Introduccion: La fotosntesis es un proceso anablico que realizan todas las plantas, para fabricacin de sus reservas y obtencin de ATP

por medio de reacciones qumicas donde intervienen enzimas especficas, para ellos se necesita la absorcin de fotones de luz por medio de un pigmento fotosinttico llamado clorofila que se encuentra en la membrana tilacoidal, entre ellos las mas importantes la clorofila a y la clorofila b, que captan los fotones de luz para desencadenar una reaccin qumica convirtiendo energa luminosa en energa qumica por oxido-reduccin, esto sucede en la membrana tilacoidal. La fotosntesis es un proceso que se desarrolla en dos etapas, La primera es un proceso dependiente de la luz (etapa clara), requiere de energa de la luz para fabricar molculas portadoras de energa a usarse en la segunda etapa.En la etapa independiente de la luz (etapa oscura) los productos de la primera etapa son utilizados para formar los enlaces C-C de los carbohidratos. Las reacciones de la etapa oscura usualmente ocurren en la oscuridad si los transportadores de energa provenientes de la etapa clara estn presentes, La etapa clara ocurre en la grana y la oscura en el estroma de los cloroplastos.

La fotosntesis no se podra llevar acabo sin los pigmentos fotosintticos por ende no hubiera liberacin de oxgeno y no hubiera vida en la tierra entre las ms importantes la clorofila a y b la proporcin entre ellos indicara la capacidad de absorbancia de luz solar para ello se aplicara una metodologa para obtener los siguientes objetivos: Objetivos: Separar por diversos mtodos los pigmentos fotosinttizantes. Demostrar que los pigmentos fotosintticos pueden ser extrados fcilmente con solventes orgnicos. Estudiar algunas de las propiedades fsicas y qumicas.

Revisin de Literatura: Pigmentos fotosintticos. Los ms importantes son las clorofilas, pigmentos verdes con estructuras policclicas que se parecen a la protoporfirina de la hemoglobina, la molcula est compuesto de un sistema de anillos heterocciclicos (cuatro anillos pirrlicos sustituidos y un quinto anillo no pirrlico) adems contiene una larga cadena hidrofbica de un alcohol, el fitol, esterificando a un cido sustituyente de un de los pirroles. El sistema de anillos heterocclicos tiene un estructura con alternancia de enlaces sencillos y doble (conjugados) que constituyen el grupo cromforo responsable de la absorcin de la luz. Los cloroplastos de las plantas superiores contienen siempre dos tipos de clorofila. Una invariablemente la clorofila A, mientras que la segunda es la clorofila B, que slo

difiere de la clorofila a en que tiene un grupo aldehdo en lugar de un grupo metilo en el anillo ll. La mayora de las plantas superiores contienen aproximadamente el doble de clorofila A que de clorofila B. en organismos fotosintetizadores inferiores existen otras clorofilas con pequeas diferencias qumicas.

Adems de las clorofilas, las membranas tilacoidales contienen pigmentos secundarios que tambin absorben la luz, llamados conjuntamente pigmentos accesorios. Entre ellos se encuentran los carotenoides que incluyen a los carotenos, no oxigenados, y las xantofilas, decolores rojo al amarillo y las ficobilinas que son pigmentos

tetrapirrlicos pero no cclicos, presentes en lagas rojas y en cianobacterias e incluyen a la ficocianina (azul) y a la ficoeritrina (roja).

La clorofila fue descubierta en 1817 por los qumicos franceses Pelletier y Caventou, que consiguieron aislarla de las hojas de las plantas. Pelletier introdujo los mtodos, basados en la utilizacin de disolventes suaves, que permitieron por primera vez aislar no slo la clorofila, sino sustancias de gran importancia farmacolgica como la cafena, la colchicina o la quinina. Materiales: Hoja de Lechuga Hoja de Betarraga Hoja de Tomate Acetona al 80% Triturador. Embudo. Papel filtro. ter de petrleo. Balanza. Metanol. Agua destilada. Vaso e precipitacin. Tubos de ensayos. Pera decantacin

Mtodo: A) Extraccin de los Pigmentos del Cloroplasto:

Est basado en la accin de solventes orgnicos sobre los lpidos del cloroplasto dentro de los cuales los pigmentos se hallan disueltos (pigmentos liposolubles). Hierva 20g de hojas frescas en agua durante 2 minutos, no ms (porque). Inmediatamente transfiralas a un mortero de porcelanas y tritrelas bien, usando 50ml de acetona al 80%, luego lave el mortero con los otros 50 ml de acetona al 80% y filtre. En el extracto de acetona se encuentran los pigmentos fotosintetizantes extrados de las hojas. Separacin de los pigmentos del cloroplasto: La separacin de los pigmentos fotosintetizantes se puede hacer en dos formas: 1) Por la distribucin de los pigmentos frente a solventes inmiscibles. Esto naturalmente est en funcin del coeficiente de particin de cada pigmento, o sea del grado que una sustancia o grupo de sustancias es fraccionada por dos solventes inmiscibles. 2) Por medio de la cromatografa de papel, que nos va a permitir separar e identificar individualmente cada pigmento contenido en un extracto acetonico determinado. 3) Separacin por solventes inmiscibles: a) Vierta 80 ml del extracto acetonico en un embudo de separacin y aade 50 ml de ter de petrleo y cuidadosamente agite por unos minutos (1 a 2 min). Deje reposar y Ud. Notara la separacin en dos capas. La capa superior contiene los pigmentos fotosintetizados disueltos en ter de petrleo, la capa inferior es una mezcla de acetona, atonicanicas y agua las que son intersolubles. Porque los pigmentos se liberaron de su solvente inicial, la acetona. b) Descarte la capa inferior abriendo la llave del embudo separados y retenga solo la porcin superior. Lvela con agua destiladas 3 o 4 veces, descartando en cada operacin la porcin inferior. c) Enseguida aada 40ml de Metanol al 90% y mezcle cuidadosamente. Se observara la formacin de dos capas. La porcin es el ter de petrleo que retiene a la clorofila y al caroteno. En la porcin inferior estn la clorofila b y la xantofila disueltas en metanol. d) Transfiera la porcin inferior a otro embudo de separacin, sin dejar pasar liquido de la porcin superior contenida en el embudo inicial que dominamos Embudo A, el cual contiene la clorofila a y el caroteno el embudo B que contiene la clorofila B y la Xantofila Embudo A: Vierta 20 ml de KOH al 20% en metanol recientemente preparado, tape bien, agite y deje en reposo. Note la formacin de dos capas. Vierta 20ml de agua destilada, mezcle nuevamente y deje en reposo. Las dos capas que se forman contienen respectivamente la superior caroteno y la inferior clorofila a.

Embudo B: Vierta 40ml de ter etlico, lave cuidadosamente con 20ml de agua destilada repitiendo el proceso 2 o 3 veces descartando sucesivamente la porcin inferior que contiene metanol y agua. La clorofila b y la xantofila ahora estn contenidas en un extracto de ter. Vierta 20ml de KOH al 20% en metanol. Tape bien el embudo, agite con cuidado y deje en reposo durante 10 minutos. Aade luego de los 10 minutos 20 ml de agua destilada y deje en reposo hasta que se separen en dos capas. La capa superior contiene Xantofila y la inferior Clorofila b. As se tiene separados los cuatro pigmentos principales de los cloroplastos, en funcin de sus coeficientes particin en lquidos inmiscibles.

Resultados: Al final de la prctica se logr obtener las soluciones y poder observar los diferentes pigmentos presentes en las hojas de tomate.

Solucin B

Solucin A

Solucin A

Conclusin:

Se pude observar que la clorofila A tiene un color ms claro que el de la clorofila B En la parte superior de la solucin A se puede observar el color casi transparente del caroteno. En la parte superior de la solucin B se puede observar el color opaco de la Xantofila.