ACTA CHROMATOGRAPHICA, NO. 19, 2007 SIMULTAN PENENTUAN Loratadin dan pengawet DI sirup OLEH TIPIS-LAYER KROMATOGRAFI G.

Popovi, M. Cakar, dan D. Agbaba * Fakultas Farmasi, Universitas Belgrade, Vojvode Stepe 450, PO Box 146, 11000 Belgrade, Serbia RINGKASAN Sederhana, cepat, dan tepat metode TLC Densitometri telah ditetapkan untuk penentuan simultan loratadin dan pengawet dalam loratadin-natrium benzoat dan loratadine-methylparaben-propylparaben campuran. Kromatografi dilakukan pada pelat aluminium pra-dilapisi dengan silika gel 60 F254. Para fase gerak adalah n-butyl acetate-car-bon tetraklorida-asam asetat-asetonitril 3:6:0.2:3 (v / v) untuk loratadin-jadi-dium campuran benzoat dan etil asetat-n-heksana-metanol-amonia- dietilamin 1:4:0.8:0.4:2 (v / v) untuk loratadin-methylparaben-propylpa-Raben campuran. Zona kromatografi dipindai di reflektansi-absor-Bance modus pada 240 nm untuk campuran mantan dan 275 nm untuk yang kedua. Hubungan antara luas puncak dan jumlah senyawa dievaluasi dengan analisis regresi linier dalam konsentrasi berkisar 0,3-0,7 ug per band untuk loratadin, methylparaben, dan natrium benzoat dan 0,03-0,07 mg per band untuk propylparaben. Berarti pemulihan untuk semua senyawa bervariasi 98,3-102,5%. Deteksi dan kuantifikasi batas berkisar 0,004-0,03 dan 0,01-0,1 mg per band, masingmasing. Metode yang diusulkan digunakan untuk penentuan simultan loratadin dan pengawet dalam sirup obat komersial. PENDAHULUAN Loratadine (etil 4 - (8-kloro-5 ,6-dihidro-11H-benzo [5,6] cyclohep-ta [1,2-b] piridin-11-ylidine)-1piperidin karboksilat) adalah salah satu dari kelompok antihistamin generasi kedua yang mirip satu sama lain lebih dalam tindakan farmakologis mereka daripada struktur kimianya. Senyawa ini merupakan antagonis selektif dan cukup kuat dari reseptor histamin H1. Karena disosiasi lambat dari reseptor antihistamin H1-comp lex, dan pembentukan metabolit aktif dengan aksi serupa pada kelas reseptor histamin, sebagian besar obat memiliki tindakan antihistamin berkepanjangan [1]. Sebuah fitur yang sangat penting dari generasi antihistamin adalah bahwa ketika digunakan pada konsentrasi terapi mereka memiliki efek penenang buruk diungkapkan, karena hanya sejumlah kecil obat menembus penghalang darah-otak [2]. Loratadine secara komersial tersedia dalam bentuk tablet dan sirup, yang terakhir selalu mengandung pengawet yang berbeda. Loratadine telah dianalisis dalam formulasi farmasi alo-ne [3-10], di hadapan produk degradasi [11], dalam campuran dengan kotoran terkait [12-14], dan dengan obat lain, misalnya desloratadin [15], pseudoephedrine [16-20], montelukast [21], dan pseudoephedrin dex-brompheniramine [22], dan pseudoefedrin dan ibuprofen [23]. Tipis-la-yer kromatografi (TLC) telah digunakan untuk penentuan loratadin baik sendiri [9] atau di hadapan kotoran [14] atau pseudoefedrin [19]. Meskipun analisis loratadin yang mengandung obatobatan telah dijelaskan dalam berbagai makalah, tidak ada metode untuk analisis simultan dari

loratadin dan pengawet tersedia dalam literatur. Menurut praktek manufaktur yang baik (GMP) peraturan, zat aktif dan pengawet yang digunakan untuk formulasi obat manusia harus dianalisis. Hal ini mendorong kami untuk mengembangkan dan mengevaluasi metode TLC untuk simultan-lisis ana loratadin dan pengawet yang umum digunakan, yaitu natrium benzoat dan methylparaben campuran dan propylparaben, dalam komersial medi-cinal sirup. EKSPERIMENTAL

Kimia dan Reagen Loratadine dan pengawet (natrium benzoat, methylparaben, dan propylparaben) yang ramah disediakan oleh Obat dan Kesehatan Badan Devices Serbia (Belgrade, Serbia). Reagen lain yang digunakan dalam penelitian ini adalah Merck (Darmstadt, Jerman) produk analitis kelas rity pu-. Claritine sirup yang mengandung 1 mg per loratadine sirup mL dan begitu-dium benzoat (1 mg mL-1) sebagai pengawet (Schering-Plough pharmaceu-vertikal Pekerjaan, Belgia) dan sirup loratadine mengandung jumlah yang sama loratadin per mL dan methylparaben (1 mg mL-1) dan propylparaben (0,1 mg mL-1) sebagai pengawet (Jugoremedia Pharmaceutical Works, Ser-bia) dianalisis. Sirup plasebo adalah larutan propilen glikol (4,5 mL), glyce-rol (1,5 mL), asam sitrat (1,5 mL larutan 5%), dan sakarosa (5 g) dalam air (25 mL). Saham solusi loratadin (1 mg mL-1), methylparaben (1 mg mL-1), dan propylparaben (0,1 mg mL-1) disusun dalam etanol dan larutan stok natrium benzoat (1 mg mL-1) disiapkan di 01:15 (v / v) asam asetat-etanol. Solusi standar untuk kalibrasi dalam konsentrasi yang berlari -ges 0,15-0,35 mg mL-1 (loratadine, methylparaben dan natrium benzoat) dan 0,015-0,035 mg mL-1 (propylparaben) disusun menipiskan solusi saham dengan etanol, sehingga aplikasi dari 2 uL menutupi berkisar 0,3-0,7 ug per band untuk loratadin, methylparaben, dan natrium benzoat, dan 0,03-0,07 mg per band untuk propylparaben.

Analisis Syrup Loratadin

Sirup (2,5 mL) dipindahkan ke botol 10-mL dikalibrasi dan di-luted ke volume dengan etanol.

Kromatografi

Kromatografi dilakukan pada 20 cm 10 cm TLC pelat dipotong dari 20 cm 20 cm pelat aluminium yang dilapisi silika gel 60 F254 (Merck). Standar dan sampel solusi (2,0 uL) yang diterapkan pada plates, 15 mm dari bawah, dengan cara perangkat (Muttenz, Swiss) aplikasi Camag NANOMAT II. Ascending kromatografi dengan jarak 95 mm yang dilakukan di ruang twin-palung Camag. Para fase gerak adalah n-butyl acetate-karbon tetraklorida-asam asetat-asetonitril 3:6:0.2:3 (v / v) (S1 fase gerak) untuk campuran loratadin dan natrium benzoat, dan etil asetat-n-heksana-metanol -amoniadietilamin 1:4:0.8:0.4:2 (v / v) (fase gerak S2) untuk campuran loratadin, methylpa-Raben, dan propylparaben. Setelah pembangunan lempeng dikeringkan di udara dan zona yang discan dalam linier reflektansi-absorbansi pada 240 nm modus (loratadine dan natrium benzoat) atau 275 nm (loratadine, methylpara-ben, dan propylparaben) dengan cara Camag TLC Scanner II dengan sistem komputer dan perangkat lunak Kucing (V.3.15).Daerah puncak digunakan untuk kuantifikasi. HASIL DAN PEMBAHASAN

masing-masing; RF nilai 0,30 dan 0,38) . Identitas band loratadin dan pengawet dari sirup dikonfirmasi dengan membandingkan spektra UV dari band dipisahkan dengan orang-orang dari standar (r 0,9997). Kemurnian puncak band analit dinilai dengan membandingkan spektra yang diperoleh pada awal puncak (S), puncak puncak (M) dan akhir puncak (E) dari band. Nilai r (S, M) dan r (M, E) 0,9998 menunjukkan bahwa band analit semua dari sirup yang murni. Panjang gelombang yang digunakan untuk kuantifikasi dari komponen-komponen individual dari campuran oleh TLC dipilih atas dasar in-situ spektrum UV senyawa '. Loratadine, methylparaben, dan propylparaben yang diukur pada 275 nm, yaitu pada maksimum penyerapan loratadin dan di mana absorbansi baik methylparaben dan propylparaben cukup tinggi. Loratadine dan natrium benzoat dalam campuran kedua yang quanti-fied pada 240 nm, di mana kedua zat memiliki absorbansi yang sama. Panjang gelombang ini dipilih karena absorbansi sangat rendah natrium benzo-makan dalam kisaran panjang gelombang dekat dengan maksimum penyerapan lorata-makan. Dengan cara ini adalah mungkin untuk mengukur kedua komponen dari campuran mendatang-dalam satu langkah. Plot kalibrasi diperoleh dalam mg konsentrasi kisaran 0,3-0,7 per band untuk loratadin, natrium

Seperti terlihat dari Gambar. 1, pilihan n-butyl acetate-karbon te-trachloride-asam asetatasetonitril 3:6:0.2:3 (v / v) sebagai fase gerak diaktifkan Gambar. 1 Densitograms diperoleh dari (a) sirup Claritin, dan (b) benzoat loratadine (1) dan sodium (2) standar. Fase gerak: n-butyl acetate-karbon tetraklorida-asam asetat-asetonitril 3:6:0.2:3 (v / v), panjang gelombang 240 nm

benzoat, dan methylparaben, dan 0,03-0,07 mg per band untuk propylparaben. Hubungan antara luas puncak dan jumlah untuk zat dikromatografi diperoleh dengan analisis regresi linier. Data statistik untuk kalibrasi dari masing-masing senyawa yang tercantum dalam Tabel I. Semua larutan stok dan kalibrasi disiapkan dalam etanol kecuali untuk saham larutan natrium benzoat yang dipersiapkan dalam asam asetat-Etha-nol 01:15 (v / v), karena natrium benzoat hanya sedikit larut dalam Etha-nol. Kalibrasi solusi untuk natrium benzoat diperoleh dengan mengencerkan larutan stok dengan etanol yang mengandung asam asetat 0,6-2%. Untuk alasan ini penyelesaian yang memuaskan dari loratadin (migrasi jarak 52,5 mm, RF 0,47) dan natrium benzoat

Gambar. 2 Densitograms diperoleh dari (a), loratadine (b) methylparaben, (c) propylparaben, sirup dan (d) loratadine. Fase gerak: etil asetat-n-heksana-metanol-amonia-dietilamin 1:4:0.8:0.4:2 (v / v), panjang gelombang 275 nm penyelesaian yang memuaskan dari loratadin (migrasi jarak 52,5 mm, RF 0,47) dan natrium benzoat (migrasi jarak 62,9 mm, RF 0,60). Resolusi tidak terpengaruh oleh konstituen lain dari sirup. Penggunaan fase gerak yang sama untuk campuran loratadin, methylparaben, dan propylparaben reberkonsultasi dalam resolusi miskin dari paraben, bagaimanapun, dengan nilai RF mendekati 1. Untuk alasan ini fase mobile baru, etil asetat-n-heksana-metha-nol-amonia-dietilamin 1:4:0.8:0.4:2 (v / v) telah dioptimalkan, hasilnya ditunjukkan pada Gambar. 2. Penerapan ini fase gerak menghasilkan mobilitas yang lebih besar dari loratadin (migrasi jarak 70,5 mm, RF 0,69) dan mobilitas yang lebih rendah dari paraben (migrasi jarak methylparaben dan pro-pylparaben adalah 39,3 mm dan 45,1 mm,

(migrasi jarak 62,9 mm, RF 0,60). Resolusi tidak terpengaruh oleh konstituen lain dari sirup. Penggunaan fase gerak yang sama untuk campuran loratadin, methylparaben, dan propylparaben reberkonsultasi dalam resolusi miskin dari paraben, bagaimanapun, dengan nilai RF mendekati 1. Untuk alasan ini fase mobile baru, etil asetat-n-heksana-metha-nol-amonia-dietilamin 1:4:0.8:0.4:2 (v / v) telah dioptimalkan, hasilnya ditunjukkan pada Gambar. 2. Penerapan ini fase gerak menghasilkan mobilitas yang lebih besar dari loratadin (migrasi jarak 70,5 mm, RF 0,69) dan mobilitas yang lebih rendah dari paraben (migrasi jarak methylparaben dan pro-pylparaben adalah 39,3 mm dan 45,1 mm, masing-masing; RF nilai 0,30 dan 0,38) . Identitas band loratadin dan pengawet dari sirup dikonfirmasi dengan membandingkan spektra UV dari band dipisahkan dengan orang-orang dari standar (r 0,9997). Kemurnian puncak band analit dinilai dengan membandingkan spektra yang diperoleh pada awal puncak (S), puncak puncak (M) dan akhir puncak (E) dari band. Nilai r (S, M) dan r (M, E) 0,9998 menunjukkan bahwa band analit semua dari sirup yang murni. Panjang gelombang yang digunakan untuk kuantifikasi dari komponen-komponen individual dari

campuran oleh TLC dipilih atas dasar in-situ spektrum UV senyawa '. Loratadine, methylparaben, dan propylparaben yang diukur pada 275 nm, yaitu pada maksimum penyerapan loratadin dan di mana absorbansi baik methylparaben dan propylparaben cukup tinggi. Loratadine dan natrium benzoat dalam campuran kedua yang quanti-fied pada 240 nm, di mana kedua zat memiliki absorbansi yang sama. Panjang gelombang ini dipilih karena absorbansi sangat rendah natrium benzo-makan dalam kisaran panjang gelombang dekat dengan maksimum penyerapan lorata-makan. Dengan cara ini adalah mungkin untuk mengukur kedua komponen dari campuran mendatang-dalam satu langkah. Plot kalibrasi diperoleh dalam mg konsentrasi kisaran 0,3-0,7 per band untuk loratadin, natrium benzoat, dan methylparaben, dan 0,03-0,07 mg per band untuk propylparaben. Hubungan antara luas puncak dan jumlah untuk zat dikromatografi diperoleh dengan analisis regresi linier. Data statistik untuk kalibrasi dari masing-masing senyawa yang tercantum dalam Tabel I. Semua larutan stok dan kalibrasi disiapkan dalam etanol kecuali untuk saham larutan natrium benzoat yang dipersiapkan dalam asam asetat-Etha-nol 01:15 (v / v), karena natrium benzoat hanya sedikit larut dalam Etha-nol. Kalibrasi solusi untuk natrium benzoat diperoleh dengan mengencerkan larutan stok dengan etanol yang mengandung asam asetat 0,6-2%. Untuk alasan ini

Kekokohan metode dipelajari dengan menentukan efek sedikit perubahan suhu, saturasi ruang, geometri ruang, dan jarak pengembangan. Variasi suhu antara 22 dan 28 C tidak memiliki efek diamati pada pemisahan loratadin dan pengawet, pada suhu di bawah 18 C, bagaimanapun, resolusi benzoate loratadin dan natrium miskin. Chamber saturasi tidak berpengaruh pada pemisahan campuran loratadin, methylparaben, dan propylparaben namun menghasilkan RF yang lebih rendah (0,53) untuk natrium benzoat. Tidak ada perubahan signifikan dari RF diamati untuk salah satu senyawa ketika efek dari ruang yang berbeda dan jarak pengembangan (85, 90, dan 95 mm) diuji. amobil fase: n-butyl acetate-karbon tetraklorida-asam asetat-asetonitril 3:6:0.2:3 (v / v) bMobile fase: etil asetat-n-heksana-metanol-amonia-dietilamin 1:4:0.8:0.4:2 (v / v) Metode ini digunakan untuk penentuan benzoat loratadin dan natrium dalam sirup Claritine, dan untuk penentuan loratadin, methylpa-Raben, dan propylparaben dalam sirup loratadine. Hasil yang diperoleh adalah lis-ted pada Tabel IV.

KESIMPULAN Metode Densitometri untuk analisis kuantitatif sirup con-taining loratadine, antihistamin, sebagai agen yang aktif, dan natrium benzoat, methylparaben, dan propylparaben sebagai pengawet yang akurat, sederhana, dan cepat. Hal ini dapat berhasil digunakan untuk penentuan simultan lorata-makan dan pengawet dalam sirup obat. Persiapan sirup Samp-les untuk analisis sederhana dan metode memungkinkan terminasi de-Densitometri langsung tanpa isolasi sebelumnya senyawa yang menarik.

Poin aCalibration diperoleh dalam rangkap tiga di lima tingkat bn-Butil asetat-karbon tetrakloridaasam asetat-asetonitril, 3:6:0.2:3 (v / v) cEthyl asetat-n-heksana-metanol-amonia dietilamin, 1:4:0.8:0.4:2 (v / v) efek dari konsentrasi yang berbeda dari asam asetat pada nilai-nilai RF dan data kalibrasi untuk natrium benzoat diperiksa. Dua kontrol seri dengan konsentrasi natrium benzoat yang sama seperti dalam seri kalibrasi disiapkan. Konsentrasi asam asetat di semua solusi dalam seri pertama adalah 2% sedangkan yang dalam larutan dari seri kedua adalah dua kali lebih tinggi dalam larutan kalibrasi (yaitu 1,2-4%). Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa jumlah yang berbeda dari asam asetat memiliki efek hampir tidak ada data kalibrasi atau nilai-nilai RF untuk natrium benzoat. Akurasi dan presisi dari metode yang didirikan oleh analisis sirup plasebo dibubuhi dengan jumlah yang telah diketahui loratadin dan pengawet. Hal ini terlihat dari data yang tercantum dalam Tabel II bahwa standar deviasi relatif (RSD) berkisar antara 1,39% sampai 3,40%, hal ini jelas menunjukkan ketepatan metode ini memuaskan. Batas deteksi (LOD) dan kuantifikasi (LOQ) dari lorata-makan dan pengawet yang diperoleh secara eksperimental atas dasar signal-to-noise rasio 3:1, dan 10:01 masing-masing (Tabel III).

UCAPAN TERIMA KASIH Karya ini didukung oleh Departemen Perlindungan Lingkungan Sains dan-mental Republik Serbia, Grant # 142.071.

REFERENSI [1] DT Witiak, agen antiallergenic, Di Burger A. (ed.), Obat Kimia, 3rd ed, New York, Wiley Interscience, 1970, hlm.. 3. [2] J.H. Blok, JM Beale Jr, Wilson dan Textbook Gisvold ini Obat Kimia dan Farmasi Organik, Lippincott Willians & Wilkins, ed kesebelas, Philadelphia., 2004, hal. 712. [3] A.A. Gazy, H. Mahgoub, F.A. El-Yazbi, sarjana sastra El-Sayed, dan R.M. Youssef, J. Pharm. Biomed. Anal, 30., 859 (2002)

[4] M.M. Ghoneim, M.M. Mabrouk, A.M. Hassanein, dan A. Tawfik, J. Pharm. Biomed. Anal, 25., 933 (2001) [5] M. Nogowska, M. Zajac, dan I. Muszalska, Chem. Anal. (Warsawa), 45, 681 (2000) [6] N. El-Kousy dan L. I. Bebawy, J. Pharm. Biomed. Anal., 20, 671 (1999) [7] P. Mikus, P. Kubacak, I. Valaskova, dan E. Havranek, Pharmazie, 59, 260 (2004) [8] J.A. Squella, J.C. Sturm, sarjana sastra Diaz, H. Pessoa, dan L.J. Nunez-Vergara, Talanta, 43, 2029 (1996) [9] G. Indrayanto, L. Darmawan, S. Widjaja, dan G. Noorrizka, J. Planar Chromatogr.-Mod. TLC, 12, 261 (1999) [10] S.J. Rajput dan AG Vyas, Obat India, 35, 352 (1998) [11] NA El Ragehy, A.M. Badawey, dan S.Z.-El. Khateeb, J. Pharm. Biomed. Anal, 28., 1041 (2002) [12] H. Fernandez, FJ Ruperez, dan C. Barbas, J. Pharm. Biomed. Anal, 31., 499 (2003) [13] FJ Ruperez, H. Fernandez, dan C. Barbas, J. Pharm. Biomed. Anal, 29., 35 (2002) [14] N. Issa dan M. Mlynarova, Ceska a Farmacie Slovenska, 53, 192 (2004) [15] D.T. El-Sherbiny, N. El-Enany, F.F. Belal, dan S.H. Hansen, J. Pharm. Biomed. Anal, 43., 1236 (2007) [16] A. Abu-Lathou, I.I. Hamdan, dan A. Tahraoui, Obat Dev. Ind Pharm, 31., 577 (2005) [17] H. Mahgoub, A.A. Gazy, F.A. El-Yazbi, sarjana sastra El-Sayed, dan R.M. Youssef, J. Pharm. Biomed. Anal, 31., 801 (2003) [18] M.M. Mabrouk, H.M. El-Fatatry, S. Hammad, dan A.A.M. Wahbi, J. Pharm. Biomed. Anal, 33., 597 (2003) [19] R.T. Sane, M. Francis, S. Khedkar, S. Pawar dan A. Moghe, Obat India, 38, 436 (2001) [20] G.V. Kanumula dan B. Raman, Obat India, 37, 574 (2000) [21] T. Radhakrishna, A. Narasaraju, M. Ramakrishna, dan A. Satyanarayana, J. Pharm. Biomed. Anal, 31., 359 (2003) [22] F. Onur, C. Yucesoy, S. Dermis, M. Kartal, dan G. Kokdil, Talanta, 51, 269 (2000) [23] D. Ivanovi, M. Medenica, S. Markovi, dan G. Mandic, Arzneim.-Forsch, 50., 1004 (2000)