Penyimpangan Hukum Lambert-Beer Akibat Instrument

Dari grafik hubungan antara spektrum absorpsi analit terhadap panjang gelombang, kurva kalibrasi antara absorbansi terhadap konsentrasi, dan % kesalahan, terlihat bahwa jika panjang gelombang di diperbesar (tidak pada panjang gelombang maksimum), maka kepekaan atau respon dari spektrofotometer akan menurun. kemudian limit deteksinya semakin besar karena pengukuran tidak dilakukan pada panjang gelombang dimana absorbans maksimum. Hal ini juga akan memperbesar kesalahan dalam pengukuran. Kemudian jika lebar celah diperbesar, maka serapan akan semakin lebar dan cahaya semakin tidak monokromatis sehingga resolusi dan puncak kurva makin tidak sempurna serta % kesalahan akan meningkat. Jika stray light tak terserap diperbesar maka akan menyebabkan ketidaklinieran kurva kalibrasi sebagai akibat dari self-absorption atau ketakcukupan intensitas cahaya yang melewati sel dan mengakibatkan penurunan sensitivitas (kepekaan). Selain itu, hal ini juga akan memperbesar kesalahan pengukuran. Kemudian jika panjang jalan sinar diperbesar maka absorbansi akan semakin besar dan kemiringan kurva kalibrasi semakin besar sehingga menyebabkan penurunan limit deteksi. Dalam hal ini peningkatan panjang jalan sinar tidak mempengaruhi kesalahan pengukuran. Kemudian jika absortivita maksimum diperbesar maka dampaknya akan sama dengan penambahan panjang jalan sinar, yaitu memperbesar absorbansi dan kemiringan kurva kalibrasi serta menyebabkan penurunan limit deteksi. Seperti halnya penambahan panjang jalan sinar, penambahan absortivita maksimun tidak berpengaruh kepada % kesalahan. Jika lebar pada puncak diperbesar maka kepekaan atau sensitivitas dari spektrofotometer akan menurun sehingga akan memperbesar % kesalahan.