Sintesis dan Aktivitas Antiplasmodium Senyawa 3-Furyl dan 3Thienylquinoxaline-2-carbonitrile 1,4-Di-N-oksida

Pendahuluan Malaria masih merupakan masalah kesehatan global, baik di negara-negara berkembang maupun negara maju. Usaha pemberantasan telah lama dilakukan namun hingga saat ini belum memberikan hasill seperti yang diharapkan. Bahkan malaria kini merupakan salah satu penyakit yang mengancam kembalii penduduk di seluruh dunia. Hal ini ditunjukkan oleh gejala meningkatnya wabah malaria pada akhir-akhir ini dii seluruh daerah endemik di dunia. Banyak faktor yang menjadi kendala dalam usaha pemberantasan malaria. Di antara faktor utama tersebut adalah timbulnya vektor malaria yang resisten terhadap insektisida dan parasit yang resisten terhadap antimalaria yang tersedia, utamanya antimalaria pilihan utama yaitu klorokuin. Faktor lain yang mempersulit kemoterapi malaria modern adalah galur Plasmodium (khususnya falciparum) yang resisten terhadap antimalaria telah dilaporkan di beberapa negara berkembang dan negara maju misalnya P.falciparum, P. vivax, dan P. falciparum resisten terhadap antimalaria klorokuin. Masalah resistensi ini telah menjadi masalah yang serius dan mengkawatirkan karena mengakibatkan terjadinya banyak kegagalan dalam pengobatan bahkan sampai menyebabkan kematian. Sintesis derivate 3-phenylquinoxaline-2-carbonitrile 1 ,4-di-N-oksida, dan dalam upaya untuk menetapkan persyaratan struktural untuk penghambatan P. falciparum, maka dilakukan sintesis senyawa baru dengan modifikasi struktur pada senyawa karbon (Gambar 1). Perubahan yang dilakukan adalah substitusi dari subunit fenil di posisi 3 oleh 2-furyl (seri A) atau 2-thienyl (seri B), berikut gambaran klasik bioisosteric pengganti digunakan dalam Obat Kimia, Untuk mengetahui pengaruh ukuran dan sifat aromatik cincin dalam posisi ini. Gambar 1. Desain derivatif baru sebagai obat antimalaria

Hasil dan Pembahasan Turunan quinoxaline yang paling poten secara in vitro adalah 3-(4'-klorofenil) quinoxaline-2-carbonitrile 1,4-di-N-oksida yang mengalami perubahan struktur. Penggantian benzena di posisi 3 dari subunit quinoxaline oleh heteroaromatic 5-2-furan atau cincin 2thiophene. Dua belas senyawa disintesis dan dievaluasi untuk aktivitas antimalaria terhadap Plasmodium falciparum. Perubahan quinoxaline 1 ,4-di-N-oksida 1-12 dievaluasi terhadap CQ (klorokuin) sensitif strain 3D7 dan hasilnya tercantum dalam Tabel 1. Senyawa tersebut dipilih untuk pengujian lebih lanjut jika nilai IC50 kurang dari 1 M saat diuji terhadap 3D7 strain. Diambil senyawa berikutnya kemudian diuji terhadap K1 resisten (CQ-resisten) dan cytotoxicities ditentukan dalam sel KB mamalia (Tabel 1). Tabel 1. Struktur, secara in vitro terhadap P. falciparum (strain 3D7 dan K1) dan sitotoksisitas pada KB sel mamalia.

a. Angka adalah suatu nilai IC50 mean (M) standar derivasi dari percobaan independen yang dilakukan masing-masing dengan tiga kali pengulangan. b. Tidak ada data c. Klorokuin digunakan sebagai obat standar. Penggantian biosterik dari subunit fenil dengan 5-cincin heteroaromatik, heteroatom tersebut dapat dilihat dari turunan 2-thienyl (seri B) menunjukkan sebuah IC50 <1 M, sedangkan dari turunan 2-furyl (seri A) menunjukkan nilai IC50 berkisar antara 0,49-0,93

M. Semua turunan yang diuji menunjukkan aktivitas yang superior terhadap galur K1, dibandingkan dengan klorokuin (IC50 (1-6) <IC50 (CQ)). Dengan ini, turunan 3 - (2'-furyl) quinoxaline-2-carbonitrile 1 ,4-di-N-oksida dijadikan senyawa baru untuk antimalaria yang poten. Aktivitas turunan ini dipengaruhi oleh substituen yang berbeda pada inti quinoxaline: dimana pada posisi R7, ada sebuah trifluoromethyl (5, 11) atau (metoksi 6, 12) merupakan dua senyawa yang paling baik. Derivatif 7-kloro 3, 9 menunjukkan efek kontras: sementara 3 derivatif furyl adalah senyawa yang paling poten melawan 3D7 dan yang kedua yang paling aktif terhadap K1, 9 turunan thienyl tidak aktif terhadap 3D7. Senyawa yang paling aktif terhadap P. falciparum (3, 5 dan 6 di seri A dan 11 dan 12 di seri B) juga sitotoksik pada sel KB, dengan nilai IC50 yang lebih rendah dari 4 M. Derivatif yang paling sitotoksik adalah 5, 11, yang termasuk kelompok CF3 di posisi R7 dari cincin quinoxaline, dan senyawa paling sitotoksik adalah 1 derivatif 3-furyl nonsubstituted dalam posisi R7. Seperti diamati pada Tabel 1, semua derivat 3-furyl menunjukkan kecenderungan mempunyai nilai-nilai IC50 yang lebih rendah terhadap K1 terhadap strain 3D7. Hasil yang paling baik diperoleh dari menghitung Indeks Perlawanan dan Selektivitas (RI dan SI) dari senyawa yang dipilih (IC50 <1 M), seperti digambarkan dalam Tabel 2. Sementara klorokuin menunjukkan IC50nya 50 kali lebih tinggi pada K1 di strain 3D7 (RI = 50), nilainya lebih rendah dari RI 1 untuk semua senyawa yang paling aktif (Tabel 2). Fakta ini menunjukkan rendahnya tingkat resistansi silang untuk CQ Tabel 2. Resistance indeks (RI) dan Selektivitas indeks (SI).

a. Indeks Perlawanan. dihitung sebagai (IC50 3D7) / (K1 IC50). b. Indeks Selektivitas b dihitung sebagai (KB IC50) / (P. falciparum IC50). c. Klorokuin digunakan sebagai obat standar

Berkenaan dengan selektivitas senyawa, nilai SI diperlukan untuk senyawa yang akan dipilih untuk in vivo . Empat dari derivatif diuji (1, 2, 3 dan 6) menunjukkan nilai SI resistensi K1, selain derivate 3 - (2'-furyl) , nonsubstituted diposisi R7, adalah senyawa yang paling selektif terhadap strain 3D7. Potensi, sitotoksisitas rendah dan selektivitas 3 - (2'-furyl) quinoxaline 1,4-di-N-oksida dapat diambil untuk sintesis senyawa baru yang mungkin memiliki aktivitas lebih baik. KESIMPULAN 1. Dua belas senyawa telah disintesis dan dievaluasi aktivitas antimalaria dari senyawa penuntun 3-phenylquinoxaline-2-carbonitrile 1 ,4-di-N-oksida. Delapan senyawa menunjukkan IC50 <1 M terhadap strain 3D7. 2. Derivat 1 menunjukkan potensi yang tinggi (IC50 = 0,63 M) dan selektivitas yang baik (SI = 10,3 5), sehingga menjadi senyawa penuntun baru. 3. Aktivitas antimalaria in vitro telah membuktikan bahwa 3 - (2'-furyl) quinoxaline-2carbonitrile 1,4-di-N-oksida derivat 1-6 merupakan senyawa antimalaria baru.