BioSMART ISSN: 1411-321X

Volume 5, Nomor 1 April 2003

Halaman: 61-64

Aktivitas Anticendawan Biji dan Buah Kapulaga Lokal (Amomum cardamomum

Willd.) terhadap Botrytis cinerea Pers. asal Buah Anggur (Vitis sp.)

Antifungal activity of seed and fruit of Javanese cardamoms (Amomum cardamomum Willd.) for
Botrytis cinerea Pers. from grape fruit (Vitis sp.)

IKA PRASASTY, SURANTO, RATNA SETYANINGSIH

Jurusan Biologi FMIPA Universitas Sebelas Maret Surakarta 57126

Diterima: 13 Agustus 2002. Disetujui: 1 Januari 2003

ABSTRACT

The aims of this research were, firstly to examine and compare the antifungal capability from the essential oil and crude extract of seed
and fruit Javanese cardamoms (Ammomum cardamomum Willd.) in preventing the growth of B. cinerea. which were isolated from grape
fruits (Vitis sp.), secondly to find the optimum concentration of the extracted Javanese cardamoms sample in preventing the growth of
the above species of fungi. The design of this research was completely randomized design with 3 factors used namely, part of the plant
(seed and fruit), extraction (essential oil and crude extract) and concentrations of essential oil and crude extract of A. cardamomum (0%;
1,5%; 3%; 4,5%; 6%). Besides, for examining the antifungal activities of essential oil and crude extract, the dilution method was used.
Briefly, this could be explain as follow: 1 ml suspension of B. cinerea. was grown in potato dextrose broth. Essential oil and crude
extract were added in concentration of 1,5%; 3%; 4,5%; 6% respectively and then incubated at 25oC for 2 days. The observation of total
colony was counted using counter plate. The data were analyzed using varian analysis and for the comparison of whether there were any
significant different among the antifungal testeds the DMRT 5% was employed. The results showed that essential oil and crude extract
of seed and fruit A. cardamomum were capable to prevent the growth of B. cinerea. at concentration 1,5%. Essential oil of seed at
concentration 4,5% and for essential oil of fruit at concentration 6% could stop the growth of B. cinerea. Crude extract of seed and fruit
did not capable to stop the growth of B. cinerea. until concentration of 6% was reached. Essential oil of seed more effective to prevent
the growth of B. cinerea. than the others (crude extract of seed, essential oil and crude extract of fruit).

Key words: A. cardamomum, essential oil , crude extract, B. cinerea.

PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara tropis yang banyak
menghasilkan buah. Meskipun demikian, buah produksi
Indonesia masih kalah bersaing dengan produksi luar
negeri di dalam ekspor karena kualitasnya yang rendah.
Kualitas buah yang rendah tersebut antara lain disebabkan
perawatan tanaman yang kurang baik sehingga terserang
hama atau penyakit. Menurut Martoredjo (1982), hama dan
penyakit dapat menurunkan produksi tanaman.
Salah satu tanaman buah populer adalah anggur (Vitis
sp). Buah anggur banyak dikenal dan digemari masyarakat
karena rasanya yang manis, serta bentuk dan warnanya
yang beragam, yaitu ungu, merah dan hijau. Meskipun
demikian, belum banyak masyarakat yang dapat menikmati
buah anggur segar karena harganya yang relatif mahal
dibandingkan dengan buah lain di pasaran misalnya nanas,
pepaya, mangga, dan pisang. Untuk memperoleh buah
segar dengan rasa manis dan penampilan yang menarik
perlu diperhatikan cara menanam, memelihara dan
merawat tanaman anggur agar terhindar dari penyakit.
Salah satu penyakit yang menyerang tanaman anggur di
seluruh dunia adalah penyakit busuk kelabu (gray rot).
Penyakit ini disebabkan oleh cendawan Botrytis cinerea
Pers. yang menyerang buah yang mulai masak. Buah yang
diserang akan mengkerut, busuk dan gugur sebelum
dipetik. Semua jenis anggur rentan terhadap penyakit ini.
Kerusakan dapat terjadi dengan busuknya buah di lahan
pertanian atau di gudang penyimpanan (Smith, 2000).
Pengendalian penyakit busuk kelabu dapat dilakukan
dengan mengurangi infeksi melalui penyemprotan
fungisida (Semangun, 1994; Setiadi, 2000). Meskipun
demikian, ternyata kebanyakan fungisida yang digunakan
untuk mengendalikan penyakit ini belum dapat bekerja
secara maksimal, sehingga masih banyak dijumpai buah
anggur yang rusak (Smith, 2000).
Kerusakan karena penyakit busuk kelabu dapat menu-
runkan produksi dan mutu buah, sehingga perlu diusahakan
pengendaliannya. Salah satu alternatif yang sedang
dikembangkan adalah penggunaan fungisida nabati, yakni
fungisida dari bahan alami utamanya tanaman. Menurut
Duryatmo (2000), fungisida nabati lebih ramah lingkungan
dan dampak terhadap lingkungan hampir tidak ada karena
dapat terurai. Tanaman yang diberi fungisida nabati bebas
dari residu bahan-bahan berbahaya. Menurut Supriadi dkk.
(1999) bahan alami tersebut antara lain ekstrak kasar dan
minyak atsiri tanaman. Guenther (1987) menyatakan bahwa
minyak atsiri berperan sebagai bakterisida dan fungisida.

© 2003 Jurusan Biologi FMIPA UNS Surakarta

62 BioSMART Vol. 5, No. 1, April 2003, hal. 60-63
Banyak jenis tanaman rempah yang mengandung
minyak atsiri, antara lain kapulaga lokal (Amomum
cardamomum Willd.) yang termasuk dalam famili
Zingiberaceae. Tanaman asli Indonesia ini belum banyak
diusahakan masyarakat secara komersial. Bagian tanaman
yang sering dimanfaatkan adalah bijinya. Menurut
Tjitrosoepomo (1994) biji kapulaga lokal mengandung 3-
7% minyak atsiri. Bagian tanaman lain yang dapat
dimanfaatkan menurut Heyne (1987) adalah buah yang
mengandung 4-6% minyak atsiri. Buah akan lebih cepat
diproses untuk menghasilkan minyak atsiri dibandingkan
dengan biji karena tidak perlu membuang kulit buahnya.
Nazaruddin (1993) mengungkapkan bahwa pengambilan
minyak atsiri dari kapulaga kurang dikenal di Indonesia.
Tujuan penelitian ini adalah untuk menguji kemampuan
anticendawan minyak atsiri biji dan buah kapulaga lokal
terhadap pertumbuhan cendawan B. cinerea yang diisolasi
dari buah anggur, menguji kemampuan anticendawan
ekstrak kasar biji dan buah kapulaga lokal terhadap
pertumbuhan B. cinerea yang diisolasi dari buah anggur
dan menemukan konsentrasi optimum minyak atsiri dan
ekstrak kasar biji dan buah kapulaga lokal untuk
menghambat dan atau menghentikan pertumbuhan B.
cinerea yang diisolasi dari buah anggur.
BAHAN DAN METODE
Bahan dan alat
Bahan yang digunakan adalah biji dan buah kapulaga
lokal dari Kebun Koleksi PT Jamu Air Mancur di Karang-
pandan, Karanganyar, isolat B. cinerea asal buah anggur
yang sakit, medium potato dextrosa agar (PDA), kentang,
sukrosa, agar, akuades, metanol, alkohol 70%, laktofenol,
kloramfenikol, alumunium foil, kapas, dan kertas saring.
Alat yang digunakan adalah tabung reaksi, gelas beker,
botol flakon, botol gelap, tabung efendorf, gelas ukur,
cawan petri, pipet tetes, pipet ukur, labu didih, labu
erlenmeyer, gelas benda, gelas penutup, jarum ose, jarum
preparat, pinset, pisau, mikropipet, tip, mikroskop, blender
elektrik, pemanas, bunsen, magnetic stirer, inkubator,
autoklaf, vortex mixer, colony counter, oven, kamera foto,
kamera mikrofotografi, seperangkat alat destilasi Stahl,
seperangkat alat kromatografi gas (Hewlett Pacard 5890
Series II, USA), seperangkat alat GC-MS (Shimadzu QP-
5000, Jepang).
Cara kerja
Pembuatan serbuk buah kapulaga. Buah kapulaga
segar yang cukup umur dicuci bersih, dan dikeringkan di
bawah sinar matahari tidak langsung dengan ditutup kain
selama 3 hari. Buah diblender menjadi serbuk dan disim-
pan dalam wadah tertutup untuk mengurangi penguapan
minyak atsiri. Serbuk akan digunakan untuk distilasi
minyak atsiri dan pembuatan ekstrak kasar (Setyawan,
1999; Supriadi dkk., 1999).
Pembuatan serbuk biji dan buah kapulaga. Buah
utuh dan buah yang telah dikeringkan dikupas kulitnya
sehingga diperoleh biji diblender secara terpisah menjadi
serbuk dan disimpan dalam wadah tertutup untuk
mengurangi penguapan minyak atsiri. Serbuk akan
digunakan untuk distilasi minyak atsiri dan pembuatan
ekstrak kasar (Setyawan, 1999; Supriadi dkk., 1999).
Distilasi minyak atsiri. Sebanyak 50 g serbuk ditam-
bah 100 ml pelarut metanol absolut dimasukkan dalam labu
didih dan dipanaskan selama 6 jam pada suhu 80oC. Hasil
distilasi ditampung dalam labu erlenmeyer. Minyak atsiri
yang tertampung dipisahkan dari pelarut dengan cara
dipanaskan pada suhu 80oC. Minyak atsiri yang diperoleh
disimpan dalam botol gelap, ditutup rapat dengan
alumunium foil dan disimpan pada suhu 4oC.
Pembuatan ekstrak kasar. Serbuk dari biji dan buah
kapulaga masing-masing dilarutkan dalam metanol (50 g
bahan/50 ml metanol), dikocok dan dibiarkan selama 24
jam. Ekstrak kasar kemudian disaring dan diambil
filtratnya (Supriadi dkk., 1999).
Isolasi B. cinerea. Isolat B. cinerea diambil dari buah
anggur yang sakit. Isolasi dilakukan dengan teknik direct
plating (Malloch, 1997) dengan meletakkan buah anggur
pada medium PDA steril yang telah ditambah
kloramfenikol dalam cawan petri steril, kemudian
diinkubasi pada suhu 25oC selama 3 hari. Koloni-koloni
yang tumbuh diidentifikasi untuk memper-oleh dan
memastikan adanya B. cinerea.
Identifikasi B. cinerea. Identifikasi cendawan
dilakukan secara makroskopis dan mikroskopis.
Pengamatan makroskopis: permukaan koloni B. cinerea
berwarna putih dan berbulu kemudian menjadi kelabu
(Malloch, 1997). Pengamatan mikroskopis: koloni B.
cinerea memiliki hifa hialin bersepta hingga coklat.
Konidiofor panjang dan bercabang membentuk gelembung
menghasilkan blastokonidia, spora berbentuk bulat bening
hingga kelabu (Stamets dan Chilton, 1983; Malloch, 1997).
Pengujian anticendawan dengan Dilution Methods.
Sebanyak 1 ml suspensi cendawan ditumbuhkan dalam
medium potato dextrosa cair yang telah ditambah minyak
atsiri atau ekstrak kasar dengan konsentrasi 1,5%; 3%;
4,5% dan 6% untuk masing-masing perlakuan dan 0%
sebagai kontrol. Semua perlakuan diinkubasi selama 5 hari
pada suhu 25oC selanjutnya dilakukan pengenceran berseri
sampai 10-5. Tiap pengenceran diambil 1 ml dan
dimasukkan dalam cawan petri yang kemudian
ditambahkan medium PSA. Semua perlakuan diinkubasi
selama 2 hari pada suhu 25oC. Pengamatan jumlah
cendawan dilakukan dengan metode hitungan cawan, yaitu
dengan menghitung koloni cendawan pada tiap perlakuan.
Ketentuan cawan yang dihitung adalah yang mengandung
jumlah koloni antara 30-300. Jika jumlah koloni pada
cawan petri kurang dari 30 koloni, hanya jumlah koloni
pada pengenceran terendah yang dihitung (Fardiaz, 1989;
Hadioetomo, 1994; Madigan et al., 2000).
Analisis minyak atsiri. Komponen minyak atsiri
dideteksi dengan menggunakan alat kromatografi gas
cairan merek Hewlet Pacard 5890 Series II, USA. Kondisi
operasi yang digunakan adalah: jenis detektor: FID (flame
ionization detector), suhu detektor: 270ºC, suhu injektor:
260ºC, jenis kolom: HPS non polar 30 meter, suhu awal
kolom: 120ºC, kenaikan: 10ºC/menit, suhu akhir: 270ºC,
gas pembawa: Helium, total flow: 10, split (Kpa): 60,
kecepatan kertas: 1 cm/menit, dan jumlah injeksi: 1 µl

Identifikasi senyawa kimia penyusun minyak atsiri.
Identifikasi dilakukan menggunakan alat kromatografi GC-
MS merek Shimadzu QP-5000, Jepang. Kondisi operasinya
adalah: jenis pengion: EI (electron impack), jenis kolom:
DBI panjang 30 m, suhu kolom: 45ºC-250ºC, kenaikan
10ºC/menit, gas pembawa : Helium, split (Kpa): 15, jumlah
injeksi: 1,4 µl, suhu detektor: 270ºC, dan suhu injektor:
270ºC.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolat B. cinerea
Dari hasil pengamatan secara mikroskopis konidiofor B.
cinerea tampak bening dengan panjang 60 µm dan lebar 15
µm. Pada bagian ujung konidiofor banyak tersebar konidia
berbentuk bulat dan berwarna putih kecoklatan berukuran
10 µm. Konidia ini merupakan spora aseksual B. cinerea
yang termasuk golongan Fungi Imperfecti
(Deuteromycetes) yang belum diketahui spora seksualnya.
Kenampakan minyak atsiri dan ekstrak kasar
Kenampakan minyak atsiri kapulaga lokal berupa
cairan bening atau berwarna kuning dengan aroma dan rasa
pedas yang tidak mudah hilang dan segar (Harris, 1993).
Dalam penelitian ini untuk selanjutnya minyak atsiri hasil
penyulingan disebut minyak atsiri, sedangkan minyak atsiri
hasil ekstraksi disebut ekstrak kasar. Minyak atsiri dan
ekstrak kasar biji kapulaga lokal berwarna kuning bening
dan mempunyai aroma seperti minyak kayu putih. Minyak
atsiri buah kapulaga lokal berwarna coklat bening dan
ekstrak kasarnya berwarna kuning kecoklatan, keduanya
mempunyai aroma tajam. Aroma yang dihasilkan dari
minyak atsiri dan ekstrak kasar ini dimungkinkan berasal
dari sineol (Tabel 2.). Menurut Soeseno (1999) sineol
beraroma sedap, agak pedas, menghangatkan seperti
minyak kayu putih
Uji anticendawan minyak atsiri dan ekstrak kasar
Minyak atsiri biji kapulaga lokal mampu menghambat
pertumbuhan B. cinerea pada konsentrasi 1,5%.
Penambahan minyak atsiri biji kapulaga lokal pada
konsentrasi 4,5% dan 6% menyebabkan pertumbuhan B.
cinerea terhenti. Ekstrak kasar biji kapulaga lokal mampu
menghambat pertumbuhan B. cinerea pada 1,5% tetapi
pada konsentrasi 6% belum mampu menghentikan
pertumbuhan B. cinerea (Tabel 1.).
Tabel 1. Pertumbuhan B. cinerea dengan penambahan minyak
atsiri dan ekstrak kasar biji dan buah kapulaga lokal.
Jumlah cendawan (koloni per ml)
Perlakuan
0% 1,5% 3% 4,5% 6%
Minyak 2,1x106 c 1,6x105 b 1,2x104 a 0a 0a
atsiri biji
Ekstrak 2,2 x106 c 2,0x105 ab 1,4x104 a 3,0x102 <3,0x102 ekstraksi.
1a
kasar biji (2,0x10 ) (1,0x10 )
Minyak 2,4x106 c 1,9x105 b 1,3x104 a <3,0x102 0a
1a
atsiri buah (3,0x10 )
Ekstrak 2,3x106 c 2,3x105 b 1,7x104 a <3,0x102 <3,0x102
kasar buah (6,0x101 a) (4,0x101 a) minyak atsiri biji kapulaga lokal diduga bersifat
Keterangan: Angka dalam satu baris yang diikuti huruf yang sama
menunjukkan tidak beda nyata pada DMRT taraf 5%
63
Pertumbuhan B. cinerea terhambat dengan penambahan
minyak atsiri buah kapulaga lokal pada konsentrasi 1,5%.
Pertumbuhan cendawan benar-benar terhenti pada
konsentrasi 6% dengan tidak tumbuhnya cendawan pada
konsentrasi ini. Ekstrak kasar buah kapulaga lokal mampu
menghambat pada konsentrasi 1,5% tetapi pada konsentrasi
6% belum mampu menghentikan pertumbuhan B. cinerea
Hasil uji DMRT 5% menunjukkan pengaruh nyata dari
semua perlakuan terhadap kontrol.
Tingkat penghambatan minyak atsiri dan ekstrak kasar
biji dan buah kapulaga lokal terhadap pertumbuhan B.
cinerea yang cenderung rendah dalam penelitian ini, antara
lain disebabkan pemilihan metode ekstraksi dan distilasi
minyak atsiri yang digunakan. Uji kromatografi gas (GC)
dan kromatografi gas-spektrometer massa (GC-MS)
terhadap ekstrak kasar biji dan buah kapulaga lokal
menunjukkan kadar minyak atsiri dalam ekstrak kasar
hanya 8,36% dan 5,89%, sedangkan pada minyak atsiri
kadarnya 15,34% dan 12,51%, sisanya adalah pelarut
metanol serta sejumlah kecil minyak atsiri lain yang
kadarnya sangat kecil (Tabel 2.). Menurut Setyawan (2002,
komunikasi pribadi) kadar minyak atsiri hasil distilasi
dengan pelarut air (hidrodistilasi) dapat mencapai 100%,
karena air tidak dapat larut dalam minyak atsiri yang
dihasilkan, berbeda dengan metanol.
Tabel 2. Jenis dan kadar minyak atsiri biji dan buah kapulaga
lokal dari hasil distilasi metanol dan ekstraksi metanol.
Kadar (%)
Nilai
Nama Biji Buah
Rf
Distilasi Ekstraksi Distilasi Ekstraksi
3,53 Metanol 84,66 87, 49 91,64 94,11
4,99 Sineol 10,75 7, 73 5,72 3,75
6,92 Geraniol 1,23 0, 48 0,94 0,89
20,15 Mirsenol 1,62 0, 32 0,60 0,98
Senyawa lain 1,74 3,98 1,10 0,27
Kadar total
15.34 12,51 8,36 5,89
minyak atsiri
Keterangan: senyawa lain terdiri dari beberapa senyawa namun
kadar masing-masing sangat kecil (± 0,1%).
Data Tabel 2. juga menunjukkan bahwa baik dengan
proses distilasi maupun ekstraksi, jenis senyawa aktif yang
terisolasi relatif sama, yaitu sineol, geraniol dan mirsenol.
Aktivitas anticendawan minyak atsiri hasil distilasi lebih
besar dibandingkan dengan ekstrak kasar, karena pada
proses distilasi dalam media metanol terjadi proses
pemanasan dan pelarutan sehingga upaya isolasi minyak
atsiri lebih efektif, sedangkan pada proses ekstraksi dengan
pelarut metanol hanya terjadi proses pelarutan saja.
Akibatnya senyawa aktif biji dan buah kapulaga lokal yang
dihasilkan dari proses distilasi memiliki kadar lebih tinggi
dari pada minyak atsiri yang diperoleh dari proses
1a
Senyawa utama yang diduga bersifat aktif sebagai
anticendawan dalam minyak atsiri kapulaga lokal adalah
sineol. Senyawa sineol yang merupakan senyawa utama
anticendawan karena senyawa ini merupakan monoterpena.
Menurut Davidson (1993), senyawa sineol yang merupakan
64 BioSMART Vol. 5, No. 1, April 2003, hal. 60-63
golongan monoterpena memberikan efek penghambatan
terhadap mikroba. Robinson (1995) mengemukakan bahwa
senyawa monoterpena dapat bekerja sebagai fungisida.
Penelitian daya antimikroba minyak atsiri temu giring
(Curcuma heyneana Val. & v. Zijp.) oleh Mulyani dkk.
(1994) menunjukkan bahwa senyawa sineol merupakan
komponen utama penyusun minyak atsiri temu giring.
Senyawa ini mampu menghambat pertumbuhan bakteri
Strepcococcus betahaemolyticus, S. aureus dan
Escherichia coli.
Hasil pengamatan terhadap pertumbuhan B. cinerea
menunjukkan bahwa minyak atsiri biji kapulaga lokal
mampu menghentikan pertumbuhan cendawan pada
konsentrasi 4,5%. Hal ini disebabkan oleh lebih tingginya
kandungan sineol dalam minyak atsiri biji dibandingkan
dengan ekstrak kasar biji, serta minyak atsiri dan ekstrak
kasar buah kapulaga lokal sehingga minyak atsiri biji lebih
efektif dalam menghambat dan menghentikan pertumbuhan
B. cinerea.
Mekanisme penghambatan minyak atsiri terhadap
pertumbuhan B. cinerea
Dinding sel merupakan pelindung sel yang berfungsi
menjaga kehidupan suatu mikroba. Senyawa anticendawan
dapat menghambat pertumbuhan cendawan dengan cara
mempengaruhi materi genetik yang mengkode pembentuk-
an dinding sel, sehingga dinding sel tidak sempurna dan
menyebabkan matinya sel cendawan. Menurut Pelczar dan
Chan (1988) mekanisme zat antimikroba antara lain
menyebabkan kerusakan dinding sel mikroba.
Penghambatan dapat pula terjadi terhadap enzim yang
bekerja dalam sel cendawan. Menurut Pelczar dan Chan
(1988) enzim merupakan sasaran potensial bagi bekerjanya
suatu zat antimikroba. Dengan terhambat atau terhentinya
aktivitas enzim maka mekanisme kerja enzim terganggu
sehingga mempengaruhi pertumbuhan sel cendawan.
Senyawa anticendawan dapat pula mempengaruhi
permeabilitas membran sel. Fungsi dari membran ini
adalah mempertahankan bahan-bahan di dalam sel secara
selektif, mengatur keluar masuknya zat antara sel dengan
lingkungan luar dan tempat terjadinya reaksi. Menurut
Fessenden dan Fessenden (1999) membran sel merupakan
membran yang terbentuk dari lipoprotein dengan suatu
lapisan rangkap (bilayer), yaitu bagian hidrofobik
menghadap ke dalam dan bagian hidrofilik menghadap ke
luar. Senyawa minyak atsiri akan masuk ke membran sel
dan terikat oleh bagian hidrofilik. Senyawa minyak atsiri
akan menyebabkan lisisnya membran lipoprotein sehingga
menyebabkan terhambatnya pertumbuhan sel dan matinya
cendawan. Menurut Atlas (1997) senyawa anticendawan
mengubah permeabilitas membran sel yang menyebabkan
kematian sel. Dinding sel dan membran sel yang rusak
akan menghambat pembentukan hifa sehingga
pertumbuhan B. cinerea juga akan terhambat. Senyawa
sineol yang merupakan monoterpena sebagai anticendawan
kemungkinan mampu merusak dinding sel dan
mempengaruhi permeabilitas membran sel B. cinerea
dengan terhambat dan terhentinya pertumbuhan cendawan
tersebut.
KESIMPULAN
Minyak atsiri biji kapulaga lokal mampu menghambat
pertumbuhan B. cinerea pada konsentrasi 1,5% dan meng-
hentikan pertumbuhan B. cinerea pada konsentrasi 4,5%.
Ekstrak kasar biji kapulaga lokal mampu menghambat per-
tumbuhan B. cinerea pada konsentrasi 1,5% tetapi sampai
konsentrasi 6% belum mampu menghentikan pertumbuhan
B. cinerea. Minyak atsiri buah kapulaga lokal mampu
menghambat pertumbuhan B. cinerea pada konsentrasi
1,5% dan menghentikan pertumbuhan B. cinerea pada
konsentrasi 6%. Ekstrak kasar buah kapulaga lokal mampu
menghambat pertumbuhan B. cinerea pada konsentrasi
1,5% tetapi sampai konsentrasi 6% belum mampu
menghentikan pertumbuhan B. cinerea. Minyak atsiri biji
kapulaga lokal lebih efektif dibandingkan dengan ekstrak
kasar biji, serta minyak atsiri dan ekstrak kasar buah dalam
menghambat dan menghentikan pertumbuhan B. cinerea.
DAFTAR PUSTAKA
Atlas, R.M. 1997. Principles of Microbiology. London: WMC. Brown.
Davidson, P.M and A.L. Baranen. 1993. Antimicrobia in Food. New
York: Marcel Dekker, Inc.
Duryatmo, S. 2000. Kunci penyemprotan insektisida nabati. Trubus 31
(365): 47
Fardiaz, S. 1989. Analisis Mikrobiologi Pangan. Bogor: PAU IPB.
Fessenden, R and J.S. Fessenden. 1999. Kimia Organik. Jilid II.
Penerjemah: Pudjaatmaka, A.H. Jakarta: Penerbit Erlangga.
Gandjar, I., R.A Samson, K.V.T. Vormeulen, A. Oetari, dan I. Santoso.
1999. Pengenalan Kapang Tropik Umum. Jakarta: YOI.
Guenther, E. 1987. Minyak Atsiri. Jilid I. Penerjemah: Ketaren, S. Jakarta:
UI Press.
Hadioetomo, R.S. 1990. Mikrobiologi Dasar dalam Praktek. Jakarta: PT.
Gramedia.
Haris, R. 1993. Tanaman Minyak Atsiri. Jakarta: Penebar Swadaya.
Heyne, K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia. Jilid I. Jakarta: yayasan
Sarana Wana Jaya.
Madigan, T., J.M. Martinko and J. Parker. 2000. Biology of
Microorganisms. London: Prestice Hall International, Inc.
Malloch, D. 1997. Moulds Isolation, Cultivation, Identification.
Mycology. Toronto: Department of Botany, University of Toronto.
Martoredjo, T. 1982. Pengendalian Penyakit Tanaman. Yogyakarta: Andi.
Mulyani, S., Amini, dan Sumarno. 1990. Analisis GC-MS dan daya
antimikrobia minyak atsiri temu giring. Berkala Penelitian Pasca
Sarjana UGM 3 (1B): 141-157.
Nazaruddin. 1993. Komoditi Ekspor Pertanian. Jakarta: Penebar Swadaya.
Pelczar, M.J. dan E.C.S. Chan. 1988. Dasar-dasar Mikrobiologi 1
Penerjemah: Hadioetomo, R., Tijalma, S. Tjitrosomo, dan S.L.
Angka. Jakarta: UI Press.
Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Penerjemah:
Padamawinata, K. Bandung: Penerbit ITB.
Semangun, H. 1994. Penyakit-Penyakit Tanaman Hortikultura di
Indonesia. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Setyawan, A.D. 1999. Status Taksonomi Genus Alpinia Berdasarkan
Sifat-sifat Morfologi, Anatomi dan Kandungan Kimia Minyak Atsiri.
BioSmart 1 (1): 31-40.
Setiadi. 2000. Bertanam Anggur. Jakarta: Penebar Swadaya.
Smith. J. 2000. Botrytis Bunch Rot or Gray Mold of Grape.
http:/www.ohioline.osa.edu/hyg.fct/3000/30.20.html.
Stamets, P and J.S. Chilton. 1993. The Mushroom Cultivator. Washington:
Agaoikon Press.
Soeseno, S. 1999. Bertanam Kapulaga itu Gampang.
http:/www.indomedia.com/intisari/’99/nov/flora-nov98.html.
Supriadi, C. Winarni, dan Hernani. 1999. Potensi daya antibakteri
beberapa tanaman rempah dan obat terhadap isolat Ralstonia
solanacearum asal jahe. Hayati 6 (2): 43-46.
Tjitrosoepomo, G. 1994. Taksonomi Tumbuhan Obat-obatan. Yogyakarta:
Gadjah Mada University Press.
65