Virus-Virus Yang Digunakan Sebagai Vektor Pada Terapi Gen

Virus-Virus Yang Digunakan Sebagai Vektor Pada Terapi Gen Vektor biologi yang digunakan untuk membawa gen yang telah diperbaiki adalah virus yang susunan genetiknya telah diubah sehingga dapat membawa gen manusia yang normal.Virusvirus ini akan membawa gen yang telah diperbaiki kedalam sel-sel sasaran pada tubuh manusia dengan cara tertentu dan kemudian berintegrasi pada genom tertentu. Untuk mencapai tujuan ini gen-gen pada virus yang dapat menyebabkan penyakit harus dihilangkan dan diganti dengan gen-gen yang telah diperbaiki. Sebagai contoh virus A diketahui dapat berreplikasi atau memperbanyak diri dengan cara menginsersikan gen-gen nya kedalam genom sel-sel host.Virus ini mempunyai 2 jenis gene yaitu gen A dan gene B. Gen A adalah gen yang mengkode protein yang berguna untuk menginsersikan gen- gen nya kedalam genom sel host (inang). Sebaliknya gen B adalah gen yang menyebabkan timbulnya penyakit pada host. Gen C adalah gen yang telah diperbaiki dan akan menggantikan gen B. Dengan dilakukannya reengineering sedemikian rupa sehingga gen C dapat menggantiksn gen B. Dengan demikian gen A tetap dipertahankan untuk menjalankan fungsinya. Virus adalah partikel yang menular berisi materi genetik yang dapat dikombinasikan dengan sebuah gen baru. Virus ini dapat membawa gen baru ke dalam sel penerima dalam proses menginfeksi sel tersebut. Juga dapat dinonaktifkan sehingga saat membawa gen baru ke dalam sel, virus tidak dapat menjalankan mesin genetik sel untuk membuat ribuan salinan itu sendiri. Untuk melakukan terapi gen, harus digunakannya vektor, baik berupa virus maupun nonvirus. Prosesnya sama dengan transdusi, dimana gen manusia dimasukan kedalam virusyang akan menginfeksi sel manusia yang mengalami mutasi. Beberapa Virus yang dapat digunakan sebagai vektor adalah : a) Retrovirus

adalah salah satu andalan pendekatan Terapi gen yang saat ini. Retrovirus rekombinan seperti virus murine leukemia Moloney memiliki kemampuan untuk mengintegrasikan ke dalam genom host dengan cara yang stabil. Mereka berisi transkriptase yang memungkinkan integrasi ke host genom. Mereka telah digunakan dalam jumlah yang disetujui FDA uji klinis seperti SCID-X 1 percobaan. Retroviral vektor dapat menjadi kompeten replikasi atau replikasi-cacat. Replikasi-cacat vektor adalah pilihan yang paling umum dalam studi karena virus memiliki daerah coding

Virus-Virus Yang Digunakan Sebagai Vektor Pada Terapi Gen

untuk gen yang diperlukan untuk tambahan putaran virion replikasi dan kemasan yang digantikan dengan gen lain, atau dihapus.Virus ini mampu menginfeksi sel target mereka dan memberikan muatan virus mereka, tetapi kemudian gagal untuk melanjutkan jalur lytic khas yang mengarah ke sel Lisis dan kematian.Sebaliknya, kompeten replikasi virus vektor berisi semua gen yang diperlukan untuk sintesis virion, dan terus menyebarkan diri setelah infeksi terjadi. Karena genetika virus untuk vektor ini jauh lebih panjang, panjang dari gen dimasukkan sebenarnya menarik terbatas dibandingkan dengan panjang mungkin insert untuk replikasicacat vektor.Tergantung pada vektor virus, panjang maksimum khas memasukkan DNA yang diizinkan di sebuah cacat replikasi virus vektor adalah biasanya sekitar 8-10 kB. Sementara ini membatasi pengenalan banyak urutan genom, sebagian besar cDNA urutan masih dapat ditampung.Kelemahan utama untuk menggunakan retrovirus seperti Moloney retrovirus melibatkan persyaratan untuk sel-sel membagi secara aktif untuk transduksi. Sebagai akibatnya, sel-sel seperti neuron sangat tahan terhadap infeksi dan transduksi oleh retrovirus.Ada kekhawatiran bahwa mutagenesis insertional karena untuk integrasi ke genom host dapat mengakibatkan kanker atau leukemia. b) Lentiviruses

Lentiviruses adalah sebuah subclass retrovirus. Mereka baru-baru ini telah diadaptasi sebagai gen pengiriman kendaraan (vektor) Terima kasih kepada kemampuan mereka untuk mengintegrasikan ke dalam genom non-membagi sel, yang merupakan fitur unik Lentiviruses sebagai retrovirus lain dapat menginfeksi hanya sel-sel pemisah.Genetika virus dalam bentuk RNA sebaliknya-ditranskripsi ketika virus memasuki sel untuk menghasilkan DNA, yang kemudian dimasukkan ke dalam genom pada posisi acak oleh enzim integrase virus.Vektor, yang sekarang disebut provirus, tetap di genom dan diteruskan ke keturunan sel ketika membagi. Situs integrasi ini tak terduga, yang dapat menimbulkan masalah.Provirus dapat mengganggu fungsi gen selular dan mengakibatkan aktivasi dari onkogen, mempromosikan perkembangan kanker, yang menimbulkan keprihatinan untuk aplikasi mungkin lentiviruses dalam gen terapi. Namun, penelitian telah menunjukkan bahwa lentivirus vektor memiliki kecenderungan untuk mengintegrasikan di tempat-tempat yang berpotensi menyebabkan kanker daripada gamma retroviral vektor.Lebih khusus lagi, satu studi menemukan bahwa vektor lentiviral tidak menyebabkan peningkatan dalam insiden tumor atau awal awal tumor pada tikus

Virus-Virus Yang Digunakan Sebagai Vektor Pada Terapi Gen

ketegangan dengan insiden tumor jauh lebih tinggi.Selain itu, uji klinis yang dimanfaatkan vektor lentiviral untuk memberikan gen terapi untuk pengobatan HIV mengalami peningkatan dalam peristiwa mutagenik atau oncologic.Untuk alasan keamanan vektor lentiviral tidak pernah membawa gen yang diperlukan untuk replikasi mereka. Untuk menghasilkan lentivirus, beberapa plasmid transfected ke garis sel disebut kemasan, biasanya HEK 293.Satu atau lebih plasmid, biasanya disebut sebagai kemasan plasmid, menyandikan protein virion, seperti capsid dan reverse transcriptase.Plasmid lain berisi materi genetik yang disampaikan oleh vektor. Ini ditulis untuk menghasilkan genetika virus RNA tunggal dan ditandai oleh kehadiran urutan (psi).Urutan ini digunakan untuk paket genom ke virion. c) Adenoviruses

Sebagai lawan untuk lentiviruses, adenoviral DNA tidak mengintegrasikan ke genom dan tidak direplikasi semasa pembelahan.Hal ini membatasi penggunaannya dalam penelitian dasar, meskipun vektor adenoviral kadang-kadang digunakan dalam eksperimen '' in vitro''. Aplikasi utama mereka berada di Terapi gen dan vaksinasi.Karena manusia biasanya datang dalam kontak dengan adenoviruses, yang menyebabkan pernafasan, pencernaan dan mata infeksi, memicu respon imun yang cepat dengan konsekuensi yang berbahaya.Untuk mengatasi masalah ini para ilmuwan sedang menyelidiki adenoviruses manusia yang tidak memiliki kekebalan. d) ADO-terkait virus

ADO-terkait virus (AAV) adalah virus kecil yang menginfeksi manusia dan beberapa spesies primata lainnya. AAV tidak diketahui menyebabkan penyakit dan akibatnya virus menyebabkan respon imun yang sangat ringan. AAV dapat menginfeksi pemisah maupun non-membagi sel dan dapat memasukkan genom ke yang sel inang. Fitur ini membuat AAV calon yang sangat menarik untuk menciptakan virus vektor untuk terapi gen.Zat-zat yang nonviral seperti Ormosil telah digunakan sebagai vektor DNA dan dapat memberikan banyak DNA sel-sel khusus ditargetkan pada hidup hewan. (Singkatan dari Ormosil '' Organik diubah silika atau silikat.)''. e) Herpes Simplex Virus

Herpes Simplex Virus adalah virus Neurotropik manusia. Ini kebanyakan diperiksa untuk transfer gen dalam sistem saraf. Jenis liar HSV-1 virus mampu menginfeksi neuron. neuron

Virus-Virus Yang Digunakan Sebagai Vektor Pada Terapi Gen

yang terinfeksi tidak ditolak oleh sistem kekebalan tubuh. Meskipun virus laten tidak transcriptionally jelas, itu tidak memiliki promotor spesifik neuron yang dapat terus berfungsi secara normal. Antibodi terhadap HSV-1 yang umum pada manusia, namun komplikasi karena infeksi herpes agak jarang. f) Rhinovirus

Rhinovirus (dari bahasa Yunani''rhin''-yang berarti "hidung") adalah genus dari keluarga Picornaviridae''''virus.Telah sekarang digabung menjadi Enterovirus, sekelompok

Picornaviridae yang mencakup Virus polio, virus Coxsackie A, dan Hepatitis A. Rhinovira adalah agen yang paling umum infeksi virus pada manusia, dan agen penyebab pilek (sekitar 49,12159% dari kasus flu biasa disebabkan oleh virus ini). Hal ini litik di alam. Ada lebih dari 100 jenis yang diakui rhinovira yang berbeda berdasarkan berbagai protein mereka permukaan.Rhinovira adalah di antara Vira terkecil, dengan diameter sekitar hanya 30 nanometer (Vira lain seperti cacar dan vaccinia Vira adalah 10 kali lebih besar pada sekitar 300 nanometer).Rhinovira memiliki akal beruntai tunggal RNA genom positif antara 7,2 dan 8,5 kb panjang. Di ujung 5 'dari genom adalah protein virus dikodekan, dan seperti mRNA mamalia, ada 3' poli-A ekor. Protein struktural yang dikodekan dalam 'wilayah genom dan non struktural di 3' 5 akhir. Ini adalah sama untuk semua picornavira. Partikel virus sendiri tidak menyelimuti dan ikosahedral dalam struktur. Rhinovirus juga tumbuh terbaik di suhu antara 33-35 C, dan ini mungkin mengapa reproduksi terjadi di hidung. Hal ini sensitif terhadap lingkungan asam.Protein virus ditranskripsi sebagai single, panjang polipeptida, yang dibelah menjadi protein struktural dan nonstruktural virus.

g)

Poxvirus

merupakan virus lengkap yaitu virion dan dari inti asam nukleat yang dikelilingi lapisan protein yang bersifat antigenik yang disebut dengan kapsid dan terdapat selubung luar (envelope) yang terdiri dari protein dan lipid. Ciri mencolok dari DNA poxvirus adalah bahwa kedua untai komplementer bergabung. Intermediet replikatif, hadir dalam sitoplasma, yang concatemers khusus berisi pasang genom tersambung baik kepala atau ekor.Poxvirus ini

Virus-Virus Yang Digunakan Sebagai Vektor Pada Terapi Gen

berasal dari family poxviridae, merupakan penyakit penyebab cacar. Biasanya terjadi infeksi pada kulit.

virus ini menyebar dari orang ke orang dengan menyentuh kulit yang terkena. Virus ini juga dapat menyebar dengan menyentuh permukaan dengan virus di atasnya, seperti handuk, pakaian, atau mainan. Setelah seseorang memiliki virus, benjolan dapat menyebar ke bagian lain dari tubuh mereka dengan menyentuh atau menggaruk benjolan dan kemudian menyentuh bagian lain dari tubuh.Siklus hidup poxvirus rumit dengan memiliki bentuk infeksi ganda, dengan mekanisme yang berbeda dan masuk ke sel.

Poxvirus adalah unik di antara virus DNA dalam bahwa mereka bereplikasi dalam sitoplasma sel bukan di inti. Untuk mereplikasi, poxvirus menghasilkan berbagai protein khusus yang tidak diproduksi oleh virus DNA lainnya, yang paling penting yang merupakan virus terkait DNA-dependent RNA polimerase.Kedua virion menyelimuti dan unenveloped yang menular. Virus ini terbuat dari membran Golgi dimodifikasi mengandung virus-spesifik polipeptida, termasuk hemaglutinin. Infeksi dengan baik variola besar atau variola minor menciptakan kekebalan terhadap yang lain.