Reguladores de crecimiento 3.1.

REGULADORES DE CRECIMIENTO

17

El estudio de los reguladores de crecimiento comenz cuando Julius von Sachs sugiri que en las plantas se encontraban presentes sustancias especficas para la formacin de rganos. Sin embargo la concentracin de los mencionados compuestos era tan baja que recin en 1930 pudo ser identificado el cido indolactico, considerado durante algn tiempo la nica hormona vegetal. En la dcada del 50 la idea fue desechada ya que se descubren las giberelinas y confirma la existencia y accin de las citoquininas. La presencia del ltimo grupo se sospechaba ya desde 1913, cuando Haberland descubri la existencia de compuestos que estimulaban la divisin celular, pero no fue hasta 1954 con el descubrimiento de Carlos Miller, quien por hidrlisis parcial de DNA aisl un compuesto activo al que denominaron kinetina. Desde all han sido numerosos los estudios que han permitido la identificacin de distintas citoquininas naturales. Todos estos compuestos se definan como hormonas vegetales, son sustancias orgnicas sintetizadas en alguna parte de la planta, capaces de translocarse a otra, donde en concentraciones muy bajas causan una respuesta fisiolgica. Actualmente estas se encuadran dentro de una denominacin ms amplia, la de Reguladores de Crecimiento Vegetal, en razn de que existen otras sustancias, entre las que pueden mencionarse a poliaminas, brasinlidos, cido saliclico y jasmonatos, que no cumplen con la caracterstica de ejercer efecto a distancia propia de las hormonas vegetales, pero que pueden regular y alterar tanto el crecimiento como el desarrollo vegetal provocando en numerosos casos respuestas fisiolgicas similares a las de las hormonas vegetales. A medida que los reguladores de crecimiento fueron identificados comenzaron los estudios sobre sus efectos mucho antes de poder determinar sus concentraciones endgenas debido a limitaciones instrumentales actualmente superadas. Se encontr que los mismos desencadenan respuestas en muchas partes del vegetal, y que dichas respuesta varan con la especie, rgano que se estudie, estado de desarrollo, concentracin e interaccin hormonal y diversos factores ambientales. Por estos motivos resulta riesgoso generalizar acerca de los efectos de estos reguladores sobre los procesos de crecimiento. En la actualidad se considera que existe un sistema de respuesta que hace que los reguladores de crecimiento resulten activos y especficos. Este sistema, aplicable a un gran nmero de reguladores de crecimiento, consta de tres puntos : El regulador debe encontrarse en la cantidad adecuada. El regulador debe ser reconocido por los receptores de las clulas blanco. Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento

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La presencia de mecanismos de amplificacin de las seales del mensajero

hormonal. El complejo hormona-receptor o receptor activado constituye el primer eslabn de la cadena de transduccin de seales, esta respuesta primaria inicia una serie de cambios, que integran una respuesta compleja que inducen a la respuesta fisiolgica. La manera de accin de este sistema puede ser visualizado claramente en el siguiente esquema mediante el que se representa el modelo de transduccin inicial en la membrana plasmtica.

Regulador

R PLC PIP2 DAG IP3 Organela Ca++

Regulado rreguReg uladorRe gulador

AC ATP Ca++ AMPc

PKC Ca++ /Ca MPK Fosforilacin proteica Respuesta celular

Como se mencion anteriormente la concentracin de los reguladores es fundamental para la accin de ellos mismos. Durante el desarrollo de un tejido la concentracin endgena de las hormonas pueden sufrir variaciones, esto provoca cambios en el sistema de recepcin afectando la sensibilidad del mismo. La sensibilidad de estos sistemas tendra su origen en diferentes factores : nmero de receptores (receptividad). La afinidad por el receptor (afinidad) Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento La capacidad de respuesta, en los eventos posteriores a la recepcin

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Los cambios que pudieran ocurrir sobre cualquiera de los factores descriptos, durante el desarrollo de un tejido ocasionaran modificaciones sobre la sensibilidad de estos sistemas (Davies, J.P. ; 1995). Hasta aqu se han descripto los efectos generales y el modo de accin de algunos reguladores de crecimiento, sin embargo es importante tener en cuenta cuales son los efectos particulares que estos provocan en los tejidos vegetales. 3.1.1. Auxinas Se denominan auxinas los compuestos caracterizados por su capacidad de inducir elongacin en clulas de vstagos. La auxina natural de mayor distribucin es el cido 3indolactico (AIA), aun cuando el cido 4-cloroindol-3-actico ha sido aislado de plantas superiores. En general este grupo de hormonas afecta otras caractersticas fisiolgicas, adems de la elongacin, pero esta accin es considerada crtica.

Auxinas naturales
CH2 COOH Cl CH2 COOH

N H

N H

Acido indol-3-actico (AIA)

Acido 4-cloroindol-3-actico (4-Cl-AIA)

Son numerosos los ejemplos de auxinas sintticas utilizados en cultivo de tejidos vegetales, fundamentalmente porque su accin es ms prolongada que la de sus anlogos naturales y su costo inferior.

Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento
Auxinas sintticas
CH2 CH2 CH2 COOH O CH2 N H COOH Cl Cl O CH2 COOH

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Cl

Cl

Cl

Acido indol-3-butrico (AIB)

Acido 2,4-diclorofenoxiactico (2,4-D)

CH2 COOH H3 C N H3 C C

Acido 2,4,5-triclorofenoxiactico (2,4,5-T)

S O CH2 COOH

Acido -naftalenactico (ANA)

N,N-dimetiltiocarbamoilactico

En el siguiente esquema puede observarse la similitud entre una auxina natural, el cido indolactico (AIA) y su ms potente anlogo de sntesis el cido 2,4diclorofenoxiactico (2,4-D).

O H N

AIA

CH2 C

O O

Cl

O CH2

C O

2,4-D

Cl

Esta comprobado que diferentes tejidos responden en forma distinta a iguales concentraciones de una misma auxina habindose observado que la respuesta depende de la edad y de su estado fisiolgico. Al igual que la mayor parte de las hormonas vegetales las auxinas inducen una gran diversidad de efectos fisiolgicos y entre los de mayor significacin cabe mencionar: Participacin en los perodos S y G1 del ciclo celular, promoviendo la duplicacin del ADN. Aumento de la extensibilidad de la pared celular. Participacin en la diferenciacin celular. Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento Estimulacin de foto y gravitropismos. Estimulacin del desarrollo del fruto luego de la fecundacin. Regulacin de la abscisin. Participacin en el fenmeno de dominancia apical, etc.

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Las auxinas causan una rpida extensibilidad de pared en coleoptilos y tallos jvenes, si bien su accin no es directa sobre la pared sino intracelular o en membranas plasmticas. La clula vegetal exporta factores que aumentan la extensibilidad de la pared celular (WLF) en respuesta al AIA. Se postula para el citado fenmeno un mecanismo denominado hiptesis del crecimiento por acidez. El mismo seala que la clula secreta H + a las paredes primarias por medio de una bomba ATPsica. El descenso del pH producido favorece la accin hidroltica de enzimas que escinden uniones de polisacridos haciendo ms laxa la estructura; la citada modificacin en la presin de la pared se opone a la presin de turgencia por lo que se modifica el potencial de agua producindose el ingreso de agua lo que permite un crecimiento hasta el 70% de su volumen original, aparejado con el ingreso de electrolitos, fundamentalmente potasio. Las auxinas seran tambin reguladoras del balance osmtico en razn de regir la concentracin citoplasmtica de electrolitos. Simultneamente las auxinas estimulan la sntesis de enzimas que intervienen en la biosntesis de polisacridos de pared, lo que ocasiona un crecimiento irreversible. Este proceso ocurre por medio de la activacin de protenas regulatorias que migran del citosol al ncleo para unirse a sitios especficos en los genes estimulando la transcripcin. Se han identificado protenas que se unen a auxinas y no son necesariamente receptores (ABP); se localizan principalmente sobre retculo endoplsmico y en la parte exterior de la membrana plasmtica. Mediante extensos screening se ha determinado que numerosos compuestos de sntesis presentan actividad auxnica; los ms comunes son: cido 1-naftalen actico (ANA), cido fenilactico, cido cis-cinmico, cido 2,4-diclorofenoxiactico (2,4-D) y cido indolbutrico (IBA). Entre estos el ms utilizado es 2,4-D fundamentalmente para promover el crecimiento de explantos en forma indiferenciada. Se han descubierto compuestos con actividad antiauxnica tanto naturales, aislados de plantas superiores y hongos, como sintticos. Como es de suponer existe relacin entre la estructura y la actividad antiauxnica, as por ejemplo 2,4-dicloroanisol, anlogo de 2,4D, inhibe el crecimiento de coleoptilos de avena. Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento
O CH3 Cl O CH2 COOH Cl

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Cl 2,4-Dicloroanisol

Cl 2,4-Diclorofenoxiactico

Existen tambin compuestos naturales y de sntesis que inhiben el transporte de auxinas como el llamado DPX 1840 cuyos efectos fisiolgicos contrarrestan a los de auxinas y presentan sinergismo con etileno y cido abscico (ABA). Se han establecido cuatro rutas diferentes para la sntesis de AIA a partir de Ltriptofano. La ms frecuente en plantas superiores involucra, en primer lugar la desaminacin del aminocido por parte de triptofanoaminotransferasa para generar cido indol-3-pirvico, la posterior descarboxilacin de ste genera indol-3-acetaldehido por medio de la indolpirvicodescarboxilasa y la obtencin de AIA por deshidrogenacin y oxidacin catalizada por la indolacetaldehidodeshidrogenasa NAD dependiente y la indolacetaldehido oxidasa respectivamente. (Takahashi, 1986).

COOH COOH NH2 N H N H cido indol-3-pirvico O N H indol-3-acetaldehido C

H COOH O N H IAA

La auxina natural se metaboliza por dos rutas principales: el metabolismo oxidativo o peroxidativo y la conjugacin con aminocidos y azcares. El primero de ellos genera, como principal producto en plantas superiores, al indol3-aldehdo. Como metabolitos mayoritarios de la segunda ruta se producen cido indol-3acetilasprtico y 1-(indol-3-acetyl)--D-glucosa (Takahashi, 1986).

Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento
COOH

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N H O NH CHCOOH N H cido indol-3-acetilasprtico O OH O O HOH2 C N H 1-(indol-3-acetil)--D-glucosa OH OH O N H N H O N H N H N H CH2 OH COOH O N H indol-3-aldehido CH2 COOH N H O O N

COOH

OOH COOH

H O

OH

El rol que se atribuye a los compuestos conjugados de auxinas es variado, se sugiere que sta es la forma de transporte de AIA, de almacenamiento, de reutilizacin , de proteccin frente a la degradacin enzimtica y de control homeosttico de la concentracin de AIA en las plantas (Cohen, 1982). Existen estudios que indican la mayor eficiencia de las auxinas sintticas como el ANA o el IBA respecto del IAA. Esto puede deberse en el caso de NAA, que al no poder ser degradado por la IAA-oxidasa y otras enzimas encargadas de la degradacin del IAA, este permanezca ms tiempo en el tejido originando en consecuencia mejores respuestas. Respecto de IBA se conoce que presenta gran actividad, an cuando es metabolizado con rapidez para formar IBA-aspartato y otros conjugados, lo que sugiri que es una manera de almacenamiento del IBA y que permite una liberacin gradual del mismo, lo que mantiene las concentraciones adecuadas para el desarrollo de los tejidos.

Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento 3.1.2. Citoquininas

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Las citoquininas son un grupo de fitohormonas que regulan la divisin celular y la diferenciacin en tejidos vegetales, participan en el control del desarrollo y la senescencia. Se definen como citoquininas a los compuestos naturales o de sntesis que en presencia de adecuadas concentraciones de auxinas inducen la divisin celular en cultivos de tejidos vegetales. Se observ que tanto extractos de tejidos vegetales vasculares, leche de coco, extracto de malta, como preparaciones de ADN envejecidas o autoclavadas en medio cido eran potentes activadores de la divisin celular en cultivos de tejidos de tabaco.

NH

CH2 N N H O

Kinetina (K)

NH N N

CH2 N N H

O NH C NH

Bencilaminopurina o benciladenina (BAP)

N,N'-difenilurea

Como ya hemos mencionado en 1955, (Millen, 1956) aisl e identific, a partir de ADN espermtico, 6-furfurilaminopurina, compuesto al que denominaron kinetina debido a su capacidad especfica de producir citocinsis a bajas concentraciones en clulas de tabaco. La kinetina (K) puede sintetizarse qumicamente por diversas vas. La primera citoquinina natural fue aislada de Zea mays (maz) por lo que se la denomin zeatina (Z) 6-(4-hidroxi-3-metil-2-trans-butenoamil)purina (Letham, D. 1963). Posteriormente se aislaron (Letham, D. 1973). Los mtodos actuales de HPLC y GSMS han permitido aislar e identificar un gran nmero de citoquininas naturales. Todas presentan una base adenina N6 sustituida; que de 9--D-ribofuranosilzeatina ([9R]Z) y su 5'-monofosfato

Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento

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acuerdo al tipo de sustituyentes se pueden clasificar en dos grupos: anlogas a N6isoprenoides y anlogas a N6-benciladeninas. Al primer grupo pertenecen la mayora de las citoquininas vegetales y puede subdividirse a su vez en tres clases. La primera es la formada por zeatina (Z) y sus derivados, ribsidos, O-glucsidos, N-glicsidos, variaciones en cadena lateral o ismeros cis. La segunda clase contiene los metabolitos de reduccin como dihidrozeatina (diH) Z y sus derivados y conjugados. Mientras que en la tercera clase se ubican N6- (2-isopentenil) adenina, iP y sus derivados. Al grupo de los anlogos N6-benciladenina pertenecen la activa citoquinina sinttica 6-bencilaminopurina (BAP) y unos pocos derivados naturales especialmente hidroxilados.

HOCH2 N R2

NH N N R1

HOCH2

NH N R2 N N N R1

trans-zeatina R1 Zeatina (Z) Ribozeatina [9R]Z N-glucosilzeatina [9G]Z H Ribosa Glucosa R2 H H H

cis-zeatina R1 cis-ribozeatina 2-metil-cis-ribozeatina Ribosa Ribosa R2 H -CH3

Al igual que la mayora de las hormonas vegetales, las citoquininas inducen gran diversidad de efectos fisiolgicos. Por ejemplo, intervienen en el perodo M del ciclo celular, favoreciendo la divisin, por lo que la mitosis slo es posible si las auxinas han estimulado previamente la duplicacin del ADN. Adems, estimulan el crecimiento por aumento de plasticidad sin variar la elasticidad. A diferencia de las auxinas y giberelinas, tienen efecto sobre hojas cotiledonales y no utilizan un mecanismo de acidificacin. Aumentan la sntesis de cierto tipo de protenas especficas en detrimento de otras, haciendo variar el pattern normal. Es evidente la rpida formacin de poliribosomas en respuesta a las citoquininas. Las citoquininas retrasan la senescencia puesto que evitan la degradacin de protenas existentes e inducen la sntesis de nuevas, particularmente algunas que estabilizan clorofilas. En presencia de luz intervienen en maduracin y sntesis de cloroplastos debido a que favorecen la sntesis de protenas tilacoidales que enlazan las clorofilas retrasando su

Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento

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degradacin y tambin inducen la formacin de protenas fotosintticas y estructurales de membranas tilacoidales. Por otra parte inhiben la formacin de radicales libres por lo que se evita la oxidacin de cidos grasos no saturados de membrana. Las citoquininas ocasionan una movilizacin diferencial de nutrientes hacia los tejidos donde se hallan ms concentradas, esto se denomina efecto fuente-sumidero y es vital para el retraso de la senescencia. En plantas superiores las citoquininas se sintetizan principalmente en los sistemas radiculares. La produccin de citoquininas libres se da por dos mecanismos: la sntesis de novo y la liberacin de las contenidas en el ARN de transferencia (ARN t), tambin existe una combinacin de ambos. La citoquinina mayoritaria en ARNt es 9RiP y se forma por la transferencia de un grupo isopentenilo desde 2-isopentenilpirofosfato (2-IPP) al N6 de una base adenina del ARNt mediante un sistema enzimtico. De todas formas las pequeas cantidades de citoquininas presentes en ARNt y el bajo ndice de recambio del mismo son suficientes para afirmar que debe existir sntesis de novo. Se ha demostrado la conversin de AMP en citoquininas libres en sistemas libres de clulas provenientes de cultivo de tabaco; la enzima involucrada, 2-isopentenil-pirofosfato: 5'-AMP-2-isopenteniltransferasa, ha sido purificada (Toya, 1978; Chem, 1979). El metabolismo de las citoquininas naturales ha sido estudiado en plantas intactas, en rganos aislados, y en cultivos de tejidos aplicando, en todos los casos, exgenamente los compuestos en estudio. Citoquininas derivadas tanto de Z como de iP son convertidas en una gran diversidad de metabolitos mediante una o ms de las siguientes reacciones bsicas: a) trans-hidroxilaciones de los grupos metilos terminales de las cadenas laterales de los derivados de iP; b) reducciones en cadena lateral en Z y sus derivados; c) clivaje de las cadenas laterales isoprenoides; d) O-glicosilaciones; e) N-glicosilaciones; f) sustituciones anulares por alanina; g) interconversiones de base entre ribonucletidos y ribonuclesidos (Palni, 1983; Mc. Gaw, 1983; Terrine, 1980).

3.1.3. Giberelinas Dentro de la clasificacin de giberelinas se encuentra una familia de compuestos diterpnicos conocidos como ent-giberelanos. Si bien el ms popular es el cido giberlico Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento

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(GA3), actualmente se conocen alrededor de ochenta giberelinas de origen natural, presentes en vegetales y microorganismos.

O CO HO H CH3 H

OH H CH2

CO2H

cido giberlico (GA3)

En la actualidad se conoce que las giberelinas se encuentran involucradas en el control de procesos claves en el desarrollo de las plantas, entre los que pueden citarse elongacin de tallos, movilizacin endosprmica, floracin y fructificacin. La elongacin de tallos, fue el primer efecto que se les asign a las giberelinas. El proceso de elongacin puede deberse a la estimulacin de la divisin o a la elongacin celular. Esto tiene su origen en el control que producen este tipo de compuestos en la expresin de un gran nmero de genes, incluidos los de la sntesis de protenas intrnsecas del tonoplasto, y la formacin de canales de agua que regulan el flujo hdrico dentro de la vacuola durante el proceso de expansin. El sistema mejor caracterizado en que las giberelinas son activas, es el control de la transcripcin en la aleurona induciendo la sntesis de enzimas hidrolticas especialmente amilasas. En el desarrollo floral actan a nivel de expresin de genes involucrados en la biosntesis de flavonoides tales como los que codifican para la sntesis de chalcona sintetasa (Huttly, 1995). En cultivos de callos las giberelinas inhiben la organognesis, especficamente la formacin de yemas, que dan origen a vstagos (Ezura, 1995). El sitio de biosntesis de este tipo de compuestos no se encuentra claramente definido. No obstante el proceso comienza de cido mevalnico siguiendo la ruta de los diterpenos como se esquematiza en el siguiente diagrama.

Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento
3 CoASH 3-acetil CoA CH2 COOH C HO CH3 CH2 CH2 OH CH3 C CH2 CH2 CH2 OH O P O O OH P O OH

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4 pirofosfato de isopentenilo

CH2 OP2 O 6

-3

pirofosfato de copalilo

Kaureno

CH2 OH Kaurenol

CHO Kaurenal

COOH cido Kaurenoico

CHO COOH cido giberlico

Otras giberelinas

Una vez sintetizados probablemente la forma de transporte sea a travs de floema y xilema. 3.1.4. cido abscsico El cido abscsico (ABA) rene todas las condiciones para ser considerado una hormona, presenta efecto inhibidor sobre el crecimiento al ser aplicado a plantas intactas y antagoniza la accin de las hormonas promotoras del mismo; adems ejerce una gran variedad de efectos sobre el metabolismo vegetal. El nombre de cido abscsico deriva del antiguo rol que se le atribua a esta hormona en la abscisin de las hojas. Es un compuesto de naturaleza terpnica que se origina en las races y hojas maduras, particularmente en respuesta al estrs hdrico. Partiendo de farnesilpirofosfato (FPP), podemos delinear sus dos rutas principales de biosntesis. Una involucra la ciclacin de un precursor C-15, mientras que en la otra se forma en primer lugar un carotenoide C-40 seguido de metabolismo oxidativo que conduce a la estructura C-15. El camino directo es utilizado principalmente por hongos.

Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento
FPP

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OH

HO

COOH

OH O COOH O COOH

ABA

1-Deoxi-ABA

En plantas el carotenoide 9-cis-neoxantina es el principal precursor de ABA. Deriva de la violoxantina todo trans, luego se realiza el clivaje de la cadena polinica para generar xantoxina, la cual es transformada en ABA va ABA-aldehdo. Esto ha sido confirmado utilizando extractos libres de clulas de hojas de Phaseolus vulgaris.

Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento
OH O

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O HO

Violaxantina todo trans

OH HO

O HO

Neoxantina todo trans

O O HO CHO

Xantoxina

OH

CHO

ABA-aldehdo

HO

OH

COOH

OH

ABA

OH HO

COOH

Las enzimas involucradas en estas ltimas etapas son xantoxina oxidasa y aldehdo abscsico oxidasa, que es la que est ausente en las mutantes no productoras de ABA y adems es dependiente de NADP+. El ABA es transportado al resto de los rganos del vegetal desde las races va xilema y desde las hojas va floema, incluso existen evidencias de que sera transportado hacia las races va floema y que retornara hacia los vstagos por el xilema. Dentro de los numerosos efectos fisiolgicos que el ABA presenta podemos citar su participacin en el cierre estomtico que preserva la reserva hdrica del vegetal. Este tipo de regulador tambin inhibe el crecimiento de los vstagos en respuesta al estrs por falta de agua, induce la sntesis de protenas de almacenamiento en semillas. Posee un efecto Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento

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contrario al de las giberelinas en la sntesis e induccin de -amilasas en los procesos de germinacin. Por otra parte las injurias mecnicas inducen el incremento de los niveles endgenos de ABA que a su vez activa la transcripcin de genes que codifican para inhibidores de proteinasas por lo que esta involucrado en las defensa frente al ataque de insectos.

3.1.5. Etileno El etileno (C2H4) ha sido considerado por mucho tiempo como la hormona de la madurez y el envejecimiento, pero su rol en los tejidos vegetales es mucho ms amplio y diverso. Este gas se sintetiza a partir de metionina en gran cantidad de tejido vegetales fundamentalmente en respuesta al estrs. Es el nico hidrocarburo que presenta un efecto pronunciado sobre las plantas aunque no parecera ser esencial para el desarrollo vegetativo normal. Su sntesis se exacerba en tejidos senescentes o en proceso de maduracin. Pero como es un gas se moviliza por difusin. El intermediario ms importante en su proceso de biosntesis es el cido 1-aminociclopropano-1-carboxlico (ACC) el cual es transformado en etileno en presencia de oxgeno, por lo que puede ser transportado a grandes distancias del efecto causal.
Ribosa C4-aceptor

CH3 S

CH2 CH2

CH COO + NH
3

CH3 S

Ribosa

Ade

+ CH3 S

CH2 CH2

Ade(SAM)

CH COO + NH 3

CH3 S Ade (SAM)

Anaerobiosis Desacoplantes Co2+ Temperatura Luz

AVG AOA

Maduracin del fruto AIA Heridas Inundaciones

+
2 HC

CH2 O2

2 HC 2 HC

NH3 COO
-

Entre sus aciones podemos mencionar: Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento *Induccin de senescencia en flores y hojas. *Promocin de formacin de races adventicias en algunas especies.

32

*Expresin de sexo en flores de especies monoicas (formacin de flores femeninas). *Interrupcin de latencia de las semillas de algunas especies (en este caso el etileno podra ser aportado por los hongos de la rizsfera). *Induccin de la floracin. *Induccin de epinastia de hojas. *Inhibicin del alargamiento de tallos y races en dicotiledoneas que se hacen mas gruesos por expansin radial. *Regulacin de la abscisin . *Induccin de la maduracin de los frutos. 3.1.6. Jasmonatos Tanto la regulacin del crecimiento vegetal como la respuesta al estrs estn estrechamente relacionadas con el metabolismo de los cidos grasos polinsaturados. El cido jasmnico y su metil ster han sido aislados de diferentes especies vegetales (Miersch, 1989; Miersch, 1987; Meyer, 1984; Kaise, 1974). Actualmente se considera a los jasmonatos como un nuevo grupo de reguladores que inhiben el crecimiento y promueven la senescencia (Vick, 1984). Por su estructura han sido comparados con las (Zimmerman, 1984). prostaglandinas de mamferos

COOR

R = H Acido Jasmnico R = - CH3 Metiljasmonato

Numerosos autores, siguiendo muy distintas metodologas experimentales, han demostrado que los prostanoides estn involucrados en los sistemas intracelulares de transduccin de seales, fundamentalmente en procesos relacionados al estrs. (Dittrich, 1993; Farmer, 1990). Se observa que los niveles endgenos de cido jasmnico son mximos antes de la transcripcin de genes que codifican los compuestos relacionados con la defensa, stos

Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento

33

ubican a este compuesto en un lugar preponderante y desempeando un rol integral como seal de transduccin en plantas.(Mirjalili, 1996). En mamferos, los icosanoides se sintetizan a partir de la liberacin de cido araquidnico de las membranas plasmticas al citoplasma; anlogamente las clulas vegetales utilizan cido linolnico como sustrato de la lipoxigenasa (LOX) (Vick, 1984). Esta reaccin ha sido ampliamente estudiada debido a que la generacin de hidroperxidos altamente reactivos es una causa potencial de dao celular. En 1978 se demostr que el hidroperxido del cido linolnico se convierte, mediante la accin de una hidroperxido ciclasa en un cido graso cclico de 18 tomos de carbono, el 12-oxofitodienoico (12 oxo-PDA) (Zimmerman, 1978). Este ltimo es reducido y -oxidado hasta un cido compuesto de 12 carbonos, el antes mencionado cido jasmnico.

Reguladores de crecimiento

Reguladores de crecimiento
COOH

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O2
OOH

Lipooxigenasa

COOH

Acido 13-hidroperoxilinolnico [13-HPOtre] Hidroperxidociclasa

COOH

12-oxo-PDA Reductasa
COOH

-oxidacin
COOH

-oxidacin
COOH

O H R S H

-oxidacin O-glucsidos
COOH

Oxidac.

Hidroxilaciones

Epimerizacin

Jasmnico
(1R,2S)

Conjugacin Conjugadas * Metil y glucosil steres * Con aminocidos

COOH

Reduccin
O

(-) Jasmnico (1R,2R)

HO

COOH

El cido jsmonico se sintetiza en plantas como 1R, 2S-JA, tambin llamado (+)-7iso-JA o 3R, 7S-JA. (Albrecht, 1993). Las enzimas de las rutas biosintticas de los jasmonatos son constitutivas. Se propone que su regulacin, como ocurre en los animales con la ruta del cido araquidnico, est a nivel de la disponibilidad de precursores por lo que se le atribuye un rol fundamental a la lipasa que controla la liberacin de cido linolnico. (Albrecht, 1993; Farmer, 1992).

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Reguladores de crecimiento

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De acuerdo al modelo propuesto por Farmer y Ryan (Farmer, 1992) el cido linolnico es liberado en respuesta a seales traumticas y es convertido en jasmonatos. Estos actan sobre un sistema de receptores que regulan la expresin gnica, por ejemplo en la transcripcin de genes que codifican para la sntesis de protena inhibidora de proteinasas.

RI

Lipasa

R II

Acido Linolnico

LOX Dehidrasa -oxidacin

JA - JAME Receptor de JA Activacin de genes

Sntesis proteica inhibidores de la proteinasa

El modelo descripto indica que los genes activados por los jasmonatos regulan en plantas tanto las respuestas a condiciones ambientales como el propio desarrollo del vegetal y propone tanto a sistemina como a los oligournidos producidos por el ataque de insectos o patgenos como las seales que actan sobre receptores en clula blanco para iniciar la ruta de respuesta basada en los octadecanicos. Los jasmonatos ejercen diversos efectos en plantas y an existen discrepancias en cuanto a, si deben ser considerados como reguladores hormonales o como simples factores del estrs en el proceso de la senescencia foliar, un hecho perfectamente probado (Ueda,1990; Chou,1992). Al respecto se ha demostrado la reduccin en los niveles de clorofila y en la actividad de la Rubisco (Parthier,1990). Tambin inhiben la germinacin del polen y la semilla (Yamane, 1981; Wilen, 1991). Adems inducen la acumulacin de protenas de almacenamiento (Mason, 1990) y de ARNm que codifica protenas abundantes en la embriognesis (Reinbothe, 1992). Otros autores sostienen que la germinacin de embriones de manzanas es estimulada por la adicin de cido jasmnico e inhibida por el cido salicilhidroxmico que es un conocido inhibidor de la lipoxigenasa (Ranjan, 1994). Reguladores de crecimiento

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Estos icosanoides tambin provocan el aumento de protenas tilacoidales y de protenas solubles relacionadas con el estrs salino (Maslenkova, 1992), inducen la tuberizacin en papa, principalmente debido a que participan en la expansin celular (Takahashi, 1994) este ltimo efecto se asocia con las analogas estructurales que presentan con el cido tubernico. Se ha demostrado que la fluidez de las membranas decrece en protoplastos aislados a partir de plantas desarrolladas bajo altas concentraciones de cido jasmnico (1 a 10 M) (Vilhar, 1991). Esto podra justificarse teniendo en cuenta que el suministro de jasmonatos desencadena una respuesta que puede involucrar dao a las membranas celulares ya que incluye la liberacin de elicitores a partir de stas. A su vez, los cidos grasos polinsaturados de membrana son precursores en la biosntesis y podran autocatalizar la produccin de jasmonatos endgenos (Vick, 1986). La citada liberacin de los componentes insaturados de la bicapa lipdica disminuye notablemente la fluidez debido a que predominan, luego del proceso, fosfolpidos con cidos grasos saturados los cuales son menos mviles (Leshem, 1987). Adems los jasmonatos han sido identificados como metabolitos secundarios de diferentes gneros de hongos basidiomicetes como Collybia, Mycena, Phellinus, Strofaria, Trometes, etc. La funcin de los icosanoides en los micelios fngicos se desconoce pero se les atribuyen posibles roles alelopticos en la interaccin planta-hongo. Es un ejemplo de esto la induccin de senescencia en rosas ornamentales por Botryodiploidia theobromae , la que sera estimulada por los jasmonatos de origen microbiano (Miersch, 1993). 3.1.7. Poliaminas Las poliaminas tales como espermina y espermidina han sido consideradas como reguladores de crecimiento a partir de 1982, puesto que no solo estn ampliamente distribuidas en las diferentes especies vegetales sino que tambin ejercen diferentes efectos a concentraciones micromolares. Este tipo de compuestos ejercen control sobre el desarrollo lo cual es una caracterstica fundamental de las hormonas que las distingue de sustancias que presentan rol de nutrientes como aminocidos o vitaminas. Las poliaminas son esenciales en la divisin celular vegetal y en los procesos morfolgicos normales. Las plantas cuyos niveles de poliaminas estn genticamente alterados presentan modificaciones en su desarrollo normal. Por ejemplo es imposible lograr la formacin de embriones a partir de callos con bajos niveles de poliaminas o es posible lograr el desarrollo de anteras en lugar de ovarios en ejemplares hiperproductores de estas hormonas. Reguladores de crecimiento

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3.1.8. Brassinlidos Los brasinlidos son tambin denominados brasinoesteroides por su naturaleza qumica y por haber sido aislados, en principio, del polen de plantas del gnero Brassica. Este grupo de reguladores que comprende a ms de sesenta compuestos esteriodales fue considerado como propio de ciertas especies pero actualmente se conoce su amplia distribucin en el reino vegetal. Producen efectos sobre el crecimiento y desarrollo a muy bajas concentraciones como por ejemplo promocin dela elongacin de los tallos, inhiben el crecimiento de la raz y promueven tanto la sntesis de etileno como la epinastia (curvatura hacia abajo de determinados rganos que se produce por el mayor crecimiento del lado superior). 3.1.9. cido saliclico Desde hace mucho tiempo se conoce la presencia de salicilatos en la corteza de los sauces, pero recientemente se los ha descripto como compuestos potencialmente reguladores. El efecto ms conocido es su comportamiento como sustancia calorignica puesto que produce termognesis en flores del gnero Arum. Pero el rol ms general que se les atribuye es la participacin en los sistemas relacionados con la defensa frente a ataques de organismos patgenos ya que ha sido demostrado que inducen la produccin de protenas relacionadas con la patogenia. Los salicilatos tambin prolongan la longevidad de las flores, inhiben la biosntesis de etileno, la germinacin de la semilla, bloquean los procesos de respuesta frente a injurias mecnicas y revierten los efectos del cido abscsico.

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