1 Alat
Pipet tetes Botol vial Aluminium foil Termos dingin Kulkas/freezer Pipet ukur Gelas beaker Tabung reaksi Bejana kromatografi vertical (Camag-Muttenz-Switzerland) Ball filler Tabung eppendorf Oven Strip test benzodiazepine, THC, dan opiat dari BIO-RAD
Strip pH dari MACHEREY-NAGEL Pemanas dari Caorning PC-420D Catridge SPE ACCUBOND dan CHROMABOND
3.2.2 Bahan
Bahan Kimia dan Pelarut Bahan kimia dan pelarut yang digunakan mempunyai derajat kemurnian pro analisis dari Merck-Germany yaitu : methanol, kloroform, sikloheksan, toluene, dietilamin, HCl, NaOH, amoniak 25%, aseton dan etanol.
Fase Diam Fase diam yang digunakan adalah plat Al-TLC Si 60 GF 254 dari MerckGermany
Senyawa Standar Senyawa standar pembanding digunakan larutan morfin, kodein, kafein, papaverin, bromheksi, teofilin dan dekstrometorfan.
3.2 Prosedur Kerja 3.2.1 Sistem Kromatografi A. Penyiapan Fase Diam Plat Al-TLC Si 60 GF254 Dipotong ukuran Plat yang dipotong sudah sesuai
Dicuci/dielusi dengan metanol Plat yang sudah dicuci Diaktivasi dalam oven pada suhu 120 C selama 30 menit Plat siap digunakan
B. Penyiapan Larutan Pengembang 1. Larutan Pengembang TB Sikloheksana (75 mL) Toluene (15 mL) dietilamin (15 mL) Dihomogenkan 2. Larutan Pengembang TAEA Toluene (45 mL) Aseton (45 mL) Etanol (7 mL) Amonia (3 mL) Dihomogenkan Labu ukur Larutan pengembang yang siap digunakan Labu ukur Larutan pengembang yang siap digunakan
C. Larutan pengembang TB
Bejana digunakan
siap
D. Larutan Standar Pembanding Larutan standar pembanding berbeda untuk tiap system fase gerak. Larutan standar pembanding ini digunakan untuk menghitung hRfc senyawa.
1. Fase Gerak Sistem TB
3.2.2 Pemisahan Hasil Ekstraksi Sampel dengan KLT Plat Al-TLC Si 60 GF254 Ditotolkan standar pembanding + 25 L larutan ekstrak Plat Al-TLC Si 60 GF254 Dimasukkan ke dalam bejana kromatografi sampai 90 mm dari tepi atas plat Plat yang sudah dimasukkan ke dalam bejana Plat diangkat dan dikeringkan dalam oven pada suhu 60 C selama 10 menit Plat yang dikeringkan sudah
3.2.3 Deteksi dengan Spektrofotodensitometer dan Penetapan Hasil Ekstraksi Sampel Plat yang dielusi sudah
Dipindai dengan TLC scanner Histogram Setiap noda dibuat spektrumnya dari 190 400 nm Hasil spektrum Dicocokkan harga hRfc dan spectrum senyawa yang terdeteksi Senyawa hasil deteksi