LAPORAN PRAKTIKUM ANALISIS KLINIK PENETAPAN KADAR KREATININ Hari / Tanggal Praktikum Golongan Nama / NIM Nurindah Tri

Margita Dzikrina Ilmanita Sekar Tyas Hutami Umi Rohmadiyani Afina Muharridotussilmi Amanda Lia Heriza Siti Nur Rodiah Sofiana Bernadine Amanda N. Alfiani Husna Amalia Christanti Litani P. P. Ayu Widhaningtyas Lina Susanti Noviana Suci Latifah Estriyani Annisa Ayu Puspita Siti Wahidah Binti Yussof Alphita Laksmi Dewanti : Jumat / 11 Maret 2011 : IV : 8392 8397 8403 8406 8414 8421 8422 8423 8428 8430 8432 8440 8441 8444 8447 8449 8452 8270 (golongan I)

I.

TUJUAN Menetapkan kadar kreatinin dalam sampel urin dan plasma dengan metode Jaffe modifikasi tanpa deproteinisasi serta menghitung jumlah leukosit, eritrosit, dan trombosit darah.

II.

PRINSIP DASAR PERCOBAAN Percobaan ini sederhana, untuk penentuan kadar dengan bantuan larutan pikrat basa tanpa deproteinisasi. Reaksinya yaitu dengan mereaksikan kreatinin dengan asam pikrat membentuk kompleks kreatinin pikrat yang berwarna jingga dan memiliki serapan 492 nm.

III.

ALAT DAN BAHAN

Alat 1. Pipet volume 1 ml 2. Pipet ukur 2 ml 3. Pipet tetes 4. Pro pipet 5. Yellow tip 6. Blue tip 7. Tabung reaksi 8. Labu takar 100 ml 9. Kuvet dan Spektrofotometer 10. Mikropipet 11. Eppendorf 12. Syringe dan jarum 13. Mikroskop 14. Objek glass 15. Kapas Bahan 1. Sampel urin 2. Sampel plasma 3. Reagen 1 ( Larutan buffer = 6,26g NaOH dalam akuades ad 1000ml ) 4. Reagen 2 ( Asam pikrat 2,0g dalam aquades ad. 1000ml ) 5. Aquadest 6. Alkohol

7. Reagen Turk 8. Reagen Hayem 9. Reagen asam oksalat 1%

IV.

CARA KERJA

Sampel Urin Cara I Ambil sampel urin 1 ml diencerkan sampai 50 ml

Sampel urin ( 50 L)

Baku kreatinin ( 50 L)

Blanko aquadest ( 50 L)

Tambah Reagen 1, diamkan 5 menit

Tambah Reagen 2, tunggu 1 menit, Baca absorbansi ( A1) Tunggu 2 menit, baca absorbansi ( A2 )

Cara II

Sampel urin ( 50 L)

Baku kreatinin ( 50 L)

Blanko aquadest ( 50 L)

Tambah monoreagen ( 8 ml reagen I + 2 ml reagen 2)

Baca absorbansi Sampel Plasma Cara I Darah 1000 L dalam eppendorf

Sentrifuge 1300 rpm, 25C, 3 menit

Ambil masing - masing 50 L ke dalam 16 tabung reaksi kecil

CARA KERJA 1. Penghitungan Jumlah Leukosit a. Mengambil 20 mikro Liter darah EDTA b. Menambahkan 0,5 ml reagen Turk c. Mencampur dan mendiamkan selama 15 menit d. Menghitung Jumlah Leukosit dibawah mikroskop 2. Penghitungan Jumlah Eritrosit a. Mengambil 20 mikroliter darah EDTA b. Menambahkan 4 ml reagen Hayem c. Mencampur dan mendiamkan selama 3 menit d. Menghitung jumlah eritrosit dibawah mikroskop

3. Penghitungan Jumlah Trombosit a. Mengambil 20 mikroliter darah EDTA b. Menambahkan reagen Amonium Oksalat 1% c. Mencampur dan mendiamkan selama 5 menit d. Menghitung jumlah trombosit dibawah mikroskop

V.

HASIL PERCOBAAN ( DATA DAN PERHITUNGAN)

Data Urin No. Data Urin A1 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. Baku Sampel I Sampel II Sampel III Sampel IV Sampel V Sampel VI Sampel VII Sampel VIII Sampel IX Sampel X Sampel XI Sampel XII Sampel XIII Sampel XIV Sampel XV 0,034 0,044 0,042 0,038 0,058 0,055 0,035 0,38 0,023 0,032 0,043 0,058 0,048 0,037 0,028 0,101 0,113 0,116 0,107 0,129 0,062 0,087 0,108 0,077 0,098 0,114 0,099 0,120 0,091 0,095 Cara I A2

Perhitungan Konsentrasi kreatinin = (A2-A1)sampel x 2 mg/100ml (A2-A1)baku

Cara I: Sampel 1 = 0,101-0,034 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 5,826 mg/100ml = 0,113-0,044 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 6 mg/100ml = 0,116-0,042 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 6,435 mg/100ml = 0,107-0,038 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 6 mg/100ml = 0,129-0,058 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 6,174 mg/100ml = 0,062-0,055 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 0,609 mg/100ml = 0,087-0,035 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 4,552 mg/100ml = 0,108-0,038 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 6,087 mg/100ml = 0,077-0,023 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 4,695 mg/100ml = 0,098-0,032 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 5,739 mg/100ml = 0,114-0,043 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 6,174 mg/100ml = 0,099-0,058 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 3,565 mg/100ml = 0,120-0,048 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 6,261 mg/100ml = 0,091-0,037 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 4,696 mg/100ml = 0,095-0,028 x 2 mg/100ml -0,044+0,067

Sampel 2

Sampel 3

Sampel 4

Sampel 5

Sampel 6

Sampel 7

Sampel 8

Sampel 9

Sampel 10

Sampel 11

Sampel 12

Sampel 13

Sampel 14

Sampel 15

= 5,826 mg/100ml Konsentrasi kreatinin rata-rata = 5,2426 mg/100ml No. Data Plasma A1 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Baku Sampel I Sampel II Sampel III Sampel IV Sampel V Sampel VI Sampel VII Sampel VIII -0,067 0,027 0,106 -0,041 -0,015 -0,03 0,095 0,023 0,037 Cara I A2 -0,044 0,032 0, 124 -0,029 0,03 0,008 0,076 0,008 0,09

Perhitungan Cara I: Sampel 1 = 0,032-0,027 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 0,432 mg/100ml = 0,124-0,106 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 1,565 mg/100ml = -0,029-(-0,041) x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 1,043 mg/100ml = 0,03-(-0,015) x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 3,913 mg/100ml = 0,008-(-0,03) x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 3,304 mg/100ml = 0,095-0,076 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 1,652 mg/100ml = 0,023-0,008 x 2 mg/100ml -0,044+0,067

Sampel 2

Sampel 3

Sampel 4

Sampel 5

Sampel 6

Sampel 7

Sampel 8

= 1,304 mg/100ml = 0,037-0,09 x 2 mg/100ml -0,044+0,067 = 1,565 mg/100ml

Konsentrasi kreatinin rata-rata = 1,847 mg/100ml DATA PENGAMATAN SEL DARAH 1. Gambar Leukosit

2. Gambar Eritrosit

3. Gambar Trombosit

10x

PERHITUNGAN 1. Leukosit
leukosit 1 1 0,5 0,02 pengenceran jumlahhitung 108 7020 vol.kotak 0,4 0,02

sel/m3 darah 2. Eritrosit

eritrosit 1 1 4 0,02 pengenceran jumlahhitung 720 723600 vol.kotak 0,02 0,02

sel/mm3 darah 3. Trombosit

trombosit 1 1 2 0,02 pengenceran jumlahhitung 360 90900 vol.kotak 0,04 0,02

sel/mm3 darah