Inhalasi dengan Fucose dan galaktosa untuk Pengobatan Pseudomonas Aeruginosa pada pasien Cystic Fibrosis

Di susun oleh: IYAN MAULANA 0943050069

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS 17 AGUSTUS 1945 JAKARTA

Inhalasi dengan Fucose dan galaktosa untuk Pengobatan Pseudomonas Aeruginosa pada pasien Cystic Fibrosis
Hans-Peter Hauber, 1, 2 Maria Schulz, 2 Almuth Pforte, 2 Dietrich

Mack, 3Petrus Zabel, 1 dan Udo Schumacher 4

1. Klinik Medis, Pusat Penelitian Borstel, Departemen Kedokteran, Borstel, Jerman. 2. Departemen Kedokteran Aku, Rumah Sakit Universitas Hamburg-Eppendorf, Jerman. 3. Departemen Mikrobiologi dan Imunologi, Universitas Hamburg-Eppendorf Hospital, Jerman. 4. Departemen Anatomi II: Morfologi Eksperimental, Rumah Sakit Universitas Hamburg-Eppendorf, Jerman Korespondensi ke: priv. Doz. Dr med. Hans-Peter Hauber, Pusat Penelitian Borstel, Departemen Kedokteran, Parkallee 35, 23845 Borstel, Jerman. Telp: (+) 49-4537-188-0, Fax: (+) 49-4537-188-313; E-mail: hphauber@fzborstel.de Konflik Kepentingan: Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan. Penelitian ini terdaftar di University of Hamburg, Jerman. Diterima 24 Agustus 2008; Diterima November 15, 2008.

ABSTRAK
Latar Belakang: Kolonisasi cystic fibrosis (CF) paru-paru dengan Pseudomonas aeruginosa difasilitasi oleh dua lektin, yang mengikat gula mantel dari lapisan epitel permukaan dan menghentikan pemukulan silia. Tujuan: Kami berhipotesis dua bahwa P. aeruginosa infeksi dan dengan paru-paru harus

dibersihkan oleh inhalasi fucose dan galaktosa, yang bersaing untuk situs pengikatan gula lektin demikian menghambat pengikatan P. aeruginosa. Metode: 11 pasien dewasa dengan CF infeksi kronis dengan P. aeruginosa dirawat dua kali sehari dengan inhalasi dari fucose / solusi galaktosa selama 21 hari (4 pasien hanya menerima inhalasi, 7 pasien menerima antibiotik intravena inhalasi dan). Mikroba tuduhan P. aeruginosa , pengukuran fungsi paru, dan inflamasi spidol ditentukan sebelum dan setelah pengobatan.

Hasil: Terhirup gula ditoleransi dan tidak ada efek samping yang merugikan yang diamati. Inhalasi sendiri serta terapi kombinasi (inhalasi dan antibiotik) secara signifikan menurun P. aeruginosa dalam dahak (P <0,05). Kedua terapi juga secara signifikan mengurangi ekspresi TNFa dalam dahak dan sel-sel darah perifer (P <0,05). Tidak ada perubahan dalam pengukuran fungsi paru-paru yang diamati. Kesimpulan: Menghirup gula sederhana adalah ukuran yang aman dan efektif untuk mengurangi P. aeruginosa jumlah pada pasien CF. Hal ini dapat memberikan suatu pendekatan therapeutical alternatif untuk mengobati infeksi dengan P. aeruginosa . Keywords: Cystic fibrosis, fucose, glactose, inhalasi, lektin, Pseudomonas aeruginosa

PENDAHULUAN
Infeksi kronis saluran udara dengan P. aeruginosa merupakan penyebab utama morbiditas dan mortalitas pada mayoritas pasien CF. Patogen ini colonises saluran udara dan paru-paru sering di akhir usia belasan atau awal dua puluhan dan dapat dikendalikan untuk waktu yang lama dengan pengobatan antibiotik. Namun, selama periode panjang infeksi, itu akan tahan terhadap kemoterapi dan infeksi sehingga tidak dapat dikendalikan lagi. Situasi ini akan menjadi lebih jelas di masa depan sebagai pipa untuk pengembangan agen antibakteri berjalan kering dengan hanya lima obat baru mungkin untuk disetujui dalam beberapa tahun mendatang. Namun, strategi baru untuk memerangi infeksi dapat dikembangkan dengan mengganggu dengan lampiran bakteri ke epitel saluran napas. P. aeruginosamenghasilkan dua lektin, protein yang mengikat karbohidrat, ditunjuk P. aeruginosa lektin I (PA-I atau LEC A) dan II (PA-II atau LEC B). Yang pertama adalah khusus untuk galaktosa, yang kedua untuk fucose. Kedua lektin yang digunakan dalam dua cara cerdas untuk memfasilitasi patogenisitas nya. Pertama-tama, lektin menempel pada epitel yang menutupi dengan mengikat glycocalix dari sel-sel mamalia. Dengan menambahkan gula sederhana, lampiran ini dapat diblokir seperti yang ditunjukkan pada otitis eksternal yang disebabkan

oleh P. aeruginosa. Namun, adhesi sederhana melalui interaksi gula lektin tidak akan cukup untuk bertahan dalam saluran udara sebagai lift mukosiliar akan menghapus semua patogen yang berada dalam lapisan lendir cairan yang melapisi saluran udara. Karena lift ini didorong oleh silia pemukulan, inaktivasi mereka juga akan memfasilitasi infeksi, yang memang kasus ini sebagai dua lektin juga melumpuhkan silia, sehingga membuat lift mukosiliar tidak efektif . Sebuah laporan kasus menunjukkan, bahwa menghirup galaktosa dan fucose memang bisa menghilangkan P. aeruginosa dari saluran udara pasien CF non bahkan jika pengobatan antibiotik konvensional gagal. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki efek dari solusi galaktosa / fucose pada pasien CF dengan infeksi kronis dengan P. aeruginosa sebagai setidaknya PA-II bekerja pada silia pasien CF in vitro dengan cara yang sama seperti pada kontrol normal.

SUBYEK DAN METODE

Studi desain
Penelitian ini merupakan uji klinis terbuka. Dewasa CF pasien direkrut dari klinik rawat jalan CF dan bangsal paru dari Departemen Kedokteran Aku, Rumah Sakit Universitas Hamburg-Eppendorf. Pasien mengalami infeksi kronis dengan P.aeruginosa (dibuktikan dengan kultur sputum positif untuk setidaknya tiga tahun) dan eksaserbasi akut pada saat perekrutan. Mereka secara acak diobati dengan inhalasi 10 ml 0,1 M fucose / 0,1 M larutan 0,9% galaktosa dalam NaCl dua kali sehari selama 21 hari baik dengan adanya atau tidak adanya terapi dengan antibiotik intravena (cephalosporine + aminogylcoside). Konsentrasi fucose dan galacose didasarkan pada data dari studi sebelumnya. Sebelumnya obat termasuk antibiotik dihirup, vitamines, enzim pankreas, alpha dornase, bronchodilatators dilanjutkan. Budaya dahak, dahak jumlah sel, jumlah sel darah perifer, pengukuran fungsi paru (kapasitas vital, VC, volume ekspirasi paksa dalam satu detik, FEV1), tekanan oksigen arteri, penanda inflamasi (protein C reaktif, IgG, IgE), tes fungsi hati (GOT, GPT) dan pengukuran sitokin (tumor necrosis factor-,

interleukin-10) dilakukan sebelum dan setelah pengobatan. Protokol penelitian disetujui oleh Komite Etika lokal dari Kota Hamburg, Jerman.

Pengambilan sampel dahak

Setelah membilas mulut dengan air steril pasien batuk dahak ke dalam wadah steril. Satu bagian segera diangkut ke Departemen Mikrobiologi untuk kultur bakteri. Bagian lain ditimbang, lyophylized dengan DTT dan disaring melalui mesh nilon. Setelah sentrifugasi sel pelet dilarutkan kembali ke fosfat buffered saline (PBS) yang mengandung 2% serum janin anak sapi (FCS; Seromed, Berlin, Jerman). Jumlah sel dihitung dan cytospins dipersiapkan untuk jumlah sel diferensial.

Darah perifer sel mononuklear (PBMC) dan sampel serum

PBMC diisolasi dengan sentrifugasi selama Ficoll-Paque (Pharmacia, Uppsala, Swedia) dan dicuci dua kali dengan PBS yang mengandung 2% FCS. PMBC dihitung, cytospins disiapkan dan diferensial jumlah sel yang preformed. Kadar protein serum tumor necrosis factor- (TNFa) ditentukan dengan menggunakan enzim linked immunosorbent assay (ELISA, R & D Sistem, Minneapolis, Minh, USA).Protein C reaktif (CRP), IgG, IgE, GOT, GPT dan diukur dengan menggunakan protokol laboratorium rutin.

RNA persiapan dan RT-PCR

Sel dan sampel sputum PBMC, masing-masing berisi RNAzol (Wak, Bad Soden, Jerman) dan 80.000 sel, disimpan pada -20 C sampai persiapan lebih lanjut. RNA diekstraksi dengan pengobatan dengan chlorofrome dan diendapkan dengan isopropanol. RNA ditranskripsi balik menggunakan 2 ml 25 mM MgCl 2 , 1 penyangga 10xPCR ml, 1 ml 10 mM dari masing-masing desoxynucleotide trifosfat (dNTP), 0,5 ml 50 pM OligodT, 0,5 ml 20 U / l RNAse inhibitor dan 0,5 ml 50 U / ml reverse transcriptase (Perkin Elmer Biosystemsm Roche, Branchburg, USA). Campuran diinkubasi pada 42 C selama 30 menit dan pada 99 C selama 5 menit. Sampel disimpan pada -20 C sampai amplifikasi. CDNA yang dihasilkan diamplifikasi dengan PCR pada pengendara sepeda termal (Hybaid, Teddington, Inggris) dengan volume akhir 100 ml yang berisi 10 ml

cDNA (IL-18, IL-10) atau 5 ml cDNA (-aktin), 10 ml atau 15 ml pengenceran penyangga, 8 ml 12 mM MgCl 2 , 8 penyangga 10xPCR ml, 55,5 ml DEPC-H 2 O, 0,5 ml U / l rekombinan Taq DNA polimerase (Perkin Elmer Biosystems, Roche, Branchburg, USA) dan 2,0 ml 15 mmol primer masing-masing. -aktin menjabat sebagai kontrol.Primer oligonukleotida untuk PCR didasarkan pada urutan mRNA diterbitkan. Para -aktin manusia yang primer 5'-GTG GGG LKP CCC CAC Agg CA-3 'untuk primer hulu dan 5'-CTC CTT GTC AAT ACG CAC GAT TTC-3' untuk primer hilir. TNFa 5'-CAG dimanfaatkan Agg GAA GAG TTC CCC AG-3 'untuk primer hulu dan 5'-CCT TGG TCT GGT Agg AGA CG-3' untuk primer hilir. PCR amplifikasi untuk -aktin dilakukan selama 36 siklus (1 menit pada 94 C, 1 menit pada 60 C, 40 detik pada 72 C) dan untuk TNFa selama 40 siklus (1 menit pada 94 C, 1 menit pada 60 C, 40 detik pada 72 C).

Identifikasi produk PCR

Produk PCR dianalisis dengan elektroforesis pada etidium bromida agarosa 2% gel yang mengandung dan divisualisasikan dengan sinar UV. Ukuran produk PCR dibandingkan dengan produk PCR panjang diharapkan menggunakan penanda berat molekul (Boehringer, Mannheim, Jerman) berjalan secara paralel.

Densitometri dan Analisis PCR semikuantitatif

Analisis densitometri dilakukan dengan Eagle Eye II Masih Video Systeme (Stratagen, La Jolla, Amerika Serikat). Ekspresi adalah standar dengan yang aktin ekspresi dari sampel reverse-ditranskripsi mRNA yang sama TNFa atau IL10. Rasio sitokin: -aktin dihitung untuk pengukuran ekspresi RNA semikuantitatif seperti telah dijelaskan sebelumnya

Statistik
Sebuah ANOVA keseluruhan, diikuti oleh beberapa pengujian dengan koreksi Bonferroni, dilakukan. Perbedaan antara kondisi dinilai melalui perbandingan berpasangan pasca hoc dengan tes Dunnet. AP nilai kurang dari 0,05 dianggap signifikan secara statistik. Semua nilai yang diberikan sebagai sarana SEM jika tidak dinyatakan lain.

HASIL
Pasien karakteristik
Sebanyak 11 pasien (8 pria, 3 wanita, usia rata-rata 27 tahun) dimasukkan. 4 pasien dirawat dengan inhalasi saja, 7 pasien menerima inhalasi dan antibiotik. Tabel Table1 merangkum demografi kedua kelompok.
p. i 4 2/2 35.25.0 p. I + i. v. TABEL 1 7 Pasien kelompok karakteristik 3/4 31.33.5

N Male/female Age (years)

p.i : Inhalation alone. P. i. + i. v: inhalation + i. v. antibiotic

Fucose / galaktosa inhalasi mengurangi P. aeruginosa dalam dahak

Inhalasi dengan fucose / galaktosa solusi sendiri secara signifikan menurun P.aeruginosa dalam dahak ( 1.032.500 561,714 bakteri / ml pra 302,347 527,525 vs bakteri / ml posting) (P <0,05). Kombinasi antibiotik intravena inhalasi dan juga secara signifikan mengurangi beban bakteri dalam dahak ( 1.007.000 254,215 bakteri / ml pra 223,592 500,366 vs bakteri / ml posting) (P <0,05). Pengurangan P aeruginosa dalam dahak terhirup saja dibandingkan dengan terapi kombinasi adalah serupa. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara kedua regimen pengobatan (P> 0,05) (Gambar (Figure1 ).
Gambar 1 Dahak tuduhan P. aeruginosa sebelu m (pra) dan sesudah (pasca) pengobatan dengan inhalasi saja (pi) atau pengobatan dengan dikombinasikan

inhalasi dan antibiotik iv (pi + iv). Berarti + SEM. *: P <0,05 vs pra.

Fucose / galaktosa terhirup menurun neutrofil dahak

Jumlah sel-sel inflamasi dalam dahak tidak signifikan diubah oleh inhalasi baik saja (P> 0,05) atau terapi kombinasi (p = 0,06). Namun, inhalasi saja secara signifikan menurunkan persentase neutrofil dahak (95,5 1,5% vs 84,0 2,0 pra

pasca%) (P <0,05) dan secara signifikan meningkatkan persentase makrofag dahak (3,0 0,0% vs 11,0 pra 1,0% post) dan dahak limfosit (0,5 0,5% vs 2,5 0,5 pra pasca%) (P <0,05) (Tabel (Tabel 2). Sebaliknya tidak ada perubahan signifikan yang diamati dengan terapi kombinasi (P> 0,05). Dalam inhalasi darah perifer sendirian dan terapi kombinasi tidak secara signifikan mengubah angka atau precentages dari PBMC (P> 0,05).
Macrophages (%) Lymphocytes (%) Neutrophils (%) Eosinophils (%) Pre Post Pre Post Pre Post Pre Post
TABEL 2 Inflamasi dahak sel-sel dalam

p.i. 3.00.0 11.01.0* 0.50.5 2.50.5* 95.11.5 84.02.0* 1.01.0 2.52.5

p.i.+ i.v. 7.23.2 3.51.2 2.30.9 2.31.3 90.23.8 93.81.8 0.30.2 0.80.5

Fucose / galacatose inhalasi tidak kompromi fungsi paru

Tidak ada perubahan signifikan dalam pO 2 , VC atau FEV1 dengan inhalasi sendiri atau terapi kombinasi (P> 0,05, data tidak ditampilkan).

Fucose / galaktosa terhirup menurun ekspresi TNFa

Kedua inhalasi sendirian dan terapi kombinasi menurun secara signifikan ekspresi mRNA dalam sel TNFa dahak (1,31 0,53 vs 0,54 pra 0,0 0,94 pos dan 0,39 vs 0,31 pra 0,13 posting) (P <0,05) (Gambar (Figure22 A) dan di PBMC (0,45 0,29 vs 0,24 pra 0,04 0,29 pos dan 0,17 vs 0,02 pra 0,20 posting) (P <0,05) (Gambar (Figure22 B). Ekspresi mRNA IL-10 tidak secara signifikan diubah oleh pengobatan (P > 0,05;. data tidak ditampilkan) TNFa kadar serum protein menurun secara bermakna setelah pengobatan dengan fucose / galaktosa inhalasi sendiri (P <0,05) tetapi tidak dengan terapi kombinasi (P> 0,05) (Gambar (Figure33 ).

Gambar 2 Ekspresi mRNA dalam sel TNFa dahak (A) dan di PBMC (B) sebelum (pra) dan sesudah (pasca) inhalasi kombinasi pengobatan saja (pi) inhalasi dengan atau dengan

antibiotik (pi + iv). Berarti + SEM.*: P <0,05 vs pra.

Gambar 3 Serum kadar protein TNFa sebelum (pra) dan sesudah (pasca) pengobatan dengan inhalasi saja (pi) atau pengobatan dikombinasikan dengan inhalasi dan antibiotik iv (pi + iv). Berarti + SEM. *: P <0,05 vs pra.

Fucose / galaktosa inhalasi tidak mempengaruhi penanda inflamasi dan fungsi hati
Tidak ada perubahan signifikan terhadap tingkat CRP, jumlah leukosit, tingkat IgG, IgE tingkat, tingkat GOT, GPT dan tingkat diamati setelah inhalasi sendiri atau dikombinasikan terapi (P> 0, 05, data tidak ditampilkan).

PEMBAHASAN
Dalam penelitian ini kami menemukan bahwa inhalasi dengan fucose / galaktosa dapat mengurangi P. aeruginosa dan neutrofil dalam dahak serta ekspresi TNFa dalam dahak dan darah perifer pasien CF dengan eksaserbasi akut. Kombinasi dengan antibiotik intravena tidak memiliki efek tambahan. Dalam penelitian kami menggunakan solusi fucose / galaktosa untuk memblokir P.aeruginosa lektin PA-I dan II PA-sebagai pendekatan alternatif untuk mengurangi kolonisasi saluran napas dengan bakteri ini. P. aeruginosa lektin PA-I dan II PA-yang mengikat fucose dan galaktosa berkontribusi pada vilrulence ini bakteri 10 . Oleh karena itu memblokir ini dapat mencegah kolonisasi lektin yang sedang berlangsung dan peradangan. Meskipun fucose / galaktosa telah dibuktikan efektif in vitro dan in vivo saat ini tidak ada informasi yang tersedia tentang dampak klinis fucose / galacatose ketika diberikan kepada pasien CF. Dalam penelitian ini kedua inhalasi fucose / galaktosa solusi sendiri dan terapi kombinasi inhalasi dan antibiotik menurun P. aeruginosa beban dalam sputum.Penelitian sebelumnya digunakan larutan garam hipertonik atau manitol sebagai pengobatan inhalasi di CF. Inhalasi dengan larutan garam hipertonik menyebabkan fungsi paru-paru meningkat dan tingkat eksaserbasi berkurang. Ada juga kecenderungan penurunan P. aeruginosa dalam dahak. Inhalasi manitol dengan izin batuk membaik pada pasien CF, tapi jangka panjang efektivitasnya belum ditentukan belum. Dalam penelitian ini kita tidak dapat mengesampingkan kemungkinan bahwa bagian dari efek mungkin karena hypertonicity. Namun, hal ini tidak menghalangi bahwa fucose / galaktosa solusi blok P. aeruginosa lektin dan bahwa ini adalah efek yang paling penting. Tentu saja kontrol eksperimental yang dihirup gula lain yang bukan merupakan pengikat yang kuat untuk lektin PA akan berguna untuk lebih mendukung gagasan bahwa efek fucose / galaktosa adalah karena pemulihan lift mucocilliary dan bukan karena hypertonicity.Kami tidak menyertakan kelompok kontrol yang lain karena telah jelas ditunjukkan

dalam percobaan sebelumnya yang fucose dan galaktosa dapat mencegah pengikatan PA lektin I dan II. Dalam penelitian penghambatan ketukan silia karena lektin PA dihitung serta pemulihan dengan menambahkan fucose dan / atau galaktosa. Terapi inhalasi saja tetapi tidak dikombinasi diperbaiki pola sel inflamasi dalam dahak (neutrofil kurang). Data ini mengejutkan. Tampaknya inhalasi saja bisa membersihkan bakteri dari saluran udara tanpa respon inflamasi yang kuat karena penghapusan fisik P. aeruginosa melalui lift mukosiliar. Di sisi lain harus diperhitungkan bahwa interaksi P. aeroginosa dengan antibotics adalah kompleks sebagai "subinhibitory" konsentrasi antibiotik mengarah ke penekanan sintesis lektin melalui sistem quorum sensing. Antibiotik karena itu dapat mengurangi efektivitas fucose / galaktosa. Hal ini masih harus dievaluasi lebih lanjut. Di sisi lain, baik pilihan pengobatan secara signifikan mengurangi ekspresi mRNA dalam sel TNFa sputum dan PBMC. Temuan ini setuju dengan hipotesis bahwa antibiotik serta terapi inhalasi memiliki efek anti-inflamasi. Menariknya kita hanya mengamati penurunan yang signifikan tingkat serum protein TNFa dengan inhalasi saja tapi tidak dengan terapi kombinasi. Hal ini menggoda untuk berspekulasi bahwa fucose / inhalasi galacatose mungkin dapat membersihkan bakteri dari paru-paru tanpa menginduksi peradangan.Namun, ini harus dievaluasi lebih lanjut. Tidak ada peningkatan yang signifikan dalam pengukuran fungsi paru-paru setelah inhalasi atau terapi kombinasi. Hal ini sebagian besar disebabkan oleh sejumlah kecil pasien dan waktu singkat dipelajari. Sebagai inhalasi fucose / galaktosa adalah sebuah pengobatan baru, sebuah pertanyaan penting menyangkut observasi efek samping dari perawatan ini. Dalam inhalasi fucose / galaktosa penelitian ini adalah baik ditoleransi dan tidak memiliki efek efek buruk pada fungsi hati. Namun, periode hal ini tidak pasien mengesampingkan treatement kemungkinan samping dapat bahwa selama berkepanjangan

terjadi.Menariknya,

kebanyakan

melaporkan lega dari gejala setelah inhalasi. Hal ini mungkin karena menurunkan viskositas lendir. Seperti telah disebutkan inhalasi dengan fucose / galaktosa untuk

mengurangi P.aeruginosa di CF pasien adalah pendekatan terapi baru yang belum pernah dilakukan sebelumnya. Namun, kelemahan utama dari studi ini adalah jumlah kecil pasien dipelajari dan perbandingan inhalasi dibandingkan antibiotik inhalasi +. Selain itu, pasien dengan eksaserbasi tetapi tidak pasien dengan penyakit stabil diselidiki.Inhalasi dengan fucose / galaktosa belum pernah digunakan sebelumnya dalam percobaan klinis dengan pasien CF. Untuk pertimbangan metodis kami memilih pasien dengan infeksi kronis dengan P. aeruginosa yang eksaserbasi karena pasien tersebut cenderung memiliki angka tinggi dari P. aeruginosa dalam sputum. Hal ini membuat lebih mudah untuk mengamati efek dalam mengurangi beban bakteri.Untuk masalah etika kami membagi kelompok penelitian dalam rasio 1:2 (inhalasi: inhalasi + antibiotik). Hal ini memastikan bahwa sebagian besar pasien diobati dengan antibiotik dan efek inhalasi sendiri dan inhalasi dengan antibiotik dapat dievaluasi. Tentu saja kontrol yang memadai akan inhalasi dengan pengenceran solusi untuk fucose dan galaktosa. Namun, penelitian ini direncanakan sebagai studi percontohan untuk melihat apakah fucose / galaktosa akan memiliki efek apapun. Penelitian lebih lanjut diperlukan untuk membandingkan fucose / galacatose untuk penarikan lain (salin hipertonik misalnya). Dalam kesimpulan temuan dalam laporan ini menunjukkan bahwa inhalasi dengan fucose / galaktosa solusi dapat mengurangi P. aeruginosa dalam dahak pasien CF dewasa dengan infeksi kronis dengan bakteri ini. Itu ditoleransi dan tidak ada efek samping yang serius diamati. Peradangan lokal di paru-paru dapat dilemahkan oleh penghapusan P. aeruginosa . Penelitian selanjutnya akan harus membandingkan efek inhalasi dengan solusi fucose / galaktosa dengan rejimen inhalasi lainnya. Ini juga akan diperlukan untuk menentukan pasien yang cenderung mendapat keuntungan terbanyak dan apakah harus digunakan dalam interval teratur atau tidak.

REFERENSI
1. 2. 3. 4. 5. Davis PB, Drumm M, Konstan MW. . Cystic fibrosis Am J Med Perawatan Respir Crit. 1996; 154:1229-1256. [ Gibson RL, Burns JL, Ramsey BW. . Patofisiologi dan manajemen infeksi paru pada cystic fibrosisAm J Med Perawatan Respir Crit. 2003; 168 :918-951. 3 R. Nelson pipa pengembangan antibiotik kering. Lancet. 2003; 362 . :1726-1727 Gilboa-Garber N. lektin Pseudomona aeruginosa. Metode Enzymol. 1982; 83 . :378-385 Steuer MK, Herbst H, J Beuth, Steuer M, Pulverer G, Matthias R. Hemmung der durch bakteriellen Adhsion Lektinblockade bei durch Pseudomonas aeruginosa Otitis eksterna induzierter im Vergleich zur lokalen Therapie mit antibiotika (Jerman) Otorhinologica Nova. 1993; 3 : 19-25. 6. Adam EC, Mitchell BS, Schumacher DU, Grant G, Schumacher U. Pseudomonas aeruginosa lektin II berhenti berdetak silia manusia:. implikasi terapeutik fucose . Am J Med Perawatan Respir Crit 1997; 155 :2102-2104. 7. von Bismarck P, Schneppenheim R, Schumacher U. Keberhasilan pengobatan infeksi saluran pernafasan Pseudomonas aeruginosa dengan larutan gula - laporan kasus pada prinsip terapi berbasis lektin Klin Pdiatr. 2001; 213 :285-287. 8. Adam EC, Schumacher DU, Schumi U. Silia dari pasien cystic fibrosis bereaksi terhadap Pseudomonas aeruginosa lektin ciliotoxic II dalam cara yang mirip dengan kontrol normal silia laporan kasus. J Laryngol Otol. 1997; 111 :760-762. 9. Hancock A, L Armstrong, Gama R, Millar A. Produksi dari interleukin 13 oleh makrofag alveolar dari paru-paru normal dan fibrosis Am J Respir your Mol Biol. 1998; 18 :60-65. 10. Mitchell E, Houles C, Sudakevitz D. et al. . Dasar struktural untuk adhesi dimediasi oligosakarida Pseudomonas aeruginosa di paru-paru pasien cystic fibrosis Nat struct Biol. 2002; 9 . :918-921 11. Wark PA, McDonald V. Nebulised salin hipertonik untuk cystic fibrosis. Cochrane database Syst Rev 2003; 1 :. CD001506 12. Donaldson SH, Bennett WD, Zeman KL, Knowles MR, Tarran R, Boucher RC. Lendir clearance dan fungsi paru-paru di cystic fibrosis dengan salin hipertonik. N Engl J Med. 2006; 354 :241250. 13. Elkins MR, Robinson M, Rose BR, Habour C, Moriarty CP, Marks GB, Belousova EG, Xuan W, Bye PT. Saline hipertonik Nasional di Cystic (NHSCF) Kelompok Studi Fibrosis. Sebuah uji coba terkontrol jangka panjang salin hipertonik inhalasi pada pasien dengan fibrosis kistik. N Engl J Med.2006; 354 :229-240. 14. Robinson M, Daviskas E, Eberl S, J Baker, Chan HK, Anderson SD, Bye PT. Efek manitol dihirup pada pembukaan lendir bronkus pada pasien cystic fibrosis:. Sebuah studi pilot Eur Respir J. 1999;14 . :678-685 15. MeWe M, Tielker D, R Schonberg, Schachner M, Schumacher U, Jaeger EK. Lektin-aku Pseudomonas aeruginosa dan-II dan interaksi mereka dengan silia saluran napas manusia. J Laryngol Otol. 2005; 119 . :595-599

16. Sofer D, Gilboa-Garber N, Belz A, Garber NC. "Subinhibitory" merepresi produksi eritromisin
lektin Pseudomonas aeruginosa, autoinducer dan faktor virulensi. Kemoterapi. 1999; 45 :335341.

DAFTAR PUSTAKA

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/