Seminar Hasil

IDENTIFIKASI BIOHIDROGEN DARI KULTUR CAMPURAN MENGGUNAKAN VARIASI KONSENTRASI SUKROSA SEBAGAI SUBSTRAT
RIZKY AMELIA 1407 100 040
Dosen Pembimbing : Prof. Dr. SURYA ROSA PUTRA, MS HERDAYANTO SULISTYO PUTRO, M.Si

LOGO

1. Pendahuluan
Energi
HDI 2005
463 kWh/cap

Minyak Bumi Gas alam Batu Bara (86,9 miliar (384,7 TSCF) (58 miliar RESOURCE ton) UNRENEWABLE barel)

Biohydrogen
Sumber Energi Alternatif

Biodiesel

Bioetanol

BIOHIDROGEN

Ramah Lingkungan Efisien Renewable Resource

Efek Rumah Kaca (Hawkes et al., 2002) 122 MJ/kg (Anatopoulou et al,2007)

Biohydrogen
BIOHIDROGEN
Clostridium Bacillus Enterobacter

Kotay, 2006

Fermentasi
Memanfaatkan limbah organik

GLUKOSA (Katsopoulos et al.,2006)

SUKROSA (Niel et al.,2006)

PATI (Fang et al.,2006)

Biohydrogen

Sukrosa (substrat)

Kultur campuran

Biohidrogen

Pengaruh variasi konsentrasi substrat

Identifikasi

2. Metodologi
1. Regenerasi Kultur*
*Isolat kultur campuran dari Lab. Mikrobiologi UNAIR

diregenerasi Stok kultur

2. Pembuatan Media Cair

dicampur Sukrosa 1%, 2%, 3% Ekstrak ragi 0,5% Media cair

Biohydrogen 3. Pembiakan Kultur Campuran

1 ose bakteri DAN
FeSO4 0,03%

diambil 5 ml

inkubasi 14 jam (400C, 125 rpm)

Media kurva pertumbuhan Media fermentasi biohidrogen

inkubasi 14 jam (400C, 125 rpm)

(Media starter)
Kotay, 2006

FeSO4 0,03%

Media 50 ml

Biohydrogen 4. Pewarnaan Gram dan Uji Morfologi

1 ose bakteri preparat steril Metilen Blue

dikeringkan dialiri aquadest

Biohydrogen 5. Kurva Pertumbuhan Bakteri

inkubasi 14 jam (400C, 125 rpm)

Media starter Sukrosa 2% diambil

Kotay, 2006

diukur tiap 2 jam

Spektrofotometer UV-Vis ( = 600 nm)

Blanko

Biohydrogen 6. Jumlah Biomassa

disentrifuge microtube (10.000 rpm, 10 menit) diambil 1 ml

Sukrosa 1%, 2%, 3%

Tabung reaksi

per 6 jam

vortex

aquadest steril

endapan

vortex kuvet

Spektrofotometer UV-Vis ( = 600 nm)

Biohydrogen 7. Fermentasi Biohidrogen

Media starter
FeSO4 0,03%

dirangkai
h

suhu : 400C pH : 5-6 125 rpm

Hydrogen bag

Biohydrogen 8. Analisa Kualitatif

dianalisa Hydrogen Sensor Hydrogen bag

9. Analisa Kuantitatif

dianalisa

dan
GC

Volume total biogas

3. Hasil dan Pembahasan

1. Pembuatan Media

Media cair yg benar

Media cair

Media cair

Biohydrogen 2. Pewarnaan Gram dan Uji Morfologi

Batang kecil

Batang besar

Gambar 1. Pewarnaan Gram

Gambar 2. Morfologi Kultur Campuran

Bacillus susbtilis Pseudomonas fluorescens Bacillus cereus Actinobacillus sp.

Biohydrogen 3. Kurva Pertumbuhan Bakteri

= 600 nm (Kambourova et al., 1995) Keterangan:
Fase lag Fase log Fase stationer

Gambar 3. Kurva Pertumbuhan pada Sukrosa 2%

Fase kematian

Biohydrogen 4. Jumlah Biomassa

= 600 nm (Kambourova et al., 1995)

Kosentrasi Sukrosa (w/v) 1% 2% 3%

Absorbansi (nm) 0,37 0,46 0,56

Jam ke19 42 5

Gambar 4. Jumlah Biomassa

Biohydrogen 5. Fermentasi Biohidrogen

belum ada gelembung

indikator gas

sudah ada gelembung

Gambar 5. Rangkaian Alat

Piruvat + CoA + 2Fd(oks) Asetil-CoA + 2Fd(red) + CO2 2H+ + 2Fd(red) + enzim hidrogenase H2 + Fd(oks)
Pembentukkan asam organik: C6H12O6 + 2 H2O 2 CH3COOH + 2 CO2 + 4 H2 C6H12O6 CH3CH2CH2COOH + 2 CO2 + 2 H2 C6H12O6 2 C2H5OH + 2 CO2

Biohydrogen 6. Variasi Konsentrasi Substrat

Sukrosa 1%

Sukrosa 2%

Konsentrasi Sukrosa (w/v) 1%

Yield hydrogen (mol H2/mol substrat) 0,0625

2%
3%

0,0849
0,1398

Sukrosa 3%

Biohydrogen 7. Analisa Gas Hidrogen

Konsentrasi Sukrosa (w/v) 1% 2% 3% Volume Biogas (mL) 350 470 850 %H2 dengan Hydrogen Sensor 13,55% 18,20% 33,30%

Analisa Kualitatif

Konsentrasi Sukrosa (w/v) 1% 2% 3%

Analisa Kuantitatif

Konsentrasi Sukrosa (w/v) 1% 2% 3%

%H2 dengan GC 11,37% 13,57% 18,53%

Sukrosa 1%

11, 73%

Sukrosa 2%

13,57%

Sukrosa 3%

18,53%

4. Kesimpulan
Masing-masing konsentrasi menghasilkan total biogas dan perolehan biohidrogen yang berbeda volume

Yield hydrogen yang diperoleh dari konsentrasi sukrosa 1%, 2% dan 3% berturut-turut adalah 0,0625 mol H2/mol sukrosa; 0,0849 mol H2/mol sukrosa; 0.1398 mol H2/mol sukrosa

Jumlah substrat yang ada dalam media menambah hasil biohidrogen dalam proses fermentasi

LOGO