Escola Superior de Hotelaria e Turismo do Estoril Relatrio de Microbiologia Propagaes

Curso: Produo Alimentar na Restaurao Aluna: Sofia de Almeida Pinto Vieira Lus N: 4881 Ano: 2 Semestre: 1 Disciplina: Microbiologia Alimentar I Docente: Cladia Azevedo Data de Entrega: 6 de Novembro de 2011

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ndice
Objectivo .......................................................................................................................... 3 Introduo ........................................................................................................................ 3 Mtodos de Propagao .................................................................................................. 4 Diluio ......................................................................................................................... 4 Suspenso..................................................................................................................... 4 Espalhamento ............................................................................................................... 4 Incorporao ................................................................................................................ 4 Esgotamento ................................................................................................................ 5 Picada Central............................................................................................................... 5 Resultados ........................................................................................................................ 6 Discusso de Resultados .................................................................................................. 6 Concluso ......................................................................................................................... 7 Bibliografia........................................................................................................................ 8

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Objectivo
O Objectivo principal deste trabalho prtico era a aprendizagem dos alunos na elaborao de diversos processos de propagao a que se d o nome de Propagaes (Sementeiras). Foram realizados no total seis mtodos de propagao: Diluio. Suspenso, Incorporao, Espalhamento, Esgotamento e Picada Central.

Introduo
Os microrganismos so seres vivos de tamanho reduzido observveis apenas em microscpio (Denise Lacasse, Introduo Microbiologia Alimentar) o crescimento destes seres vivos depende de diversos factores (Stephen J. Forsythe, Microbiologia da Segurana Alimentar). Existem diversos microrganismos tanto inofensivos como perigosos para a sade pblica, para um maior controlo das espcies necessrio realizar diversas anlises microbiolgicas que fornecem os resultados necessrios para o estudo das espcies (Stephen J. Forsythe, Microbiologia da Segurana Alimentar). Estas anlises realizam-se a partir dos chamados mtodos de propagao, estes mtodos fornecem dados rpidos e exactos do tipo de microrganismos presentes no meio de cultura. Os meios de cultura escolhidos para o cultivo de bactrias especificas normalmente imitam o habitat normal das mesmas (Michael J Pelczar Jr, ECS Chan, Noel e Krieg Conceitos e aplicaes Microbiologia). A propagao tambm conhecida como sementeira o semear de um meio de cultura para outro atravs de diversas tcnicas. Para a realizao deste trabalho prtico foram realizados os diversos mtodos de propagao de acordo com as regras previamente estabelecidas, a realizao destes mtodos teve como objectivo a aprendizagem e para que os mesmos se habituassem aos termos e aos mtodos. No foram realizados nenhuns testes especficos para nenhum microrganismo especfico.

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Mtodos de Propagao
Diluio
Esta tcnica efectuada por transferncia de volume, ou seja, de um meio lquido para outro meio lquido. Normalmente a preparao de propagaes feita de uma escala 1:10. Transfere-se 1 ml de uma suspenso bacteriana para 9 ml de um ensaio com gua Peptonada Tamponada.

Suspenso
A propagao por suspenso uma tcnica efectuada por transferncia de massa, que realizada a partir de um meio slido para um meio lquido. Com ajuda de uma ansa retirada uma colnia de uma placa de Petri com crescimento de microrganismos visvel, esta colnia ser depois suspensa num meio lquido de 2 ml. Ao manusear com ansa necessrio aquece-la antes de entrar em contacto com a colnia escolhida para no contaminar a realizao desta colnia e igualmente importante deixar esta arrefecer, pois se tiver muito quente e entrar em contacto coma colnia ir matar todos os microrganismos prejudicando assim os resultados finais do trabalho prtico.

Espalhamento
O espalhamento um tipo de propagao no qual o crescimento microbiano apenas ocorre na superfcie do meio de cultura, efectuado a partir de um meio lquido para um meio slido. colocado na superfcie de uma placa de Petri (com meio de cultura) 0,1 0.2 ml de inoculo, este depois com a ajuda de um espalhador espalhado de forma circular por toda a superfcie da placa, o espalhador roda num sentido o e placa de Petri no sentido contrario. Se esta tcnica no for bem elaborada contem o risco de ser visveis as marcas do espalhador e o crescimento microbiano no ser uniforme.

Incorporao
Neste tipo de propagao verifica-se o crescimento de colnias superfcie e no interior do meio de cultura, realizada a partir de um meio lquido para um meio slido. retirado 1 ml de inoculo a partir da diluio depois colocado numa placa de Petri onde sero adicionados cerca de 15 ml de meio de cultura. So depois efectuados movimentos giratrios e lineares de forma a espalhar e incorporar o inoculo, estes movimentos iro facilitar a contagem aps o tempo de incubao.

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Esgotamento
Este tipo de tcnica uma tcnica quantitativa que se pode realizar de duas maneiras, ou de um meio lquido para um meio slido ou ento de um meio slido para um meio slido. De um meio lquido para um meio slido retirada com ajuda de uma ansa uma gota de inoculo e realizam-se estrias no meio slido. De um meio slido para um meio slido transfere-se com ajuda de uma ansa uma colnia de um meio slido para outro meio slido, so depois realizadas as estrias nesse meio slido. Estas tcnicas tm como objectivo esgotar o inoculo de forma a obter-se colnias isoladas, as estrias so realizadas de 3 formas, na primeira estria esgota-se a maior parte do produto, realizando-se movimentos de vai e vm, estas estrias so normalmente feitas muito juntas umas das outras de forma a esgotar a maior parte do inoculo, na segunda forma realizado o mesmo movimento vai e vem mas realiza-se estrias mais afastadas, por fim na ltima forma realizado um movimento de Zig Zag mais afastado.

Picada Central
Este tipo de propagao usado maioritariamente para o estudo da mobilidade, respirao e metabolismo bacteriano. realizada de um meio slido para outro meio slido. Com ajuda de uma ansa retirada uma colnia de um meio slido, este depois transferido para um tubo de ensaio com agar inclinado. A ansa colocada em forma recta e direita neste meio, retira-se com cuidado e no final passa-se com ansa na rampa, que se formou no tubo, em movimentos de zig zag.

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Resultados
Mtodo de Propagao Diluio Suspenso Incorporao Espalhamento Esgotamento Picada Central Crescimento Sim x x x x x x No Qualidade da Tcnica Fraca Mdia x Alta x x x x x x x x Distino de colnias Sim No x x x x x x Fraca Densidade Mdia Alta x x x

Discusso de Resultados
Em termos gerais os mtodos foram realizados com sucesso sendo que alguns com mais dificuldades que outros. No mtodo de suspenso foi visvel em todos os tubos de ensaio dos diversos grupos crescimento microbiobiano, com turvao e sedimentos visveis. Em relao ao sobrenadante no ocorreu em nenhum grupo, ou seja, no houve formao de uma pequena membrana. A propagao em suspenso permitiu a garantia de que foi possvel inocular em condies perfeitas e foi possvel avaliar o crescimento. A incorporao e o espalhamento so tcnicos de propagao quantitativos, nesta aula estas tcnicas serviram apenas para aprendizagem e no foram realizadas contagens nas mesmas. Na tcnica de propagao via incorporao foi possvel reparar que na maior parte dos grupos a densidade era intensa, a razo pela qual o meio ficou muito denso devido diluio estar muito concentrada. Quanto mais concentrada for a diluio maior ser a densidade. No espalhamento obteve-se diversos resultados, numas placas eram visveis as marcas por onde o espalhador passou provocando um crescimento no homogneo. Noutras placas o crescimento foi totalmente uniforme com alguma densidade. Em casos excludos onde ocorreu o rompimento do meio de cultura provocando a alterao do meio no foi possvel verificar um crescimento homogneo, apesar deste percalo foi possvel verificar o crescimento de pequenas colnias individuais ao longo da placa. O Esgotamento um mtodo em que o objectivo obter colnias isoladas, apesar da inexperincia dos alunos e de alguma dificuldade foi possvel em algumas placas obter-se colnias isoladas. Noutras placas devido ao pouco treino foi uma tcnica mal feita havendo alguma densidade de microrganismos no sendo observvel o crescimento de colnias 6 Microbiologia Alimentar I Sementeiras

Escola Superior de Hotelaria e Turismo do Estoril individualizadas. Em algumas excepes em que houve rompimento do meio no possvel verificar a isolao das colnias. Em geral na picada central foi visvel o crescimento microbiano mas foi na rampa que verificou-se um maior crescimento na rampa concludo que os microorganismos eram aerbios facultativos. Num caso de excepo no ocorreu crescimento microbiano, possivelmente, a ANA (ver o nome real)! utilizada para retirar a colnia estaria muito quente, queimando as colnias restantes.

Concluso
De modo geral podemos concluir que o trabalho prtico foi realizado com sucesso e que a aprendizagem dos diversos mtodos foi adquirida com grande compreenso. Os resultados obtidos apesar de alguns negativos foram os esperados. No existiu dificuldade na compreenso tanto dos mtodos como dos resultados.

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Bibliografia
1. FORSYTHE, Stephen J. Microbiologia da Segurana Alimentar; editora Artmed

2. LACASSE, Denise Introduo Microbiologia Alimentar; Coleco Cincia e Tcnica, Instituto PIAGET Diviso editorial

3. PELCZAR JR, Michael J; CHAN ECS; KRIEG, Noel R. Microbiologia, Conceitos e Aplicaes; Pearson Makron Books

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