de HLB y su vector como Murraya paniculata, entre otras. 5. Exigir el certificado sanitario a los viveros de los pases de donde se vayan a importar material vegetativo de ctricos. 6. Aplicar insecticidas para el control del vector, ya que una vez est presente la bacteria en la plantacin, no habr tolerancia al insecto vector (cero tolerancias). 7. Implementar un programa de certificacin de viveros de ctricos. 8. El control qumico del vector y el uso de plantones certificados proveniente de viveros cubiertos, es indispensable. 9. Prohibir el traslado de materiales de propagacin de plantas de ctricos y otras Rutceas que hayan sido producidas en los lugares infectados por la bacteria asociada al HLB, hacia las reas libres de la plaga.

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