Anda di halaman 1dari 12

Teknik Isolasi Biakan Murni

Wisnu Satrio Herlambang (116275) Yeni Dwija Cahyanti (116276)

Pendahuluan
Isolasi mikroba adalah memisahkan mikroba satu dengan mikroba lain yang berasal dari campuran berbagai mikroba. Inokulasi adalah penanaman mikroba. Isolasi mikroba dapat dilakukan dengan cara menumbuhkan (menanam) mikroba dalam medium padat atau medium cair.

Langkah Inokulasi dan Isolasi Mikroba

Menyiapkan Ruangan Pemindahan dengan kawat inokulasi Pemindahan dengan pipet

Teknik Biakan Murni


1. 2. 3. 4. 5. Cara Pengenceran Cara Penuangan Cara Penggesekan / Penggoresan Cara Penyebaran (Agarsebar) Cara Pengucilan Satu Sel (single cell isolation) 6. Cara Inokulasi pada Hewan

Teknik Biakan Murni


1. Cara Pengenceran
Suspensi berupa campuran spesies diencerkan dlm satu tabung Diambil 1 mL untuk diencerkan Dari enceran yg kedua diambil 1mL untuk diencerkan lbh lnjut

Biakan murni

Koloni tumbuh dalam medium

0,1 mL disebar pada medium padat

Teknik Biakan Murni


2. Cara Penuangan
Ambil sedikit sampel campuran bakteri yg sudah diencerkan Disebar ke medium dari kaldu dan gelatin encer Medium mengental

NB: penuangan pada cawan petri menggunakan agar-agar sebagai pengganti gelatin

Nampak koloni

Teknik Biakan Murni


3. Cara Penggesekan / Penggoresan
(+) penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah (-) bakteri-bakteri anaerob tidak dapat tumbuh Yang perlu diperhatikan: Gunakan ose yang dingin untuk menggores permukaan Waktu menggores, ose dibiarkan meluncur di atas permukaan lempengan Ose harus dipijarkan setelah menggores suatu daerah Menggunakan tutup cawan petri untuk melindungi permukaan Membalikkan lempeng untuk mencegah air kondensasi jatuh di atas permukaan

Teknik Penggesekan
a. Goresan T
b. Goresan Kuadran c. Goresan Radian d. Goresan Sinambung

Teknik Biakan Murni


4. Cara Penyebaran (Agarsebar)
Biarkan cairan mengalir ke atas permukaan agar Pipet 0,1 mL cairan dari botol pengencer Pengenceran sama seperti cara penuangan

Cairan sampel di sebarkan dg penyebar yg terbuat dr gelkas

Sterilisasi penyebaran dilakukan dg mencelupkan ke alkohol, kemudian dipanaskan sehingga alkohol terbakar habis. Penyebar didinginkan dahulu, penyebaran cairan sampel dilakukan dg memutar

Teknik Biakan Murni


5. Cara Pengucilan Satu Sel (Single Cell Isolation)
Tampak suatu tetesan yg mengandung satu bakteri Buat beberapa tetesan bergantung pada kaca penutup dg mikropipet Menggunakan alat mikropipet yg ditempatkan pada mikromanipulator

Tetesan dipindahkan ke suatu medium encer

Diperoleh biakan murni

Teknik Biakan Murni


6. Cara Inokulasi pada Hewan