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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

MANUAL PARA EL ANLISIS QUMICO DE

Rubn Bazan Tapia rbt@lamolina.edu.pe

1996

PRESENTACIN
El Manual de Anlisis de Suelos, Aguas y Plantas recopila una vasta informacin dispersa y acumulada a travs de la experiencia adquirida en el Laboratorio Anlisis del Departamento de Suelos y Fertilizantes, Facultad de Agronoma de la Universidad Nacional Agraria "la Molina". La presentacin del contenido esta dividido en cuatro captulos correspondientes al Anlisis de Suelos Normales, Anlisis de Suelos Salinos - Sdicos, Aguas y Plantas. En general en contenido sencillo, dinmico y acadmico para el entendimiento de los lectores conocedores del tema. Los procedimientos han sido propuestos desde un punto de vista agronmico y descritos p1ra seguirlos paso a paso. El Captulo I contiene la gua para el anlisis de suelos normales e incluye los procedimientos necesarios para la preparacin de las muestras, las determinaciones de carbonatos, materia orgnica, y la determinacin de macros (N, P y K) y anlisis de un suelo salino-sdico. El Capitulo II del Manual orienta en los procedimientos para el anlisis de cationes y aniones solubles, cloro extractable y en la determinacin de yeso soluble. El Captulo III muestra los procedimientos para los anlisis de aguas, donde las determinaciones estn relacionadas a la reaccin (pH) del agua, alcalinidad, conductividad elctrica, cationes y aniones. EI Captulo IV y ultimo captulo. referente al anlisis de plantas o foliar, comienza con los principio bsicos y las determinaciones del contenido de humedad, nitrgeno total por el mtodo de Kjeldahl, continua con los procedimientos para la digestin por la va humedad o seca para determinar P, K, Ca, Mg, S, B, Cu, Fe. Mn y Zn y termina con las determinaciones de B y Cl. El manual incluye una serie de mtodos de anlisis alternativos a los tradicionales usados, pero que necesariamente deben ser aprobados antes de su aplicacin a los diferentes suelos, aguas y plantas. En la descripcin de un mtodo de anlisis no solo esta indicado el procedimiento de anlisis, sino tambin el principio qumico del mtodo, que sirve de informacin bsica para que el usuario tome en cuenta las diferentes reacciones que ocurren en el proceso. Por otro lado, ante la existencia de diferentes instrumentos de anlisis, como producto del avance de la ciencia y tecnologa, ha sido necesario recomendar el uso de las tcnicas de emisin y absorcin en las determinaciones analticas. El autor espera que este Manual de Anlisis sirva de Ayuda a todos aquellos interesados en el anlisis de suelos, aguas y plantas. El autor tambin espera que los lectores sean los ms severos crticos para ir mejorando el Manual de Anlisis, en el cual puedan converger los actuales avances en el desarrollo de nuevas tcnicas o mtodos de anlisis. Escaneado y editado por Ing. Carlos Hugo Egovil De la Cruz (Moyobamba, 2009).

Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas

INDICE I.
1.

ANALISIS DE SUELOS
PREPARACIN DE MUESTRAS DE SUELOS EN EL LABORATORIO ........................................ 8 1.1. 1.2. 1.3. 1.4. Equipos Identificacin Secado Molienda y tamizado

2.

DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE HUMEDAD ..................................................................... 9 2.1. 2.2. 2.3. 2.4. Principio Equipos Procedimiento Clculos

3.

ANLISIS DEL TAMAO DE PARTCULA .................................................................................... 10 Principio Reactivos Materiales Procedimientos en estudios edafolgicos 3.4.1. Oxidacin de la Materia Orgnica 3.4.2. Remocin de carbonatos 3.4.3. Dispersin 3.4.4. Separacin de fracciones 3.4.5. Determinacin de la fraccin arena 3.4.6. Determinacin de limo y arcilla 3.4.6.1. Calibracin de la pipeta 3.4.6.2. Determinacin del blanco 3.4.7. Determinacin de las fracciones menores a 0.05 mm de dimetro 3.4.8. Determinacin de las fracciones menores a 0.02 mm de dimetro 3.4.9. Determinacin de las fracciones menores a 0.002 mm de dimetro 3.4.10. Clculos 3.5. Mtodo del hidrmetro 3.5.1. Principio 3.5.2. Reactivos y materiales 3.5.3. Procedimiento 3.5.4. Clculos 3.1. 3.2. 3.3. 3.4.

4.

DETERMINACIN DEL pH DE LOS SUELOS ............................................................................... 15 4.1. Principio 4.2. Reactivos 4.3. Procedimiento 4.3.1. pH de la pasta saturada 4.3.2. pH del suelo en relacin 1:1 v/v 4.3.3. pH del suelo en relacin 1:2 p/v

5.

CONDUCTIVIDAD ELCTRICA (CE Sales Solubles) ................................................................ 17 5.1. 5.2. 5.3. 5.4. Principio Equipo y materiales Reactivos Procedimiento 5.4.1. Preparacin de la pasta de suelo saturada 5.4.2. Preparacin de una suspensin suelo-agua en relacin 1:2 o 1:5 5.5. Lectura de la conductividad elctrica Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas 2

DETERMINACIN DE CARBONATOS: CALCITA DOLOMITA ................................................. 20 6.1. Principio 6.2. Equipos y materiales 6.3. Reactivos 6.4. Procedimientos 6.4.1. Determinacin de carbonatos mediante el calcmetro 6.4.2. Determinacin de carbonatos mediante neutralizacin cida 6.4.3. Clculos

7.

DETERMINACION DEL CARBONO ORGANICO: MATERIA ORGANICA ................................... 22 7.1. 7.2. Principio Determinacin de la materia orgnica por calentamiento 7.2.1. Materiales 7.2.2. Procedimientos 7.2.3. Clculos Determinacin de la materia orgnica: Mtodo de Walkley y Black 7.3.1. Principios 7.3.2. Materiales 7.3.3. Reactivos 7.3.4. Procedimiento 7.3.5. Clculos Determinacin de la materia orgnica por colorimetra 7.4.1. Materiales 7.4.2. Reactivos 7.4.3. Procedimiento

7.3.

7.4.

8.

DETERMINACION DEL NITROGENO TOTAL EN LOS SUELOS ................................................. 26 8.1. 8.2. 8.3. 8.4. 8.5. Principio Materiales Reactivos Procedimiento por el mtodo de Kjeldahl Clculos

9.

DETERMINACION DEL FOSFORO DISPONIBLE ......................................................................... 28 9.1. 9.2. Principio Reactivos 9.2.1. Soluciones extractantes 9.2.2. Soluciones para el desarrollo del color 3.2.2.1. Para extracciones con Bray y doblemente cida 3.2.2.2. Para extraccin con Olsen 9.2.3. Solucin estndar Procedimiento 9.3.1. Bray I y Bray II 9.3.2. Doble cido 9.3.3. Olsen Clculos

9.3.

9.4.

10. CAPACIDAD DE INTERCAMBIO CATIONICO: CIC ..................................................................... 32 10.1. Principio 10.2. Determinacin de la CIC Saturacin con Acetato de amonio (NH4OAc) 10.2.1. Reactivos 10.2.2. Procedimiento usando destilacin Kjeldahl 10.2.3. Procedimiento usando destilacin micro Kjeldahl 10.2.4. Procedimiento ASI 10.3. Procedimiento mediante saturacin con Acetato de sodio (NaOAc), pH 8.2 10.3.1. Reactivos 10.3.2. Procedimiento 3

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11. DETERMINACION DE CATIONES CAMBIABLES ......................................................................... 35 11.1. Principio ++ ++ 11.2. Determinacin de Ca y Mg por titulacin 11.2.1. Principio 11.2.2. Reactivos 11.2.3. Procedimiento 11.2.3.1. Calcio ms magnesio 11.2.3.2. Calcio ++ ++ 11.3. Determinacin de Ca y Mg por fotometra de absorcin + + 11.4. Determinacin de Na y K por fotometra de absorcin +++ + 11.5. Determinacin de Al e H (acidez intercambiable) 11.5.1. Principio 11.5.2. Reactivos 11.5.3. Procedimiento 11.5.4. Clculos 12. DETERMINACION DE MICRONUTIUENTES: Fe - Cu - Zn - Mn.................................................. 39 12.1. Principio 12.2. Metodologa ASI para Cu Fe Zn Mn 12.2.1. Reactivos 12.2.2. Procedimientos 12.2.3. Determinacin 12.3. Metodologa de Lindsay y Norvell DTPA 12.3.1. Reactivos 12.3.2. Procedimiento 12.3.3. Determinacin 13. DETERMINACIN DEL AZUFRE DISPONIBLE EN SUELOS ...................................................... 41 13.1. Principio 13.2. Extraccin del azufre del suelo 13.2.1. Reactivos 13.2.2. Procedimiento 13.2.2.1. Extraccin del azufre del suelo 13.2.2.2. Desarrollo de la turbidimetra 13.2.2.3. Clculos 13.3. Extraccin con NH4OAc - CH3 - COOH 13.3.1. Reactivos 13.3.2. Procedimiento 13.3.2.1. Extraccin del azufre del suelo 13.3.2.2. Desarrollo de turbidimetra 13.3.2.3. Clculos 14. DETERMINACION DEL BORO DISPONIBLE EN LOS SUELOS. ................................................. 42 14.1. Principio 14.2. Extraccin con fosfato de calcio y determinacin del Boro con curcumina 14.2.1. Reactivos 14.2.2. Procedimiento 14.2.2.1. Extraccin del boro 14.2.2.2. Determinacin del boro extrado 14.3. Extraccin con agua caliente y determinacin del Boro con curcumina 14.3.1. Reactivos 14.3.2. Procedimiento 14.3.2.1. Extraccin del boro 14.3.2.2. Determinacin del boro extrado 14.4. Extraccin con agua caliente y determinacin del Boro con carmn 14.4.1. Reactivos 14.4.2. Procedimiento 14.4.2.1. Extraccin del boro 14.4.2.2. Determinacin del boro extrado Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas 4

II.

ANALISIS DE SUELOS SALINOS Y SODICOS

15. ANALISIS DE SUELOS SALINOS Y SODICOS ............................................................................. 46 15.1. Determinacin del porcentaje de saturacin, extracto de saturacin y conductividad elctrica 15.2. Determinacin de cationes solubles 15.3. Determinacin de aniones solubles -3 15.3.1. Carbonato CO y bicarbonatos HCO3 15.3.1.1. Principio 15.3.1.2. Reactivos 15.3.1.3. Procedimiento 15.3.1.4. Clculos 15.3.2. Determinacin de cloruros 15.3.2.1. Principio 15.3.2.2. Mtodo del nitrato de plata 15.3.2.3. Mtodo del nitrato de mercurio (Mtodo de Clark y posteriores modificaciones) 15.4. Determinacin del cloro extractable 15.4.1. Reactivos 15.4.2. Procedimiento 16. DETERMINACION DEL YESO SOLUBLE ...................................................................................... 50 16.1. 16.2. 16.3. 16.4. Principio Reactivos Procedimiento Clculos

III.

ANALISIS DE AGUAS CON FINES DE RIEGO


17.1. Principio 17.2. Reactivos 17.3. Procedimiento

17. DETERMINACION DEL pH ............................................................................................................. 51

18. DETERMINACION DE LA ALCALINIDAD ...................................................................................... 52 18.1. Principio 18.2. Reactivos 18.3. Procedimiento 18.3.1. Alcalinidad en fenolftaleina 18.3.2. Alcalinidad total por el mtodo del methyl orange 18.3.3. Clculos 19. CONDUCTIVIDAD ELECTRICA ...................................................................................................... 53 19.1. Principio 19.2. Equipo 19.3. Procedimiento 20. DETERMINACION DE CATIONES Y ANIONES ............................................................................. 53 20.1. Principio 20.2. Determinacin de cationes 20.2.1. Equipo 20.2.2. Reactivos 20.2.3. Procedimiento 20.3. Determinacin de aniones Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas 5

20.3.1. Determinacin de carbonatos y bicarbonatos 20.3.1.1. Principio 20.3.1.2. Reactivos 20.3.1.3. Procedimiento 20.3.1.4. Clculos 20.3.2. Determinacin de cloruros 20.3.2.1. Principio 20.3.2.2. Reactivos 20.3.2.3. Procedimiento 20.3.2.4. Clculos 20.3.3. Determinacin de sulfatos y boro 20.3.4. Determinacin de Nitratos 20.3.4.1. Principio 20.3.4.2. Reactivos 20.3.4.3. Procedimiento 20.3.4.4. Clculos

IV.

ANALISIS DE PLANTAS
21.1. 21.2. 21.3. 21.4. Muestreo Lavado Secado Molido

21. PRINCIPIOS BASICOS DE ANALISIS FOLIAR ............................................................................. 57

22. DETERMINACION DEL CONTENIDO DE HUMEDAD ................................................................... 58 22.1. 22.2. 22.3. 22.4. Principio Equipos Procedimiento Clculos

23. DETERMINACION DEL NITROGENO TOTAL: METODO KJELDAHL ......................................... 60 23.1. Principio 23.2. Reactivos 23.2.1. Mezcla sulfrica cido saliclico 23.2.2. Mezcla digestora compuesta 23.3. Procedimiento 23.3.1. Usando mezcla sulfrica cido saliclico 23.3.2. Usando mezcla digestora compuesta 24. DIGESTION HUMEDA PARA DETERMINAR: P K Ca Mg S B Cu Fe Mn Zn ... 62 24.1. Principio 24.2. Reactivos 24.3. Procedimiento: Obtencin del extracto 24.3.1. Determinacin de fsforo 24.3.1.1. Reactivos 24.3.1.2. Procedimiento 24.3.1.3. Clculos 24.3.2. Determinacin de Ca Mg K Na 24.3.2.1. Equipos y reactivos 24.3.2.2. Procedimiento 24.3.2.3. Clculos 24.3.3. Determinacin de Azufre 24.3.3.1. Reactivos 24.3.3.2. Procedimiento 24.3.3.3. Clculos 24.3.4. Determinacin de boro Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas 6

24.3.4.1. Reactivos 24.3.4.2. Procedimiento 24.3.4.3. Clculos 24.3.5. Determinacin de Cu Fe Mn Zn 24.3.5.1. Equipo 24.3.5.2. Procedimiento 25. DIGESTION VIA SECA PARA DETERMINAR: P K Ca Mg S B Cu Fe Mn Zn.... 64 25.1. Principio 25.2. Equipos 25.3. Procedimiento: Obtencin del extracto 25.3.1. Determinacin de fsforo 25.3.1.1. Reactivos 25.3.1.2. Procedimiento 25.3.1.3. Clculos 25.3.2. Determinacin de potasio 25.3.2.1. Equipo 25.3.2.2. Procedimiento 25.3.2.3. Clculos 25.3.3. Determinacin de Calcio y Magnesio 25.3.3.1. Por absorcin atmica 25.3.3.2. Por titulacin con EDTA 25.3.4. Determinacin de Magnesio por colorimetra 25.3.5. Determinacin de Cobre 25.3.6. Determinacin de Fierro 25.3.7. Determinacin de Manganeso 25.3.8. Determinacin de zinc 26. DETERMINACION DE BORO EN PLANTAS CON ALTO CONTENIDO EN ESTE ELEMENTO. 71 27. DETERMINACION DEL CLORO EN PLANTAS ............................................................................. 71 27.1. Principio 27.2. Extraccin del cloro 27.3. Determinacin del cloro 27.3.1. Reactivos 27.3.2. Procedimiento 27.3.3. Clculos

BIBLIOGRAFIA ............................................................................................................................. 73

Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas

I.- ANLISIS DE SUELOS


1. PREPARACIN DE MUESTRAS DE SUELOS EN EL LABORATORIO
Se asume que en el campo, se han tomado muestras de suelos verdaderamente representativas. Por consiguiente, es necesario poner sumo cuidado en el manejo de las muestras cuando llegan al laboratorio. Las operaciones que implican son: identificacin, secado, molienda y tamizado. 1.1. Equipos Molino para muestras de suelo (de preferencia de martillo). Estufa para secado, con circulacin de aire. Tamiz de 2 mm de dimetro. Mortero de gata para casos especiales Bolsas de polietileno o de papel kraft Marcadores indelebles o etiquetas. Cuaderno para registro. 1.2. Identificacin En el cuaderno de registro se deben anotar todas las muestras que llegan al laboratorio para su anlisis. En este se anotarn el nmero de laboratorio y de campo que le corresponda a la muestra de suelo, datos sobre la procedencia as como el tipo de anlisis que requiere la muestra. Cualquier otro dato que permita su identificacin debe ser anotado. 1.3. Secado Tan pronto como las muestras llegan al laboratorio (en una cantidad aproximada de 1 Kg.), son puestas a secar al aire en un lugar seco y protegido de posibles contaminaciones. En algunos casos puede secar en una estufa con circulacin de aire y a una temperatura de 25 C. Debido a rpidos cambios que se producen en el estado de algunas especies inicas por efecto del secado, muchos anlisis deben realizarse sobre muestras hmedas. Ejemplo: determinacin de nitratos. En este caso, es necesario determinar el % de humedad para luego hacer las correcciones en la expresin del contenido. Una vez seca la muestra, una porcin puede ser guardada en frascos para el museo edafolgico. 1.4. Molienda y tamizado En el anlisis de suelos con fines agrcolas, se emplea el concepto tierra fina secada al aire (TFSA). TFSA es aquella que ha pasado por el tamiz de 2.0 mm de dimetro. En consecuencia los agregados de suelo deben ser rotos mediante molienda. Se debe evitar moler partculas de grava o cascajo. Durante el proceso de secado de la muestra se debe remover restos de hojas o races, as como agregados muy duros. Terminado este proceso, la muestra esta preparada para ser trabajada en el laboratorio y los anlisis pueden ser realizados.
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2.

DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE HUMEDAD


2.1. Principio El contenido de humedad es determinado por el peso de una muestra de suelo con contenido de humedad original, seguido por el secado del suelo en una estufa de aire forzado y luego pesada. La perdida en peso (agua) es expresada en porcentaje sobre la base de peso seco. En algunos suelos la materia orgnica puede ser descompuesta a 105 C. Para la mayora de los suelos, esto no es un problema serio de error, pero si lo es para suelos que contienen cantidades significativas de compuestos voltiles. 2.2. Equipos Estufa Balanza con aproximacin de 0.01 g. Desecador Cajas de aluminio con tapa (preferentemente de peso conocido) 2.3. Procedimiento a. Pesar la caja de aluminio W1 b. c. d. Transferir un peso de suelo hmedo; 20 g. Es una cantidad suficiente para suelos minerales. Peso de caja ms muestra de suelo hmedo es W2. Colocar la caja ms muestra de suelo en la estufa a 105 C hasta peso constante. Esto se logra en ms o menos 24 horas. Enfriar en un desecador durante 30 minutos. Pesar con una aproximacin de 0.01 g. Peso de caja ms muestra seca es W3

2.4. Clculos Peso de suelo seco es Humedad en g. es

= =
=

W3 - W 1 W2 - W3
humedad en gramos x 100 Peso suelo seco

% de Humedad

Nota: 1. Contenido de humedad de un suelo secado al aire es denominado: humedad higroscpica 2. Los resultados analticos de N-P-K, etc. en muchos casos son expresados sobre la base de peso seco a la estufa. Si el anlisis es hecho en muestras secadas al aire o sobre muestras hmedas, los resultados pueden ser convertidos a la base de peso seco a la estufa por determinacin de la humedad en una submuestra del suelo. Los resultados analticos hechos en muestras hmedas se multiplican por el factor de humedad. Donde:
Factor de Humedad = 100 + % de humedad 100

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3.

ANLISIS DEL TAMAO DE PARTCULA


3.1. Principio Se refiere a la separacin de la parte mineral del suelo en fracciones de diferentes tamao y la preparacin de cada una de ellas. El anlisis comprende a todos los materiales minerales del suelo, incluyendo gravas o materiales ms gruesos. En este caso, el procedimiento que se da es aplicable a la fraccin fina del suelo (< 2 mm de dimetro). Una parte importante en este anlisis es el tratamiento de la muestra para una completa dispersin de las partculas primarias. En consecuencia, los materiales cementantes generalmente de origen secundario, tales como la materia orgnica, carbonato de calcio y xidos; tienen que ser removidos. Para propsitos de anlisis con fines agrcolas, esta remocin no es de vital importancia. Sin embargo, para fines de estudios edafolgicos si se debe considerar todos estos pre tratamientos que consisten bsicamente en la remocin de la materia orgnica mediante la adicin de cido perxido de hidrgeno (H2O2); la del carbonato de calcio mediante la adicin de cido actico al 10% (CH3COOH) o de cido clorhdrico (HCl) diluido. Luego de una agitacin con el agente dispersante, la fraccin arena, limo y arcilla cuantificada por el mtodo de la pipeta, del hidrmetro o alternativamente mediante el uso de tamices (> a 0.050 mm), en el cual la fraccin arena es separada del limo y de la arcilla. Para la aplicacin del mtodo del hidrmetro o de la pipeta se utiliza el principio de la velocidad de cada de los cuerpos en un medio lquido y que se puede calcular mediante la formula de Stokes. 3.2. Reactivos Perxido de hidrgeno, agua oxigenada al 30% cido actico al 10% v/v. Adicionar 100 ml de cido actico Q.P. a 800 ml de agua destilada. Agitar y llevar a volumen de 1000 ml. Agente dispersante: hexametafosfato de sodio (NaPO3)6 al 4% y solucin de carbonato de sodio (Na2CO3) al 1%. Disolver 40 g de hexametafosfato de sodio y 10 g de carbonato de sodio en agua, llevar a volumen de 1000 ml. Ambos reactivos antes de ser usados deben ser secados a la estufa a 105 C por 24 horas. Solucin saturada de cloruro de sodio (NaCl). Disolver 37.5 g de cloruro de sodio en agua a temperatura de 70 80 C; luego enfriar. Llevar a volumen de 1000 ml. 3.3. Materiales Bao mara Plancha de calentamiento Agitador horizontal o vertical Juego de tamices: 2.0; 1.0; 0.5; 0.25; 0.125; 0.050 mm de dimetro Cilindros de sedimentacin: probeta de Bouyoucos Hidrmetro de 67 F o 68 F de calibracin Termmetro en grados Celsius.

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10

3.4. Procedimiento en estudios edafolgicos. 3.4.1. Oxidacin de la materia orgnica 1. Pesar aproximadamente 20 g de tierra fina seca al aire (TFSA), y colocar dentro de un vaso. Si el suelo presenta contenido de carbonato mayor al 10% pesar proporcionalmente ms suelo. 2. Adicionar 15 ml de agua y 15 ml de perxido de hidrgeno al 30%. Cubrir el vaso con luna de reloj. En caso de presentarse fuerte efervescencia adicionar algunas gotas de etanol 3. Dejar en reposo toda la noche 4. Al siguiente da poner el vaso en bao mara a 80 C; adicionar 5 10 ml de agua oxigenada al 30% hasta la total descomposicin de la materia orgnica. El sobrenadante debe ser de color claro. 5. Adicionar agua destilada hasta un volumen de ms o menos 300 ml. 6. Poner en la plancha de calentamiento y cuidadosamente calentar por 1 hora para remover algn remanente de perxido de hidrgeno. Remover el vaso de la plancha y dejar enfriar. 7. Centrifugar y decantar alternativamente para eliminar el lquido Nota: En este momento se debe hacer la distincin si el suelo es calcreo o no: Suelo calcreo = generalmente pH > 6.5, Suelo no calcreo = generalmente pH < 6.5. 8. Si el suelo es no calcreo, adicione 300 ml de agua destilada y disperse 9. Si el suelo es calcreo, proceda con la remocin de carbonatos 3.4.2. Remocin de carbonatos 1. La muestra libre de materia orgnica recibe aproximadamente 100 ml de cido actico al 10%. Calentar en bao mara (100 C). Cubrir el vaso con una luna de reloj. Despus que la efervescencia ha cesado, adicione incrementos de 25 ml de cido actico hasta que no se presente efervescencia. 2. Centrifugar y decantar la solucin sobrenadante 3. Adicionar 300 ml de agua destilada. Agitar el sedimento. Centrifugar y decantar. Repetir 4 o 5 veces. 4. Adicionar algunos ml de solucin saturada de cloruro de sodio para promover peptizacin. 3.4.3. Dispersin 1. Transferir la suspensin hacia una botella de agitacin. 2. Adicionar 20 ml del agente dispersante. Llevar a volumen de 300 ml con agua destilada. 3. Agitar toda una noche, 16 horas, en un agitador horizontal. 3.4.4. Separacin de fracciones 1. Pasar la suspensin dispersada a travs de un tamiz de 0.05 mm de dimetro y que est colocado encima de un embudo soportado por el cilindro de sedimentacin 2. Llevar a volumen de 1000 ml con agua destilada. 3.4.5. Determinacin de la fraccin arena 1. Pasar la fraccin arena retenida en el tamiz de 0.05 mm de dimetro a una cpsula de porcelana. Aqu se puede tomar las siguientes alternativas. a. Tamizar la arena en hmedo para separar en fracciones b. Secar la arena y luego tamizar para separar las fracciones.
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2.

Con los datos obtenidos en a b calcular la cantidad d arena.

3.4.6. Determinacin de limo y arcilla 3.4.6.1. Calibracin de la pipeta El mtodo que se describe, est basado en la toma de un volumen de 20 ml a partir de una solucin de 1000 ml. El factor de clculo ser 1000/20 = 50. S se usa una pipeta de otro volumen el factor cambiara. 3.4.6.2. Determinacin del blanco Aunque el agente de dispersin est preparado para este fin, es necesario llevar un blanco. Cualquier error ser multiplicado por 50. El procedimiento es tomar una alcuota de 20 ml y evaporar a sequedad. Pesar aproximadamente de 0.001 g. Este peso es Z de blanco. 3.4.7. Determinacin de las fracciones menores de 0.05 mm de dimetro 1. El cilindro con las fracciones menores a 0.05 mm es tapado con un tapn de jebe y luego agitado. 2. 3.
4.

Colocar el cilindro sobre una mesa, remover el tapn e inmediatamente tomar con la pipeta 20 ml de suspensin en el centro del cilindro. Transferir la alcuota a una cpsula de porcelana y evaporar a 105 C por 24 horas. Pesar la cantidad de fraccin con aproximacin de 0.001 g. Este es el peso F de fraccin <0.05 mm

3.4.8. Determinacin de las fracciones menores a 0.02 mm de dimetro 1. Tapar el cilindro y luego agitar. 2. 3. 4. 5. Colocar el cilindro sobre una mesa libre de vibraciones y ensamblar la pipeta Despus de 5 minutos medir la temperatura y tomar una alcuota de 20 ml a la profundidad indicada en la tabla 3.1. Transferir la alcuota a una cpsula y secar a 105 C por 24 horas. Pesar la cantidad de fraccin con aproximacin de 0.001 g. Este es el peso G de fraccin < 0.02 mm

Tabla 3.1 Profundidades en cm. al cual las fracciones menores a 0.02 mm y menores a 0.2 mm de dimetro deben ser tomadas en funcin de la temperatura y el tiempo de sedimentacin. Temperatura C 19 20 21 22 5 min. < 0.02 mm 10.5 10.8 11.0 11.3 5 y 1/2 horas < 0.002 mm 6.9 7.1 7.2 7.4 Temperatura C 23 24 25 26 5 min. < 0.02 mm 11.6 11.9 12.1 12.4 5 y 1/2 horas < 0.002 mm 7.6 7.8 8.0 8.2

3.4.9. Determinacin de las fracciones menores a 0.002 mm de dimetro 1. Despus de 5 y horas de sedimentacin medir la temperatura y tomar una alcuota de 20 ml a la profundidad indicada en la tabla. 2. Transferir la alcuota a una cpsula y secar a 105 C por 24 horas
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3.

Pesar con aproximacin de 0.001 g. Este es el peso H de las fracciones menores a 0.002 mm

3.4.10. Clculos Los clculos se hacen sobre la base de muestra secada a la estufa. Arcilla : < 0.002 mm = (H x 50) (Z x 50) Limo : 2 0.02 mm = (G x 50) (Z x 50) K Limo : 0.02 0.05 mm = (F x 50) (Z x 50) K L Arena : > 0.05 mm = A+B+C+D+E Peso de muestra = K + L + M + N (todos los pesos en gramos). Donde: A hasta E F G H Z = = = = =

= = = =

peso K peso L peso M peso N

pesos individuales de las fracciones de arena pesos de la alcuota de 20 ml de la fraccin < 0.05 mm pesos de la alcuota de 20 ml de la fraccin < 0.02 mm pesos de la alcuota de 20 ml de la fraccin < 0.002 mm pesos de la alcuota de 20 ml del blanco.

Las cantidades proporcionales de las fracciones pueden ser calculadas por: % arcilla < 0.002 mm = K / peso de muestra x 100 % limo % limo % arena % arena % arena % arena % arena 0.002 0.02 mm 0.02 0.05 mm 2 1 mm 1 0.5 mm 0.25 0.50 mm 0.10 0.25 mm 0.05 0.10 mm = = = = = = = L / peso de muestra x 100 M / peso de muestra x 100 A / peso de muestra x 100 B / peso de muestra x 100 C / peso de muestra x 100 D / peso de muestra x 100 E / peso de muestra x 100

3.5. Mtodo del hidrmetro. 3.5.1. Principio Las fracciones de arena, limo y arcilla puedan ser determinadas con un hidrmetro en reemplazo de la pipeta, en un procedimiento bastante simple y rpido. Bsicamente consiste en la medida de la densidad de la suspensin la cual es funcin de la concentracin y del tipo de partcula presente, despus de un tiempo de sedimentacin. Si se desea un pre tratamiento del suelo este es el mismo tal como ha sido descrito para el mtodo de la pipeta, Despus de un tiempo de agitacin con el agente dispersante la suspensin es transferida a un cilindro de sedimentacin, donde se estimar la concentracin de las fracciones: arena, limo y arcilla. 3.5.2. Reactivo y Materiales Agente dispersante: solucin de hexametafosfato de sodio (NaPO3)6 y carbonato de sodio (Na2CO3): disolver en agua 37.5 g de hexametafosfato de sodio y 7.94 g de carbonato de
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sodio; agitar y llevar a volumen de 1000 mI. Hidrmetro estndar, ASTM N 152 con escala Bouyoucos en g/l. Cilindros para suspensin con dos marcas: una para una muestra de 50 g y la segunda para 100 g. Equipo para dispersin vertical o de agitacin horizontal

3.5.3. Procedimiento 1. Pesar 50 g. de TFSA para muestras de textura fina; 100 g. para suelos arenosos. 2. Pasar la muestra al deposito de dispersin, adicionar agua destilada hasta 1/3 por debajo del volumen final; adicionar 50 ml del agente dispersante y dejar unos minutos para que la muestra se embeba o puede dejarse durante toda la noche. Si usa el dispersador agite por 5 a 6 minutos para suelos arenosos y para los suelos medios a finos agitar por 10 minutos. Si usa el agitador recprocante, agite por dos horas. 3. Verter el contenido de muestra dispersada al cilindro de sedimentacin. Con el hidrmetro dentro de la suspensin llevar el nivel del lquido hasta la marca inferior si utiliz 50 g, o hasta la superior si utiliz 100 g. 4. Agitar la suspensin. Tan pronto termine la agitacin dejar en reposo el cilindro y anote el tiempo; sumerja el hidrmetro en la suspensin y de acuerdo a la clasificacin de partculas segn el Sistema Americano, haga dos lecturas: una a los 40 segundos y la segunda a las 2 horas. 5. A cada tiempo de lectura del hidrmetro tome la temperatura de la suspensin. Por cada grado de temperatura por encima o por debajo de la temperatura de calibracin del hidrmetro (67 F 68 F) corrija en 0.2 unidades la que se suma o se resta a la lectura del hidrmetro segn la tabla 3.2
Tabla 3.2 Factores de correccin a la lectura del hidrmetro por efecto de temperatura Temperatura Factor de Correccin Temperatura Factor de Correccin C C 67 F 68 F 67 F 68 F 14 - 1.96 - 2.36 22 + 0.92 + 0.72 16 - 1.24 - 1.44 24 + 1.64 + 1.44 18 - 0.52 - 0.72 26 + 2.36 + 2.16 20 + 0.20 0.00 28 + 3.08 + 2.88

La efectividad del mtodo depende en gran parte de una buena dispersin, para lo cual es necesario que el equipo se encuentre en buenas condiciones, especialmente las paletas de agitacin y las varillas de la copa del dispersador. 3.5.4. Clculos
% de arena % de arcilla % de limos = = = 100 (lectura a 40 seg. x 100 / peso de muestra) lectura corregida a las 2 horas x 100 / peso de muestra 100 (% de arena + % de limo)

Con estos datos se determina la clase textural, utilizando el tringulo textural.

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Triangulo Textural

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4.

DETERMINACIN DEL pH DE LOS SUELOS


4.1. Principio El pH es medido potencialmente en una pasta saturada o en el liquido sobrenadante que est en equilibrio en una suspensin suelo-lquido en una relacin 1:1; 1:2 1:5 en peso: peso peso: volumen volumen: volumen. El lquido es agua o un electrlito: 0.01 M de cloruro de calcio (CaCI2) 1 N de cloruro de potasio (KCI). 4.2. Reactivos Solucin de cloruro de calcio 0.01 M. Disolver 1.47 g de la sal (CaCI2 .2H2O) en 1000 ml. de agua destilada. Controlar el pH de la solucin, este debe ser entre 5.0 y 6.5. Si requiere ajuste se hace con Ca(OH)2 HCI. La conductividad elctrica debe ser 2.32 mmhos/cm a 25C. Solucin de cloruro de potasio. Disolver 74.5 g. de la sal (KCI) en 1000 ml. de agua destilada Soluciones buffer de pHs : 4.0 ; 7.0 ; 10.0 Solucin buffer de pH 4.0: pesar 5.105 g de biftalato de potasio seco a 105 C y disolver en agua destilada previamente hervida y enfriada; llevar a volumen de 500 mI. Agregue un cristal de timol 1 ml de cloroformo para preservar. Solucin buffer de pH 7.0; solucin de Sorensen. La solucin A es fosfato de sodio secundario M/15: disolver 11.8660 g de la sal (Na2HPO4 . 2H2O) en agua destilada y luego llevar a volumen de 1000 mI. La solucin B es fosfato de potasio primario M/5: disolver 9.0.063 g de la sal (K2HPO4) en agua destilada y llevar a volumen de 1000 ml. Con las soluciones prepare la mezcla de fosfatos. Para 500 ml de solucin de pH 7.0 medir 302.5 ml de la solucin A y completar a 500 mi con la solucin B. Agregue un cristal de timol 1 ml de cloroformo para preservar. Solucin buffer de pH 10.0: disolver 3.81 g. de borato de sodio (Na2B407 . 10H20) en 1000 mI de agua destilada. Agua destilada. En el anlisis se usa agua destilada o desionizada. Al estar en contacto con el C02 del medio ambiente, el pH es de 5.8 a 6.0; su conductividad elctrica es de 3 - 5 micromhos/cm. En algunos casos se requiere agua destilada libre de CO2; esta puede ser preparada, hirviendo esta agua tendr un pH de 6.8 a 7.2 y muy probable que tenga una conductividad elctrica menor a 3 micromhos/cm. 4.3. Procedimiento 4.3.1. pH de la pasta saturada 1. En un vaso plstico de 400 ml adicionar suelo hasta ms o menos la mitad del volumen. 2. Adicionar suficiente cantidad de agua destilada hasta que todo el suelo se encuentre hmedo (estado de humedad cercano a la capacidad de campo). 3. Con la ayuda de una esptula mezclar el suelo. Adicionar algunos mililitros de agua y mezclar. De esta forma llegar a una pasta saturada caracterizada porque fluye lentamente por las paredes del vaso cuando se inclina pero no cae o derrama del vaso cuando el vaso esta vertical. En la superficie de la masa se observa una pelcula de agua que refleja la luz. 4. Cubrir el vaso y dejar por una hora para obtener el equilibrio. Si se mide el volumen de suelo y la cantidad de agua adicionada, se puede calcular el porcentaje de saturacin (ml de agua/100 ml de suelo). 5. Introducir los electrodos del potencimetro dentro de la masa hasta encontrar la lectura definida en el potencimetro.
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Nota: El potencimetro debe ser previamente calibrado con buffer 7.0 y luego con un buffer cido o alcalino de acuerdo a las caractersticas del suelo. 4.3.2. pH del suelo en relacin 1:1 v/v 1. Medir 20 ml de suelo en un vaso de 50 o 100 ml. 2. Adicionar 20 ml de agua destilada o solucin de 1N de KCI solucin de 0.01M de CaCI2. 3. Agitar intermitentemente durante 30 minutos. Dejar en reposo por 30 minutos. 4. Leer el pH en el potencimetro sumergiendo el los electrodos. El potencimetro debe previamente ser calibrado con los buffer. Nota: Si usa electrodo de combinacin o electrodos de vidrio y de referencia, estos deben estar sumergidos en el lquido sobrenadante. Siempre debe existir buen contacto electroltico. 4.3.3. pH del suelo en relacin 1:2 v/v 1. Pesar 10 g de suelo en un vaso de 100 ml. 2. Adicionar 20 ml de agua destilada o solucin 1N de KCI 0.01M de CaCl2. 3. Proceder en la misma forma como en el caso anterior. Nota: la medida del pH en 0.01M de CaCl2 ofrece las siguientes ventajas: El pH es casi independiente de la dilucin. Provee una buena aproximacin del pH de la solucin suelo bajo condiciones de campo. Los resultados son ms reproductibles que el pH medido en agua. La solucin de CaCl2 0.01M enmascara la variabilidad por efecto del contenido de sales en el suelo y ste es mantenido en un estado floculado eliminando el efecto de suspensin.

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5. CONDUCTIVIDAD ELCTRICA (CE Sales Solubles)


5.1. Principio Las sales solubles en el suelo son estimadas a partir de la conductividad elctrica (CE) en un extracto acuoso. Este extracto sirve, tambin, para determinar los aniones y cationes solubles. El extracto es obtenido a partir de una pasta saturada o de la filtracin de una relacin sueloagua 1:2 1:5. El extracto de una pasta saturada da mejor representacin de las condiciones de la salinidad del suelo con relacin a las plantas. 5.2. Equipos y Materiales Bomba de tipo elctrica o de agua para producir vaco.

Celda de conductividad y conductmetro. Vasos plsticos. Embudos Buchner. Embudos de vidrio o de plstico.

5.3. Reactivos Solucin de cloruro de potasio (KCI) 0.01 M. Disolver 0.7456 g de la sal (KCI) en agua destilada y llevar a volumen de 1000 ml. Esta solucin tiene una conductividad elctrica (CE) de 1.412 mmhos/cm 1. 5.4. Procedimiento 5.4.1. Preparacin de la pasta de suelo saturada. 1. Preparar una pasta de suelo saturada tal como se ha descrito en la determinacin del pH saturado. 2. Cubrir con una luna de reloj el vaso y dejar en reposo por toda lo noche. Al da siguiente controlar si la pasta presenta las condiciones de saturacin, en caso necesario adicionar agua o suelo. En estas condiciones se puede determinar el contenido de humedad por gravimetra. Este valor es el porcentaje de saturacin. Filtrar usando embudo Buchner y bomba de vaco. Recibir el filtrado o extracto acuoso en un frasco. Nota: En este extracto se puede medir la concentracin de iones solubles (aniones y cationes); para lo cual en muchos casos ser necesario hacer diluciones con agua destilada. En las diluciones, adicione 1 gota de una solucin 0.1% de hexametafosfato de sodio (NaPO3)6 para prevenir precipitacin del CaCO3.

3.

Unidad anterior 1 mmhos/cm 1 mmhos/cm

= =

Unidad actual -1 1 mS.cm (mili Simens por centmetro) -1 1 dS.m (deci Simens por metro) 18

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5.4.2. Preparacin de una suspensin suelo-agua en una relacin 1:2 1:5 1. Pesar 20 g medir 20 ml de suelo. Transferir a un vaso de 100 ml 200 ml. Adicionar 40 ml de agua destilada cuando se trata de una relacin 1:2 100 ml de agua cuando se trata de una relacin 1:5 2. 3. Agitar intermitentemente por 30 minutos en agitador reciprocante. Filtrar usando papel filtro y embudos. Recibir el filtrado en frascos.

5.5. Lectura de la conductividad elctrica (CE) 1. Colocar 10 a 15 ml de la solucin de KCl 0.01 M en un vaso. Tomar la temperatura. 2. 3. Llenar la pipeta de la celda de conductividad con la solucin de KCl 0.01 M. Si se trata de una celda de inmersin, sumergir esta en la solucin de KCl 0.01 M Fijar la temperatura en el equipo. Realizar la lectura de la solucin de KCl y que debe ser de 1.412 mmhos/cm. En caso contrario fijar este valor en el dial de lectura del equipo. Este procedimiento permite la calibracin del equipo o de la celda. Lavar la pipeta de la celda y luego proceder a tomar la lectura de los extractos acuosos de las muestras para poder conocer el valor de la conductividad elctrica.

4.

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DETERMINACIN DE CARBONATOS: CALCITA DOLOMITA


6.1 Principio Los carbonatos son minerales que estn presentes en muchos suelos. Son de formula: CaCO3 (calcita) y CaMg(CO3)2 (dolomita). Ambos reaccionan con el cido clorhdrico (HCI). EI CO2 generado puede ser medido en un calcmetro a temperatura y presin atmosfrica. Tambin puede ser calculado en base a la cantidad de HCI gastado, de acuerdo a la siguiente reaccin:
CaCO3 + HCI H2CO3 CaCl2 + H2CO3 + HCl H2O + CO2

El exceso de HCl adicionado es titulado con NaOH, ajustndose a la siguiente reaccin:


HCl + NaOH NaCI + H2O

6.2 Equipos y Materiales Calcmetro de Collins con graduacin Erlenmeyer (matraces) de 150 ml y 250 ml Buretas para titulacin. Pipetas graduadas 6.3 Reactivos Acido clorhdrico al 1/3 Acido clorhdrico 0.5 N. Diluir 42.5 mI. de HCl Q. P. y llevar a volumen de 1000 ml. Controlar la normalidad con una base estndar Hidrxido de sodio (NaOH) 0.5 N. Disolver 20 g de NaOH Q. P. y llevar a volumen de 1000 ml con agua destilada. Controlar la normalidad con un cido estndar Indicador. Es preparado por la mezcla de : - 100 ml de fenolftaleina: 1 g de fenolftaleina en 100 ml de alcohol - 60 ml de rojo de metilo: 0.1 g de rojo de metilo en 100 ml de alcohol - 40 ml de verde de bromocresol: 0.04 g de verde de bromocresol en 80 ml de agua (5.7 ml de 0.01 N de NaOH) 6.4 Procedimiento 6.4.1 Determinacin de carbonatos mediante el calcmetro 1. En un erlenmeyer de 150 ml colocar 5 g de suelo 2. Conectar el erlenmeyer al calcmetro. Equilibrar presiones 3. Adicionar 10 ml de HCl al 1/3 4. Agitar. Si en la muestra hay calcreo la columna de agua saturada se desplaza. Cuando no hay ms cambio en altura de la columna, leer los ml desplazados. Registrar esta lectura Clculos: 1 mol de CO2 ocupa 22.4 litros 1 mMol de CO2 ocupa 0.0224 litros W = peso del suelo en gramos
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K = peso de mg de CaCO3 para desplazar 100 ml de columna V = volumen de CO2 en ml producidos por la muestra de suelo
% de CaCO3 = K V 100 W

6.4.2 Determinacin de carbonatos mediante neutralizacin cida 1. En un erlenmeyer de 250 ml poner 1 g de suelo 1 ml de suelo si se va trabajar en volumen 2. Adicionar 25 ml de HCl 0.5 N. Agitar. Adicionar agua destilada (25 - 50 ml). 3. Calentar en forma lenta hasta cerca a ebullicin. 4. Enfriar. Adicionar 0.5 ml del indicador'. 5. Titular con NaOH 0.5 N hasta el cambio de color. 6. Llevar en forma paralela un blanco. Clculos: T = normalidad de NaOH A = mI. de NaOH adicionado al blanco B = mI. de NaOH adicionado a la muestra de suelo 1 me* de CaCO3 = 50 mg de CaCO3 (A - B) T x 50 = mg. de CaCO3 presente en 1 g de suelo o 1 ml. de suelo.
% de CaCO3 = (A B) T x 5

* miliequivalente

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7.

DETERMINACIN DEL CARBONO ORGNICO: MATERIA ORGNICA


7.1 Principio El carbono orgnico, materia orgnica, puede ser determinado por el proceso de oxidacin del C a CO2 Dos procedimientos son, generalmente, utilizados: a. Oxidacin de la materia orgnica por calentamiento b. Oxidacin usando un agente fuertemente oxidante (K2Cr2O7) en una solucin cida de H2SO4 Este segundo procedimiento, presenta dos modificaciones: la primera es midiendo el exceso del agente oxidante en la reaccin y la segunda es la medida de la tramitancia de la solucin coloreada de la reaccin carbono-dicromato de potasio. 7.2 Determinacin de la materia orgnica por calentamiento Es una combustin de la materia orgnica del suelo a CO2. Este CO2 puede ser medido, de acuerdo a su volumen generado, por fijacin de ste en una solucin alcalina o por diferencia de peso. 7.2.1. Materiales Mufla hasta 500 C Crisoles o cpsulas de porcelana Balanza de precisin Desecador 7.2.2. Procedimiento 1. Pesar con exactitud el crisol o la cpsula de porcelana 2. Adicionar 5 g de suelo al crisol o cpsula 3. Calentar en la mufla hasta la temperatura de 375 C por 12 horas 4. Enfriar el crisol o cpsula en el desecador 5. Pesar con aproximacin de 0.001 g. 7.2.3. Clculos

% de M. O. (estimado) = peso de muestra antes de calentar - peso de muestra despus de calentar Peso de muestra despus de calentar

7.3 Determinacin de la materia orgnica. Mtodo de Walkley y Black 7.3.1. Principio La materia orgnica del suelo es oxidada por una mezcla de K2Cr2O7 ms H2SO4. El exceso de K2Cr2O7 es determinado por titulacin con FeSO4 con (NH4Fe)2 (SO4)3

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La primera reaccin de oxidacin reduccin es:


8H2SO4 + 3C + 2K2Cr2O7 4 ( Cr
6+

2K2SO4 + 2Cr2 (SO4)3 + 3CO2 + 8H2O


3+

+ 3e Cr )
4+

Reduccin Oxidacin

3 ( C - 4e C )

4 Cr

6+

+ 3C

4 Cr

3+

+ 3C

4+

La segunda reaccin de titulacin es:


K2Cr2O7 + 6FeSO4 + 7H2SO4 K2SO4 + Cr2 (SO4)3 + 3Fe2 (SO4)3 + 7 H2O

El punto de equivalencia es esta reaccin es dada por el indicador redox: difenil amina sulfrica. La materia orgnica es estimada asumiendo que sta contiene 58 % de carbono (factor de Van Bemmelen) 7.3.2. Materiales Erlenmeyer de 250 ml Pipetas graduadas y volumtricas Agitador magntico con barra de tefln Buretas para titulacin. 7.3.3. Reactivos Dicromato de Potasio N (0.167M), Disolver en agua 49.04 g del reactivo K2Cr2O7 y luego llevar a volumen de 1000 ml Sulfato ferroso 0.5 N (0.5 M). Disolver, exactamente, 140 g del reactivo FeSO4 . 7H2O en 800 ml de agua destilada; adicionar 40 ml de H2SO4 Q.P. Enfriar y llevar a volumen de 1000 ml. indicador, se puede usar: a. Difenil amina sulfrica. Disolver 5 g del indicador [(C6H5)2NH2] en 20 ml de agua y luego adicionar 100 ml. de H2SO4 b. Ortrofenantrolina sulfato ferroso 0.025 M. Este indicador se conoce comercialmente con el nombre de Ferroin. Disolver 1.495 g del indicador (C12H8N2.2H2O) y 0.696 g de FeSO4 . 7H2O en agua destilada y completar a volumen de 100 ml cido sulfrico Q.P. 96%; densidad = 1.84 g/cc 7.3.4. Procedimiento 1. En un Erlenmeyer de 250 ml poner 1.0 g de suelo 1 ml. de suelo si se va trabajar en volumen. Si los suelos son muy oscuros, pesar 0.5 g medir 0.5 ml de suelo 2. Adicionar 10 ml de K2Cr2O7 3. Adicionar 10 ml de H2SO4 (manejar con cuidado) 4. Mezclar para homogenizar la solucin. Durante esta reaccin hay generacin de calor
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5. 6. 7. 8.

Dejar en reaccin por 1 hora o ms Adicionar aproximadamente 30 ml de agua destilada Adicionar 5 ml de H3PO4 y 0.5 mI del indicador difenilamina sulfrica 3-4 gotas de ferroin Titular en forma lenta hasta el cambio de color. En el cambio, detener la titulacin.

Nota: Llevar un blanco (sin muestra) para conocer la normalidad del FeSO4 7.3.5. Clculos
% de C en el suelo = N x (V1 V2) x 0.39 Peso de suelo en g

Donde: N 0.39 3 x 10-3 1.3 V1 V2

= = = = = =

Normalidad del FeSO4 3 x 10-3 x 100 x 1.3 peso equivalente del carbono factor de asuncin de 77% de recuperacin volumen de FeSO4 requerido para el blanco volumen de Fe SO4 requerido por la muestra
% de M.O. = % de C x 1.724

7.4 Determinacin de la materia orgnica por colorimetra


Durante el proceso de oxidacin de la materia orgnica; el dicromato sufre variacin en su capacidad de absorber la luz

7.4.1. Materiales Erlenmeyer de 150 ml. Tubos de prueba Pipetas, buretas 7.4.2. Reactivos Dicromato de potasio 2N cido sulfrico Almidn Agua destilada Solucin de superfloc. Disolver mediante agitacin 0.5 g de superfloc* en 10 litros de agua destilada
* Superfloc = polmetro de alto peso molecular

7.4.3. Procedimiento 1. En un erlenmeyer de 150 ml. colocar 1 g 1 ml de suelo. Use 0.5 g 0.5 ml en suelos con altos contenido de materia orgnica. 2. Adicionar 10 ml de dicromato de potasio 2N 3. Adicionar I10 ml de cido sulfrico Q. P. 4. Calentar a temperatura de + - 150 C por 1 hora 5. Dejar enfriar. Adicionar 25 ml de solucin Superfloc. Dejar en reposo por 20 minutos.
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6. 7. 8.

Tomar alcuota de 2 ml del sobrenadante; verter en un tubo de ensayo y luego adicionar 10 ml de agua destilada. Leer absorbancia o tramitancia en la longitud de onda de 650 nm (1 nanmetro = 109 m) En forma paralela correr una curva de calibracin de acuerdo a lo siguiente:
Peso de Almidn 0.000 g 0.025 g 0.050 g 0.075 g 0.100 g % de T 100 % de M. O. 0.0 1.3 2.6 3.9 5.2

9.

Con los datos del % de T (tramitancia) y el % de M. O. de la curva construir una lnea de regresin. Para esta lnea hallar el valor r (coeficiente). El valor de r debe ser lo ms cerca de 1. Si se intercepta el calor del % de T de la muestra en la curva, se puede encontrar el valor del % de M.O. de la muestra.

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8. DETERMINACIN DEL NITRGENO TOTAL EN LOS SUELOS


8.1 Principio. Un nmero bastante grande de compuestos nitrogenados son encontrados en los suelos, El mtodo clsico para el anlisis de N en los suelos es el procedimiento Kjeldahl. En el correr de los aos, diferentes intentos para mejorar o reemplazar el procedimiento Kjeldahl han sido realizados. Sin embargo, el procedimiento clsico se mantiene como estndar. La muestra sufre un proceso de digestin con una mezcla catalizadora que contiene H2SO4 y K2SO4. La digestin se realiza en presencia de calor y se usa un baln de cuello alargado. La presencia del H2SO4 cumple con la finalidad de destruir el material carbonaceo, liberando el N en la forma de NH3 y a la vez captura el NH3 y forma un compuesto del tipo (NH4)2SO4. La reaccin qumica es:
H2SO4 + compuesto carbonaceo + calor NH3 (g) + H2SO4 CO2 + H2O + SO3 + NH3 (g) (NH4)2SO4 (1) (2)

El K2SO4 sirve para elevar el punto de ebullicin del H2SO4; acelerar la reaccin y prevenir las perdidas de N por volatilizacin. La mezcla catalizadora acelera la reaccin del H2SO4 con los compuestos orgnicos El cuello alargado del baln Kjeldahl sirve como un condensador para prevenir las prdidas del H2SO4. Una prdida excesiva del lquido en el baln, de tal forma que el contenido interno da la apariencia de estar seco, puede producir prdidas del N, de acuerdo a la siguiente ecuacin:
(NH4)2SO4 + calor 2 NH3 + H2SO4 (3)

Cuando el proceso de la digestin se inicial la mezcla de muestra y solucin de ataque se vuelve oscura (negra). Esto es causado por la formacin de compuestos de carbn. Pero como el proceso contina, el material oscuro desaparece a medida que el carbono es oxidado a CO2 con la consiguiente reduccin del H2SO4 a H2O y formacin de gases sulfurosos. Por lo tanto, un sistema de escape es necesario para la remocin de estos gases. Una coloracin clara de toda la mezcla es un indicador de que todos los compuestos nitrogenados han sido destruidos. Un sistema de destilacin es usado para realizar la determinacin cuantitativa del (NH4)2SO4 (o nitrgeno) en la solucin que ha sufrido la digestin. Una cantidad de NaOH es adicionada en el proceso de destilacin y que tiene la finalidad de neutralizar el H2SO4 no usado durante la digestin y a la vez dar un carcter alcalino a la solucin. El N es as liberado en la forma de NH3 de este sistema alcalino y cuya ecuacin de reacciones es:
NaOH + H2SO4 (NH4)2SO4 + calor + pH alcalino H2SO4 + NaOH Na2SO4 + H2O 2NH3 + H2SO4 Na2SO4 + H2O (4) (5) (6)

El condensador usado en el sistema de destilacin sirve para enfriar el flujo gaseoso, el cual reacciona con el NH3 para formar NH4OH, de acuerdo a la siguiente reaccin:
NH3 + H2O NH4(OH) (7)

El NH4(OH) destilado es recolectado en una solucin cida (cido brico), de tal forma que se produce la siguiente reaccin:
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NH4 + H3BO3

H2O + (NH3)H2BO3

(8)

El pH del cido dbil, brico, es menor que 5.0; pero como el NH4(OH) es destilado dentro de la solucin de cido brico, el pH de la solucin tiende a incrementarse. La presencia de un indicador disuelto en el cido brico cambiar de color a medida que la solucin se hace ms alcalina. EI cido brico ms la mezcla de la solucin destilada, es titulada con un cido, HCI o H2SO4, de normalidad conocida, hasta que el indicador muestre un cambio a su coloracin inicial. La reaccin es:
HCl + NH4H2BO3 NH4Cl + H3BO3 (9)

Los mili equivalentes (me) de cido usado en esta titulacin, son iguales a los me de N en la muestra de suelo. 8.2 Materiales Balones de destilacin tipo micro Kjeldahl de 100 ml capacidad Unidad de digestin micro Kjeldahl Unidad de destilacin micro Kjeldahl Frascos erlenmeyers y buretas para titulacin 8.3 Reactivos Sulfato de potasio mezcla catalizadora: Preparar una mezcla de 150 g de K2SO4; 10 g de CuSO4 . 5H2O y 10 g de selenio. Pulverizar los reactivos en forma separada antes de mezclar y moler la mezcla en un mortero cido sulfrico Q. P. Hidrxido de sodio (NaOH) 10N. Disolver 400 g de NaOH en 700 ml de agua destilada. Enfriar, llevar a volumen de 1000 ml. Disolver 10 g de fenolftaleina. cido brico (H3BO3) al 2 %. Disolver 20 g de H3BO3 en 900 ml de agua destilada. Adicionar 20 ml del indicador, que es una solucin que contiene: 0.059 g de verde de bromocresol y 0.066 g de rojo de metilo disueltos en 100 ml de etano al 95 %, Llevar a volumen de 1000 ml. Ajustar a un color violeta mediante la adicin de 0.1 N de NaOH o HCl de acuerdo a la necesidad. cido clorhdrico (HCl) 0.02 N Acido sulfrico (H2SO4) 0.02 N. (estandarizado) 8.4 Procedimiento para el mtodo micro Kjeldahl. 1. En un baln micro Kjeldahl de 100 mI colocar 1 g de muestra de suelo (TFSA) 2. Adicionar 1.0 g de. muestra catalizadora 3. Adicionar 3 ml de H2SO4 concentrado. 4. Calentar en la unidad de digestin hasta que el color de la solucin sea claro 5. Dejar enfriar, adicionar agua destilada para dar volumen (+/- 15 ml). 6. Llevar a la unidad de destilacin. Adicionar por el tubo de seguridad NaOH que contiene fenolftaleina hasta que la solucin cambie a color rojo (indicacin de la neutralizacin de la acidez). Iniciar el proceso de destilacin, recibiendo en 10 ml de H3BO3. El tiempo de destilacin es de 3 - 5 minutos. 7. Titular el destilado con HCI H2SO4 estandarizado. 8.5 Clculos mili equivalente de N en la muestra = ml de cido gastados x normalidad del cido
% de N en muestra = me de N x 0.014 x 100 Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas 27

9.

DETERMINACIN DEL FSFORO DISPONIBLE


9.1 Principio. A travs de los aos una gran cantidad de investigaciones se han realizado paro poder estimar el fsforo disponible en los suelos como una base para hacer las recomendaciones de fertilizacin. En suelos cidos los compuestos dominantes de fsforo son los de aluminio, fierro y manganeso; mientras que en suelos alcalinos lo son los fosfatos de calcio y magnesio. Esta qumica del fsforo ha hecho que se desarrollen diferentes extractantes en el anlisis del fsforo disponible. Una vez que el fsforo ha sido extractado, la determinacin en la solucin es un procedimiento de tipo analtico. El Dr. Bray ha desarrollado diferentes investigaciones sobre extractantes en suelos cidos. Los ms ampliamente conocidos son extractantes cidos a base de NH4F y HCI en diferentes concentraciones. De acuerdo a esto, las reacciones con estos extractantes pueden ser resumidas:
Ca(H2PO4)2 + HCI Ca(H2PO4)2 + 2NH4F AlPO4 + 3NH4F + 2 HCl Ca
2+

+ Cl + H

+ 2H2PO4
+

CaF2 + 2NH4
-

+ H2PO4
-

AlF3 + 2Cl + H2PO4 + 3 NH4

Adems de estos extractantes, se ha trabajado con extractantes doblemente cidos del tipo H2S04 y HCI que son utilizados para suelos de baja capacidad de intercambio catinico, con presencia de caolinitas y fosfatos de aluminio y fierro. Para suelos alcalinos, el Dr. Olsen trabajo con el extractante bicarbonato de sodio (NaHCO3) en el cual el in bicarbonato tiende a capturar al calcio, manteniendo el fosfato en solucin. La ecuacin es:
Ca3(PO4)2 + 3 NaHCO3 3 CaCO3 + 3 Na + HPO4
+ =

+ H2PO4

Para remover la coloracin orgnica en los extractos, se recomienda el uso de carbn activado. Para cuantificar la cantidad de fsforo en el extracto, hay diferentes mtodos disponibles, se indican slo los ms comunes. 9.2 Reactivos 9.2.1 Soluciones extractantes Bray I. (0.03N NH4F en 0.025N HCl). Disolver 1.11 g de fluoruro de amonio en 900 mI de agua destilada pura. Adicionar 2.16 mI de HCl (sp. g. 1.19, 37.5 %). Diluir a 1000 ml. Almacenar en frascos de polietileno. Bray II. (0.03 N NH4F en 0.1N HCl). Disolver 1.11 g de fluoruro de amonio en 900 mI de agua destilada pura. Adicionar 8.3 mI de HCl (sp. g. 1.19, 37.5 %). Diluir a 1000 ml. Almacenar en frascos de polietileno. Extractantes doblemente cidos (0.025N H2SO4 en 0.05N HCl). 4 ml de HCl concentrado y 0.7 ml de H2SO4 concentrado. Diluir a 1000 ml con agua destilada. Olsen (0.5M NaHCO3 pH 8.5). Disolver 42.0 g de bicarbonato de sodio en 1000 ml de agua destilada. Ajustar el pH a 8.5 con 10N de NaOH.
Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas 28

9.2.2

Soluciones para el desarrollo del color

9.2.2.1 Para extracciones con Bray y doblemente cida Stock de molibdato de amonio (SMA). Disolver 60 g de molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 . 4H2O] en 200 ml de agua destilada calentada (60 C), dejar enfriar. Disolver 1.455 g de tartrato doble de antimonio y potasio en la solucin de molibdato. Lentamente adicionar 700 ml de H2SO4 Q. P. Enfriar y diluir con agua a 1000 ml. Almacenar en frasco oscuro y en refrigeracin. Stock de cido ascrbico (SAA). Disolver 132 g de cido ascrbico en agua destilada y diluir a 1000 ml. Almacenar en frasco oscuro bajo refrigeracin. Solucin de trabajo para desarrollo de color. Se prepara la cantidad necesaria y justo antes de trabajar. Para 1000 ml: adicionar 25 mI de la solucin SMA a +/- 800 ml de agua pura, mezclar y luego adicionar 10 ml de la solucin SAA. Llevar a volumen de 1000 ml. 9.2.2.2 Para extraccin con Olsen Stock Sulfo molibdica (SSM). Disolver 1.0 g de Molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 . 4H2O] en +/- 800 ml de agua pura. Disolver 0.024 g de tartrato doble de antimonio y potasio. Mezclar ambos. Adicionar 16 ml de H2SO4 concentrado. Enfriar y llevar a volumen de 1000 ml. Almacenar en frasco oscuro y bajo refrigeracin. Solucin de trabajo para desarrollo de color. Se preparar la cantidad necesaria y justo antes de trabajar. Para 1000 ml a 1000 ml de la SSM adicionar 10 g de cido ascrbico. 9.2.2.3 Solucin estndar Solucin stock de 1000 mg de P por litro (1000 ppm P). Disolver 4.3936 g del reactivo KH2PO4 secado en una cantidad mnima de agua. Llevar a volumen de 1000 mI con el extractante respectivo. Solucin estndar de trabajo. A partir de la solucin stock de 1000 mg de P/l, preparar por dilucin la solucin estndar de trabajo de 10 mg de P/l (10 ppm P) con la solucin extractante respectiva. 9.3 Procedimiento 9.3.1 Bray I y Bray II 1. Pesar 2 g. de suelo y colocarlo en frascos de extraccin 2. Adicionar 20 ml del extractante correspondiente 3. Agitar por 5 minutos. Filtrar a travs de papel Whatman No. 2. 4. Si el filtrado no es claro, refiltrar. 5. Colocar 2 ml de alcuota del filtrado en tubo limpio 6. Adicionar 8 mI de la solucin de trabajo para desarrollo de color. Homogenizar. 7. Despus de 10 minutos de desarrollo de color leer % de tramitancia a 660 nanmetros (nm) de longitud de onda. El color es estable por dos horas.

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29

8.

En forma paralela se prepara una serie de patrones de acuerdo a lo siguiente:


Solucin de Volumen final color ml ml 8 100 8 100 8 100 8 100 8 100 8 100 Concentracin final mg de P/ l 0 0.50 1.00 2.50 5.00 7.50 Tramitancia % 100 .... .... .... .... .... ppm 0 0.5 1.0 2.5 5.0 7.5

Solucin de 10 ppm de P ml 0 5 10 25 50 75

9.3.2 Doble cido 1. Colocar 2 g de suelo en frasco de extraccin. Adicionar 100 mg de carbn activado libre de fsforo. 2. Adicionar 20 ml de la solucin extractora. 3. Agitar por 5 minutos. Filtrar. 4. En un tubo colocar alcuota de 2 ml del extracto. Adicionar 8 ml de la solucin de trabajo para desarrollo de color. Homogenizar. 5. Despus de 10 minutos leer tramitancia en el espectrofotmetro a 660 nm. de longitud de onda. 6. En forma paralela preparar serie de patrones tal como se indic para Bray. 9.3.3 Olsen 1. En frasco de agitacin colocar 2 g. de suelo. Adicionar 100 mg de carbn activado 2. Adicionar 20 ml de extractante (NaHCO3: 0.5M, pH 8.5). 3. Agitar por 30 minutos. Filtrar. 4. En un tubo colocar alcuota de 3 mI del extracto. Adicionar 10ml. de la solucin de trabajo de desarrollo de color. Homogenizar. 5. Despus de 10 minutos leer tramitancia en el espectrofotmetro a 660 nm de longitud de onda. 6. En forma paralela preparar serie de patrones de acuerdo a lo siguiente:
Solucin de 10 ppm de P ml 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 Solucin de color ml 10 10 10 10 10 Volumen final ml 13 13 13 13 13 Concentracin final ppm de P 0.0 0.38 0.76 1.15 1.53

Tramitancia % 100 .... .... .... ....

9.4 Clculos La concentracin de fsforo en la solucin se calcula en relacin a su tramitancia y al valor de concentracin en la serie de patrones; luego referirse al peso de suelo, volumen de extractante y alcuota usada
mg de P / Kg suelo = lectura en la curva x FD Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas 30

FD = vol. Extractante x vol de reaccin de color Peso suelo vol. alcuota o

ppm = Absorbancia x Factor de correccin X FD

FD =

20 x 13 = 43.33 2 3

Factor de correccin = x = Promedio de concentracin de P de los estndares y Promedio de lectura de Absorbancia de los estndares Absorbancia = Log T 2

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31

10.

CAPACIDAD DE INTERCAMBIO CATINICO: CIC


10.1 Principio Una de las propiedades ms importantes de los suelos es su capacidad de intercambio catinico (CIC). La CIC se puede definir como la capacidad del suelo para retener iones cargados positivamente (cationes). Esta retencin se debe a que en el suelo, el complejo coloidal presenta cargas negativas originadas por procesos de sustitucin isomrfica en las lminas tetradricas u octadricas; por procesos de rotura en los bordes de las arcillas o por hidrlisis de los grupos COOH y OH en los coloides orgnicos. Diferentes procedimientos son usados, actualmente, para determinar la CIC. Todos ellos estn basados en el principio del lavaje del suelo, con una solucin que contiene un catin que no est presente en el suelo. El mtodo ms ampliamente usado para suelos, es el del acetato de amonio (NH4OAc). El complejo es saturado con el catin amonio (NH4+), luego el exceso de este catin es lavado con alcohol etlico. El NH4+ adsorbido es determinado cuantitativamente por destilacin, por titulacin o por colorimetra. 10.2 Determinacin de la CIC. Saturacin con amonio (NH4OAc) 10.2.1 Reactivos Acetato de amonio (NH4OAc) N pH 7.0 58 ml de cido actico (CH3COOH) es adicionado a 850 ml de agua destilada. Adicionar 70 ml de hidrxido de amonio (NH4OH). Homogenizar. Enfriar. Ajustar a pH 7.0 Llevar a volumen de 1000 mI. Alcohol etlico 95% Magnesia calcinada ligera (MgO). Puede ser remplazado por NaOH 10 N. cido clorhdrico 0.1 N. Hidrxido de sodio 0.1 N. Indicador rojo de metilo al 0.1 % en alcohol etlico Reactivo de Nessler. Fenolftaleina al 0.1% en alcohol etlico al 70 %. Indicador mixto. Es una mezcla de volmenes iguales de rojo de metilo al 0.66 '% y verde de bromocresol al 0.99 % en etanol. cido brico al 2 % en agua destilada y que contiene 10 ml del indicador mixto por litro. 10.2.2 Procedimiento usando (destilacin) Kjeldahl 1. Pesar 5 g de suelo y colocar en un embudo que contenga papel filtro Whatman No. 2 su equivalente. 2. Lavar el suelo con agua destilada para eliminar los iones solubles 3. Lavar el suelo con 100 ml de NH4OAc. Recibir el lavado para determinar los cationes cambiables: Ca ; Mg ; K ; Na. 4. Lavar el suelo con alcohol etlico para remover el exceso de amonio. EI lavado termina cuando se obtiene reaccin negativa con el reactivo de Nessler Nota: No se puede lavar con agua destilada debido a la reaccin: NH4-suelo-NH4 + 2H2O H-suelo-H + 2 NH4OH 5. Colocar el filtro que contiene la muestra de suelo dentro del baln Kjeldahl. Adicionar magnesia calcinada ligera o 10 mI de soda 10N. Destilar. Recibir el destilado en un
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6.

erlenmeyer que contiene HCl 0.1N en exceso, ms indicador rojo de melito, o cido brico al 2 % Titular el exceso de HCI con NaOH 0.1 N o con un cido valorado cuando se us cido brico. ml de HCI usado por la base NH3 me de NH4 en 5 g de suelo
me de NH4 x 100 5 g de suelo

Clculos (ml de HCI 0.1N) - (ml de NaOH) = (ml de HCI usado por la base NH3) =
CIC me/100 g =

10.2.3 Procedimiento usando (destilacin) micro Kjeldahl 1. Seguir los procedimientos indicados del 1 al 4 en el sistema (destilacin) Kjeldahl. 2. Despus del lavado con alcohol, lavar el suelo con 100 ml de KCl N con la finalidad de desplazar el NH4 adsorbido. Colectar el filtrado y llevar a volumen de 100 mI con KCl N. 3. Tomar alcuota de 10 ml del filtrado y colocar en un baln micro Kjeldahl. Adicionar 2 gotas de fenolftaleina y 1 g de MgO. El MgO puede ser reemplazado por NaOH 10N. Destilar y recibir en cido brico al 2 % ms indicador mixto. 4. Titular la solucin de borato con HCI 0.01N. Clculos. S la determinacin fue hecha con 5 g de suelo y el volumen final fue 100 ml en KCl N. Entonces: 10 ml de la ltima solucin, corresponde con:
10 ml x 5 g = 50 = 0.5 g 100 ml 100

Los 0.5 g de suelo retiene: V x 0.01 me de NH4+ (V = mI de HCl usados en titulacin)


CIC me/100 g = V x 0.01 x 100 0.5 g de suelo

10.2.4 Procedimiento ASI (Arvel H Hunter) 1. Pesar 2.5 g de suelo y colocar en vasos de agitacin 2. Adicionar 25 ml de NH4OAc N pH 7.0 3. Agitar por 10 minutos. Filtrar usando papel filtro Whatman N 1 o su equivalente. Pasar todo el suelo remanente del vaso de agitacin usando alcohol etlico. 4. Lavar el suelo con el alcohol hasta llenar el vaso de agitacin (100 mI.) 5. Dejar que el suelo y filtro seque 6. Pasar suelo y filtro a otro vaso de agitacin 7. Adicionar 25 ml de KCl N 8. Agitar por 10 minutos. Filtrar 9. Determinar la cantidad de amonio (NH4). Puede usarse dos alternativas en la determinacin:
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a. Destilacin micro Kjeldahl b. Por colorimetra


COLORIMETRA.

Reactivos. Reactivo de NaOH-fenol. Disolver 27 g de NaOH, 3 g de EDTA-Na y 5 g de NH4OAc en agua destilada. Llevar a volumen de 1000 ml. Solucin bsica de fenol. Esta solucin se prepara justo antes de usar. Adicionar 45 ml de fenol lquido a 1000 ml del reactivo de NaOH Solucin de NaClO (solucin de clorox). Mezclar una parte de 5.25% de NaClO (leja) con 4 partes de agua. Preparar soluciones estndares de NH4+ de 0 ; 10 ; 20 microgramos de N/ml, a partir de la sal de NH4Cl Procedimiento 1. A partir del filtrado (punto 8 del procedimiento ASI) preparar una dilucin de 20 veces (20x) 2. Tomar una alcuota de 3 mI de la dilucin 20x 3. Adicionar 4 ml de la solucin bsica de fenol 4. Adicionar 10 ml de In solucin de clorox. 5. Dejar en reposo por 30 minutos 6. Leer la tramitancia o absorbancia a longitud de onda 630 nm 7. En forma paralela correr curva de calibracin de 3 ml de los estndares de 0 ; 10 ; 20 microgramos de NH4-N por ml. Nota: En el extracto amnico de cualquiera de las formas usadas para la determinacin de la CIC se puede medir la cantidad de los cationes: Ca ; Mg ; K ; Na. 10.3 Procedimiento mediante saturacin con acetato de sodio (NaOAc), 1N pH 8.2 10.3.1 Reactivos Acetato de sodio (NaOAc) N pH 8.2. Diluir 40 g de NaOH en unos 500 ml de agua destilada y mezclar con 57 mI de cido actico (CH3COOH) del 99.5%. Ajustar a pH 8.2 con NaOH con CH3COOH. Llevar a volumen de 1000 ml. Se puede preparar tambin, disolviendo 82.04 g de acetato de sodio anhidro (CH3COONa); ajustar a pH 8.2 y luego llevar a volumen de 1000 ml. Acetato de amonio N pH 7.0 Alcohol etlico 10.3.2 Procedimiento 1. Pesar 5 g de suelo en un frasco o erlenmeyer de 100 125 ml. 2. Adicionar 30 ml de NaOAc y agitar por 10 minutos. 3. Filtrar la suspensin en embudos Buchner, aplicando succin 4. Lavar el suelo con 5 porciones de NaOAc N de 20 mI c/u. 5. Descartar los filtrados de NaOAc. Lavar el suelo con 10 porciones de 5 ml de alcohol etlico. Evitar que el suelo se seque completamente. 6. Reemplace los erlenmeyers y lave con 5 porciones de 20 ml de NH3OAc N pH 7.0. Llevar a volumen de 100 ml con NH4OAc y luego determinar por fotometra el contenido de sodio, previa calibracin del equipo con patrones de Na en NH4OAc. 7. La cantidad de Na determinado y expresado en me/100 g. de suelo es la CIC.
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11.

DETERMINACIN DE CATIONES CAMBIABLES


11.1 Principio Los extractos obtenidos durante el proceso de saturacin con acetato de amonio (NH4OAc) en la determinacin de la CIC, contiene los cationes cambiables desplazados por el catin saturante (NH4). Los cationes desplazados son principalmente: Ca++ ; Mg++ ; K+ ; Na+, si se trata de suelos de reaccin alcalina; pero si los suelos son cidos se encontrar adems la presencia de H+ y Al+++ En la solucin de NIH4OAc, los cationes Ca ; Mg ; Na y K pueden ser determinados por fotometra de absorcin de emisin, e inclusive el Ca y el Mg pueden ser evaluados por titulacin. Para la determinacin de Al y del H, en suelos cidos, mtodos de titulacin son los ms comnmente usados. Cuando se trata de suelos salinos (CE > 4.0 mmhos/cm), la determinacin de los cationes cambiables es interferida debido a que estos suelos contienen cantidades de sales de Ca, Mg, K Na que se disolvieron con la solucin saturante, no permitiendo en la determinacin del catin, diferenciar entre el cambiable v el soluble. Por otro lado, es virtualmente imposible eliminar todas las sales solubles sin producir una alteracin de la relativa proporcin de los cationes cambiables. De tal forma que para poder determinar los cationes cambiables en estos suelos, es necesario cuantificar en forma separada los solubles y los cambiables, para luego hallar por diferencia la cantidad de cationes cambiables reales. Tambin se debe considerar que el CaCO3 que puede estar presente en el suelo, es posible a ser solubilizado por el NH4OAc y por consiguiente esta solucin no puede ser usada, para evaluar el Ca cambiable en suelos calcreos. Sin embargo, se debe tener en cuenta que en los suelos calcreos, el complejo de cambio esta saturado mayormente con Ca y por lo tanto la diferencia entre la CIC y Ia suma de: Mg, K y Na es suficiente para estimar la cantidad de Ca cambiable. Las reacciones involucradas en este proceso, pueden ser resumidas en la siguiente grfica:
Ca K coloide Na + NH4 Mg NH4 NH4 coloide NH4 NH4 + Ca, Mg, K, Na

11.2

Determinacin de Ca++ y Mg++ por titulacin 11.2.1 Principio Para la determinacin del Ca y Mg se utiliza la sal di sdica del cido etilendiamino tetraactico (EDTA) conocida como verseno, titriplex, etc. Qumicamente es un agente quelatante lo que significa que contiene grupos donadores de electrones que al reaccionar forman anillos en los cuales las uniones del metal son enlaces covalentes. En esta reaccin es necesaria la utilizacin de indicadores de titulacin. 11.2.2 Reactivos Solucin amortiguadora de hidrxido de amonio-cloruro de amonio. Disolver 67.5 g de NH4CI en 570 mI. de NH4OH concentrado. Llevar a volumen de 1000 ml con agua destilada.
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Hidrxido de sodio (NaOH) 6 N Estndar de calcio 0.0 1 N. Pesar 0.5 g de CaCO3 puro y disolver en 10 ml de HCI 1:3; llevar a volumen de 1000 mI. Indicador negro de eriocromo T. Pesar 0.5 g. del indicador negro de eriocromo T y 4.5 g de cloruro de hidroxilamina (NH2OHCI); disolver en 100 ml de aIcohol etlico al 95 %. Inhibidor de carbamato. Disolver 1.5 g de la sal sdica del cido di etil tiocarbamico en agua destilada y llevar al volumen de 100 mI. utilice en la titulacin directamente los cristales de la sal. Indicador murexide (purpurato de amonio). Usando un mortero, mezclar 0.5 g de murexide con 100 g. de sulfato de potasio (K2S04), tratar de pulverizar. EDTA (verseno) 0.02 N. Disolver 4 g de la sal de EDT A y 0.05 .g de Mg2Cl . 6H2O en agua destilada y llevar a volumen de 1000 mI. Establecer su normalidad con respecto al patrn de calcio, murexide y negro eriocromo T, de acuerdo al siguiente procedimiento: En una alcuota de 10 ml del patrn de calcio, adicionar 5 gotas de NaOH, mezclar, adicionar 0.05 g de murexide, mezclar, adicionar agua destilada y titular con EDTA 0.02 N. La normalidad ser:
N= 10 ml (alcuota) x 0.0 1 N de solucin de Ca = Gasto de EDTA 0.1 5 = 0.02

11.2.3

Procedimiento

11.2.3.1 Calcio ms Magnesio 1. Del extracto amnico, tomar alcuota de 20 ml. 2. Llevar a volumen de 100 ml con agua destilada 3. Adicionar 6 gotas de la solucin de carbamato y 1 ml de la solucin amortiguadora 4. Adicionar 0.05 mI. del indicador negro eriocromo T 5. Homogenizar y titular con EDTA hasta cambio de color: de rojo oscuro a azul claro Clculos
Ca + Mg me/100 g = ml de EDTA x N del EDTA x vol. del extracto Alcuota x peso del suelo

11.2.3.2 Calcio 1. Del extracto amnico, tomar alcuota de 20 ml. 2. Llevar a volumen de 100 ml con agua destilada 3. Adicionar 6 gotas de solucin de carbamato y luego 3 ml de NaOH 6 N Nota: la cantidad de NaOH esta condicionado por la cantidad de alcuota del extracto amnico y debe ser tal que permita elevar el pH de la alcuota a un valor de 12 4. Adicionar 0.05 g del indicador murexide 5. Titular con EDTA hasta el cambio de color: rosado a violeta Clculos
Ca me/100 g = ml de EDTA x N del EDTA x vol. del extracto Alcuota x peso del suelo

Mg me/100 g

(me Ca + Mg / 100 g) (me Ca / 100 g)

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36

11.3 Determinacin de Ca++ y Mg++ por fotometra de absorcin El calcio y el magnesio, se pueden determinar en el extracto amnico, mediante fotometra de absorcin. En este caso, para evitar las interferencias se debe usar solucin de lantano al 1 %. Seguir las indicaciones del manual del equipo.

11.4 Determinacin de Na+ y K+ por fotometra de emisin Las determinaciones de sodio y potasio, normalmente se llevan a cabo por fotometra de emisin (fotmetro de llama) o por absorcin (fotmetro de absorcin atmica). En ambos casos se siguen las indicaciones del manual del equipo. La medida se hace en el extracto amnico.

11.5

Determinacin de Aluminio e Hidrgeno (Al+++ y H+ : acidez intercambiable) 11.5.1 Principio La acidez del suelo proviene de diferentes fuentes que son capaces de ceder protones (H+). En los suelos del trpico hmedo con un pH menor a 5.5, el catin Al+++ es predominante. Existen tambin pequeas cantidades de H+. La determinacin consiste en la extraccin del Al+++ e H+ con una sal neutra no amortiguada y luego la titulacin de ambos en el extracto, para lo cual se usa una base estandarizada. La reaccin de titulacin puede ser simplificada:
AICl3 HCl + + 3 NaOH Na(OH) Al(OH)3 NaCl + + 3 NaCl H2O

Si se quiere cuantificar en forma separada Al+++ e H+, se agrega al extracto titulado NaF y luego se titula Al+++ con un cido estandarizado. Las reacciones son:
Al (OH)3 NaOH + + 6 NaF HCl 3 NaOH NaCl + + Na2AIF6 H2O

La diferencia entre acidez intercambiable (Al+++ + H+ ) y el aluminio (Al+++) da el hidrgeno intercambiable. 11.5.2 Reactivos Cloruro de potasio (KCl) N. Pesar 74.06 g de la sal de KCl y llevar a volumen de 1000 ml Hidrxido de sodio (NaOH) 0.01N Acido clorhdrico (HCl) 0.01 N Fluoruro de sodio (NaF) al 4% Fenolftaleina al 0.1% en alcohol 11.5.3 Procedimiento 1. Pesar 2.5 g de muestra de suelo 2. Adicionar 25 ml de la solucin de KCl N 3. Agitar por 10 minutos. Filtrar
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4. 5. 6. 7.

Tomar alcuota de 10 ml. Adicionar 15 ml de agua destilada Adicionar 3 4 gotas del indicador fenolftaleina Titular con NaOH 0.01 N hasta cambio de color. Anotar el gasto. Para hacer las determinaciones de hidrgeno y aluminio, a la solucin titulada una gota de HCI 0.01 N para decolorar. Si la muestra tiene Al+++ el color rosado retorna. Adicionar 6 ml de NaF y titular con HCl 0.01 N hasta desaparecer el color rosado. Agregar 2 gotas de fenolftaleina y si el color rosado reaparece contine la titulacin con HCl 0.01N hasta la desaparicin de color rosado por algunos minutos. Anotar el gasto de HCl 0.01N Clculos
+

11.5.4
Al
+++

+ H me / 100 g

gasto de NaOH x N del NaOH x Vol. de extraccin x 100 Alcuota x peso de suelo

Al

+++

me / 100 g

gasto de HCl 0.01 N x N del HCl x Vol. de extraccin x 100 Alcuota x peso de suelo

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38

12.

DETERMINACIN DE MICRONUTIUENTES: Fe - Cu - Zn - Mn.


12.1 Principio. El anlisis de estos elementos para diagnosticar su presencia y disponibilidad en el suelo, generalmente no es llevado a cabo dentro de un anlisis de rutina; sin embargo, en algunos casos puede, revelar la existencia de un factor limitante para el crecimiento de las plantas. Dentro del anlisis de estos elementos, existe todava cierta dificultad en la eleccin del mtodo de extraccin. Lindsay y Norvell, han desarrollado agentes quelatantes en base al cido dietilentriamino pentaactico (DTPA), CaCl2 y trietanolamina (TEA) como extractantes. Existen otros tales como: NH4OAc ms EDTA y el HNO3. Una vez extrados los elementos, estos pueden ser cuantificados mediante fotometra de absorcin (absorcin atmica). Por ser de inters, se presentan dos metodologas para la extraccin de estos nutrientes. La primera conocida como metodologa ASI (Agro Services International, INC) y la segunda, la propuesta por Lindsay y Norvell. 12.2 Metodologa ASI para: Cu Fe - Mn Zn 12.2.1 Reactivos Solucin extractante ASI (0.25N NaHCO3 - 0.01M EDTA - 0.01N NH4F). Disolver 21.0 g. de NaHCO3 ; 3.72 g EDTA-Na ; y 0.37 g NH4F en agua destilada y llevar a volumen de 1000 mI. Solucin de superfloc 127. Disolver 0.05 g de superfloc 127 en 1000 mI. de agua destilada. Estndares de Fe - Cu - Zn - Mn. Preparar los siguientes estndares para obtener la curva en el equipo: Solucin estndar 1. Slo extractante ASI Solucin estndar 2. 1 mg Cu/l ; 5 mg Fe/l ; 2 mg Mn/l ; 1 mg Zn/l en extractante ASI Solucin estndar 3. 2 mg Cu/l ; 10 mg Fe/l ; 4 mg Mn/l ; 2 mg Zn/l en extractante ASI 12.2.2 Procedimiento 1. Pesar 2.5 g de muestra de suelo. 2. Adicionar 20 ml de extractantes ASI 3. Agitar la solucin por 10 minutos. 4. Adicionar 5 ml de superfloc 127; agitar para mezclar. Dejar en reposo 1 minuto o ms. 5. Filtrar a travs de parel filtro Whatman No. 1 equivalente. 12.2.3 Determinacin Leer la concentracin de cada uno de los elementos por absorcin atmica directamente o en una dilucin de acuerdo a las caractersticas del equipo. 12.3 Metodologa de Lindsay y Norvell DTPA 12.3.1 Reactivos Solucin extractora de DTPA: en una fiola de 1000 ml poner 600 ml de agua destilada. Agregar 14.9 g de TEA (trietanolamina) y disolver. Agregar 1.967 g de DTPA (cido dietilentriamino pentaactico) y disuelva. Agregue 1.470 g de CaCl2.2H2O y disuelva.
39

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Llevar a volumen de 900 ml. Ajustar el pH a 7.3 con HCl 6N (se requiere +/- 13 ml). Llevar a volumen de 1000 ml. 12.3.2 Procedimiento 1. En un frasco de extraccin poner 10 g. de suelo y 20 ml de la solucin extractora DTPA 2. Agitar por 2 horas. Filtrar la solucin usando papel filtro Whatman No.42 12.3.3 1. 2. Determinacin

Usando equipo de absorcin atmica determinar la concentracin de los elementos, previa calibracin de acuerdo al manual del equipo. Se deben preparar soluciones stock para la calibracin. Una solucin stock de 1000 mg/I es preparada de la siguiente forma: Fierro (Fe) Manganeso (Mn) Zinc (Zn) Cobre (Cu) 0.4979 g FeSO4 . 7H2O por 100 ml de N HNO3 0.2876 g KMnO4 por 100 ml de N HNO3 0.4399 g ZnSO4 . 7H2O por 100 ml de N HNO3 0.3930 g CuSO4 . 5H2O por 100 ml de N HNO3

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40

13.

DETERMINACIN DEL AZUFRE DISPONIBLE EN SUELOS


13.1 Principio. La determinacin del azufre disponible en suelos, se complica por la multiplicidad del origen de las formas disponibles del elemento y por sus magnitudes en relacin con los requerimientos por las plantas. Existen varios procedimientos para la determinacin del azufre. Algunos basados en la precipitacin en un medio cido, como sulfato de bario y otros basados en turbidimetra en la cual la absorcin de la suspensin es medida en un espectrofotmetro. El mtodo que se describe, es el propuesto por Mehlich y Fowling mediante el uso del cloruro de amonio (NH4Cl) como extractante y precipitacin con solucin de acetato de bario (BaOAc) y cido actico (CH3COOH). Tambin se describe otra alternativa, basada en la extraccin en una solucin de acetato de amonio (NH4OAC) ms cido actico (CH3COOH). 13.2 Extraccin con BaOAc CH3COOH 13.2.1 Reactivos Solucin extractora. NH4CI 0.5N. Disolver 26.73 g de NH4CI en +/- 900 mI de agua destilada, bufferar la solucin a pH 7.0 con NH4OH Reactivo de precipitacin. BaOAc + CH3COOH. Disolver 255 g de BaOAc en una solucin de 100 mI de CH3COOH y 500 ml de agua destilada (calentar si es necesario), diluir a 1000 ml. Stock estndar de 100 mg de S por litro (100 ppm S). Disolver 0.443 g de Na2SO4 anhidro en agua y diluir a volumen de 1000 ml. Reactivo de siembra. Aadir 70 ml de la solucin stock estndar a un frasco volumtrico de 500 ml que contenga 250 ml de la solucin extractora ms 2 ml de HCl. Diluir a volumen de 500 ml con la solucin extractora. Estndares para la curva patrn de acuerdo a lo siguiente:
Stock Estndar ml 0 5 10 15 20 Sol. Extractora ml 100 95 90 85 80 Vol. Final ml 100 100 100 100 100 Concentracin mg S / l (ppm S) 0 5 10 15 20

13.2.2

Procedimiento

13.2.2.1 Extraccin del azufre del suelo 1. Pesar 5 g. de suelo y colocar en frascos de extraccin 2. Aadir 20 ml de la solucin extractora 3. Agitar por 15 minutos el agitador de tipo horizontal a velocidad rpida 4. Filtrar usando papel filtro Whatman No 5. Si el filtrado es turbio, refiltrar. 13.2.2.2 Desarrollo de la turbidimetra 1. Tomar alcuota de 5 ml del extracto y 5 mI de cada uno de los estndares de la curva patrn 2. Colocar en tubos de ensayo.
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3. 4. 5. 6.

Aadir 1 ml del reactivo de siembra Aadir 1 ml del reactivo de precipitacin Mezclar y dejar en reposo por 10 minutos Leer tramitancia a longitud de onda de 420 nm. Clculos

13.2.2.3

Empleando la curva patrn determinar concentraciones de azufre (S) en las muestras 13.3 Extraccin con NH4OAc CH3COOH 13.3.1 Reactivos Solucin extractora. Disolver 39 g. de acetato de amonio en 1000 ml de CH3COOH 0.25N. Carbn activado. Lavar el carbn con la solucin extractora hasta eliminacin de sulfatos. Solucin de semilla cida. Preparar HCI 6N que contenga 20 mg de S / I (20 ppm de S) como K2SO4. Cloruro de bario. BaCl2 . 2H2O, en cristales de 20 a 60 mallas Stock estndar de 100 mg de S / l, (100 ppm de S). Disolver 0.5434 g de K2S04 y llevar a volumen de 1000 ml con solucin extractora. Estndares para la curva patrn de acuerdo a lo siguiente:
Stock 100 mg/l ml 0 1.25 2.50 5.00 7.50 10.0 Sol. Extractora ml 25.00 23.75 22.50 20.00 17.50 15.00 Vol. Final ml 25 25 25 25 25 25 Concentracin mg S / l (ppm S) 0 5 10 20 30 40

13.3.2

Procedimiento

13.3.2.1 Extraccin del azufre del suelo 1. Agitar 10 g. de suelo con 7.5 ml de la solucin extractora por 30 minutos. 2. Adicionar 0.25 g de carbn activado y luego agitar por 3 minutos. 3. Filtrar la suspensin usando papel filtro Whatman No. 42 13.3.2.2 1. 2. 3. 4. 5. 6. Desarrollo de la turbidimetra

Tomar alcuota de 10 ml de los extractantes y 10 ml de cada uno de los estndares de la curva patrn. Colocar en tubos de ensayo. Adicionar 1 ml de la solucin de semilla cida. Agitar. Adicionar 0.5 g de BaCI2 . 2H2O en cristales. Dejar en reposo 1 minuto; luego agitar hasta que los cristales se disuelvan Despus de 8 - 10 minutos de disueltos los cristales, leer tramitancia a 420 nm de longitud de onda.

13.3.2.3 Clculos Con los datos de la tramitancia y concentracin de estndares construya la grfica. Halle la concentracin de S en la curva
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14.

DETERMINACIN DEL BORO DISPONIBLE EN LOS SUELOS.


14.1 Principio. En este caso se trata de estimar el boro disponible para las plantas, sin tener en cuenta el boro total debido a la extrema insolubilidad de los compuestos nativos de este elemento. El mtodo ms frecuentemente utilizado es el de Berger y Truog: soluble en agua caliente utilizando un condensador de reflujo. Sin embargo, actualmente se han desarrollado nuevas formas de extraccin, Ej.: extraccin con fosfato de calcio. Para la cuantificacin del boro extrado, diferentes mtodos se utilizan. El carmn sulfrico y el de la curcumina son los ms empleados. 14.2 Extraccin con fosfato de calcio y determinacin del boro con curcumina 14.2.1 Reactivos Solucin extractante. Fosfato de calcio. Disolver 2.03 g de CaH4(PO4)2 . 2H2O en +/- 1000 ml de agua que tiene 1.0 mI de HCl concentrado. Llevar a volumen final de 1000 ml. Solucin de superfloc 127. Disolver por agitacin 0.05 g de superfloc 127 en +/- 800 ml de agua destilada. Llevar a volumen de 1000 ml. Solucin de curcumina: 15 ml de glicerol, 2 ml de DTPA (cido dietilentetraamina penta actico 41% en agua) que en caso de no disponerse se puede prescindir, y 1 g de curcumina para 1000 ml de cido actico. Agitar para disolver la curcumina. cido sulfrico concentrado. Metano o etanol. Una mezcla de 3 partes de metanol, 2 partes de agua y 20 ml de glicerol por litro, ha sido probada con buenos resultados Preparar serie de estndares de boro: 0 ; 1 ; 2 ; 3 mg de B/l a partir de cido brico disuelto en solucin de fosfato de calcio. 14.2.2 Procedimiento

14.2.2.1 Extraccin del boro Nota: usar material de plstico o de vidrio libre de boro. 1. Pesar 5 g de suelo y adicionar 20 ml de la solucin extractante de fosfato de calcio. 2. Agitar la solucin por 10 minutos. 3. Adicionar 5 ml de solucin de superfloc 127, agitar lentamente por rotacin para mezclar. 4. Dejar en reposo por 2 a 3 minutos y luego filtrar a travs de papel filtro Whatman N 1 equivalente. 14.2.2.2 Determinacin del boro extrado Nota: usar material de plstico o de vidrio libre de boro. 1. Tomar alcuota de 0.5 ml del filtrado. Adicionar 3.5 ml de la solucin de curcumina, mezclar. 2. Adicionar 1 ml de H2SO4 concentrado, mezclar. Dejar en reposo por 15 minutos o ms. 3. Adicionar 15 ml de metanol o etanol y luego mezclar. Dejar en reposo por 20 minutos, pero no ms de 90 minutos. 4. Leer % de tramitancia a 555 nm de longitud de onda. 5. En forma paralela hacer curva patrn tomando alcuotas de 0.5 ml de la serie de estndares
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14.3

Extraccin con agua caliente y determinacin del boro con curcumina 14.3.1 Reactivos Solucin extractante. Disolver 10 g de CaCl2 . 2H2O en agua destilada y llevar a volumen de 1000 ml Solucin de curcumina cido oxlico: Disolver 0.04 g de curcumina y 0.5 g de cido oxlico en 100 ml de alcohol etlico. Mantener en refrigeracin y en lugar oscuro. Usar el reactivo dentro de los dos das de preparado. Solucin estndar de 5 mg de B/l (5 ppm B). 14.3.2 Procedimiento

14.3.2.1 Extraccin del boro 1. Pesar 10 g. de suelo y colocar dentro de un erlenmeyer con bajo contenido de boro y tubo de reflujo. 2. Adicionar 20 ml de solucin extractante. 3. Hervir por 5 minutos. Dejar enfriar ligeramente y luego retirar de la plancha. 4. Inmediatamente transferir la suspensin a un tubo plstico de centrfuga. Centrifugar por 15 minutos a 3000 rpm. 14.3.2.2 Determinacin del boro extrado. 1. Del sobrenadante, tomar alcuota de 2 ml y colocar dentro de un vaso plstico. 2. Adicionar 4 ml de la solucin de curcumina cido oxlico. Mezclar por rotacin. 3. Evaporar a sequedad usando un bao mara (temperatura no mayor a 55 C) 4. Enfriar, adicionar 25 ml de alcohol absoluto para disolver. Filtrar en tubo limpio. 5. Medir la tramitancia a 545 nm de longitud de onda. 6. Preparar curva patrn tomando alcuotas del estndar de 5 mg de B/l (5ppm B), realizando el siguiente procedimiento: medir para cada uno de los 5 vasos 20 ml de agua destilada, luego adicionar a partir del estndar de 5 mg de B/l tal como se detalla y luego proceder como muestra.
N de Vaso 1 2 3 4 5 Estndar de B ml 0.0 0.5 1.0 2.0 3.0 Concentracin de B mg B / l 0.00 0.12 0.24 0.45 0.65

14.4

Extraccin con agua caliente y determinacin del boro con carmn 14.4.1 Reactivos Nota: Usar material de plstico resistente al calor, o de vidrio libre de boro. Solucin de carmn sulfrico. Pesar 0,460 g. de rojo carmn, disolver en 500 ml de cido sulfrico concentrado mediante agitacin. Llevar a volumen de 1000 ml con cido sulfrico concentrado. Solucin estndar de 5 mg de B/l
Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas 44

14.4.2

Procedimiento

14.4.2.1 Extraccin del boro Seguir el mismo procedimiento indicado anteriormente en 14.3.2.1 14.4.2.2 Determinacin del boro extrado 1. Tomar alcuota de 1 ml del extracto. 2. Adicionar 10 ml de solucin de carmn sulfrico. Agitar para homogenizar. 3. Dejar en reposo por 45 minutos. 4. Leer tramitancia a 595 nm de longitud de onda. 5. En forma paralela a la determinacin del boro en las muestras, hacer curva patrn a partir del estndar de 5 mg de B/l, de acuerdo a lo siguiente:
Alcuota del Estndar ml 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 * Datos como ejemplo Volumen de agua ml 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 Carmn ml 10 10 10 10 10 10 Concentracin mg B / l 0.00 0.09 0.18 0.27 0.36 0.45 Absorbancia 0.00 * 0.14 * 0.22 * 0.34 * 0.46 * 0.57 *

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45

II.
15.

SUELOS SALINOS Y SODICOS

ANLISIS DE SUELOS SALINOS Y SODICOS

La formacin y acumulacin de sales en los suelos se debe a numerosos procesos geoqumicos que ocurren en la parle superior de la corteza terrestre. Cuando un suelo contiene un exceso de sales solubles, se le denomina salino. Los problemas de salinidad del suelo, surgen frecuentemente por la presencia de Na+ ; Cl- ; SO4= y en menor escala por: Ca++ ; Mg++ ; y HCO3-. Por otro lado, se debe considerar que la fuerte alcalinidad de los suelos esta asociado con la condicin de sodicidad que, generalmente se manifiesta por el pH del suelo suficientemente alto que puede llegar hasta valores de 10.0 (presencia de carbonato de sodio). Dentro de las principales sales solubles en suelos de las zonas ridas, se tienen diferentes grupos. El grupo carbonato, representado por el carbonato de calcio y carbonato de magnesio; el grupo sulfatos constituidos por el sulfato de calcio (yeso), el sulfato de magnesio y el sulfato de sodio. El grupo cloruro, que conjuntamente con el sulfato son los principales compuestos responsables de la formacin de suelos salinos, incluye al cloruro de calcio, de magnesio, de sodio y potasio; luego el grupo nitrato y borato. Cada una de estas sales tiene diferente solubilidad en agua y tambin diferente grado de toxicidad. EI anlisis de los suelos brinda la informacin necesaria para la evaluacin de la cantidad de estas sales y su posible efecto en el desarrollo de los cultivos. Para caracterizar qumicamente un suelo salino, sdico o salino-sdico, se requieren los siguientes datos: pH, porcentaje de saturacin de agua, conductividad elctrica del extracto de saturacin, cantidad de cationes solubles: Ca++ ; Mg++ ; Na+ y K+ ; cantidad de aniones solubles: CI- ; SO4= ; HCO3- ; CO3= ; NO3- y boro soluble; CIC y cationes cambiables. Adems yeso soluble. 15.1 Determinacin del porcentaje de saturacin, extracto de saturacin y conductividad elctrica

Procedimiento Seguir la metodologa descrita en la determinacin de sales solubles conductividad elctrica (I 5.4.1) 15.2 Determinacin de cationes solubles

Procedimiento Determinar el Ca++ y Mg++ solubles a partir del extracto de saturacin utilizando EDTA 0.02N siguiendo las indicaciones dadas para Ca++ y Mg++ cambiables. Alternativamente, puede determinarse por fotometra de absorcin atmica (AA) utilizando solucin de lantano al 1% Determinar Na+ y K+ por fotometra de llama o por fotometra de absorcin atmica (AA). Una vez determinado el Na+ en el extracto de saturacin y conociendo la CIC del suelo y el Na+ cambiable (extrado con NH4OAc) hallar el porcentaje de saturacin de sodio. Se debe tener presente que en suelos salinos, el NH4OAc extrae las bases solubles. En consecuencia, para obtener el verdadero calor del Na+ cambiable es necesario deducir el Na+
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extrado con agua: Na+ cambiable en me/100 g = Na+ extrado con NH4OAc Na+ soluble en agua El Na+ soluble en agua se expresa en me/l y se convierte en me 100 g. de suelo, teniendo en cuenta el porcentaje de saturacin en agua (PS):
Na soluble en agua me / 100 g
+

Na soluble en me / l x PS 1000

% saturacin de Na =

Na cambiable en me / 100 g x 100 CIC en me / 100 g

15.3

Determinacin de aniones solubles 15.3.1 Carbonato de CO3= y bicarbonatos HCO3-

15.3.1.1 Principio Los carbonatos (CO3=) y los bicarbonatos (HCO3-) en una solucin pueden ser determinados por titulacin de la solucin usando un cido de normalidad conocida y los indicadores fenolftaleina y rojo de metilo-verde de bromocresol respectivamente. Cuando el color de la fenolftaleina desaparece, indica la mitad de la neutralizacin del carbonato. En este momento el segundo indicador es adicionado y la titulacin s continua. Cuando el color cambia de claro a rosado plido, el punto final de la completa neutralizacin del bicarbonato es alcanzado. Las siguientes reacciones ilustran estos cambios:
2 Na2CO3 2 NaHCO3 + + H2SO4 H2SO4 2 NaHCO3 Na2SO4 + + 2 H2O Na2SO4 + 2 CO2

15.3.1.2 Reactivos Indicador mixto. Disuelva 0.02 g de rojo de metilo y 0.10 g de verde de bromocresol en 100 ml de alcohol etlico de 95 Fenolftaleina al 1% en etanol al 50 % cido sulfrico 0.01N (S se presenta en la titulacin turbidez, cambie el sulfrico por clorhdrico) 15.3.1.3 Procedimiento 1. En una cpsula de porcelana o en un vaso, colocar una alcuota del extracto de saturacin 2. Agregue una gota de fenolftaleina y si la solucin se enrojece, agregue gota a gota H2SO4 0.01N a intervalos de 5 segundos, hasta que desaparezca el color. Anote este gasto como Y. 3. Agregue luego 3 gotas del indicador mixto y contine la titulacin con H2SO4 0.01N hasta la obtencin de un color rosado-plido. Designe este gasto corno Z. 4. Lleve un blanco de reactivos con agua destilada hervida (libre de CO2) 15.3.1.4 Clculos
CO3 me / l
=

2* Y x Norm. del H2SO4 x 1000 ml de alcuota

* Desde que el carbonato es convertido solo a bicarbonato, esto es solo la mitad de la neutralizacin, la total neutralizacin necesitar 2Y ml de cido. Manual para el Anlisis Qumico de Suelos, Plantas y Aguas 47

HCO3

me / l

(Z 2Y) x Norm. del H2SO4 x 1000 ml de dilucin

15.3.2

Determinacin de cloruros

15.3.2.1 Principio El in cloro se combina con el in plata, formando cloruro de plata. El indicador cromato de potasio, indica el punto final de la titulacin del cloruro. Posteriores modificaciones han desarrollado nuevos mtodos. Por ser de inters se describe primero el basado en la reaccin con el AgNO3 y segundo lugar el basado en la titulacin con nitrato de mercurio. 15.3.2.2 Mtodo del nitrato de plata AgNO3

Reactivos Indicador cromato de potasio al 5 %. Disolver 5 g. de la sal K2CrO4 polvo en 100 ml de agua. Estndar de nitrato de plata. Disolver 2.395 g. de AgNO3 en agua y diluir a 1000 ml. Estandarizar contra una solucin de NaCl 0.014N. Almacenar en botella de color mbar. Estndar de cloruro de sodio 0.014N. Disolver 0.824 g. de NaCl secado a 140 C, en agua destilada libre de cloro y diluir a 1000 mI. Reactivos especiales para la remocin de interferencias: Suspensin de hidrxido de aluminio. Disolver 12.5 g. de sulfato de aluminio y potasio (AlK(SO4)2.12H2O) sulfato de aluminio y amonio (AlNH4(SO4)2.12H2O) en agua destilada. Calentar a 60 C y adicionar 5.5 ml de NH4OH con agitacin. Dejar en reposo una hora. Lavar el precipitado por decantacin con agua destilada hasta estar libres de cloruros. La suspensin ocupa un volumen de aproximadamente 100 mI. Hidrxido de sodio N. Disolver 40.01 g. de NaOH en 1000 ml de agua destilada. cido sulfrico N. Diluir 28 ml de H2SO4 concentrado en agua destilada y llevar a volumen de 1000 mI. Procedimiento 1. Tomar una alcuota del extracto de saturacin. Llevar a un volumen de 100 ml con agua destilada. Si la muestra es coloreada, adicione 3 ml de la suspensin de hidrxido de aluminio [ Al(OH)3 ]; mezclar y dejar sedimentar; filtrar y lavar. 2. Controlar el pH de la muestra. Este debe estar entre 7 a 10. Para ajustar a este rango use soluciones de H2SO4 NaOH 3. Adicionar 1 ml del indicador K2CrO4 4. Titular con el AgNO3 estandarizado hasta cambio de color 5. Lleve un blanco usando agua destilada. Clculos
Cl en me / l
-

(A B) x Normalidad del AgNO3 x 1000 ml de alcuota

A B

= =

ml de AgNO3 usados en la muestra ml de AgNO3 usados en el blanco


48

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15.3.2.3

Mtodo del nitrato de mercurio (Mtodo de Clarck y posteriores modificaciones

Reactivos Solucin concentrada cida nitrato de mercurio. Disolver 3.25 g. de Hg(NO3)2 en 0.05N de HNO3, llevar a volumen de 1000 mI. Solucin diluida cida - nitrato de mercurio. Tomar 50 ml de la solucin concentrada cida - nitrato de mercurio y llevar a volumen de 1000 ml con 0.05N de HNO3. 1 ml de esta solucin se combinar con 35.45 micro gramos de cloro. Solucin diphenylcarbazone al 0.5 %. Disolver 5 g de diphenylcarbazone en 1000 ml de etanol. Mantener la solucin en refrigeracin. Estndar de 1000 mg de Cl-/l. Disolver 1.649 g de NaCl en 1000 mI. de agua destilada. Procedimiento 1. Tomar una alcuota de la muestra (normalmente 5 mI). Adicionar 10 ml de 0.05N de HNO3 ms 0.5 ml de la solucin de diphenylcarbazone. 2. Titular la muestra con la solucin diluida cida - nitrato de mercurio. 3. Controlar la normalidad de la solucin diluida cida - nitrato de mercurio contra el estndar de cloruro. Clculos
Cl en me / l
-

gasto de Hg(NO3)2 x Normalidad del Hg(NO3)2 x 1000 ml de alcuota

15.4

Determinacin de Cloro extractable en suelos

Se refiere al cloro que puede ser estriado por alguna solucin diferente al agua. En este caso se utiliza 0.05N de cido ntrico. El procedimiento para determinar el cloro extrado es el mismo que el descrito anteriormente (solucin diluida cida - nitrato de mercurio). 15.4.1 Reactivos Solucin concentrada cida - nitrato de mercurio Solucin diluida cida- nitrato de mercurio Diphenylcarbazone al 0.5 %. Solucin 0.05N HNO3. Adicionar 3 ml de HNO3 en agua destilada. Llevar a volumen de 1000 ml Solucin estndar de 1000 mg de Cl- / litro 15.4.2 Procedimiento 1. Pesar 2.5 g de suelo y adicionar 25 mI de 0.05N HNO3. Agitar. Filtrar. 2. Tomar alcuota de 5 ml del filtrado y adicionar 10 mI de 0.05N de HNO3* que contiene 0.5 ml de la solucin de diphenylcarbazone. 3. Titular la muestra con solucin diluida cida - nitrato de mercurio, llegando al punto final de la titulacin cuando se presenta un color violeta claro. . 4. Controlar la normalidad de la solucin diluida cida - nitrato de mercurio contra el estndar de Cl* Esta solucin se prepara antes de ser usada y dura un da. Adicionar 50 ml de la solucin de diphenylcarbazone a 1000 ml de 0.05N HNO3
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16.

DETERMINACIN DEL YESO SOLUBLE


16.1 Principio El yeso es disuelto por agitacin de la muestra en un volumen de agua. El yeso solubilizado es precipitado en el extracto por adicin de acetona. Este precipitado es redisuelto en agua y la cantidad de yeso puede ser medido por evaluacin de la cantidad de calcio o por medida de la conductividad elctrica de la solucin redisuelta en agua. Este ltimo procedimiento es el ms comn. 16.2 Reactivos Acetona grado reactivo 16.3 Procedimiento 1. Pesar 10 a 20 g de suelo. Pasar la muestra a un frasco de agitacin. 2. Adicionar un volumen de agua suficiente para disolver el yeso (50 a 100 ml). 3. Agitar el frasco en agitador reciprocante por 15 minutos. 4. Filtrar la suspensin o dejar en reposo para su sedimentacin. 5. Transferir una alcuota de 20 ml del filtrado o del sobrenadante hacia un tubo cnico de centrifugacin. 6. Adicionar 20 ml de acetona y mezclar. Dejar en reposo hasta que el precipitado flocule 7. Centrifugue. Invierta el tubo y decante el lquido sobrenadante. 8. Lave con 10 ml de acetona y centrifugue de nuevo. Invierta el tubo y decante el lquido sobrenadante. 9. Disuelva el precipitado con 40 ml de agua destilada. 10. Mida In conductividad elctrica de la solucin. 16.4 Clculos Determine la concentracin del yeso en la solucin, con referencia a una grfica que muestre la relacin entre la concentracin y la conductividad elctrica de las soluciones de yeso. Esta grfica puede construirse por medio de los siguientes datos:
Concentracin de CaSO4 me/l 1 2 5 10 20 30.5 Conductividad elctrica en mmhos / cm 0.121 0.226 0.500 0.900 1.587 2.205

CaSO4 me I alcuota = me CaSO4 obtenidos en curva x ml de agua para disolver precipitado 1000

CaSO4 me / 1000 g

CaSO4 me / alcuota x agua usada en extraccin x 100 Alcuota x g. de suelo

Nota: el suelo no debe secarse a la estufa. El calor promueve la conversin de yeso (CaSO4 . 2H2O) en anhidrita (CaSO4 . 0.5H2O), Este ltimo tiene una solubilidad ms alta en agua. Los sulfatos de sodio y potasio cuando estn en altas concentraciones precipitan con acetona.

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III.

ANLISIS DE AGUAS CON FINES DE RIEGO

El anlisis de aguas con fines de riego concierne a la presencia de sales en cantidad suficiente para producir interferencias en la germinacin, crecimiento y en el consumo de agua por los cultivos.

17.

DETERMINACIN DEL pH
17.1 Principio El pH de la mayora de las aguas est entre el rango de 4 - 9. La mayora de las aguas son ligeramente bsicas debido a la presencia de carbonatos y bicarbonatos. El pH puede ser medido colorimetrica o elctricamente. Los mtodos colorimtricos, muchas veces sufren interferencias en su color por efecto de la turbidez, alta salinidad, la presencia de material coloidal o la presencia de ciertas sustancias oxidantes o reductoras. Por las razones expuestas, se recomienda el uso del potencimetro para su determinacin. 17.2 Reactivos Soluciones buffers de pH : 4 ; 7 ; 9 (ver I- 4.2 ) 17.3 Procedimiento 1. Calibrar el potencimetro usando las soluciones buffers: pH 7.0 y la otra debe ser de pH ms aproximado al valor de la muestra. 2. En un volumen de 50 - 75 mI., determinar el pH de la muestra no filtrada.

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18.

DETERMINACIN DE LA ALCALINIDAD
18.1 Principio La alcalinidad en las aguas es causada por la presencia de bicarbonatos, carbonatos e hidrxidos de origen natural o por el efecto del tratamiento del agua. La alcalinidad es determinada por titulacin usando un cido fuerte de una determinada concentracin y un indicador adecuado. Los indicadores fenolftaleina que cambia de color a pH 8.3 y el methyl orange que cambia a pH 4.5 son los ms recomendados. 18.2 Reactivos Indicador fenolftaleina. Disolver 0.5 g. de fenolftaleina en 50 ml de alcohol y 50 mI. de agua. Luego adicionar gotas de NaOH 0.02 N hasta que aparezca un dbil color rosado. Indicador methyl orange. Disolver 0.5 g. de methyl orange en un I litro de agua destilada Acido sulfrico 0.02 N, estandarizado contra una base. 18.3 Procedimiento 18.3.1 Alcalinidad en fenolftalena 1. Tomar una alcuota (50 mI.) de muestra y colocar en un erlenmeyer. 2. Adicionar 3 gotas de fenolftaleina. 3. Titular con el H2SO4 0.02 N hasta una coloracin rosada: color del punto de equivalencia, pH 8.3. Registrar el gasto.

18.3.2 Alcalinidad total por el mtodo del methyl orange 1. Adicionar 3 gotas del indicador methyl orange a la solucin en la cual la alcalinidad en fenolftaleina ha sido determinado. 2. Continuar la titulacin con H2SO4 0.02N, hasta el punto de equivalencia. El indicador cambia a un color anaranjado (orange) a pH 4.6 y a rosado a pH 4.0 18.3.3 Clculos
Alcalinidad en fenolftaleina mg CaCO3 = A x B x 50,000 ml de muestra

Alcalinidad total mg CaCO3

B x N x 50,000 ml de muestra

Donde: A B N 50,000

= = = =

mI gastados en la titulacin con fenolftaleina. total de ml gastados en la titulacin en methyl Orange. normalidad del cido factor de conversin del equivalente de CaCO3 de ml a litros

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19.

CONDUCTIVIDAD ELCTRICA
19.1 Principio La conductividad elctrica (CE) de una muestra de agua es un indicador de la concentracin total de solutos en la muestra. Desde que la mayora de las aguas tienen una CE menor a un miliMho por centmetro y que se representa: mmho/cm; para trabajos de salinidad, es la ms conveniente. En el nuevo Sistema Internacional (SI) la unidad para expresar la CE es el Siemen por metro (S/m). Un S/m es igual a 10 mmho/cm. 19.2 Reactivos Equipo para medir la conductividad Celda de conductividad con valor K conocido. Solucin de KCI 0.01 N; CE = 1.412 mmho/cm. A 25 C 19.3 Procedimiento 1. Lavar la celda de conductividad con agua destilada 2. Llenar celda de conductividad con la muestra 3. Leer el valor de la CE Nota: Concentracin de sales en mg/l = 640 x CE en mmhos/cm. 6400 x CE en S/m.

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20.

DETERMINACIN DE CATIONES Y ANIONES


20.1 Principio

Los cationes: Ca; Mg; Na; K; Fe; Mn; Cu y Zn pueden ser determinados por aspiracin directa de la muestra de agua dentro de la llama del equipo de absorcin atmica o del fotmetro de llama. Los cationes de Ca y Mg pueden ser determinados, tambin, por titulacin con EDTA tal como se indic para la determinacin de cationes cambiables Ca++ y Mg++ en extractos amnicos. (Ver: I- 11.2). Para el caso de aniones, las tcnicas analticas de titulacin son bastante buenas y precisas La muestra de agua debe ser siempre clara. En casos de turbidez se procede, previa a la determinacin, a la filtracin o eliminacin de esta turbidez. 20.2 Determinacin de cationes 20.2.1 Equipo Absorcin atmica 20.2.2 Reactivos Estndares para calibracin Solucin de Lantano al 1% para Ca y Mg. Disolver 59 g de La2O3 en 50 ml de agua y lentamente adicionar 250 ml de HCl. Llevar a volumen final de 5 litros con agua destilada. 20.2.3 Procedimiento 1. Calibrar el equipo de acuerdo a su manual 2. Leer la concentracin de cada uno de los cationes 20.3 Determinacin de aniones 20.3.1 Determinacin de carbonatos y bicarbonatos

20.3.1.1 Principio Los cationes y bicarbonatos en una solucin, pueden ser determinados por titulacin de la muestra usando un cido de normalidad conocida y los indicadores fenolftaleina y rojo de metilo, respectivamente. Cuando el color de la fenolftaleina es desaparecida, indica la mitad de la neutralizacin del carbonato. En este momento el indicador rojo de metilo es adicionado y se contina con la titulacin. Cuando el color cambia de amarillo a rosado rojo, el punto final para la completa neutralizacin del bicarbonato se ha alcanzado. La ecuacin que representan son:
2 Na2CO3 2 NaHCO3 + + H2SO4 H2SO4 2 NaHCO3 Na2SO4 + + 2 H2O + Na2SO4 2 CO2

20.3.1.2 Reactivos 1. H2SO4 0.1N; 2.8 ml de H2SO4 concentrado es adicionado a 800 mI. de agua destilada y luego llevado a volumen de 1000 ml. 2. Rojo de metilo al 0.1%. Disolver 0.1 g de rojo de metilo en 100 mI. de alcohol etlico. 3. Fenolftaleina al 1%. 1 g. de fenolftaleina es disuelto en 100 mI. de alcohol etlico.
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20.3.1.3 Procedimiento 1. En un erlenmeyer poner una alcuota (50 ml) de muestra y 5 gotas de fenolftaleina. Si aparece un color rosado indica la presencia de carbonatos. 2. Si el carbonato esta presente, titule con 0.1 N de H2SO4 desde una bureta hasta que la solucin se vuelva incolora. Registre el gasto de 0.1 N de H2SO4 No descarte la muestra titulada 3. Adicione 5 gotas de rojo de metilo 4. Titular hasta el cambio de color de: amarillo a rosado rojo. Registrar el gasto. 20.3.1.4 Clculos Sea V1 el volumen de H2SO4 0.1N gastado en presencia de la fenolftaleina Sea V2 el volumen de H2SO4 0.1N gastado en presencia del rojo de metilo.
CO3 me/l
=

2 V1 x N H2SO4 x 1,000 ml de muestra (50 ml) V2 x N H2SO4 x 1,000 ml de muestra (50 ml)

HCO3 me/l =

20.3.2

Determinacin de cloruros

20.3.2.1 Principio El mtodo de la titulacin con nitrato de plata (I - 15.3.2) es el ms comn. Sin embargo, la titulacin con nitrato de mercurio es, tambin, bastante usado. En este caso se describir este ltimo. 20.3.2.2 Reactivos Solucin concentrada de nitrato de mercurio. Disolver 3.25 g. de Hg(NO3)2 en 0.05 N HNO3, llevar a volumen de 1000 ml Solucin diluida cida de nitrato de mercurio. Tomar 50 ml de la solucin concentrada y llevar a volumen de 1000 ml con 0.05 N HNO3, 1 ml de esta solucin se combinara con 35.45 microgramos de cloro (CI-). Diphenylcarbazone al 0.5%. Disolver 0.5 g de diphenylcarbazone en 100 ml de etanol. Se debe conservar en refrigeracin. Solucin estndar de Cl-. Disolver 1.649 g de NaCl en agua y llevar a volumen de 1000 ml. Esta solucin contiene 1000 mg de Cl- / I 20.3.2.3 Procedimiento 1. Tomar alcuota de la muestra (normalmente 5 ml). Adicionar 10 ml de 0.05 N HNO3, ms 0.5 ml de diphenylcarbazone. 2. Titular con solucin diluida cida de nitrato de mercurio. Registrar el gasto. 3. Controlar el valor de titulacin de la solucin diluida cida de nitrato de mercurio contra un estndar de 20 microgramos de cloruro/ml. 20.3.2.4 Clculos
microgramos de Cl / ml =
-

ml de solucin diluida de Hg(NO3)2 x 35.45 ml de muestra

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20.3.3 Determinacin de sulfatos y boro Se puede utilizar para cuantificar sulfatos y boro, sin ninguna limitacin, los mtodos descritos para la cuantificacin en suelos salidos y sdicos. 20.3.4 Determinacin de nitratos

20.3.4.1 Principio La reaccin entre el nitrato y el 1-2-4-cido fenol disulfnico, produce el 6-nitro 1-2-4-cido fenol disulfnico y produce un color amarillo empleado para la estimacin colorimtrica a una longitud de onda de 410 nm. 20.3.4.2 Reactivos Acido fenoldisulfnico. Disolver 25 g de fenol blanco puro en 150 ml de H2SO4 concentrado. Adicionar 75 ml de H2SO4 fumante (15 % libre de SO3); agitar bien y calentar por 2 horas en bao mara. Hidrxido de amonio concentrado Solucin de hidrxido de potasio 12 N. Disolver 673 g de KOH en agua destilada y llevar a 1000 ml Solucin stock de nitrato. Disolver 0.722 g de KNO3 anhidro y diluir a 1000 ml con agua destilada. Esta solucin contiene 100 mg de N/litro. Solucin estndar de nitrato. Evaporar 50 ml de la solucin stock de nitrato hasta sequedad en bao mara. Disolver el residuo con 2 ml de cido fenoldisulfnico. Diluir a 500 ml con agua. 1 ml = 0.01 mg de N 0.0443 mg de NO3. Solucin estndar de sulfato de plata. Disolver 4.4 g de Ag2SO4 libre de nitratos, en agua destilada y diluir a 1000 ml. 20.3.4.3 Procedimiento A. Determine el contenido de cloruros de la muestra B. Determinacin de nitratos. 1. Del filtrado o de la muestra directa si esta no tiene coloracin, tratar 100 ml con una cantidad equivalente de la solucin estndar de Ag2SO4 para precipitar los cloruros. 2. Calentar para coagular el cloruro de plata. 3. Filtrar y neutralizar el filtrado a pH 7 4. Transferir a un vaso o cpsula de porcelana y evaporar a sequedad en un bao mara. 5. Disolver el residuo seco y fro con 2 ml de cido fenoldisulfnico. Calentar en un bao mara para asegurar su disolucin. 6. Diluir con 20 ml de agua destilada, adicionar 7 mI de NH4OH concentrado para alcalinizar la solucin; agitar la mezcla para desarrollar el mximo color. 7. Preparar patrones estndares tomando alcuotas de: 0.0; 2.5; 5.0; 7.5; 100; 15.0; 20.0 mI. de la solucin de KNO3 que contiene 0.01 mg de N/mI. y tratar cada uno en forma similar a una muestra pero sin decolorar ni agregar Ag2SO4. 8. Medir el porcentaje de tramitanca a longitud de onda de 410 nm.

20.3.4.4 Clculos Graficar los valores de absorbancia obtenidos para la serie de patrones estndares versus concentracin de nitrgeno-nitrato (N-NO3).

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IV.
21.

ANLISIS DE PLANTAS

PRINCIPIOS BSICOS DE ANLISIS FOLIAR


La investigacin realizada hasta el presente ha demostrado que la concentracin de los nutrientes minerales en los tejidos de la planta con algunas excepciones, tienen una gran incidencia sobre el crecimiento y la produccin de las plantas. El diagnstico del estado nutricional de la planta se puede hacer con base a observaciones visibles de sntomas de deficiencia o de exceso, con base a anlisis de suelos o con base a anlisis del tejido vegetal. De los tres anteriores, el anlisis del tejido vegetal, tiene la ventaja de medir el contenido total del nutriente y, no solo, la parte disponible tal como sucede en los anlisis de suelos. Sin embargo, el contenido de los nutrientes varia bastante entre los diferentes rganos de la planta (hojas, pecolos, tallo, races, etc.), con la edad del tejido (por Ej. hojas jvenes o viejas) y con la edad de la planta. La tcnica del anlisis de plantas comparte varios pasos: muestreo, preparacin de la muestra, anlisis de laboratorio e interpretacin. 21.1 Muestreo

Los procedimientos dados por Chapman (1946) han sido adoptados en muchos laboratorios. Desde que la mayora de los nutrientes no se encuentran en iguales concentraciones en todas las partes de la planta, generalmente se prefieren a las hojas como las partes ms representativas. El muestreo se recomienda normalmente poco antes o en poca en que la planta comienza su fase reproductiva de desarrollo. Los tejidos muertos o daados no se incluyen en el muestreo. Las plantas bajo prolongados periodos de stress, desarrollan concentraciones extraordinarias de nutrientes, que pueden ser difciles de interpretar. Cuando aparecen sntomas o se sospecha de una deficiencia de nutrientes, la interpretacin puede facilitarse mediante el anlisis de un tejido vegetal similar de plantas normales Todo esto indica que la toma de muestra constituye un paso muy delicado. De nada sirve que los anlisis qumicos sean precisos sino se logra obtener una muestra representativa que refleje el estado nutricional promedio de la planta. 21.2 Lavado

Las hojas deben recolectarse en bolsas de papel kraft y almacenarlas a una temperatura de 0 C a 5 C hasta que puedan ser lavadas, pues es necesario que se mantengan frescas. No siempre es posible obtener una muestra de tejido vegetal libre de polvo o partculas de suelo. En estos casos es necesario el lavado. Cuando se considera que la muestra debe lavarse, el mejor procedimiento es lavar la muestra con una solucin muy diluida de 0.03N HCl y luego enjuagarla con agua destilada o desionizada. Se debe tener presente que un exceso de lavado puede producir perdidas de nutrientes (Ejemplo el K).
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21.3

Secado

Generalmente, las muestras despus de lavadas y escurridas son puestas a secar en una estufa con aire forzado a temperaturas de 60 80 C. Temperaturas mayores a 100 C reducirn el peso en seco, debido a volatilizaciones de compuestos orgnicos. 21.4 Molido

Durante la molienda de la muestra, esta puede contaminarse con metales existentes en el equipo. El uso de cuchillas y tamices de acero inoxidable, reducen significativamente la contaminacin. La molienda en mortero de gata puede ser indispensable en algunos casos. Un aspecto de gran importancia es la finura del material molido, especialmente para asegurar una preparacin homognea. Un cedazo de criba N 40 60 es el generalmente usado. La muestra molida es puesta en bolsas de polietileno o en frascos libres de boro y luego secadas a 65 C por 24 horas para remover la humedad adsorbida durante la molienda.

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22.

DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE HUMEDAD


22.1 Principio Para comparar los resultados, estos deben ser expresados o calculados sobre la base de materia seca, es decir que el material o tejido vegetal debe ser secado a 105 C. La prdida de peso a 105 C, es atribuida a la evaporacin del agua adsorbida sobre la superficie. Un prolongado proceso de secado, resultar en la prdida de agua enlazada qumicamente en las protenas hidratadas, sales o en los polisacridos. 22.2 Equipos Estufa elctrica Desecador Recipientes de aluminio con tapa 22.3 Procedimiento 1. Pesar 1 g de muestra molida y colocar dentro del recipiente de aluminio, con tapa, previamente seco y pesado. 2. Secar a 105 C en una estufa por 24 horas. 3. Remover de la estufa, cubrir el recipiente de aluminio, enfriar en un desecador y pesar. 22.4 Clculos
% de humedad = peso muestra seca al aire peso de muestra seca a 105 C x 100 peso de muestra seca al aire

Nota:

La muestra secada a la estufa tiende a absorber la humedad del medio ambiente muy rpidamente, por consiguiente sta debe ser puesta inmediatamente en el desecador. Para anlisis de rutina el contenido de humedad es determinado slo una vez y el resultado es usado para hacer las correcciones de todos los resultados o de una muestra en particular

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23.

DETERMINACIN DEL NITRGENO TOTAL: MTODO KJELDAHL


23.1 Principio En el mtodo Kjeldahl, el tejido vegetal se ataca con H2SO4 concentrado, caliente, en presencia de catalizadores. La materia orgnica se transforma por oxidacin en CO y H2O. El nitrgeno se fija por el H2SO4 en forma de sulfato amnico. La introduccin de cido saliclico en la mezcla de ataque permite la reduccin de los nitratos sin prdidas de nitrgeno. Por destilacin en presencia de fuerte alcalinidad, se libera el amoniaco que por arrastre de vapor se recoge y titula con H2SO4 de normalidad conocida. 23.2 Reactivos Se presentan dos alternativas: 23.2.1 Mezcla cido sulfrico cido saliclico Mezcla de cido sulfrico cido saliclico. Disolver 50 g de cido saliclico en 1000 ml de cido sulfrico. Tosulfato de sodio (Na2S2O3 . 5 H2O) Solucin de soda (NaOH) 40%, con 1 g de fenolftaleina disuelta por litro Indicador mixto: Preparar una mezcla en igualdad de volmenes de 0.066% de rojo de metilo y 0.099% de verde de bromocresol en alcohol etlico 96. Acido brico al 2%. 20 g de cido brico es disuelto en 600 ml de agua destilada, adicionar 10 ml del indicador mixto y llevar a volumen de 1000 ml. Catalizador pulverizado mixto de selenio. 80 g de K2SO4 ms 20 g de CuSO4 ms 2 g de selenio. 23.2.2 Mezcla digestora compuesta Mezcla digestora: en un vaso de 1000 ml de capacidad poner en el siguiente orden: 175 ml de agua destilada; 5.47 g de Na2SeO3 . 5 H2O 3.6 g de Na2SeO3; 21.39 g de Na2SO4 48.5 g de Na2SO4 .10 H2O; 4.0 g de CuSO4 . 5 H2O y 200 ml de H2SO4 Q.P. Mezclar bien los cuatro primeros reactivos y luego adicionar el cido sulfrico. Solucin de soda (NaOH) 18 N. Pesar 720 g de NaOH, disolver en agua destilada. Dejar enfriar. Llevar a volumen de 1000 ml. Solucin 0.02 N de H2SO4. Solucin de cido brico al 2 % ms indicador: 15 ml de verde de bromocresol al 0.1% en alcohol etlico ms 6 mI. de solucin de rojo de metilo al 0.1% en alcohol etlico. 23.3 Procedimiento 23.3.1 Usando mezcla cido sulfrico cido saliclico 1. En un baln tipo micro Kjeldahl de 100 mI., poner 100 mg de muestra vegetal molida. 2. Adicionar 7 ml de la mezcla cido sulfrico cido saliclico. Dejar en reaccin 30 minutos 3. Adicionar 0.5 g de Na2S2O3 y agitar. Dejar en reposo 15 minutos.
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4. 5. 6. 7. 8. 9.

Adicionar 200 mg del catalizador mixto Calentar, al inicio en forma suave y luego fuerte, hasta que el contenido del baln se aclare Dejar enfriar. Adicionar agua destilada para dar volumen (10 - 20 mI.) Destilar, previa neutralizacin de la acidez mediante adicin de NaOH al 40% con indicador Recibir el destilado en 10 ml de H3BO3 al 2% que contiene indicador mixto. Terminada la destilacin, titular el destilado con H2SO4 0.02 N hasta el cambio de color: verde a rojo.

Clculos. Si V ml de 0.02 N de H2SO4 fueron usados para la titulacin y 0.1 gramos de material fueron utilizados; la concentracin de N en la muestra es:
% de N = V x 0.02 x 0.014 x 100 0.1

23.3.2 Usando mezcla digestora compuesta 1. Pesar 100 mg de material y transferir a un baln micro Kjeldahl de 100 ml. 2. Adicionar 7 ml de la mezcla digestota compuesta. 3. Llevar a digestin, calentando al inicio en forma suave y luego elevar la temperatura hasta 350 C. La digestin termina cuando la muestra presenta color claro. 4. Llevar a destilacin y proceder tal como se indico en 23.3.1

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24.

DIGESTIN HMEDA PARA DETERMINAR: P K Ca Mg S B Cu Fe Mn Zn.


24.1 Principio La digestin hmeda es realizada mediante el ataque con cidos. El cido perclrico (HCIO4) y el cido ntrico (HNO3) son los comnmente usados. La muestra es tratada con la mezcla cida fra para permitir al cido ntrico oxidar al material orgnico altamente activo. Luego es calentado para permitir la completa oxidacin del material orgnico. Esta digestin permite, adems, la determinacin de elementos tales como el azufre el cual en una calcinacin se pierden por volatilizacin. 24.2 Reactivos Solucin de digestin. Solucin ntrica-perclrica. A 500 ml de HNO3 concentrado adicionar 100 ml de HCIO4 concentrado. 24.3 Procedimiento: Obtencin del extracto 1. Pesar 0.500 g de tejido vegetal y colocar dentro de frascos, resistentes a calor, y de 50 ml de capacidad. 2. Adicionar 5 ml de la solucin ntrica-perclrica. 3. Colocar sobre plancha de calentamiento y elevar gradualmente la temperatura hasta 175 C. Dejar en digestin por 1 hora y 30 minutos. La solucin se vuelve clara. Se puede poner un embudo sobre el frasco de digestin para dar efecto de tubo de reflujo. 4. Remover el frasco y adicionar 15 ml de 0.1 N HCI. Agitar el frasco para disolver las cenizas y filtrar la solucin. (Este filtrado original representa una dilucin de 30 veces (30x) con respecto al material vegetal). 24.3.1 Determinacin del fsforo

24.3.1.1 Reactivos Pesar 0.13 g de trixido de antimonio. Colocar en un frasco de 1000 ml y que contenga aproximadamente 400 ml de agua destilada libre de fsforo. Lentamente y con sumo cuidado y agitacin adicionar 145 ml de H2SO4 concentrado. Dejar enfriar. En un segundo frasco, disolver 7.5 g de molibdato de amonio [(NH4)6Mo7 . 4H2O)] Cuando la solucin de antimonio se encuentra fra, adicionar la solucin de molibdato y llevar a volumen de 1000 ml con agua destilada libre de fsforo. Esta solucin es estable por varias semanas si es mantenida en un frasco mbar y en refrigeracin. Reactivo para el desarrollo de color de fsforo. Este se prepara justo antes de hacer la determinacin. Diluir 150 ml de la solucin de antimonio-molibdato a 1000 ml con agua destilada. Adicionar 1.00 g. de cido ascrbico 24.3.1.2 Procedimiento 1. Del filtrado original, tomar alcuota de 1 ml y adicionar 19 ml de agua: DILUCIN 1 2. Tomar 1 ml de la dilucin 1 y adicionar 9 ml de agua 3. Adicionar 10 ml del reactivo para el desarrollo de color para fsforo. 4. Dejar en reposo por 20 minutos y luego leer la tramitancia a 680 nm de longitud de onda.
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5. Preparar una serie de patrones incluyendo un blanco para construir la curva. A partir de

una solucin patrn de 1000 mg de P/I., preparar soluciones de: 0 - 10 - 20 mg de P/I y proceda a desarrollar la curva en forma similar a la muestra. 24.3.1.3 Clculos % de P = mg de P en curva x FD
FD = vol. Extraccin x vol. final x lg x 100 g de tejido vegetal 100 ml sol. ext. Alcuota 1000 mg peso de muestra

24.3.2

Determinacin de Ca Mg K Na

24.3.2.1 Equipos y reactivos Equipo de absorcin atmica. Llama: aire - acetileno. Solucin de lantano al 1%. Disolver 59 g de La2O3 en 50 ml de agua, lenta y en forma cuidadosa adicionar 250 ml de HCl concentrado. Llevar a volumen final de 5000 ml (5 litros) con agua destilada. 24.3.2.2 Procedimiento A 1 mI de la DILUCION 1 adicionar 9 ml de agua destilada y 10 ml de la solucin de lantano al 1%. Leer la concentracin de Ca - Mg - K - Na en el equipo. Preparar estndares para la calibracin del equipo de acuerdo a su manual. 24.3.2.3 Clculos Expresar los resultados en %. 24.3.3 Determinacin de Azufre

24.3.3.1 Reactivos Solucin cida. A 500 ml de agua destilada adicionar 65 ml de HNO3; luego adicionar 3 ml de una solucin estndar de 1000 mg de S/litro. Llevar a volumen de 1000 ml con agua destilada. Solucin de cloruro de bario. Disolver 150 g de BaCl2 . 2H2O en la solucin formada por 562 ml de cido actico glacial (CH3 - COOH) ms 300 mI. de agua. Llevar a volumen de 1000 mI. 24.3.3.2 Procedimiento A 7 ml de la DILUCION 1 adicionar 9 ml de la solucin cida y 4 ml de la solucin de cloruro de bario. Mezclar. Dejar en reposo por 15 pero no ms de 45 minutos antes de lee la tramitanca a longitud de onda de 535 nm. Preparar serie de estndares para hacer la curva patrn. La concentracin ms alta del patrn puede ser 20 mg de S/litro. La curva se prepara en forma similar a la muestra.
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24.3.3.3 Clculos Expresar los resultados en % de S. 24.3.4 Determinacin de Boro

24.3.4.1 Reactivos Curcmina en cido actico. Disolver 1 g de curcmina y 5 g de cido oxlico en 1000 ml de cido actico glacial. La curcmina se disuelve lentamente, por consiguiente, el reactivo debe ser preparado con 2 3 das de anticipacin. Metanol. Mezclar un volumen de metanol con un volumen de agua. 24.3.4.2 Procedimiento A partir del filtrado original, tomar una alcuota de 0.50 ml. Usar material lo ms bajo en boro Adicionar 3.5 ml de la solucin de curcmina en cido actico. Mezclar. Adicionar 1 ml de H2SO4, mezclar y dejar en repos por 20 minutos. Adicionar 15 ml de metanol. Mezclar. Lee la tramitancia a 555 nm de longitud de onda. Preparar serie de estndares. La concentracin ms alta puede ser de 2 mg de B/litro. 24.3.4.3 Clculos Expresar el contenido de Boro en microgramos de B/gramo de muestra. 24.3.5 Determinacin de Cu Fe Mn Zn

24.3.5.1 Equipo Absorcin atmica. Llama: aire - acetileno 24.3.5.2 Procedimiento Usar el filtrado original para analizar estos elementos por absorcin atmica. Diluya en caso necesario para ajustarse al rango propio de lectura del equipo.

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25.

DIGESTIN VA SECA PARA DETERMINAR: P K Ca Mg S B Cu Fe Mn Zn


25.1 Principio La digestin va seca o calcinacin de la muestra es generalmente hecha en una mufla a temperaturas de 450 - 500 C. A estas condiciones de temperatura, elementos tales como el azufre (S), nitrgeno (N) y en algunos casos el boro (B) tiende a perderse por sublimacin. Una vez que la muestra ha sido calcinada, el residuo, cenizas, son disueltas en cidos diluidos tales como ntrico o clorhdrico. La solucin formada contiene los elementos minerales. Para la cuantificacin de los elementos, se usan tcnicas analticas que pueden ser por titulacin, colorimtricas o por espectrofotometra de emisin o de absorcin. 25.2 Equipos Crisoles de porcelana de 30 50 ml de capacidad Mufla con control de temperatura. 25.3 Procedimiento: Obtencin del extracto 1. Pesar 2.00 g de muestra de tejido vegetal molida y seca en la estufa a 60 - 70 C. Colocar en un crisol el cual ha sido identificado previamente. Es necesario llevar un blanco. 2. Colocar el crisol dentro de la mufla. Seleccionar la temperatura de 450 C en la mufla. El incremento de la temperatura en la mufla debe ser gradual. Cuando se ha alcanzado la temperatura de 450 C mantenerla por 3 4 horas. En general, se considera que el proceso total de calcinacin lleva un tiempo de 8 horas. Apagar el sistema y dejar que enfre, antes de remover el crisol. 3. Humedecer la muestra calcinada, con agua destilada. Agregar lentamente 2 ml de HCI concentrado. 4. Evaporar lentamente el contenido hasta sequedad. El exceso de calor da lugar a proyecciones de la muestra. 5. Repita el proceso de adicin de HCl y evaporacin hasta sequedad para deshidratar la slice que interfiere en la determinacin del fsforo. Este paso asegura tambin la disolucin del Mn difcilmente soluble y de otro micro nutriente. 6. Agregue aproximadamente 2 ml de agua destilada y 2 ml de HCI concentrado. Caliente suavemente, a fin de permitir la disolucin. 7. Transfiera el contenido del crisol, ayudndose con agua caliente y por filtracin, a una fiola de 50 ml. Esta solucin llamada extracto clorhdrico. sirve para determinar: P - K - Ca - Mg Cu Fe - Mn - Zn y B, ya sea directamente o despus de hacer diluciones. Nota: Este procedimiento es conveniente debido a que requiere, relativamente, poca atencin; sin embargo, ciertas precauciones deben ser tomadas. - La calcinacin debe ser llevada en forma lenta: Temperaturas por encima de 550 C pueden causar prdidas de algunos elementos, tal como el K. - La mufla debe ser lo ms hermtica posible. El ingreso de oxigeno puede incrementar la temperatura ms arriba de lo que se registra en el control.

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- Durante el proceso de solubilizacin con cido, muchos investigadores recomiendan el uso de HCl 6N de HNO3, especialmente cuando las determinaciones se van a realizar por absorcin atmica. Determinaciones analticas de elementos. En el punto 24, para anlisis en plantas, se han descrito los mtodos analticos para la determinacin de los diferentes elementos. Los mtodos indicados, pueden ser aplicados en el extracto clorhdrico sin ninguna limitacin. Sin embargo, se quiere proporcionar otras alternativas de mtodos y que se describirn a continuacin. 25.3.1 Determinacin del Fsforo

25.3.1.1 Reactivos Solucin de sulfo-molibdica. Pesar 25 g de molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 .4H2O] en 200 ml de agua destilada libre de fsforo. Calentar hasta 40 C para lograr su disolucin. En otro recipiente poner 400 ml de agua destilada y adicionar lentamente 280 ml de H2SO4 concentrado. Enfriar ambas y mezclar. Llevar a volumen de 1000 ml con agua destilada. Guardar en frasco oscuro. Reductor 1-2-4 amino naftol sulfnico. En un mortero, mezclar 6 g. de metadisulfito de sodio; 6 g. de sulfito de sodio anhidro y 1 g de 1-2-4- amino naftol sulfnico. Moler para lograr su mezcla. Solucin reductora al 2.5%. Del reductor 1-2-4 amino naftol sulfnico, pesar 2.5 g y disolver en 100 ml de agua destilada. Esta solucin se prepara, justo, antes de realizar el desarrollo de color. Solucin estndar de 80 mg de P/l. A partir de una solucin stock de 1000 mg de P/l, tomar una alcuota de 8 ml y llevar a volumen de 100 ml. 25.3.1.2 Procedimiento 1. Del extracto clorhdrico tomar alcuota de 10 ml. 2. Adicionar 12.4 ml de agua destilada 3. Adicionar 0.8 ml de solucin sulfa molbdica. 4. Adicionar 0.8 ml de la solucin reductora al 2.5%. 5. Adicionar 5.0 mI de agua destilada. 6. Leer la tramitancia a longitud de onda: 650 nm. 7. Preparar curva patrn de fsforo a partir del estndar de 80 mg de P/I de acuerdo al la siguiente tabla. Curva patrn de fsforo
N 1 2 3 4 5 6 Solucin estndar 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 Agua destilada 18.4 18.2 18.0 17.8 17.6 17.4 Sulfo Molibdica Mililitros 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 Solucin reductora 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8 Volumen final 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 Concentracin mg / l 0.0 0.8 1.6 2.4 3.2 4.0 Tramitancia % 100

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25.3.1.3 Clculos Expresar el contenido de fsforo en el tejido vegetal en % de P. 25.3.2 Determinacin del Potasio

25.3.2.1 Equipo Fotmetro de llama o absorcin atmica. 25.3.2.2 Procedimiento 1. Preparar dilucin de acuerdo a la capacidad del equipo. 2. Calibrar el equipo con estndares, segn su manual. 3. Leer la concentracin de potasio. 25.3.2.3 Clculos Expresar el contenido de potasio en el tejido en % de K. 25.3.3 Determinacin del Calcio y Magnesio Por absorcin atmica

25.3.3.1

Reactivos y Equipo.

Solucin de lantano al 1 %. Disolver 50 g de La2O3 en ms o menos 50 ml de agua destilada con adicin de 250 ml de HCI concentrado. Completar a volumen de 5000 ml (5 litros) con agua destilada. Estndares de calcio y magnesio de acuerdo al manual del equipo. Equipo de absorcin atmica.
Procedimiento.

1. Realizar las diluciones de acuerdo a la capacidad del equipo. La muestra debe tener lantano, generalmente para una alcuota de muestra de 1 ml ms 9 ml de agua se adiciona 15 ml de solucin de lantano. 2. Calibrar el equipo con los estndares 3. Leer la concentracin de las muestras. 25.3.3.2 Por titulacin con EDTA

Reactivos. 1. Solucin de cianuro de sodio al 2.5%. Pesar 2.5 g de la sal NaCN y disolver en 100 ml de agua. 2. Solucin Tampn pH 10.0. Pesar 67.5 g de la sal NH4Cl y disolver en 200 mI de agua destilada. Adicionar 570 ml de NH4OH, agitar y llevar a volumen de 1000 ml. 3. Indicador eriocrmo negro T. Pesar 0.5 g de eriocrmo negro T; 2.0 g de cloruro de hidroxilamina y disolver en un volumen de 50 ml de alcohol. 4. Indicador murexide (purpurato). Pesar 0.5 g de murexide y 100 g de K2SO4; moler hasta la completa homogenizacin. 5. Hidrxido de potasio 6N (KOH)
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6. Solucin de EDTA 0.02N. Pesar 3.7225 g de EDTA, sal di sdica y disolver en ms o menos 400 ml de agua destilada. Llevar a volumen de 1000 ml. Controlar normalidad frente a un estndar de calcio ms magnesio. Determinacin de Calcio ms Magnesio Procedimiento. 1. Tomar una alcuota del extracto clorhdrico (muestra). Adicionar agua destilada para dar volumen. 2. Adicionar: 1 ml de solucin de cianuro de sodio; 2 ml de la solucin tampn y 5 gotas de eriocromo negro T. 3. Titular con la solucin de EDTA 0.02N hasta cambio de color. Determinacin de Calcio Procedimiento. 1. Tomar una alcuota del extracto clorhdrico, del mismo volumen que para Ca + Mg. Adicionar agua destilada para dar volumen. 2. Adicionar 2 ml de KOH 6N. Adicionar 50 100 mg de murexide 3. Titular con 0.02N EDTA hasta cambio de color. 25.3.4 Determinacin del Magnesio por colorimetra

Reactivos Hidrocloruro de hidroxilamina al 5 %. Debe guardarse en frasco oscuro. Hidrxido de sodio al 2.5 % Amarrillo de thiazol al 0.02 %. Esta solucin se debe preparar cada dos semanas y guardarse en frasco oscuro. Solucin compensada. Disolver 3.7 g de cloruro de calcio (CaCl2 . 2H2O), 0.74 g de sulfato de aluminio [AI2(SO4)3 . 18H2O], 036 g de cloruro de manganeso (MnCl2 . 4H2O) y 0.60 g de fosfato de sodio (Na3PO4) en cerca de 500 ml de agua que contenga 10 ml de HCl concentrado. Diluir hasta obtener 1000 ml. Solucin de almidn al 2%. Pesar 2 g de almidn soluble Q.P.; hacer una pasta con una pequea cantidad de agua destilada, luego aadir rpidamente, mientras se agita continuamente, el resto el resto de los 100 ml de agua destilada en ebullicin. Si la mezcla queda opaca, calentar hasta que quede transparente; enfriar. Esta solucin se prepara justo antes de realizar la determinacin de magnesio Solucin compensada-almidn. Mezclar en fro y en volmenes iguales la solucin compensable y la de almidn. Solucin estndar de 25 mg de Mg/I (25 ppm). Disolver 25 mg de magnesio metlico de grado reactivo en cerca de 100 ml de agua destilada que contenga 10 ml de HCl concentrado; luego llevar a volumen de 250 ml. A partir de esta solucin prepare una dilucin 1:40 para obtener 25 mg de Mg/I (25 ppm de Mg) Procedimiento 1. En un frasco de 50 ml colocar una alcuota de 1 - 2 ml del extracto clorhdrico.
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2. Adicione agua destilada para hacer volumen de 12.5 ml 3. Adicionar: 0.5 ml de hidrocloruro de hidroxilamina; 2.5 ml de solucin compensablealmidn; 2.5 ml de amarillo de thiazol; 2.5 ml de hidrxido de sodio 2.5 N; mezclar y llevar a volumen final de 25 ml con agua destilada. 4. Dejar en reposo por 10 minutos, leer la tramitancia a 545 nm de longitud de onda. 5. En forma paralela desarrollar una curva de calibracin usando el estndar de 25 mg de Mg/l, tomando alcuotas que varen de 0 a 4 ml; adicionar a cada una de las alcuotas los reactivos para el desarrollo de color como si se tratase de una muestra. Clculos Expresar los resultados del contenido de magnesio en %. 25.3.5 Determinacin del Cobre

Reactivos cido ctrico al 15% Hidrxido de amonio 1:1 Diethyldithiocarbamato de sodio. Pesar 0.100 g y disolver en 100 ml de agua destilada. Tetracloruro de carbono puro. Solucin estndar de cobre. Pesar 0.5 mg de cobre puro y colocar en un erlenmeyer de 125 ml. Adicionar 15 ml de HNO3 1:4; dejar en reaccin para disolver el cobre. Calentar para disolver el resto de cobre, enfriar y adicionar 1 ml de H2SO4 y evaporar cuidadosamente a gases de SO3. Enfriar, diluir a 500 ml con agua destilada. Esta solucin contiene 1000 mg de Cu/l. A partir de sta, preparar una solucin de 1 mg de Cu/l. Procedimiento 1. Una alcuota de 10 ml del extracto clorhdrico es colocado dentro de un embudo de separacin. 2. Adicionar 5 ml de cido ctrico. 3. Llevar a volumen de 20 25 ml con agua bidestilada. 4. Adicionar una tira de papel azul de tornasol de 0.5 x 0.5 cm. 5. Ajustar el pH con hidrxido de amonio, hasta que el papel recupere su color original. 6. Adicionar 2 ml de diethylditiocarbamato. 7. Agregar 10 ml de tretacloruro de carbono puro y agitar por 2 minutos, dejar en reposo, agitar por 10 minutos y repetir por cuatro veces. 8. Leer la tramitancia a 435 nm de longitud de onda. 9. En forma paralela hacer una curva de calibracin tomando alcuotas de: 2 4 8 12 ml del estndar de 1 mg de Cu/l Clculos Expresar el contenido de cobre en mg de Cu / 1000 g de muestra. 25.3.6 Determinacin del Fierro

Reactivos Solucin de clorhidrato de hidroxilamina al 2.5%


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Solucin de O-fenantrolina al 1.5% en etanol al 95%. Esta solucin se prepara al momento de la determinacin. Papel indicador rojo congo. Se prepara sumergiendo papel filtro en una solucin al 0.1% y luego es secado, Solucin de hidrxido de amonio 1:4 Solucin estndar de fierro. Disolver 0.351 g de sulfato de amonio ferroso [Fe(NH4)2SO4 . 6H2O] en unos 300 ml de agua destilada; agregar y disolver 4 g de clorhidrato de hidroxilamina. Acidificar con 3 ml de HCl 0.1N; llevar a volumen de 1000 ml con agua destilada. Esta solucin contiene 50 mg de Fe/l (50 ppm de Fe). A partir de sta, preparar una solucin de 5 mg de Fe/l (5 ppm de Fe). Procedimiento 1. En un frasco de 25 ml colocar una alcuota de 2 ml del extracto clorhdrico. 2. Adicionar: 2 ml de agua bidestilada; 4 ml de clorhidrato de hidroxilamina; agitar. 3. Agregar 0.5 ml de O-fenantrolina y una tira de papel indicador rojo congo; homogenizar. 4. Ajustar el pH hasta un color rojo adicionando gota a gota amoniaco 1:4 evitando cualquier exceso. 5. Llevar a volumen de 10 ml con agua bidestilada. Homogenizar. Dejar en reposo por 1020 minutos. Leer la tramitancia a 500 nm de longitud de onda. 6. En forma paralela prepara una serie de estndares usando alcuotas de: 0 0.5 1 2 3 4 5 ml del estndar de 5 mg de Fe/l (5 ppm de Fe). Desarrollar color en forma similar a las muestras. Clculos Expresar el contenido de fierro en mg de Fe/1000 g de muestra. 25.3.7 Determinacin de Manganeso

Reactivos cido fosfrico Q.P. Metaperiodato de sodio Procedimiento 1. En un vaso de 100 ml colocar una alcuota de 5 10 ml del extracto clorhdrico. 2. Calentar en una plancha elctrica y llevar a sequedad. Enfriar. 3. Adicionar 15 ml de agua bidestilada para disolver. 4. Agregar 2.5 ml de cido fosforito. Agitar para homogenizar. 5. Adicionar 0.1 g de metaperiodato de sodio; agitar para disolver. 6. Calentar en una plancha hasta que la solucin tome el color lila rosado. Enfriar y llevar a volumen de 25 ml con agua bidestilada. 7. Leer la tramitancia a 525 nm de longitud de onda. 8. En forma paralela desarrollar la curva de calibracin utilizando alcuotas comprendidas entre 0 5 ml del estndar de 10 mg de Mn/l (ppm de Mn). Proceder en forma similar a las muestras.

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Clculos Expresar el contenido de manganeso en mg de Mn/1000 g de muestra 25.3.8 Determinacin de Zinc

Reactivos cido clorhdrico 01N. Solucin buffer pH 4.7. Se prepara disolviendo 100 g de acetato de sodio y 30 g de cido actico en un volumen final de 1000 ml de agua destilada. Controlar el pH. Tiosulfato de sodio al 2.5% Solucin de ditizona en tetracloruro de carbono. Pesar 0.005 g de ditizona y disolver en 250 ml de tetracloruro de carbono puro. Procedimiento 1. Una alcuota de 5 ml del extracto clorhdrico es colocado en un embudo de separacin de 125 ml. 2. Agregar 5 ml de cido clorhdrico 0.1N; ms 5 ml de la solucin tampn de pH 4.7 y 1 ml de la solucin de tiosulfato de sodio. Homogenizar. 3. Adicionar 5 ml de ditizona, tapar el embudo y agitar por 2 minutos y dejar en reposo para luego extraer la capa de ditizona que es la que contiene el Zn. Repetir esta operacin tantas veces como sea necesario para que la ditizona salga del mismo color original (verde). 4. Una vez realizada todas las remociones, eliminar el agua y dejar la solucin de ditizona. 5. Con la ditizona dentro del embudo, adicionar 15 ml de hidrxido de amonio, agitar por 1 minuto y dejar en reposo, repetir esta operacin. 6. Lavar 2 veces con 15 ml de agua bidestilada cada vez. 7. Leer la tramitancia a 525 nm de longitud de onda. 8. En forma paralela hacer un blanco y un estndar de Zn, para lo cual se toma una alcuota de 3 ml de un estndar de 2 mg de Zn/l. Proceder en forma similar a la muestra. Clculos Expresar el contenido de Zn en mg de Zn/1000 g de muestra

26.

DETERMINACIN DE BORO EN PLANTAS CON ALTO CONTENIDO DE ESTE ELEMENTO.


Principio Para evitar que por calcinacin se pierda el boro, la muestra que se encuentra dentro del crisol es cubierta por una capa de xido de calcio y luego se calcina. Se procede a la preparacin del extracto clorhdrico en forma similar a lo descrito (25.3). La cuantificacin del boro en el extracto clorhdrico se hace con carmn sulfrico en forma similar a una muestra normal, lectura de la tramitancia a 595 nm de longitud de onda.

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27.

DETERMINACIN DEL CLORO EN PLANTAS


27.1 Principio El cloro extrado en la forma de in CI- en una solucin acuosa, es titulado con nitrato de plata y ante la presencia del indicador cromato de potasio. El punto final de la titulacin termina cuando un color marrn claro se presenta en la solucin debido a la formacin de cromato de plata. 27.2 Extraccin del cloro 1. En un erlenmeyer de 50 mI colocar 100 mg de material vegetal seco y molido. 2. Adicionar 25 ml de agua destilada. 3. Agitar usando agitador de movimiento horizontal durante 10 minutos 4. Filtrar.

27.3

Determinacin del cloro 27.3.1 Reactivos Indicador cromato de potasio al 5%. Disolver 5 g de K2CrO4 en aproximadamente 50 ml de agua destilada. Adicionar gota a gota la solucin patrn de nitrato de plata (AgNO3) hasta la formacin de un leve precipitado de color rojo permanente; filtrar y llevar a volumen de 100 ml. Solucin patrn de nitrato de plata (AgNO3). Disolver en agua destilada 4.791 g de AgNO3 y llevar a volumen de 1000 ml. 1 ml de esta solucin equivale a 1 mg de cloro. Controlar la normalidad de esta solucin frente a una solucin 0.03N de NaCl y la presencia del indicador K2CrO4 al 5%. 27.3.2 Procedimiento 1. En un vaso, colocar una alcuota de 10 ml del extracto de cloro. 2. Adicionar 1 ml del indicador K2CrO4 al 5%. 3. Titular con la solucin patrn de nitrato de plata hasta aparicin de un color marrn claro. Registrar el gasto (G1). 4. En forma paralela llevar un blanco, titulando una alcuota de 10 ml de agua destilada. Registrar el gasto (G2) 27.3.3 Clculos
% Cl = G x Vol. De extraccin x 100 Alcuota x mg de peso de muestra

G = G 1 G2

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