Introduccin El ser humano tiene una constitucin cromosmica diploide de 46 cromosomas: 22 pares de autosomas y un par de cromosomas sexuales.

Las mujeres representan el sexo homogamtico (XX) y los varones el sexo heterogamtico (XY). El cromosoma X es un cromosoma submetacntrico perteneciente al grupo C, cuyos genes se conocen como ligados al sexo. En 1949 M. Barr y E.G. Bertram observaron una pequea masa de cromatina en el ncleo de clulas nerviosas de gato, la cual segn lo constataron, era ms frecuente en hembras y muy rara en los machos. Esta es la llamada Cromatina Sexual o Cuerpo de Barr que consiste en un cromosoma X inactivado, altamente condensado. As, se dice que los individuos son cromatina positiva cuando esta estructura se encuentra presente y cromatina negativa cuando falta. Ms tarde, la cromatina sexual fue hallada e identificada en clulas de hembras de la mayora de especies de mamfero incluyendo al hombre. Por muchos aos los investigadores se preguntaron, cmo era posible que las mujeres al tener dos cromosomas X formen igual cantidad de producto gnico que los varones con un solo cromosoma X. Al parecer deba existir un mecanismo de "compensacin de dosis". En 1961 Mary Lyon, a la par de muchos otros cientficos que estudiaban este tema formul una hiptesis conocida como la "Hiptesis de Lyon", basada en una serie de experimentos llevados a cabo en ratones. Esta teora establece que: 1) En las clulas somticas de las hembras de mamferos slo un cromosoma X es activo y el segundo cromosoma X est condensado o inactivado y aparece en interfase como cromatina sexual. 2) La inactivacin se inicia a comienzos de la vida embrionaria (blastocisto). 3) El cromosoma inactivado puede ser indistintamente un X de origen paterno o un X de origen materno, en diferentes clulas del mismo individuo, pero todos los descendientes clonales de dicha clula tendrn inactivado el mismo cromosoma X. Por ello se dice que la inactivacin del X es al azar pero fija. Este proceso explica el hecho de que el producto gnico de los genes ligados al X es igual en ambos sexos. Los individuos con una constitucin cromosmica anormal en que se incluyen X supernumerarios Ej. Sndrome de Klinefelter, presentan mayores anomalas fenotpicas mientras ms cromosomas X extras posean, a pesar de que todos ellos suelen estar inactivados formando cuerpos de Barr.

Fundamento La sexocromatina es un mtodo diagnstico clnico especfico para determinar aberraciones cromosmicas de tipo numrico ligadas a cromosoma sexual (Cromosoma X); por lo tanto se pueden determinar sndromes como Turner, Superhembra, Klinefelter entre otros. Para el estudio de la cromatina sexual, se utiliza un tejido de fcil obtencin (epitelio de carrillo bucal y frotis sanguneo), un ulterior tratamiento con un fijador, el cual tiene por objeto preservar las estructuras con un mnimo de alteraciones, seguido del uso de un colorante mixto que permite teir tanto las estructuras cromosmicas de carcter cido, como el citoplasma de carcter bsico.

Material Portaobjetos Microscopio ptico Cajas Petri Probeta de 25 ml Abatelenguas Varilla de vidrio Papel seda Lancetas estriles Cmara de tincin

Material Biolgico Raspado de la mucosa bucal (clulas de descamacin) Gotas de sangre obtenidas por puncin capilar

Reactivos Etanol al 96% y 70% Solucin colorante Giemsa diluido 1:10 (V/V) Solucin colorante de fucsina bsica: o Reactivo A: Disolver 3 g de fucsina bsica en 100 ml de etanol al 70 % o Reactivo B: Mezclar 10 ml de solucin A, 90 ml de fenol al 5%, 10 ml de cido actico glacial y 10 ml de formaldehdo al 37%. Dejar reposar 24 horas antes de su uso. Solucin colorante de Wright

Etanol absoluto Xilol Aceite de Inmersin

Procedimiento Mtodos de tincin de clulas epiteliales con Giemsa o Enjuagar la boca repetidas veces con agua y raspar la mucosa interna de la mejilla con un abatelenguas, desechar este primer raspado por el alto contenido de bacterias. o Repetir la operacin y extender la muestra sobre un portaobjetos. o Dejar secar al aire: colocar el porta objetos de una caja Petri que contenga alcohol al 96% para su fijacin durante 50 minutos. o Deajr secar al aire. o Pasar el portaobjetos a una cmara de tincin que contenga Giemsa diluida 1:10 (V/V) para su tincin por 15 a 20 minutos. o Lavar la preparacin al chorro de agua y dejar secar al aire. o Observar las preparaciones al microscopio a 10X, 40X y 100X; localizar las clulas epiteliales, poniendo especial inters en la cromatina. En mujeres normales el nmero promedio de clulas de frotis bucales con corpsculos de Barr es de 18-60%.

Planteamiento del problema La observacin de leucocitos y epitelio bucal en humanos (hembra y macho) para determinar la presencia o ausencia de cromosoma sexual corpsculo de Barr

Objetivos Utilizar sangre y epitelio bucal para la identificacin observacin de los corpsculos de Barr en el microscopio. Identificar el sexo del individuo gracioso la observacin de laminillas preparadas con las muestras de sangre y epitelio bucal. Observar las formas y las clulas en las que se puede ver claramente la cromatina sexual inactiva.

Resultados Se observ el corpsculo de Barr en forma de palillos de tambor en los ncleos polimorfonucleares de los leucocitos de la sangre de la mujer (humano). En las clulas masculinas no hubo presencia del corpsculos de Barr. En las clulas epiteliales el corpsculo de Barr estaba adherido en la membrana interna del ncleo; en las clulas de la mujer. En las clulas masculinas no hubo presencia del corpsculo de Barr. El corpsculo de Barr se tii ms fuertemente que el resto del material gentico en ambos. Aunque en el caso de la sangre el ncleo polimorfonuclear tambin present una coloracin muy fuerte. Anlisis de resultados

La preparacin de las muestras de epitelio bucal fue exitosa.

Clulas Sanguneas Teidas con Giemsa

Durante la preparacin de las muestras de sangre no se aplico suficiente colorante giemsa por tal motivo las muestras fueron desechadas y se repiti el procedimiento.

Extraccin de clulas sanguneas

Tincin de muestras de las clulas sanguneas

Muestra Sangunea Errnea

Se observo en los leucocitos la cromatina sexual de forma palillo de tambor en una de las muestras de frotis sanguneo femenino.

Cromatina sexual de la Hembra R

En la muestra obtenida de epitelio bucal (clulas epiteliales) femenina se observo la cromatina sexual (el cromosoma X inactivo).

Clulas Epiteliales al microscpio R

Conclusiones El corpsculo de Barr es el cromosomas X inactivo que se condensa y se observa apartado del resto del material gentico, y se tie ms fuertemente por que esta mas condensado que el resto del material gentica, y se tie mas fuertemente por que esta mas concdensado que el resto del material gentico. Se obtuvieron sin problemas las muestras de sangre y epitelio bucal que fueron usadas para la prctica Tanto las laminillas de epitelio bucal como las de frotis sanguineo se preparon exitosamente.

Se observaron clulas sexuales femeninas. Se observaron clulas sexuales Masculinas. Se observo la cromatina sexual en forma de palillo de tambor. Se observo la cromatina sexual en clulas epiteliales.

Bibliografa: o Nogus R. M. Sexo, Cerebro y Gnero: Diferencias y Horizonte de Igualdad. (2003). Fundacin Vidal i Barraquer Paids. Espaa. p.51 o Olivia Virgili Rafael. Gentica Mdica. (2003).Universidad de Barcelona. 3 ed. Espaa. P.161 o Kumar V., Abbas A. K., Fausto N. Patologa Estructural y Funcional. (2005). Elsevier. 7 ed. Espaa. p. 181. o Eynard A., Valentich M., Rovasio R. Histologa y Embriologa del ser Humano. Bases celulares y Moleculares. Ed. Mdica Panamericana. 4 ed. Argentina P. 577