LAPORAN PRAKTIKUM PENILAIAN STATUS GIZI BIOKIMIA DARAH

ALBUMIN

OLEH : CHICA RISKA ASHARI K21110004 KELOMPOK C1

PROGRAM STUDI ILMU GIZI FAKULTAS KESEHATAN MASYARAKAT UNIVERSITAS HASANUDDIN MAKASSAR 2012

BAB I PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang Darah merupakan bagian terpenting dari manusia yang memiliki fungsi utama dalam memelihara homeostasis tubuh. Fungsi darah sebagian besar dilaksanakan oleh plasma dan berbagai konstituennya. Plasma terdiri atas air, elektrolit, metabolit, nutrient, protein dan hormon1. Dalam pengklasifikasian protein, albumin merupakan protein globular. Protein ini umumnya berbentuk bulat atau elips dan terdiri atas rantai polipeptida yang berlipat. Pada umumnya gugus R polar terletak disebelah luar rantai polipeptida, sedangkan gugus R yang hidrofob terletak disebelah dalam molekul protein. Protein globular pada umumnya mempunyai sifat dapat larut dalam air, dalam larutan asam atau basa dan dalam etanol2. Protein globular berbentuk bola, terdapat dalam cairan jaringan tubuh. Protein ini larut dalam larutan garam dan asam encr, mudah berubh dibawah pengaruh suhu, konsentrasi garam serta mudah mengalami denaturasi3. Abumin adalah protein yang dapat larut dalam air serta dapat terkoagulasi oleh panas. Larutan albumin dalam air dapat diendapkan dngan penambahan amoniumsilfat hingga jenuh2. Albumin terdapat dalam telur, susu, plasma, dan hemoglobin. Albumin larut dalam air dan mengalmi koagulasi bila dipanaskan3. Menurut jurnal Plasma and Albumin Transfusions: Incations and Controversies, albumin memainkan peran penting dalam kesehatan dan penyakit. Albumin merupakan penyumbang utama oncotic koloid Tekanan (COP),

mengikat molekul endogen dan eksogen, koagulasi menengahi, dan membantu

1 2

Murray, R. K. 2006. Plasma Protein & Immunoglobulins. Poedjiadi Anna dan F.M. TItin Supriyanti.2009.Dasar-Dasar Biokimia 3 Almatsier Sunita. 2010. Prinsip Dasar Ilmu Gizi

untuk mempertahankan permeabilitas mikrovaskular normal. Konsekuensi klinis hipoalbuminemia mencerminkan fungsi beragam. Hipoalbumenia signifikan berkontribusi terhadap peningkatan morbiditas dan mortalitas. Lbumin dapat diberikan melalui tranfusi produk plasma, atau melalui infus albumin serum manusia (HAS)4. Menurut jurnal Protein-Which is Best?, peran protein adalah Protein adalah zat yang mengandung nitrogen yang dibentuk oleh asam amino. Mereka

melayani sebagai utama struktural komponen otot dan jaringan lain di tubuh. Selain itu, mereka digunakan untuk memproduksi hormon, enzim dan hemoglobin. Protein dapat juga dapat digunakan sebagai energi, namun, mereka tidak. Pilihan utama sebagai sumber energi. Untuk protein digunakan oleh tubuh mereka perlu dimetabolisme menjadi yang paling sederhana bentuk, asam amino. Ada memiliki telah diidentifikasi 20 asam amino yang dibutuhkan untuk manusia pertumbuhan dan metabolisme. Dua belas di antaranya asam amino (sebelas pada anak-anak) yang disebut tidak penting, yang berarti bahwa mereka dapat disintesis oleh tubuh kita dan tidak perlu dikonsumsi dalam diet. Asam amino yang tersisa tidak bisa disintesis dalam tubuh dan digambarkan sebagai penting yang berarti bahwa mereka harus dikonsumsi dalam diet kita. Ketiadaan salah satu asam amino akan membahayakan kemampuan jaringan untuk tumbuh, menjadi diperbaiki atau dipertahankan5. Albumin, sebuah protein 69,00 D, yang disintesis dalam hati. Sintesis hati fisiologis terjadi pada sekitar 30% dari kapasitas, menggantikan sekitar 4% dari total tubuh albumin setiap hari. Selama masa meningkat butuhkan, sintesis hati meningkat secara dramatis. Di bidang kesehatan, tingkat sintetis dipengaruhi secara dominan oleh COP. Ketika COP menurun, meningkatkan sintesis albumin. (Memang, koreksi hipoalbuminemia oleh sintetik infus koloid secara signifikan dapat menekan sintesis albumin) Peradangan berkurang albumin. Sintesis
4

G. Hackner, Susan. Plasma and Albumin Transfusions: Incations and Controversies.

Jay R. Hoffman, Jay dan J. Falvo, Michael. 2004. Protein-Which is Best?

sebanyak 90%. Sitokin inflamasi shunt asam amino untuk meningkatkan sintesis akut protein fase penting dalam proses inflamasi, dan jauh dari sintesis albumin4. Oleh karena itu, dilakukan percobaan ini untuk mengetahui status gizi biokimia darah individu dengan menghitung kadar albumin dalam plasma darah.

I.2 Tujuan Praktikum I.2.1 Tujuan Umum Tujuan umum kegiatan praktikum ini adalah untuk menilai status gizi individu secara biokimia I.2.2 Tujuan Khusus Tujuan khsusus kegiatan praktikum ini yaitu untuk menentukan kadar albumin dalam plasma darah manusia.

I.3 Manfaat Praktikum Manfaat dari percobaan ini agar kita dapat menentukan banyaknya jumlah albumin dalam serum manusia dan plasma pada kedua sistem baik manual maupun otomatis.

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

Albumin merupakan koloid alamiah pertama yang digunakan sebagai volume expander sehubungan dengan fungsinya dalam meningkatkan tekanan ankotik intravaskular sehingga mampu memperbesar volume intravaskular dan memperbaiki perfusi jaringan. Albumin juga berfungsi sebagai alat transport beberapa zat penting seperti lemak, toksin, obat-obatan6. Albumin memiliki sejumlah fungsi. Pertama, mengangkut molekul-molekul kecil melewati plasma dan cairan sel. Fungsi ini erat kaitannya dengan bahan metabolismeasam lemak bebas dan bilirubuindan berbagai macam obat yang kurang larut dalam air tetapi harus diangkat melalui darah dari satu organ ke organ lainnya agar dapat dimetabolisme atau diekskresi. Fungsi kedua yakni memberi tekanan osmotik di dalam kapiler6. Albumin merupakan protein utama dalam plasma manusia dan membentuk sekitar 60% protein plasma total. Sekitar 40% albumin terdapat dalam plasma, sedangkan 60% lainnya terdapat di ekstrasel. Setiap harinya, hepar menghasilkan sekitar 12 gram albumin, yang berarti sekitar 25% dari seluruh sintesis protein oleh hepar. Albumin awalnya dibentuk sebagai suatu praproprotein. Peptida sinyalnya dikeluarkan sewaktu protein tersebut memasuki sisterna retikulum endoplasma kasar, dan heksapeptida di terminal amino yang terbentuk kemudian diputuskan ketika protein tersebut menempuh jalur sekretorik. Karena massa molekulnya yang realtif rendah (69 kDa) dan konsentrasinya yang tinggi, albumin diperkirakan menentukan sekitar 75-80% tekanan osmotik plasma pada manusia1. Albumin, sebuah protein 69,00 D, yang disintesis dalam hati. Sintesis hati

fisiologis terjadi pada sekitar 30% dari kapasitas, menggantikan sekitar 4% dari total tubuh albumin setiap hari. Selama masa meningkat butuhkan, sintesis hati meningkat
6

Hartono, Andry. 2006. Terapi Gizi & Diet Rumah Sakit

secara dramatis. Di bidang kesehatan, tingkat sintetis dipengaruhi secara dominan oleh COP. Ketika COP menurun, meningkatkan sintesis albumin. (Memang, koreksi hipoalbuminemia oleh sintetik infus koloid secara signifikan dapat menekan sintesis albumin) Peradangan berkurang albumin. Sintesis sebanyak 90%. Sitokin inflamasi shunt asam amino untuk meningkatkan sintesis akut protein fase penting dalam proses inflamasi, dan jauh dari sintesis albumin4. Albumin didistribusikan antara intravaskuler (40%) dan (60%) ekstravaskuler kompartemen, dengan paruh sekitar 8 hari. Ada fluks lambat konstan antara

kompartemen. Dalam kasus intravaskular albumin kerugian, bergerak albumin dari extravascualr ke kompartemen intravaskuler ke mempertahankan COP. perkiraan akurat dari seluruh tubuh albumin pada pasien yang sakit4. Albumin melayani fungsi beragam. Konsekuensi klinis dari hipoalbuminemia mencerminkan fungsi molekul. Sementara hipoalbuminemia ringan umumnya Karena

konsentrasi albumin serum hanya mengukur bagian intravaskular, tidak mungkin

memiliki konsekuensi kecil, sedang dari. Kekurangan yang parah dapat memiliki hidup yang mengancam efek. Major pentingnya adalah peran albumin dalam

pemeliharaan COP. Albumin bertanggung jawab atas 50% dari konsentrasi protein plasma total dan 80% dari COP plasma. Pada pasien sakit kritis, hubungan ini kurang diprediksi4. Albumin juga tampaknya berperan dalam menjaga integritas mikrovaskuler. Meskipun mekanismenya tidak jelas, ada kemungkinan bahwa albumin menempati saluran air antara sel-sel endotel untuk mempersempit saluran dan mengusir makromolekul. ekstravaskuler. Parah hipoalbuminemia menyebabkan akumulasi cairan

Dengan asumsi integritas pembuluh darah normal, ini umumnya

tidak terjadi sampai penurunan albumin serum di bawah 1,5 g / dl. Ketika integritas vaskular dikompromikan (misalnya, vaskulitis), atau dalam menghadapi terapi cairan intravena, hipoalbuminemia ringan dapat mengakibatkan extravascation. Akumulasi cairan biasanya dinyatakan sebagai edema perifer (anggota badan distal, ventrum, daerah bergantung), organ edema dan / atau efusi rongga. Edema paru kurang umum

dan, pada manusia, berhubungan langsung dengan kelangsungan hidup menurun. Edema bisa kompromi penyembuhan luka, dan edema gastrointestinal dapat menyebabkan anoreksia, penurunan penyerapan gizi, ileus, dan pemberian makanan enteral intoleransi, serta eksaserbasi hipoalbuminemia melalui kehilangan GI4. Albumin mengikat sejumlah zat endogen dan eksogen, termasuk bilirubin, kalsium, edotoxin, dan obat-obatan tertentu (digoxin, furosemid, warfarin, beberapa antibiotik). Hipoalbuminemia hasil peningkatan konsentrasi protein-terikat obat

dalam bentuk terikat, yang mengarah ke salah satu efek samping atau metabolisme yang cepat dan penurunan kemanjuran. Albumin juga mengikat dan mengeruk

radikal oksigen bebas, dan dapat mengikat zat besi, menghambat peroksidasi lipid. Hipoalbuminemia mengurangi efek protektif4. Albumin berperan dalam modulasi koagulasi, oleh asam arakidonat mengikat dan dengan demikian menghambat sintesis tromboksan A2, Dan dengan menambah aktivitas antitrombin (AT). Penting hipoalbuminemia dapat menyebabkan atau memberikan kontribusi terhadap hyperaggregability pada pasien cenderung4. Albumin bermanfaat untuk pembentukan jaringan sel baru. Di dalam ilmu kedokteran, albumin ini dimanfaatkan untuk mempercepat pemulihan jaringan sel tubuh yang terbelah, misalnya karena operasi atau pembedahan. Pada masa krisis saat ini, impor serum albumin yang dimanfaatkan sering membebani biaya pasien. Untuk satu kali pembedahan, penggunaan serum ini bisa mencapai tiga kali 10 mililiter itu2. Albumin bermanfaat juga dalam pembentukan jaringan tubuh yang baru. Pembentukan jaringan tubuh yang baru dibutuhkan pada saat pertumbuhan (bayi, kanak-kanak, remaja dan ibu hamil) dan mempercepat penyembuhan jaringan tubuh misalnya sesudah operasi, luka bakar dan saat sakit . Begitu banyaknya manfaat albumin sehingga dapat dibayangkan apabila mengalami kekurangan maka banyak organ tubuh yang sakit6. Jurnal Seven-year large cohort study for the association of serum albumin level and aging among community dwelling elderly memperjelas hubungan albumin serum dan penuaan dalam komunitas hunian mandiri berusia 65 dan lebih tua. Subyek

penelitian adalah 36.674 orang yang telah memiliki dasar pemeriksaan kesehatan setidaknya satu kali 2001-2007 di Habikino-kota, Osaka. Sebagai sebuah studi crosssectional, prevalensi hipoalbuminemia (Alb 3.5g/dl) lebih tinggi pada usia yang lebih tua dari laki-laki dan perempuan. Membandingkan kadar albumin menurut kelompok umur, orang tua menunjukkan lebih tinggi albumin tingkat. Sebagai studi longitudinal, kita menghitung perubahan kadar albumin selama tujuh tahun. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar albumin menurun 4,25 0,25 g / dl menjadi 4,21 0,23 g / dl untuk pria (p <.001), 4,30 0,23 g / dl menjadi 4,25 0,22 g / dl untuk wanita (p <.001). Temuan dari penelitian ini menunjukkan bahwa penurunan kadar albumin dari laki-laki dan perempuan kalangan masyarakat yang tinggal di tua secara bermakna dikaitkan dengan penuaan7. Sedangkan jurnal Prognostic value of admission serum albumin levels in patients with head injury meneliti tentang cedera kepala yang merupakan penyebab utama kecacatan dan kematian di masyarakat, namun secara biokimia tidak efektif penanda prognostik yang tersedia. Dan hasil penelitian ini menyatakan Rata-rata serum albumin cedera kepala dan kontrol adalah 3,24 dan 4,15 g / dL masing-masing (p <0,001). Pengakuan albumin memiliki korelasi positif yang signifikan dengan skor Glasgow koma (GCS) (p <0,001). Hipoalbuminemia ( 3,5 g/dL) saat masuk tercatat pada 88%, 52% dan 33% dari pasien dengan cedera kepala berat, sedang dan ringan masing-masing (P <0,001). Tingkat albumin secara signifikan lebih rendah diamati pada pasien dengan cedera sistemik terkait; mereka membutuhkan dekompresi bedah dan pada orang tua. Kematian pada 1 bulan adalah 43% pada pasien dengan masuk hipoalbuminemia dibandingkan dengan 17% pada mereka dengan tingkat albumin normal (rasio odds [OR] 3,7, p = 0,003). Hasil yang kurang baik pada 3 bulan tercatat pada 62% pasien dengan hipoalbuminemia masuk dibandingkan dengan 18% dari mereka yang memiliki kadar albumin normal (OR 7.3, p <0,001). Dalam analisis regresi logistik, masuk hipoalbuminemia muncul sebagai prediktor independen untuk
7

Miyake, Motoko. 2011. Seven-year large cohort study for the association of serum albumin level and aging among community dwelling elderly

hasil yang tidak menguntungkan, di samping usia dan GCS. Sebagai kesimpulan dari hasil percobaan ini yaitu hipoalbuminemia Penerimaan merupakan indikator yang efektif dari keparahan cedera kepala, dan independen prediktor hasil yang tidak menguntungkan pada 3 bulan8. Albumin merupakan komponen utama dari protein serum total dalam individu yang sehat. Serum albumin diuji dalam sebagian besar laborat klinik melalui metode penguat warna (dye-binding methode) yang menggunakan bromocesol green. Serum albumin berikatan secara spesifik dengan brocresol green untuk membentuk senyawa BCG albumin biru yang menyerap secara maksimal pada 600 nm9. Prosedur penentuan serum albumin. 1. Berilah label setiap tabung uji, yaitu kosong, standar, referensi, pool, dan setiap subjek uji. 2. Tambahkan 5,0 ml reagen celup penyangga pada masing-masing tabung. 3. Pada tabung kosong tambahkan 20 l air distilasi terionisasi. Pada tabung standar tambahkan 20 L larutan standar. Pada tabung referensi tambahkan 20 L serum referensi. Pada tabung pool. Untuk masing-masing subjek uji tambahkan 20 L serum pool. Untuk masing-masing subjek uji tambahkan 20 L serum uji. 4. Campurkan masing-masing tabung secara merata, dan biarkan pada posisis berdiri selama 2 menit. 5. Pindahkan masing-masing isi tabung pada cuvet. 6. Tempatkan spektofotometer pada panjang gelombang 600 nm. 7. Aturla pada titik nol dengan menggunakan reagen blank. 8. Baca dan catat penyerapan sampel standar, referensi, dan pool. Warna akhir yang berkembang menjadi stabil selama 1 jam. Sampel yang mempunyai lebih dari 6 g/dL albumin harus didilusikan dengan salin isotonik (isotonic saline) dan diuji lagi. Hasilnya kemuian harus dikoreksi pada dilusi ini.
8

Dhandapani, SS. 2011. Prognostic value of admission serum albumin levels in patients with head injury
9

Supariasa, IDN., Bachyar B., & Ibnu F. (2012). Penilaian Status Gizi.

Reagen yang digunakan dalam pemeriksaan albumin, ditujukan untuk menentukan bnyaknya jumlah albumin dalam serum manusia dan plasma pada kedua system baik manual dan system otomatis. Prinsipnya yaitu berdasarkan pada metode Daumas et al4 dimana albumin mengikat BCG sehingga menyebabkan perubahan dalam penyerapan spectrum pencelupan. Penceluan dan pembentukan albumin kompleks mempunyai puncak penyerapan pada 625 nm yang sangat proporsional pada konsentrasi albumin dalam sampel10.

10

Sirajuddin, S., Nurhaedar J., & Rahayu I. (2012). Penuntun Praktikum.

BAB III METODOLOGI PERCOBAAN

III.1 Alat Alat yang digunakan dalam percobaan ini adalah tabung sentrifius, sentrifuge, rak tabung, cupet, pipet 20 l, pipet 2,0 mL, dan Photometer Analyzer.

III.2 Bahan Bahan yang digunakan dalam percobaan ini adalah darah, serum jernih, aquadest, standard albumin, dan reagen albumin.

III.3 Prosedur Percobaan 1. Diambil darah dari sampel (orang dewasa) dan dialirkan perlahan-lahan ke dalam tabung sentrifuge untuk dipisahkan serumnya, didiamkan 5-10 menit sebelum di sentrifuge. 2. Dimasukkan ke dalam sentrifuge dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit (bertahap setiap 5 menit). 3. Diambil 3 buah cupet dan diberi tanda : Cupet I untuk blank Cupet II untuk standard Cupet III untuk test 4. Diambil aquadest sebanyak 10 l dengan menggunakan mikropipet 20 l, dimasukkan dalam cupet I. Ganti pipet. 5. Diambil standar albumin sebanyak 10 l dengan menggunakan mikropipet 20 l, dimasukkan dalam cupet II. Ganti pipet.

6. Diambil serum/plasma 10

l dengan menggunakan pipet 20 l, secara

perlahan-lahan agar darah yang menggumpal dibawahnya tidak ikut terambil, kemudian dimasukkan dalam cupet III. 7. Diambil larutan kerja albumin1,0 mL dengan enggunakan Pipet 1,0 mL diisi dalam cupet I. Ganti pipet. 8. Diambil larutan kerja albumin 1,0 mL dengan menggunakan Pipet 1,0 mL dan diisi dalam Tabung I. Ganti pipet. 9. Diambil larutan kerja albumin 1,0 mL dengan menggunakan Pipet 1,0 mL dan diisi dalam Tabung II 10. Diambil larutan kerja albumin 1,0 mL dengan menggunakan Pipet 1,0 mL dan diisi dalam Tabung III. Ganti pipet. Campur merata bahan pada tabung I dan II kemudian biarkan pada suhu kamar selama 20 menit atau pada suhu 37oC selama 10 menit. 11. Dibaca absorbance test dan standar terhadap blank pada gelombang 570-620 nm dengan menggunakan photometer analyzer.

DAFTAR PUSTAKA

1. Murray, R. K. 2006. Plasma Protein & Immunoglobulins. In: Murray, R.K. Granner, D.K., Rodwel, V. W. (eds). Harpers Illustrated Biochemistry. McGrawHill. New York. 2. Poedjiadi, Anna. 2009. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta : Penerbit Universitas Indonesia. 3. Almatsier, Sunita dkk. 2010. Gizi Seimbang dalam daur Kehidupan. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. 4. G. Hackner, Susan. 2011. Plasma and Albumin Transfusions: Incations and Controversies. 5. Jay R. Hoffman, Jay dan J. Falvo, Michael. 2004. Protein-Which is Best? 6. Hartono, Andry. 2006. Terapi Gizi & Diet Rumah Sakit, Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran ECG. 7. Miyake, Motoko. 2011. Seven-year large cohort study for the association of serum albumin level and aging among community dwelling elderly. 8. Dhandapani, SS. 2011. Prognostic value of admission serum albumin levels in patients with head injury 9. Supariasa, IDN., Bachyar B., & Ibnu F. 2012. Penilaian Status Gizi. EGC: Jakarta 10. Sirajuddin, S., Nurhaedar J., & Rahayu I. (2012). Penuntun Praktikum. Universitas Hasanuddin: Makassar