VI.

ALAT DAN BAHAN Alat : -Spektrofotometer UV-VIS -Penangas air -Sentrifuge -Gelas ukur -Tabung reaksi -Gelas kimia Bahan : - Larutan standar glukosa 0,01 mg/mL - Larutan Ba(OH)2 0,3 N - Larutan ZnSO4.7H2O 5 % - Pereaksi arsenomolibdat

VII. ALUR KERJA Deprotenasi filtrat darah 0,1 mL oxalated Dimasukkan ke dlm tabung sentrifuge yg telah berisi 1,90 mL aquades & dicampur dgn baik (+) 1,5 mL Ba(OH)2 0,3 N & diaduk hingga merata (+) 1,5 mL ZnSO4 5 % & dicampur dengan baik Didiamkan selama 5 menit Disentrifuge selama 30 menit Didekantasi Filtrat darah bebas protein Dilakukan uji biuret Larutan tidak berwarna

Penentuan kadar glukosa darah 1,0 mL filtrat darah bebas protein Dimasukkan ke dlm tabung reaksi (+) 1 mL pereaksi Cu alkalis Dimasukkan ke dlm air mendidih selama 20 menit Dimasukkan ke dlm air dingin (+) 1 mL pereaksi arsenomolibdat & diaduk hingga merata Dibaca absorbansinya pada = 660 nm Absorbansi larutan

Penentuan kurva standar 1 mL glukosa 0,1 mg/mL 1 mL glukosa 0,2 mg/mL 1 mL glukosa 0,3 mg/mL 1 mL glukosa 0,4 mg/mL 1 mL glukosa 0,5 mg/mL

Dimasukkan ke dlm tabung reaksi (+) 1 mL pereaksi Cu alkalis Dimasukkan ke dlm air mendidih selama 20 menit Dimasukkan ke dlm air dingin (+) 1 mL pereaksi arsenomolibdat & diaduk hingga merata Dibaca absorbansinya pd = 660 nm Absorbansi larutan Larutan blanko 1,0 mL filtrat darah bebas protein Dimasukkan ke dlm tabung reaksi (+) 1 mL pereaksi Cu alkalis Dimasukkan ke dlm air mendidih selama 20 menit Dimasukkan ke dlm air dingin (+) 1 mL pereaksi arsenomolibdat & diaduk hingga merata Dibaca absorbansinya pada = 660 nm Absorbansi larutan

VIII. HASIL PENGAMATAN No. 1. 0,1 mL oxalated berisi 1,90 mL aquades & dicampur dgn baik - (+) 1,5 mL Ba(OH)2 0,3 N & diaduk hingga merata - (+) 1,5 mL ZnSO4 5 % & dicampur dgn baik - Didiamkan selama 5 menit - Disentrifuge selama 30 menit - Didekantasi filtrat darah bebas protein - Dilakukan uji biuret Larutan tak berwarna Filtrat + biuret = larutan tak berwarna Perlakuan Deprotenasi filtrat darah Oxalated = larutan (+) (+) Ba(OH)2 ZnSO4 putih = = ada (hijau - Dimasukkan ke dlm tab.sentrifuge yg telah merah kehijauan endapan keruh) Hasil pengamatan Sebelum Sesudah Dugaan/reaksi Kesimpulan

2.

Penentuan kadar glukosa darah 1,0 mL filtrat darah bebas protein - Dimasukkan ke dlm tab. reaksi - (+) 1 mL pereaksi Cu alkalis menit - Dimasukkan ke dlm air dingin - (+) 1 mL pereaksi arsenomolibdat & diaduk hingga merata - dibaca absorbansinya pd = 660 nm Absorbansi larutan Arsenomolibdat : - Dimasukkan ke dlm air mendidih selama 20 larutan tidak berwarna Filtrat = tak berwarna

(+) Cu alkalis = lar. biru Dimasukkan air panas = Kadar normal glukosa berwarna biru. biru Absorbansi = 0,089 dalam darah adalah (+) arsenomolibdat = 70-90 mg/mL

3.

Penentuan kurva standar 1 mL glukosa 0,1 mg/mL, 0,2 mg/mL, 0,3 Lar. standar glukosa = mg/mL, 0,4 mg/mL, dan 0,5 mg/mL Dimasukkan ke dlm tab. reaksi yg berbeda (+) 1 mL pereaksi Cu alkalis menit Dimasukkan ke dlm air dingin (+) 1 mL pereaksi arsenomolibdat & diaduk hingga merata Dibaca absorbansinya pd = 660 nm Absorbansi larutan (+) arsenomolibdat Tab. 1 = biru tua (++++) Tab. 2 = biru tua (+++) Tab. 3 = biru tua (++) Tab. 4 = biru tua (+) Tab. 5 = biru tua Absorbansi : Tab. 1 = 0,909 Tab. 2 = 0,758 Tab. 3 = 0,394 Tab. 4 = 0,487 Tab. 5 = 0,995 Pereaksi Cu alkalis = Dimasukkan ke dlm air mendidih selama 20 biru lar. tak berwarna Setelah dipanaskan : Larutan tak berwarna timbul endapan merah bata. Lar. menjadi warna biru

Pers.garis : y = -0,09973x + 0,73851 -0,64951 = -0,09973x x = 6,5127 x 10 x = 65,127 mg/ml

makin biru pekat warna larutan maka makin besar konsentrasi glukosa yang terkandung.

4.

Larutan blanko 1,0 mL aquades - Dimasukkan ke dlm tab. reaksi - (+) 1 mL pereaksi Cu alkalis - Dimasukkan ke dlm air mendidih selama 20 menit - Dimasukkan ke dlm air dingin - (+) 1 mL pereaksi arsenomolibdat & diaduk hingga merata - dibaca absorbansinya pd = 660 nm Absorbansi larutan (+) arsenomolibdat = lar. warna biru Absorbansi = 0,092 Aquades = tak berwarna Pereaksi Cu alkalis = biru Setelah dipanaskan : Larutan tetap berwarna biru Larutan menjadi warna biru