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Universidad Particular de Chiclayo

Facultad de Medicina
Escuela profesional de Medicina Humana Departamento Acadmico de Ciencias Bsicas

Asignatura: Tema:

Fisiologa

Responsables:

Prez Surez Ruth Mery Quirz Vega Misshell Vsquez Altamirano Hayde

Docente:

Dr. Jorge Seminario Valle

Chiclayo, 31 de Octubre del 2008.

NDICE

Pruebas para el Diagnstico del Embarazo Introduccin.. .3 I. Capitulo I... .....................4 1. Planteamiento del problema.............................. 5 1.1. Formulacin del problema........5 1.2. Justificacin del problema....5 1.3. Objetivos...................6 1.3.1. General....6 1.3.2. Especficos..6 II. Capitulo ..7 2.1. Marco terico.8 2.2. ....21 III. Capitulo III......................22 3. Metodologa de la investigacin....23 3.1. Tipo de investigacin......................23 3.2. Universo y muestra.. ...........23 3.3. Mtodo, tcnica e instrumento de muestra..23 3.4. Procedimiento...24 IV. Capitulo IV............28 4.1. Resultados e interpretaciones..29 4.2. Cuestionario 30 V. Capitulo 35 5. Conclusiones.36 Medicina Humana Fisiologa V.. Hiptesis.. II..

Pruebas para el Diagnstico del Embarazo

VI. Referencias Bibliogrficas........38 VII. Anexos 39

INTRODUCCIN
Para el diagnostico del embarazo, de ha ideado varias pruebas de laboratorio. Dichas pruebas pueden clasificarse en los siguientes grupos:

Pruebas biolgicas, que emplean un animal de laboratorio en el cual se ensayan los efectos de la gonadotropina corinica elaborada por la placenta y que se encuentran en el suero u orina de la gestante; dentro de ella se encuentra la prueba de GalliMainini, emplea sapos machos.

Pruebas inmunolgicas, que empleando el principio antgenoanticuerpo, trata de detectar la gonadotropina corinica existente en el suero o en la orina; dentro de ellas tenemos el Pregnosticn lanolest, Gravindex, Preslaid.

Pruebas bioqumicas, que detectan el pregnadiol urinario; dentro de ellas la prueba de M.Schloer utiliza la tintura de yodo como reactivo fundamental.

En la presente prctica realizaremos la prueba de Galli-Mainini y la prueba de M.Schloer. La prueba de Galli Mainini que se basa en la espermatorrea producida en el sapo macho por la HCG. Esta prueba, bien realizada da una positividad hasta del 98%, sin embargo, para su correcta interpretacin, debe tenerse en cuenta que los niveles urinarios de gonadotropina corinica varan durante el tiempo de gestacin.

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La prueba de M.Schloer, que determina la presencia de pregnadiol urinario; agregando yodo a la orina, y sometindola a fuego.

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CAPITULO I

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA


1.1.

FORMULACIN DEL PROBLEMA: Cmo determinar la presencia de HCG y pregnadiol en orina, utilizando un animal (sapo); y de una sustancia qumica?

1.2.

JUSTIFICACIN DEL PROBLEMA:

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Este experimento tiene como finalidad aplicar la teora recibida en clase; y conocer los mtodos que permiten detectar el. Como sabemos anteriormente reutilizaron diversos mtodos basados en encontrar hormonas no frecuentes en una mujer no embarazada. Es fcil averiguar por qu los mtodos qumicos acabaron por desplazar a los biolgicos. No necesitan de animales de laboratorio y, puesto que se trabaja nicamente con factores humanos, se disminuye el nmero de posibles interferencias. Los modernos mtodos bioqumicos se basan en la deteccin de la fraccin beta de la hormona gonadotropina corinica en la orina, que solamente se excreta con ella en el perodo gestacional. El empleo de los anuros para el diagnstico del embarazo mediante la provocacin de la espermatognesis por la inyeccin de hormonas gonadogropas existentes en la orina de embarazadas fue propuesto por Galli-Mainini en 1947. Numerossimos trabajos siguieron a ste en todo el mundo, siempre utilizando sapos. El fundamento de la tcnica es tan sencillo como divertido. La reaccin est basada en la rpida respuesta eyaculadora conseguida en el animal por la accin directa sobre la gnada de la hormona gonadotropina corinica (HCG) presente en la orina de la gestante.
1.3.

OBJETIVOS:

1.3.1. Objetivo General:

Explicar el proceso como determinar del embarazo con pruebas existentes de Galli-Mainini y M.Schloer .

1.3.2. Objetivo Especficos:

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Pruebas para el Diagnstico del Embarazo Entender los mtodos de Galli-Mainini y M.Schloer en la

determinacin del embarazo. Comparar los resultados obtenidos entre la muestra de orina una mujer no embarazada y una gestante. Identificar por que ocurren los cambios de color en la orina de una gestante, en comparacin a la de la orina de una mujer no embarazada. identificar la importancia clnica de la HGC. Conocer la funcin de la hormona gonadotropina corionica humana HGC.

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CAPTULO II 2. MARCO TEORICO:


Los aos de funcin reproductiva de la mujer se caracterizan por cambios rtmicos en las tazas de secrecin de las Hormonas Femeninas y cambios correspondientes en los rganos sexuales. Las funciones sexuales y reproductivas en la mujer pueden dividirse en dos fases
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principales; primera: la Preparacin del Cuerpo para la Concepcin y la Segunda: el Periodo de Gestacin o Embarazo. Durante el Periodo de Gestacin en la mujer se producen grandes cantidades de estas hormonas: Gonadotropina Corinica Humana, Estrgenos, Progesterona, y Somatomamotropina Corinica, ya que sus niveles son esenciales para la supervisin del Embarazo. Una funcin principal de la Gonadotropina Corinica Humana (GCH) es administrar los factores nutricionales y estimular cantidades necesarias de otras hormonas para mantener en ptimas condiciones el endometrio y la cavidad uterina, lo que en caso contrario de no haber concepcin o cantidad insuficiente de esta hormona se perdera en forma de lquido menstrual. La Hormona Gonadotropina Corinica Humana (GCH) tambin tiene otras aplicaciones diagnsticas aparte del monitoreo del periodo de gestacin y sus consecuencias despus de ste; tambin se utiliza cmo un marcador tumoral en diferentes padecimientos Neoplsicos en la mujer y en el hombre. Existen diferentes mtodos cuantitativos de laboratorio para determinar la presencia y niveles de sta hormona ya que con los aos se han actualizado y purificado para el estudio, valoracin y diferenciacin de diversos diagnsticos. Definitivamente el patrn de estudio de esta hormona es de gran importancia, ya que nos proporciona aspectos clnicos importantes durante las diferentes etapas de la naturaleza del hombre y de la mujer. Una funcin principal de la Gonadotropina Corinica Humana (GCH) es administrar los factores nutricionales y estimular cantidades necesarias de otras hormonas. Es una hormona que se sintetiza en el cerebro manifestando diferentes funciones en la mujer y en el hombre. Se produce por clulas Trofoblsticasen las mujeres embarazadas, estimula
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la maduracin del vulo y en los hombres la produccin de testosterona en los testculos. Una de las funciones ms importante es la de prevenir la involucin normal del cuerpo lteo al final del ciclo sexual femenino, este cuerpo lteo aparte de secretar esta hormona secreta tambin progesterona y estrgenos. Todos los tratamientos con G.C.H. en hombres y mujeres deben de ser supervisados por el mdico especialista para evitar posibles interacciones. Existen dos formas de valorar la presencia de G.C.H. en el laboratorio: en sangre y en orina. HORMONA GONADOTROPINA CORINICA HUMANA Es una hormona que se sintetiza en el cerebro manifestando diferentes funciones en la mujer y en el hombre. Se produce por clulas Trofoblsticas en las mujeres embarazadas, estimula la maduracin del vulo y en los hombres la produccin de testosterona en los testculos. Las clulas Trofoblsticas son las que darn origen a la placenta, siendo stas las que se formarn inmediatamente despus de la fecundacino la formacin de ciertos procesos tumorales en el hombre y en la mujer. ACCIONES DE GNRH SOBRE LA HIPFISIS ANTERIOR

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Dado que laGnRH juega un papel tan vital en la secrecin de gonadotropinas, se han desarrollado varias sustancias que simulan o inhiben su accin:

Agonistas de GnRH: un medicamento que tiene una afinidad por los receptores celulares normalmente estimulados por la GnRH natural y estimula su actividad fisiolgica.

Anlogos de GnRH: un compuesto qumico con una estructura similar a la de la GnRH, pero que difiere de ella con respecto a cierto componente. Puede tener una accin metablica similar u opuesta.

Antagonistas de GnRH: una sustancia que tiende a anular o cancelar la accin de GnRH, como un medicamento que se une a un receptor celular sin provocar una respuesta biolgica.

La velocidad y amplitud especficas de la secrecin de GnRH es la clave para el control del ciclo reproductivo femenino que lleva a la maduracin de un vulo mes a mes. En el hombre, la FSH y LH liberadas de la hipfisis anterior en respuesta a la estimulacin con GnRH juegan un papel fundamental en la espermatognesis. CONFOMACIN QUMICA Es una glucoprotena, en su estructura contiene aproximadamente 30% de carbohidratos; formada por dos cadenas alfa y beta con un peso molecular de 36,700 daltons, su punto isoelctrico es de 4.5, vale la pena mencionar que su subunidad o cadena alfa (14,500 daltons y 92
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aminocidos) es igual a la de otras hormonas del mismo gnero de origen glicoproteco como son la LH, FSH, y TSH, de lo contrario su subunidad o cadena beta (22,200 daltons y 145 aminocidos) es especfica de esta hormona ya que contiene 30 aminocidos adicionales en la secuencia de su carbono terminal, ricos en prolina. FUNCIN: Una de las funciones ms importante es la de prevenir la involucin normal del cuerpo lteo al final del ciclo sexual femenino, este cuerpo lteo aparte de secretar esta hormona secreta tambin progesterona y estrgenos. El aumento de G.C.H., da lugar a que el endometrio continu su crecimiento y almacene grandes cantidades de nutrientes adicionales en lugar de perderlos en forma de liquido menstrual. Si desaparece el cuerpo lteo antes de la sptima a onceava semana de embarazo se presenta un aborto espontneo, despus de este tiempo la placenta secreta cantidades suficientes para mantener la gestacin. La importancia de conocer la cantidad de G.C.H. junto con los datos clnicos de la paciente, nos permite valorar si el periodo de gestacin evoluciona normal o anormalmente. A continuacin se mencionan las anormalidades relacionadas con el periodo de gestacin: a. Embarazo ectpico.
b. Evaluacin de peligro de aborto.

c. Evaluacin de los tumores trofoblsticos (mola hidatidiforme, coriocarcinoma) d. Evaluacin de tumores testiculares. e. Produccin ectpica de G.C.H. en tumores no trofoblsticos. Otra de las funciones de la G.C.H. es el efecto estimulante sobre las clulas intersticiales en los testculos lo que trae como consecuencia que los fetos masculinos produzcan testosterona; esta pequea cantidad de secrecin de testosterona durante el embarazo es determinante para
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que el feto desarrolle rganos sexuales masculinos. La testosterona que secretan los testculos fetales ocasionan que desciendan hacia el escroto al final del periodo de gestacin. Otra funcin es su utilidad como marcador tumoral, nos permite monitorear procesos neoplsicos antes y despus del tratamiento. En la mola hidatidiforme y en el corio-carcinoma los valores de G.C.H. son estratgicamente altos desde la primera semana de aparicin, por lo que no se puede confundir con el embarazo. En la mayora de las neoplasias testiculares tambin se presentan valores de G.C.H. altos, los pacientes con tumores de clulas germinales tienen como resultado la infertilidad. Estas neoplasias afectan a personas jvenes por lo que es importante evaluar su fertilidad antes de cualquier tratamiento o quimioterapia para eliminar el tumor. Otra funcin es en el tratamiento de infertilidad en hombres y mujeres. Existen formas comerciales de ampolletas inyectables de G.C.H., la dosis es diferente para cada paciente, normalmente se administra en combinacin con otras hormonas como la F.S.H. En la mujer en caso de que no haya respuesta del ovario para producir ovulacin se administra este tratamiento hasta por varios ciclos. Tambin se administra en el hombre para estimular la formacin de espermatozoides. TRATAMIENTO CON GCH, Y REACCIONES ADVERSAS: Todos los tratamientos con G.C.H. en hombres y mujeres deben de ser supervisados generalmente por el mdico especialista las para evitar posibles interacciones. Las reacciones adversas a este medicamento son infrecuentes, destacan siguientes: irritabilidad, depresin, dolor de cabeza, retencin de lquidos, desarrollo mamario en hombres, desarrollo sexual precoz en nios, erupciones en la piel y otros efectos adversos. No se recomienda el uso de este medicamento en mujeres embarazadas y en periodos de lactancia. Los embarazos que se
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producen como consecuencia del tratamiento de G.C.H. tienen mas riesgo de aborto y de ser embarazos mltiples. IMPORTANCIA DE SU CUANTIFICACIN EN SANGRE: El monitoreo de G.C.H. se realiza en los siguientes padecimientos Periodo de gestacin o embarazo: valora la etapa y si existe algn riesgo para tratarlo oportunamente, como en el caso de los embarazos ectpicos. En caso de eclampsia y pre-eclampsia: donde se a demostrado un incremento importante en sus valores, lo que refleja el estado placentario. En evaluacin de tumores como marcador tumoral: dnde al inicio del mismo y durante la presencia de ste se observan valores muy altos, despus del tratamiento o despus de la ciruga el mdico monitorea los valores dnde deben de disminuir cmo indicativo del xito del mismo, como en el caso de la mola hidatidiforme. En la valoracin dentro del tamiz metablico en el recin nacido, cmo marcador bioqumico, dnde su presencia y aumento refleja enfermedades autosmicas fetales, dnde tambin implica la valoracin de factores predisponentes cmo la edad, sexo, raza, antecedentes familiares y obsttricos. DETERMINACIN EN EL LABORATORIO: Existen dos formas de valorar la presencia de G.C.H. en el laboratorio: en sangre y en orina. Las pruebas rpidas de embarazo en orina se basan en la identificacin de G.C.H. pero no la cuantifican, adems pueden interferir la presencia de otras hormonas glucoprotecas cmo la LH, F.S.H. y T.S.H. con las cules tiene un gran parecido, especficamente con la L.H. Aunque la
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mayora de las pruebas tienen gran sensibilidad su especificidad s vara, por lo que se recomienda que la paciente se presente despus de 8 das de retraso de su periodo menstrual. La orina puede ser, cualquiera emitida durante el da, pero de preferencia la primera de la maana por su mayor concentracin. Las pruebas de embarazo en suero son mucho ms confiables, se basan en la identificacin de la porcin beta de la hormona la sensibilidad y especificidad son muy altas en este tipo de prueba. Las tcnicas de laboratorio implican gran variedad de metodologas basadas en, inmunoensayos, radioinmunoensayo y radio-receptor. Es importante saber que la efectividad de la prueba depende desde una buena toma de muestra a analizar. La paciente se debe presentar en ayuno o con un ayuno mnimo de 6 hrs, ya que la presencia de lipemia, hemlisis e ictericia afectan en resultado final de la determinacin. Tambin es de gran importancia mencionarle a la paciente que la toma de muestra no ser dolorosa y que la cantidad y extraccin de la muestra de sangre ser la necesaria para su estudio y que no le causar otras alteraciones. Se necesita tomar mnimo 5 ml. de sangre sin anticoagulante para obtener suero, una de las metodologas ms confiables en la actualidad, es el inmunoensayo enzimtico por micropartculas (M.E.I.A.), donde el control de calidad del procedimiento es muy especfico. METODOLOGA M.E.I.A.: Este inmunoensayo por micropartculas, es una determinacin

cualitativa y cuantitativa de la subunidad beta de la G.C.H. en suero o plasma humano. Su valoracin con esta metodologa es muy confiable para su monitoreo y la deteccin temprana de embarazo, lo que le permite al mdico valorar diagnsticos tempranos de malformaciones
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gestacionales o problemas propios del embarazo o de la mujer. Esta metodologaestablece controles estndar y de calibracin de acuerdo al lote de reactivos con el que se va a trabajar estableciendo un control de calidad ptimo para la realizacin de la prueba. PRINCIPIOS BIOLGICOS DEL PROCEDIMIENTO: Anti- beta-hCG conjugado con micropartculas marcadas con fosfatasa alcalina. Muestra. Micropartculas recubiertas de anticuerpos contra la sustancia a analizar. Complejo anticuerpo-antgeno-anticuerpo. Fosfato de 4-metilumbeliferona-p (M.U.P.) Complejo anticuerpo-antgeno-anticuerpo. Emisin de fluorescencia (se mide la taza de produccin de MUP ante la presencia del complejo anticuerpo-antgeno-anticuerpo). Para ver el grafico seleccione la opcin "Descargar" del men superior Los valores esperados para este procedimiento en el periodo de gestacin son los siguientes:

SEMANAS DE EMBARAZO 3 4 45 5 -6 67 7 12

RANGO mIU/ml. 9 -130 75 2,600 850 20,800 4,000 100,200 11,500 289,000

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12 16 16 29 29 41

18,300 137,000 1,400 53,000 940 60,000

Los mtodos precoces son los que permiten detectar el embarazo en sus primeros das y antes de su principal sntoma, la suspensin de la menstruacin o amenorrea. A lo largo del tiempo se usaron diversos mtodos que hoy sabemos estaban basados en que cuando una mujer queda embarazada aparecen en su orina hormonas antes inexistentes. Los primeros mtodos usaron los efectos visibles que estas hormonas tienen sobre plantas y animales, llamados por esta razn mtodos biolgicos de deteccin de embarazos. A partir de la dcada de 1960 se desarrollaron mtodos de deteccin directa basados en que las reacciones inmunolgicos que producen estas hormonas pueden hacerse visibles usando antgenos especficos a ellas. Un papiro del Antiguo Egipto cuenta que para detectar el embarazo se haca orinar a la mujer durante varios das sobre semillas de trigo y cebada. Si despus de un tiempo germinaba la cebada, el hijo sera varn; si germinaba el trigo, sera mujer; si no germinaba ninguna semilla, la mujer no estaba embarazada (aparentemente el papiro no menciona cual era el diagnstico si germinaban ambas). Estudios hechos en 1963 mostraron que la orina de una mujer embarazada promova la germinacin el 70% de las veces, mientras que nunca lo haca la de las mujeres no embarazadas o los hombres. En 1928 los gineclogos alemanes Ascheim y Zondek desarrollaron el mtodo siguiente. Se inyectaban pequeas cantidades de orina en ratas hembras impberes, dos veces por da durante 3 das sucesivos. Al cabo
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de unas 100 horas sacrificaban las ratas e inspeccionaban sus ovarios. Si stos se hallaban engrosados, haba un 80% de probabilidad que la mujer estuviera embarazada. En 1930 Collip y colaboradores descubrieron que la orina de las embarazadas contena luego se descubri que eran en realidad fragmentos de sta la hormona gonadotropina corinica humana, actualmente denominada HCG por la sigla de su nombre en ingls Humana Chorionic Gonadotropin. En 1942, el citlogo argentino Eduardo de Robertis que en ese momento era Jefe de Trabajos Prcticos dedicacin exclusiva de la ctedra de Histologa de la Escuela de Medicina de la Universidad de Buenos Aires y Jefe de la Seccin de Citologa e Histofisiologia del Instituto de Anatoma General y Embriologa determin que la HCG acta sobre las clulas de Sertoli provocando la expulsin de espermatozoides en los sapos. Su condiscpulo Carlos Galli Mainini, mientras trabajaba en el Hospital Rivadavia de Buenos Aires entre 1942 y 1947, dedujo que si la mujer embarazada eliminaba HCG en la orina, su inyeccin en sapos causara la maduracin y expulsin de sus espermatozoides. Inyect orina de mujeres embarazadas en el saco linftico dorsal de sapos macho Bufo Arenarium; al cabo de 2 o 3 horas examin al microscopio su orina observando la presencia de espermatozoides. El mtodo, luego denominado Reaccin de Galli Mainini o Test de la rana, proporcion un modo eficaz y econmico de diagnstico precoz del embarazo y por ello se us masivamente en Argentina y Amrica Latina durante muchos aos. A juzgar por la falta de referencias en Internet, el mismo no tuvo difusin en Europa y Estados Unidos, donde aparentemente se usaron otros mtodos biolgicos hasta el desarrollo de los inmunolgicos algunas dcadas despus.
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Existen signos positivos, probables y presuntivos de embarazo, pero slo los positivos confirman con certeza la existencia de un embarazo. La determinacin de HCG es un mtodo presuntivo ya que puede ser positiva an en ausencia de embarazos. Sin embargo, de todos los mtodos disponibles en la actualidad es el que permite la deteccin ms temprana y es la base de los rpidos tests inmunolgicos actuales. PRUEBAS MODERNAS: La primera prueba "moderna" para el embarazo detecta la inhibicin del factor de preez temprana (EPF, por sus siglas en ingls). El EPF se puede detectar en la sangre en las 48 horas siguientes a la fertilizacin.1 Sin embargo, las pruebas del EPF son caras y toman mucho tiempo. La mayor parte de las pruebas qumicas buscan la presencia de la subunidad beta de la gonadotropina corinica humana (hCG) en la sangre o en la orina. El hCG se puede detectar en la orina o la sangre despus de la implantacin del producto en la matriz, que ocurre de seis a doce das despus de la fertilizacin.2 Los mtodos cuantitativos (suero beta) pueden detectar niveles de hCG tan pequeos como 1 mIU/mL, mientras que las puebas de orina requieren de 20 a 100 mIU/mL, dependiendo de la marca.3 Las pruebas cualitativas de sangre generalmente tienen un umbral de 25 mIU/mL, as que tienen menor sensibilidad que algunas pruebas de orina caseras. Con ultrasonido obsttrico, el saco gestacional puede algunas veces visualizarse tan temprano como a las cuatro y media semanas de gestacin (aproximadamente dos semanas y media despus de la ovulacin) y el "saco de yema" (en ingls, yolk sac) unas cinco semanas despus de la gestacin. El embrin puede ser observado y medido a las 5 semanas y media. El latido del corazn puede ser detectado a las 7

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semanas de gestacin, y en ocasiones se ha observado desde las 6 semanas. INFLUENCIA DEL TIEMPO EN LAS PRUEBAS DE EMBARAZO: Lecturas negativas falsas (es decir, que indican que no hay embarazo cuando realmente s lo hay) pueden ocurrir cuando la prueba se aplica muy temprano. Las pruebas cuantitativas de sangre y las ms sensibles pruebas de orina normalmente detectan el hCG poco despus de la implantacin, que puede ocurrir en cualquier momento entre 6 y 12 das despus de la ovulacin.2 Exmenes de orina menos sensibles y pruebas cualitativas de sangre pueden no detectar el embarazo hasta tres o cuatro das despus de la implantacin. La menstruacin ocurre en promedio 14 das despus de la ovulacin, as que la probabilidad de un resultado negativo falso es muy baja una vez que el periodo menstrual se ha atrasado. Sin embargo, la ovulacin puede no ocurrir regularmente (es decir, en un momento predecible) en el ciclo menstrual. Hay varios factores que pueden ocasionar una ovulacin temprana o tarda, an en mujeres con una historia de ciclos menstruales regulares. El uso de equipos predictores de ovulacin (OPK, por sus siglas en ingls), o llevar un registro de los signos de fertilidad de la mucosidad cervical o de la temperatura basal del cuerpo pueden dar una idea ms precisa de cundo se debe hacer la prueba que la simple cuenta de los das. La precisin de una prueba de embarazo est ms relacionada al da de ovulacin que al da en que ocurre la relacin sexual. Es normal que el esperma viva hasta cinco das despus del coito6 en las trompas de falopio, esperando a que ocurra la ovulacin.7 Puede tomar hasta doce das ms que ocurra la implantacin y otros tres o cuatro das para que los niveles de hCG sean detectables - lo que significa que se pueden

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obtener resultados negativos falsos hasta tres semanas despus del acto sexual que caus el embarazo.

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Pruebas para el Diagnstico del Embarazo 2.1

HIPOTESIS:

La funcin de la placenta es ser el medio de comunicacin entre los vasos sanguneos de la madre y los del feto, para proporcionar anticuerpos de la madre, respiracin (oxigeno), secrecin de hormonas, nutricin (vitaminas, aminocidos, azcares, agua, lpidos, sales minerales, etc.). Tambin tiene una funcin de retorno, para que el feto pueda eliminar sus desechos. Las hormonas principales hormonas que produce la placenta son la Gonadotrofina corinica (HCG) que mantiene la gestacin las primeras 13 a 14 semanas, la Lactgeno placentaria que genera informacin para la produccin de leche materna y aparece a las 8 a 9 semanas de gestacin, la Progesterona para mantener la gestacin en suspenso mientras se genera el parto y el Estrgeno que es el encargado de desencadenar el parto.

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CAPITULO III
3.

METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN:
3.1. TIPO DE INVESTIGACIN:

Experimental 3.2. UNIVERSO Y MUESTRA:

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Universo: Sapo, mujer gestante y mujer joven Muestra: Orina

3.3. MTODO, TCNICA E INSTRUMENTO DE MUESTRA


a. Materiales:

Orina de una mujer gestante Material Jaula de vidrio: pipetas, de portaobjetos,, etc. para aislamiento animales. Microscopio Animal de experimentacin: sapos machos adultos de ms de 100 gr. de peso corporal, bien hidratados, mantenido aislados por lo menos 24 horas antes de la prueba


3.4

Yodo Mechero

PROCEDIMIENTO: Parte 1: TEST DE GALLI - MAININI

1) Primero filtramos las orinas, la orina problema y la orina normal.

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2) Luego extraemos con una jeringa de 5 ml la orina.

3) Antes de proceder a cualquier inyeccin se debe examinar la orina de estos sapos para ver si existen espermatozoides.

4) Introducimos una pipeta pequea en la cloaca, entrando la orina

en esta.

5) Luego del sapo lamina.

llevamos la orina hacia una

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6) Luego observamos en el microscopio y hay registro de algn espermatozoide.

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7) Inyectamos 5 c.c de la muestra en el saco linftico ventral del sapo.

8) Luego esperamos por 20 min. Para obtener la muestra de orina del sapo.

9) Obtenemos la muestra de orina del sapo buscamos en el microscopio los espermatozoides.

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Pruebas para el Diagnstico del Embarazo Parte 2: TCNICA DE M. SCHLOER

1) Luego colocamos en un tubo de ensayo 6 c.c de orina una orina

normal y la otra orina problema.

2)

Le

agregamos 2 gotas de Lugol y las calentamos estas orinas hasta la ebullicin la de no embarazada y la orina problema. No tamos el resultado de las dos orinas.

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4.

RESULTADO :

Al agregar 2 gotas de yodo a los tubos uno con la orina de la gestante y otro con la orina de la alumna; y al ser ambos sometidos a fuego; se observarn diferencias, la orina problema torna un color canela; ya que la orina que se obtuvo de la gestante, contiene pregnadiol.

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4.1

CUESTIONARIO:
1. Qu tcnicas se utilizo para determinar gonadotropina corinica humana?

En 1928 los gineclogos alemanes Aschheim y Zondek desarrollaron el primer bioensayo fiable para la determinacin de la HGC, mtodo siguiente. Se inyectaban pequeas cantidades de orina en ratas hembras impberes, dos veces por da durante 4 das sucesivos y finalmente se sacrificaban las ratas e inspeccionaban sus ovarios. Si stos se hallaban engrosados, haba un 80% de probabilidad que la mujer estuviera embarazada. En 1931 Friedman redujo el tiempo de 4 das a 48 h en su prueba de inyeccin intravenosa de orina a conejas hembras, examinando sus ovarios en busca del cuerpo amarillo y folculos hemorrgicos. En 1934 Bellerby describi una prueba en sapos hembras de Sudfrica, Xenopus lavis, a las que inyectaba orina de la paciente y se buscaba depsito de huevos 24h despus. En 1941 Frank y Perman describieron una prueba ms sencilla y especfica basada en la hiperemia de los ovarios de la rata, alas que previamente inyectaban dos dosis de orina o suero, las cuales eran sacrificadas con monxido de carbono, se requera experiencia considerable para valorar la hiperemia ovrica resultante. En 1948 Galli Mainini describi la utilizacin del sapo macho bufo arenarum, mientras que Wiltberger y Millar comunicaron resultados similares con la rata macho Rana pipiens. Esos animales liberaban espermatozoides 4 a 6 h despus de recibir una inyeccin de HGC. En todos los bioensayos existen muchos factores que reducen su

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sensibilidad por lo que pueden dar resultados falsos negativos o positivos. Las pruebas inmunolgicas para el embarazo que se basan en la deteccin de HGC sustituyeron ampliamente los bioensayos para el uso clnico habitual. En 1960 Wide y Gemzell introdujeron la primera prueba inmunolgica para la HGC con base en inhibicin de la hemaglutinacin. En 1962 Robbins y colaboradores describieron una prueba de

aglutinacin de partculas de ltex. En fechas mas recientes aparecieron los radioinmunoensayos. Para el diagnstico del embarazo se ha ideado pruebas de laboratorio que se clasifican en: A. Pruebas Biolgicas, que emplean un animal de laboratorio en el cual se ensayan los efectos de la HGC elaborada por la placenta y que se encuentran presentes en el suero u orina de la gestante, dentro de ellas: prueba de Galli Mainini, emplea sapos machos, la prueba de Ascheim Zondeck emplea un ratn B. Pruebas hembra, la prueba de Friedman emplea que emplean el principio una coneja ya antes explicados detalladamente. Inmunolgicas, antgeno anticuerpo, trata de detectar la HGC existente en el suero u orina. dentro de ellas tenemos el Pregnosticn, Lanostest, Gravindex, Preslaid. C. Pruebas Bioqumicas, que detectan el pregnadiol urinario. Dentro de ellas, la prueba de M. Schloer utiliza la tintura de yodo como reactivo fundamental.

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Pruebas para el Diagnstico del Embarazo 2. Describa las diferencias entre radioinmunoanlisis (RIA) y

el ensayo inmunorradiomtrico (IRMA)? El radioinmunoanlisis (RIA) consiste en una tcnica de laboratorio de anlisis clnico. Usa istopos radioactivos, es in vitro, es decir, se extrae la sangre del paciente y es analizada para ver sustancias. Es una tcnica que nace en los aos 60-70, propiciando un gran avance de la endocrinologa. Es una tcnica muy sensible, mide pequeas cantidades de sangre. Cualquier sustancia del organismo puede ser considerada un antgeno. Los anticuerpos que se transforman sirven para medir la cantidad de hormonas que hay en el organismo. As se miden: Hormonas peptdicas: T3, T4, TSH, GH...Casi todas las hormonas hipofisarias. Hormonas no peptdicas: Estrgenos, testosterona...Hormonas sexuales. Sustancias no hormonales que pueden considerarse como antgenos: Marcadores tumorales digoxina, medicamentos. Se ha podido desarrollar un anticuerpo a la subunidad beta que por radioinmunoensayo, puede diferenciar la HCG de la LH, lo que es til en el diagnstico precoz del embarazo (se detecta 9 das despus de la implantacin), en el embarazo etpico y el seguimiento de la enfermedad del trofoblasto. Este inmunoensayo por micropartculas, es una determinacin

cualitativa y cuantitativa de la subunidad beta de la HGC. en suero o plasma humano. Su valoracin con esta metodologa es muy confiable para su monitoreo y la deteccin temprana de embarazo, lo que le permite al mdico valorar diagnsticos tempranos de malformaciones gestacionales o problemas propios del embarazo o de la mujer. Esta
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metodologa establece controles estndar y de calibracin de acuerdo al lote de reactivos con el que se va a trabajar estableciendo un control de calidad ptimo para la realizacin de la prueba.

3. Describa el perfil de secrecin de la HGC y estrgenos durante el embarazo? Durante el ciclo ovrico normal la menstruacin suele ocurrir 14 das despus de la ovulacin, cuando la mayor parte del endometrio secretor del tero se desprende de la pared uterina y es expulsado al exterior. Sin embargo, en el momento de la invasin trofoblstica del endometrio por parte del blastocisto lquidos en desarrollo las clulas trofoblsticas sincitiales secretan la hormona Gonadotropina Corinica (HGC) en los maternos, la cual evita que ocurra el desprendimiento endometrial que terminara con el embarazo. Esta hormona finalmente se elimina a travs de los riones por la orina. La HGC comienza a identificarse 8 das despus de la ovulacin, justo cuando el huevo se implanta en el endometrio. Despus, el ritmo de secrecin aumenta con rapidez para alcanzar su mximo al cabo de 10 a 12 semanas tras la concepcin. Por la influencia de la HGC el cuerpo amarillo alcanza unas dos veces su tamao inicial en alrededor de un mes despus del inicio del embarazo. Conforme la produccin de estrgenos y progesterona por la placenta aumenta durante el segundo trimestre, los niveles de HGC descienden y alcanzan un valor relativamente bajo a las 16 a 20 semanas.
La secrecin de HGC es estimulada por pulsos de genoliberina (GnRH) exgena

unas .

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4. Con que otras hormonas comparte la subunidad alfa la HGC? La HGC es una glucoprotena producida por las clulas trofoblsticas. Las subunidades alfa no son especficas sino compartidas con las de la hormona luteinizante (LH), la hormona estimulante del folculo (FSH) y la hormona estimulante de la tiroides (TSH). La funcin ms importante de la HGC es evitar la involucin normal del cuerpo amarillo al final del ciclo sexual femenino y en su lugar estimular una secrecin aun mayor de las hormonas usuales, progesterona y estrgenos.

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5. CONCLUSIONES:

La Gonadotropina Corinica Humana (hCG) es la "hormona propia


del embarazo", encargada de luego mantener de al cuerpo lteo la produciendo progesterona haberse logrado

concepcin. Los niveles de esta hormona en particular presentes en la orina de las mujeres son medidos y analizados por la mayora de las pruebas de embarazo caseras, a fin de determinar si la mujer que se estuviera realizando dicha prueba estara embarazada o no

Con el embarazo, los niveles de la hormona hCG podran


duplicarse cada dos o tres das. Sin embargo, a algunas mujeres se les debe inyectar dicha hormona a fin de provocar la ovulacin o para poder extender la fase ltea de su ciclo menstrual; siendo caracterstico que en dichos casos, pequeos rastros o indicios de esta hormona podran permanecer en su sistema por un perodo aproximado de diez das, los cuales podran dar lugar a que si usted se hubiera realizado una prueba de embarazo dentro de ese perodo de tiempo; la misma podra arrojar un falso resultado positivo. Las mujeres embarazadas normalmente logran concentraciones en el suero que pueden oscilar entre los 10 y los 50 mIU/ml en la semana posterior a la concepcin. Por otro lado, el nivel mximo de concentracin de dicha hormona se presentara entre el segundo y el tercer mes de embarazo, seguido de un descenso del mismo, el cual se producira durante el tercer trimestre.

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La importancia de conocer la cantidad de G.C.H. junto con los

datos clnicos de la paciente, nos permite valorar si el periodo de gestacin evoluciona normal o anormalmente.

Una de las funciones ms importante es la de prevenir la


involucin normal del cuerpo lteo al final del ciclo sexual femenino. El aumento de G.C.H., da lugar a que el endometrio continu su crecimiento y almacene grandes cantidades de nutrientes adicionales en lugar de perderlos en forma de liquido menstrual. La importancia de conocer la cantidad de G.C.H. junto con los datos clnicos de la paciente, nos permite valorar si el periodo de gestacin evoluciona normal o anormalmente.

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5.1 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

GUYTON A. HALL J; Tratado De Fisiologa Medica; 9na Editorial Interamericana Mcgraw -Hill; Ao 1998; Mxico;

Edicin;

GANONG W.; Fisiologa Medica; 16ava Edicin; Editorial Manual Moderno S.A.; Ao 1998; Mxico

BALCELLS A., SORIANO M.; La Clnica Y El Laboratorio; 9na Edicin; Editorial Marin S.A.; Ao 1973; Espaa;

Wyngaaden James Cecil Tratado de medicina interna.18 Edicin.

Editorial Mc Graw. 2005.

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http://www.enfemenino.com/__e1640-Diagnostico-de-embarazo.html

http://saludmujer.idoneos.com/index.php/Embarazo/Diagn %C3%B3stico_de_Embarazo (Acceso 25 de octubre del 2008)

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FASES DEL EMBARAZO

GRFICO 02:
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PRUEBAS INMUNOLGICAS PARA EL EMBARAZO

GRFICO 03:

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