Mikrobiologi Farmasi

Nita Rusdiana M.Sc., Apt

PERTEMUAN 8 Sterilitas

Methode Sterilisasi
Pemanasan Basah Autoclaf Dgn Bacterisida

Methode Sterilisasi

Pemanasan Kering

Oven Flaming Air Mendidi h

Gelombang Pendek

Pengertian
Steril
Bebas dari segala macam bentuk kehidupan Membebaskan tiap benda/substansi dr semua kehidupan dlm bentuk apapun.
Mematikan / menyingkirkan mikroorganisme yang dpt menyebabkan infeksi

Sterilisasi

Desinfeksi

Next

Fungsi
Untuk mengisolasi mikroorganisme dan mendapatkan biakan murni

Praktek
Alat, bahan, media, dll.

FAKTOR-FAKTOR YANG MEMPENGARUHI STERILISASI DAN DESINFEKSI

1. Hidrasi (Pengurangan cairan dalam

tubuh)

Hidrasi berperan dalam proses denaturasi & koagulasi oleh panas (kalor). Koagulasi berlangsung baik bila protein pd bakteri cukup mengandung air.

2. Pengaruh Suhu
Semakin rendah suhu yg digunakan semakin lama waktu yg diperlukan utk membunuh mikroorganisme Sifat mikrobisida dr bahan kimia pd umumnya mjd makin efektif bila dibuat semakin hangat

3. Konsentrasi tidak boleh terlalu pekat

Bila konsentrasi disinfektan melampaui konsentrasi (misal >1% pd fenol), maka peningkatan daya disinfeksi semakin berkurang

4. Oligodinamika
Mrpk aktivitas yg diperlihatkan logam berat dlm jmlh yg sangat sedikit dimana dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme di sekitar logam tsb

5. Disinfektan
Keefektifan disinfektan, memp sifat al : Memp sifat mikrobisida yg sempurna dlm waktu beberapa menit, paling lama 1 jam Tidak merusak bahan Tidak hilang keaktifannya oleh bahan dr luar Stabil dlm penyimpanan Mudah didapat dan tdk mahal

Cara-cara Sterilisasi FISIK

Pemanasan Sinar gelombang pendek (radiasi) Sinar-X, Sinar UV, Sinar Gamma

KIMIA
Menggunakan Bahan kimia

MEKANIK
Saringan / filter

Metode sterilisasi
Ada 2 cara sterilisasi :
1.Pemanasan basah : digunakan pada kebanyakan media perbenihan karena mengandung air 2.Pemanasan kering : digunkan untuk alat-alat

dari gelas, alat-alat dari metal, kertas pembungkus

barang yg tidak mengkerut oleh panas, minyak, waxes dan powder

Metode sterilisasi
a. Pemanasan Basah Prinsipnya adalah dengan cara mengkoagulasi atau denaturasi protein penyusun tubuh mikroba sehingga dapat membunuh mikroba.

Uap bertekanan (autoklaf) Digunakan untuk sterilisasi alat gelas Waktu yang dibutuhkan untuk sterilisasi larutan suhu 121C

Uap jenuh ini dapat menghancurkan spora bakteri yang tahan pemanasan.

Autoclav

Tekanan uap air 0 10 15

Temperatur 1000C 1150C 1210C

Waktu sterilisasi 45 menit 18 menit

30

1340C

3 menit

Autoklav

Pemanasan dengan bakterisida Digunakan untuk sterilisasi larutan berair atau suspensi obat yang tidak stabil dalam autoklaf. Larutan yang ditambahkan bakterisida dipanaskan pada suhu 100C selama 10 menit di dalam pemanas air Bakterisida yang digunakan 0,5% fenol; 0,5% klorobutanol; 0,002 % fenil merkuri nitrat; 0,2% klorokresol.

Metode Sterilisasi
b. Pemanasan Kering Prinsipnya adalah protein mikroba pertamatama akan mengalami dehidrasi sampai kering. Selanjutnya teroksidasi oleh oksigen dari udara sehingga menyebabkan mikrobanya mati.

Udara panas oven

Digunakan untuk sterilisasi alat gelas (tabung reaksi, petri, pipet), alat bedah (gunting, kapas alat suntik) Suhu sterilisasi yang digunakan adalah 170C selama 1 jam, 160C selama 2 jam, 150C selama 3 jam.

Flaming

Dengan jilatan api thd jarum, mulut tabung biakan, kaca objek, kaca penutup Benda2 tsb dijilatkan pd api bunsen tanpa membiarkannya memijar

Bunsen

Air mendidih

Digunakan untuk sterilisasi alat bedah seperti jarum. Hanya dilakukan dalam keadaan darurat.

Dapat membunuh bentuk vegetatif mikroorganisme tetapi tidak sporanya.

Sterilisasi gelombang pendek

Sterilisasi dengan radiasi Menggunakan : Udara panas : Oven, 170-180 derajat C, selama 2 jam Uap panas : Otoklaf, 121 derajad C, 1-2 Atm., 1530 Menit. Prinsipnya Radiasi menembus dinding sel dengan langsung mengenai DNA dari inti sel sehingga mikroba mengalami mutasi. Digunakan untuk sterilisasi bahan atau produk yang peka terhadap panas Ada dua macam radiasi yang digunakan : gelombang elektromagnetik (sinar x, sinar ) dan arus partikel kecil (sinar dan ).

INDIKATOR STERILISASI
Ada 2 cara yg biasa digunakan : a. Indikator kimia b. Indikator spora
a. Indikator kimia Diletakkan di tengah dari bahan yang hendak di disterilkan (bagian yang paling dingin), mis : bag paling bawah dari chamber 1. Brownes sterilizer controlo tube Berisi satu larutan yg berwarna merah berubah menjadi hijau bila dipanasi Bahan ini harus disimpan di bawah 200C Mencegah perubahan warna prematur Digunakan secara rutin

2. Adhesive tape (Bowie Disk Autoclav tape test) Untuk mengetahui/mengukur penetrasi dari uap air bersama-sama dengan tes lain

b. Indikator Spora

Spora bakteri kering diletakkan diantara bahan yang

disteril dan setelah proses tsb diperiksa viabilitasnya Bacillus stearothermophilus satu termophilic bacteria dpt tumbuh pd suhu 55 600C yg dipakai sbg tes Sporanya dapat dirusak pada suhu 1210C pada 12 menit

Sterilisasi KIMIA

Desinfektan
Desinfeksi adalah membunuh mikroorganisme penyebab penyakit dengan disinfektan (antiseptik)

Ada 2 istilah :
Desinfektan dan Antiseptik

Macam-macam desinfektan yang digunakan: 1.Alkohol

Etil alkohol atau propil alkohol digunakan untuk mendesinfeksi kulit. Alkohol yang dicampur dengan aldehid digunakan dalam bidang kedokteran gigi untuk mendesinfeksi permukaan

2. Aldehid
Glutaraldehid merupakan salah satu desinfektan yang populer pada kedokteran gigi Glutaraldehid 2% dapat dipakai untuk mendesinfeksi alat-alat yang tidak dapat disterilkan Larutan glutaraldehid 2% efektif terhadap bakteri vegetatif seperti M. tuberculosis, fungi, dan virus tidak akan mati dalam waktu 10-20 menit, sedang spora baru akan mati setelah 10 jam.

3. Biguanid

Zat ini sangat aktif terhadap bakteri Gram(+) maupun Gram (-) Contoh : Klorheksidin

4. Senyawa halogen.

Hipoklorit dan povidon-iodin adalah zat oksidasi dan melepaskan ion halide.

5. Fenol Larutan jernih, tidak mengiritasi kulit dan dapat digunakan untuk membersihkan alat yang terkontaminasi.
Sebagian besar bakteri dapat dibunuh oleh zat ini Banyak digunakan di rumah sakit dan laboratorium.

6. Klorsilenol

Klorsilenol merupakan larutan yang tidak mengiritasi dan banyak digunakan sebagai antiseptik
Aktifitasnya rendah terhadap banyak bakteri dan penggunaannya terbatas sebagai desinfektan (misalnya Dettol).

7. Iodophor Untuk mendesinfeksi permukaan Zat ini harus dilarutkan baru setiap hari dengan akuades. Dalam bentuk larutan, desinfektan ini tetap efektif namun kurang efektif bagi kain atau bahan plastik.

Teknik Aseptik
Segala tindakan / pekerjaan harus mempertimbangkan sterilitas

Laminar flow

Sterilisasi MEKANIK
Digunakan bahan rusak pemanasan Filter :
Macam-macam filter yang dipakai : 1. Berkefeld, Chamberland filter 2.Soltz filter dari asbes

3.Glass filter
4.Cellulose membrane filter