Anda di halaman 1dari 8

Abstrak : Waktu kematian sangat sulit untuk dievaluasi pada banyak situasi ilmu forensik.

Kami mengembangkan sebuah model hewan untuk menilai

perkembangan kematian melalui evaluasi transmigrasi mikrobiota normal pada dinding usus kecil. Sebuah bagian dari usus kecil disendirikan dari pemenggalan leher tikus CF-1 (peternakan Carnsworth) dan disuspensi pada in vitro dalam gelas beker steril yang berisi larutan penyangga fospat. Transmigrasi bakteri dievaluasi dengan percobaan 3 hari dengan temperatur tertentu (4, 25, 37 C) dengan kultur mikrobiologi dan scanning electron microscopy (SEM). Bukti transmigrasi bakteri oleh SEM dalam 2 sampai 3 jam pada 37 C, 5 sampai 6 jam pada 25 C, dan 72 jam pada 4 C. Data analisis mikrobiologi menunjukkan sebuah perbedaan fluks dari pemilihan bakteri dan organisme mycotic. Spesies staphylococcal adalah organisme biakan pertama dari suspending saline. Organisme ini diketahui memiliki enzim protease yang memainkan peranan penting pada degradasi jaringan usus. Organisme tipe Coliform dan spesies candida ditemukan setelah waktu kematian. Gugus terakhir pada bakteri diidentifikasi pada variasi spesies anaerob. Model ini cocok pada situasi patologi forensik manusia. Sebuah penentuan ketepatan waktu kematian (Time of death, TOD) adalah percobaan yang digunakan pada banyak situasi kedokteran. Umumnya, tidak ada metode single membuat sebuah penentuan tepat saat ini. Waktu kematian adalah perhitungan tradisional dengan mengubah pemilihan pemeriksaan mayat (misalnya rigor mortis atau algor mortis) atau observasi kimia fisika. Seluruh pendekatan memiliki batas intrinsik dan harus dievaluasi dengan pemeliharaan.

Disini kami menunjukkan model hewan yang masih digunakan sebagai pendekatan lain untuk mengestimasi waktu kematian. Sistem ini adalah dasar dari transmigrasi pemeriksaan mayat pada mikrobiota endogenus melalui dinding usus kecil tikus. Pendekatan ini diharapkan akan memberikan aplikasi pada patologi forensik manusia.

Bahan dan Metode Persiapan Usus Usus kecil tikus dewasa CF-1 pembedahan reseksi setelah pemenggalan kepala dengan teknik aseptik yang ketat. Tiga bagian usus diisolasi dengan

pengikat. Salah satu ujung, resected 10-15 mm dari usus dua belas jari, ditempatkan segera dalam 50 mL glutaradehyde buffer dingin 2,5%. Pada

spesimen ini bertugas sebagai kontrol untuk menunjukkan pemeriksaan mayat pada jaringan tubuh. A 10-15 mm dari ujung usus digunakan

untuk kultur mikrobiologi dari isi luminal. Ujung-ujung dari usus sisanya dibakar dengan fenol dan disuspensi pada sebuah labu stcrile berisi 700 mL fospat garam buffer (Gambar 1) sesuai dengan metode Kellarman, dkk. Scanning Electron Microscopy Jaringan tubuh yang telah selesai untuk scanning electron microscopy (SEM) didehidrasi dalam etanol diperlakukan dengan amil asetat. Dan mengalami titik kritis pengeringan dalam Markus Aminco 40 (Amerika Instrumen.co). Cuplikan kering dipasang berkala, dilapisi dengan emas 20 nm dan diamati dengan Stereoscan Cambridge (Markus 2-A) mikroskop elektron dioperasikan pada 20 kV.

Gambar 1. Persiapan usus tikus Model Eksperimen Serangkaian persiapan usus ini diinkubasi pada 4, 25, 37 C menghasilkan model pemeriksaan mayat pada transmigrasi bakteri. Dalam satu set percobaan, setelah proses inkubasi, topografi usus merosot. Pemeriksaan ini dikondisikan pada 72 jam dengan menggunakan jaringan usus yang bebas dari garam (Gambar 1). Perobaan kedua mengevaluasi transmigrasi mikrobiota normal menjadi garam fisiologis dari persiapan usus. Aerobik, mikotik, dan anerobik yang dihasilkan dari metode standar dari perobaan yang sama.

Hasil dan Pembahasan Transmigrasi mikroorganisme pemeriksaan mayat pada permukaan terluar dari penyusunan usus dalam contoh kami ditemukan tergantung waktu dan temperatur. Mikroba pertama mulai muncul di permukaan usus dalam waktu 2 sampai 3 jam setelah kematian sampel pada 37 C, 5 sampai 6 jam pada 25 C, dan 72 jam pada suhu 4 C. Bagian rinci oleh spesies diberikan dalam tabel 1. Dengan SEM, bakteri transmigrasi tampaknya dikaitkan dengan rangkaian

perubahan permukaan. Perubahan permukaan yang konsisten untuk suhu berbagai uji dan dapat dikategorikan ke dalam tahap-tahap berikut : (1) Awal degenerasi dan hilangnya penutup serosa luar, (2) Paparan fokus yang mendasari jaringan ikat dan otot, (3) Pembentukan permukaan alur dengan penetrasi seiring dengan

mikroorganisme, dan (4) Adanya berbagai morfologi bakteri pada permukaan dengan disorganisasi ditandai pada struktur bawah permukaan (Gambar 2 sampai 4). Analisis mikrobiologi berkaitan erat dengan pengamatan SEM. Kehadiran mikroba pada permukaan usus dengan SEM selalu terkait dengan jaringan bakteriologis positif. Bakteri dan jamur yang ditemukan pada permukaan juga jaringan dari isi luminal. Tampaknya mengalir berbeda pada bakteri dan jamur ke dalam garam fisiologis (Tabel 1). Terlepas dari uji temperatur, bakteri koagulasepositif dari genus Staphylococcus selalu merupakan organisme pertama yang dideteksi pada rangkaian jaringan. Organisme dari genus ini dikenal untuk menguraikan berbagai protease kuat dan enzim kolagenase. Enzim ini memainkan peran penting dalam kekuatan degenerasi usus. Sebagai usus yang terdegenerasi lebih lanjut, ada perubahan bertahap untuk jaringan dengan organisme bakteri koliform sebagai flora dominan. Pada saat ini, hal itu juga memungkinkan untuk mendeteksi organisme mikotik, terutama spesies candida. Terakhir, ada campuran bakteri koliform dan organisme dianggap sebagai anaerob faculative.

Gambar 2. SEM, x6000. Tinggi perbesaran gambar permukaan bagian kontrol pada usus. Permukaan serosa masih utuh dan tidak ada bukti yang mendasari struktur fibrocollagen.

Gambar 3. SEM, x6000. Perbesaran tinggi dari permukaan usus 4 jam setelah kematian pada 25 C. Ada hilangnya penutup serosa dan membuka jaringan fibrocollagen.

Gambar 4. SEM, x6000. Perbesaran profil tinggi dari permukaan usus 20 jam setelah kematian pada 25 C. Gambar ini menunjukkan sekelompok bakteri bentuk morfologis yang sama terkait dengan alur. Matriks fibrocollagen tersebar dan sangat tidak teratur dalam referensi mengubah degeneratif sebelumnya.

Pengembangan metode yang dapat dipercaya bahwa dapat dengan tepat menilai waktu kematian banyak latar belakang tujuan untuk patologi forensik. Tentu saja, ketepatan waktu ini masih menjadi diluar kapabilitas ilmu kami. Ini adalah parameter yang harus dianalisa dan dikontrol dengan tepat. Suhu, kelembaban, angka pendinginan tubuh, sebelum ada penyakit, status kekebalan antemorterm, dan perhitungan faktor lain. Model kami berusaha untuk mengontrol beberapa variabel ini dengan pengaturan waktu kematian yang tepat, suhu persiapan usus, dan keadaan antemortem hewan percobaan. Hal itu adalah dasar perubahan hubungan ekologi antara kehidupan, endogenus mikrobiota dan kematian. Model demonstrasi ini bahwa ada rangkaian ramalan permiksaan menghasilkan transmigrasi pada kelas mikroorganisme melewati dinding usus. Pada laboratorium kami, sebuah analisis topografi permukaan dan keadaan bakteriologi pada usus dapat digunakan untuk estimasi waktu kematian pada sebuah mode. Bagaimanapun model ini dapat diaplikasikan pada patologi forensik manusia bahwa tergantung pada penelitian selanjutnya menggunakan bangkai manusia. Secara nyata, bagian luar topografi dan ekologi mikro usus kecil manusia berbeda dari tikus. Kerja oleh Kelleman, dkk, bagaimanapun, saran bahwa ada persamaan mode pemeriksaan mayat transmigrasi bakteri pada usus manusia. Pemeriksaan mayat pada permukaan usus manusia mungkin oleh karena itu dapat diprediksi sebuah analog mode pada model kami. Sistem ini mungkin juga membangkitkan kegunaan informasi pada korelasi antemortem-postmortem bakteriologi, evaluasi transplantasi organ dari bangkai, dan ilmu patologi-klinik tentu merupakan halangan (misalnya, intususpection atau volvulus) berakibat pada jaringan.

MAKALAH KIMIA FORENSIK

TRANSMIGRASI BAKTERI SEBAGAI INDIKATOR WAKTU KEMATIAN


DISUSUN OLEH : KELOMPOK IX

SHERLY (H311 09 273) NURUL WAHYUNINGSIH (H311 09 274) NURHAJRAH (H311 09 275) ISNANINGSIH (H311 09 276)

JURUSAN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS HASANUDDIN MAKASSAR 2012