SEMINARIO N 1

TRANSPORTE A TRAVS DE LA MEMBRANA Fecha: 16 al 21 de setiembre del 2013

CASO CLNICO Mujer de 22 aos que acudi al mdico de atencin primaria por presentar desde hace un da diarrea acuosa de 15 deposiciones al da, sin productos patolgicos. Se acompaaba adems de vmitos biliosos y dolor abdominal. Ella refiere haber comido mariscos crudos. En el coprocultivo crecieron, en la placa de agar sangre, unas colonias de un bacilo gramnegativo hemoltico y oxidasa positiva, y en el agar MacConkey unas colonias lactosa negativa. Las colonias fueron identificadas en Kligler como glucosa positivas, no productoras de gas ni de sulfhdrico, urea y lisina negativas. El aislado mostr sensibilidad al cotrimoxazol y resistencia al cido nalidxico. TEMARIO

Estructura y funcin de la mucosa intestinal. Estructura de un enterocito. Componentes qumicos de la membrana plasmtica Tipos de transporte a travs de la membrana plasmtica: Transporte pasivo: Difusin simple y facilitada Transporte activo: Bombas y cotransporte Tipos de transporte que se dan en la membrana apical y basolateral del enterocito, indicando cul de ellos intervienen en la absorcin y secrecin intestinal.

Utilizando un esquema del agente infeccioso, explique las caractersticas ms importantes de las clulas procariotas.

Diarrea: definicin y tipos. En relacin al caso cnico, que tipo de diarrea presenta el paciente y cul sera el agente etiolgico probable?

Cmo es el mecanismo patognico del agente causante de la diarrea? Cmo acta la toxina a nivel de la mucosa intestinal?.

1.- Estructura y funcin de la mucosa intestinal. Estructura de un enterocito

Estructura y funcin de la mucosa: La mucosa intestinal se compone de tres capas regulares: Epitelio de revestimiento, Lmina propia y Muscular de la mucosa.

a) Epitelio de revestimiento: El epitelio cilndrico simple que recubre las vellosidades y la superficie de los espacios intervellosos se compone de: Clulas de absorcin de la superficie son clulas cilndricas altas de unos 25 m (micrmetro o micra) de largo, con un ncleo oval localizado en la base. Su superficie apical presenta un borde en cepillo, principales funciones de estas clulas son la digestin y absorcin terminales de agua y nutrientes, las micrografas electrnicas de las clulas de absorcin de la superficie muestran hasta 3000 microvellosidades de casi 1m de largo, cuyas puntas estn recubiertas con una capa gruesa de glucocliz que las protege de la autodigestin. Clulas caliciformes que son glndulas unicelulares, el duodeno contiene la menor cantidad de clulas caliciformes y su cifra se incrementa hacia el leon, estas clulas elaboran mucingeno cuya forma hidratada es la mucina un componente de moco, una capa protectora que reviste la luz. Clulas DNES (denominadas as porque son componentes del sistema neuroendocrino difuso de las clulas), el intestino delgado tiene diversos tipos de clulas DNES que producen hormonas paracrinas y endocrinas, alrededor de 1% de las clulas que recubren las vellosidades y la superficie intervellosa del intestino delgado se compone de clulas DNES. En resumen las funciones del Epitelio de revestimiento serian: separar el lumen de tejidos, lubricar paredes, facilitar transporte, digestin y absorcin. b) Lmina propia: El tejido conjuntivo laxo de la lmina propia forma el ncleo de la vellosidad, que de manera semejante a los rboles de un bosque sobresale de la superficie del intestino delgado, el resto de la lmina propia que se extiende hasta la muscular de la mucosa, est comprimido en hojas delgadas de tejido conjuntivo vascularizado en abundancia por las mltiples glndulas intestinales tubulares, las criptas de criptas de Lieberkhn. La lmina propia tambin contiene abundantes clulas linfoides que ayudan a proteger el revestimiento intestinal de la invasin por microorganismos (tejido linfoide difuso (GALT) que protege contra la invasin de microorganismos). Las criptas de Lieberkhn (las criptas incrementan el rea de superficie de revestimiento intestinal, se integran con clulas DNES, de absorcin de la superficie, caliciformes, regenerativas y de Paneth), son glndulas tubulares simples o tubulares ramificadas, estas glndulas se abren a los espacios intervellosos como perforaciones del revestimiento epitelial, las micrografas electrnicas de barrido indican que aberturas de mltiples criptas rodean la base cada vellosidad; stas glndulas tubulares se componen de clulas de absorcin de la superficie, caliciformes, regenerativas, DNES, y de Paneth. Las clulas de absorcin de la superficie y las caliciformes ocupan la mitad superior de la glndula. Las clulas caliciformes tienen un perodo de vida corto; se cree que mueren y se descaman despus de eliminar mucingeno. La mitad basal de la glndula carece de clulas de absorcin de la superficie y slo tiene unas cuantas clulas caliciformes; por el contrario, la mayor parte de las clulas corresponde a las regenerativas (y sus progenies), DNES y de Paneth. (En este punto solo describiremos las clulas regenerativas y las de Paneth, porque las otras ya se describieron lneas arriba) Las clulas regenerativas del intestino delgado son clulas madre que proliferan de manera extensa para repoblar el epitelio de las criptas, la superficie mucosa y las vellosidades.

Estas clulas estrechas parecen estar en cua dentro de espacios limitados entre clulas de reciente formacin.

Su ritmo de divisin celular es alto con un ciclo celular hasta cierto punto corto, de 24 horas. Se ha sugerido que 5 a 7 das despus de la aparicin de una clula nueva, la clula progresa hasta la punta de la vellosidad y se exfolia. Las micrografas electrnicas de estas clulas indiferenciadas muestran unos cuantos organelos pero muchos ribosomas libres. Su ncleo oval nico, localizado en la base, es electrolcido e indica la presencia de una gran cantidad de eucromatina. Las clulas de Paneth se distinguen con claridad por la presencia de grnulos secretores apicales, eosinoflicos y grandes. Las clulas de Paneth (flecha) son tpica e intensamente Eosinfilas, localizadas en el fondo de las criptas de Lieberkhn, vacian su contenido bactericida en la luz intestinal.

Estas clulas en forma de pirmide ocupan el fondo de las criptas de Lieberkhn y elaboran el agente antibacteriano lisozima, protenas de defensa (defensina) y factor de necrosis tumoral . A diferencia de las otras clulas del epitelio intestinal, las de Paneth tienen un periodo de vida largo, de 20 das y secretan de manera continua lisozima. En resumen las funciones de la Lmina propia, serian: Irrigacin, absorcin y defensa inmune. c) Muscular de la mucosa: Se hallan divididas en 2 capas delgadas de tejido muscular liso: Capa circular interna y capa longitudinal externa (pnemotcnia CiLe). Las fibras musculares de la capa circular interna penetran en la vellosidad y se extienden a travs de su parte central a la punta del tejido conjuntivo, hasta la membrana basal. Durante la digestin estas fibras musculares se contraen de manera rtmica y acortan la vellosidad varias veces por minuto. En resumen las funciones de la Muscular de la mucosa, serian: el permitir movimientos localizados de la mucosa, independientes del tubo. La mucosa se puede evaginar o invaginar en los diferentes segmentos formando pliegues o vellosidades o criptas, respectivamente Estructura de un enterocito

(After L. R. Johnson, ed., Physiology of the Gastrointestinal Tract, Raven Press , 1981) enterocitos o clulas absorbentes. Son el tipo ms abundante. Aparecen en el epitelio de las vellosidades y en las glndulas intestinales. Su funcin es la absorcin de nutrientes. Son clulas cilndricas, altas en las vellosidades y ms bajas en las criptas. Las clulas altas son de vida muy corta, renovndose continuamente. Uno de los problemas de los antimitticos para el tratamiento de tumores es que se producen diarreas por prdida de epitelio intestinal y lesiones. Las clulas altas se forman a partir de las bajas, que se dividen activamente y van ascendiendo. El ncleo es ovoideo y basal y est a la misma altura en las vellosidades. El citoplasma es acidfilo dbil. Al microscopio electrnico muestran borde en cepillo o ribete estriado, es decir, su extremo libre est formado por microvellosidades, en cuyo eje central hay filamentos de actina. En la superficie de las microvellosidades hay depsitos de sustancias que forman

el glucoclix. En el existen enzimas (peptidasas, lipasas...) que intervienen en los procesos digestivos. Tienen gran cantidad de mitocondrias y un aparato de Golgi bien desarrollado, igual que el RE (retculo endoplasmtico), tanto el rugoso como el liso. La membrana tiene interdigitaciones y complejos de unin (desmosomas, en el polo apical). Las microvellosidades de los enterocitos forman el borde en cepillo, que est compuesto por microvellosidades finas de aproximadamente 1 mm de longitud por 0,1 mm de ancho. Se estima que cada enterocito contiene alrededor de 600 microvellosidades y que 1 m 2 de superficie absorbente contiene 50 millones de estos elementos. Debido a ellas, el rea de superficie luminal de la mucosa del adulto es de aproximadamente 200 m2 . Esta superficie de absorcin tan grande muestra la importancia de los intercambios que en ella se llevan a cabo. Las microvellosidades producen una capa superficial de glicoprotenas, denominada glicocalix, la cual contiene los transportadores intestinales y las enzimas digestivas (glicoamilasa, sacarasa, maltasa, isomaltasa, lactasa, trealasa, enteroquinasa y oligopeptidasas) que hidrolizan sus respectivos substratos.

2 Componentes qumicos de la membrana plasmtica

En la composicin qumica de la membrana entran a formar parte lpidos, protenas y glcidos en proporciones aproximadas de 40%, 50% y 10%, respectivamente.

Lpidos: En la membrana de la clula eucariota encontramos tres tipos de lpidos: fosfolpidos, glucolpidos y colesterol. Todos tienen carcter anfiptico; es decir que tienen un doble comportamiento, parte de la molcula es hidrfila y parte de la molcula es hidrfoba por lo que cuando se encuentran en un medio acuoso se orientan formando una bicapa lipdica. La membrana plasmtica no es una estructura esttica, sus componentes tienen posibilidades de movimiento, lo que le proporciona una cierta fluidez. Los movimientos que pueden realizar los lpidos son:
o o o

de rotacin: es como si girara la molcula en torno a su eje. Es muy frecuente y el responsable en parte de los otros movimientos. de difusin lateral: las molculas se difunden de manera lateral dentro de la misma capa. Es el movimiento ms frecuente. flip-flop: es el movimiento de la molcula lipdica de una monocapa a la otra gracias a unas enzimas llamadas flipasas. Es el movimiento menos frecuente, por ser energticamente ms desfavorable. de flexin: son los movimientos producidos por las colas hidrfobas de los fosfolpidos. La fluidez es una de las caractersticas ms importantes de las membranas. Depende de factores como :

o o

o o

la temperatura, la fluidez aumenta al aumentar la temperatura. la naturaleza de los lpidos, la presencia de lpidos insaturados y de cadena corta favorecen el aumento de fluidez; la presencia de colesterol endurece las membranas, reduciendo su fluidez y permeabilidad.

Protenas Son los componentes de la membrana que desempean las funciones especficas (transporte, comunicacin, etc). Al igual que en el caso de los lpidos, las protenas pueden girar alrededor de su eje y muchas de ellas pueden desplazarse lateralmente (difusin lateral) por la membrana. Las protenas de membrana se clasifican en:
o o

Protenas integrales: Estn unidas a los lpidos ntimamente, suelen atravesar la bicapa lipdica una o varias veces, por esta razn se les llama protenas de transmembrana. Protenas perifricas: Se localizan a un lado u otro de la bicapa lipdica y estn unidas dbilmente a las cabezas polares de los lpidos de la membrana u a otras protenas integrales por enlaces de hidrgeno.

Glcidos Se sitan en la superficie externa de las clulas eucariotas por lo que contribuyen a la asimetra de la membrana. Estos glcidos son oligosacridos unidos a los lpidos (glucolpidos), o a las proteinas (glicoprotenas). Est cubierta de glcidos representan el carn de identidad de las clulas, constituyen la cubierta celular o glucoclix, a la que se atribuyen funciones fundamentales:
o o o

Protege la superficie de las clulas de posibles lesiones Confiere viscosidad a las superficies celulares, permitiendo el deslizamiento de clulas en movimiento, como , por ejemplo, las sanguneas Presenta propiedades inmunitarias, por ejemplo los glcidos del glucoclix de los glbulos rojos representan los antgenos propios de los grupos sanguneos del sistema sanguineo ABO. Interviene en los fenmenos de reconocimiento celular, particularmente importantes durante el desarrollo embrionario.

En los procesos de adhesin entre vulo y espermatozoide.

Bibliografa Bsica ALBERTS B., et al. Biologa Molecular de la Clula. 5 ed. Cpitulo 11: Transporte de pequeas molculas a trravs de la membrana y las propiedades elctricas de las membranas. Editorial Mdica
Panamericana S.A. 2010: 1728p. BECKER W. HARDIN J. KLEINSMITH L. El Mundo de la Clula. Captulo 8: Transporte a travs de membrana: saltando la barrera de permeabilidad. 6 ed. Editorial Pearson Prentice Hall. 2007. CASSIMERIS L., LINGAPPA V.R., PLOPPER G. Clulas. 2 ed. Captulo 6: Transporte de iones y molculas pequeas a trravs de la membrana. Editorial Mc Graw-Hill, 2011: 1054p CHANDAR N., VISELLI S. Biologa Molecular y celular. 1 ed. Cpitulo 13: Conceptos bsicos de transporte, Cap. 14: transporte activo, Cap.15: Transporte de glucosa. Editorial Lippincot Williams & Wilkins. 2011 COOPER G. La Clula. 5 ed. Cpitulo 13: Membrana Plasmtica. Editorial Marbn. 2010. DE ROBERTIS E.M.F., HIB J. Fundamentos de Biologa Celular y Molecular. 4 ed. Cpitulo 3: Las Membranas celulares. Buenos Aires: El Ateneo, 2004: 442p. KARP G. Biologa Celular y Molecular. Conceptos y Experimentos. Cpitulo 8: Sistemas de la membrana citoplsmica: estructura, funcin y trfico de membrana. 6 ed. Mxico: Editorial Mc Graw-Hill, 2011: 899p LODISH H., et. al. Biologa Celular y Molecular. 5. ed. Cpitulo 7: Transporte de iones y pequeas molculas a travs de las membranas celulares. Madrid: Editorial Mdica Panamericana S.A., 2005: 1030p Fisiopatologa de la diarrea: http://scielo.sld.cu/pdf/ped/v71n2/ped05299.pdf Revisin sobre clera: http://bvs.per.paho.org/texcom/colera/STCalderon.pdf Revisin sobre clera: http://www.bvsde.paho.org/texcom/colera/PJSalinas.pdf Clera: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-21252011000200017 El clera: http://www.bvsde.paho.org/texcom/colera/Slafuente.pdf

SEMINARIO N 2
BIOLOGA MOLECULAR DEL CNCER Fecha: 11 al 16 de noviembre del 2013

CASO CLNICO
Mujer de 51 aos que en una revisin de rutina observ una lesin sospechosa de mama derecha. Se realiz biopsia excisional con resultado de cncer ductal infiltrante moderadamente diferenciado con dos focos de carcinoma invasor separados uno de 2 mm y otro de 1 mm. Sin invasin vascular. Receptores Her2/neu negativos. BRCA 1 positivo con mutacin en la base 4,182, que codifica para el aminocido 1,364 para un codn de paro prematuro. Cuenta con los siguientes antecedentes de importancia: Abuelo materno con cncer de colon, ta materna con cncer de mama. Se realiz mastectoma bilateral conservadora de piel, con ganglio centinela derecho (negativo para metstasis) y reconstruccin con expansores. TEMARIO Mama Estructura bsica de la mama. Procesos Biolgicos Ciclo celular. Concepto. El estado de reposo o G0. Fases del ciclo celular: G1, S, G2 y M. Duracin y principales acontecimientos en cada una de las fases. La mitosis. Fases de la mitosis: profase, prometafase, metafase, anafase y telofase. Estructura y funcionamiento del aparato mittico. Principales acontecimientos en cada fase de la mitosis. Importancia biolgica de la mitosis. Protenas que controlan el ciclo celular: Ciclinas, kinasas dependientes de ciclinas (CDK). Actividad de los complejos ciclina-kinasa Regulacin del ciclo celular por los complejos ciclina-CDK y alteraciones en el cncer: estmulos de progresin, estmulos de detencin del ciclo celular, gen supresor p53, gen retinoblastoma (Rb) Puntos de control del ciclo celular. Mecanismos de transformacin de clula normal en tumoral. Equilibrio entre proliferacin y muerte celular Genes responsables del cncer: mutacin de protoncogenes a oncogenes. Tipos de protoncogenes. Caractersticas de la expresin de los oncogenes. El cncer como enfermedad gentica Alteraciones esenciales para la transformacin maligna: alteraciones en seales de

crecimiento, prdida de sensibilidad a las seales inhibidoras del crecimiento, evasin de la apoptosis, potencial replicativo ilimitado. Angiognesis sostenida e invasin y metstasis. En relacin al caso clnico, que tipo de cncer presenta? Qu alteracin gentica ha ocurrido? Qu es el gen BRCA?

Bibliografa Bsica
ALBERTS B., et al. Biologa Molecular de la Clula. Cpitulo 20: Cncer. 5 ed. Editorial Mdica Panamericana S.A. 2010: 1728p. ANGEL , J.L. Biologa Molecular e Ingeniera Gentica. Cpitulo 30: Bases moleculares del Cncer. 1 ed. Editorial Elsevier S.A. 2002: 469p. BECKER W., HARDIN J., KLEINSMITH L. El Mundo de la Clula. Captulo 24: Clulas Cancerosas. 6 ed. Editorial Pearson Prentice Hall. 2007. CASSIMERIS L., LINGAPPA V.R. PLOPPER G. Clulas de Lewin. Cpitulo 17: Cncer. Principios y Perspectiva general. 2 ed. Mxico: Editorial Mc Graw-Hill, 2012: 1054p CHANDAR N., VISELLI S. Biologa Molecular y celular. Cpitulo 20: Ciclo celular, Cap. 21. Regulacin del ciclo celular, Cap.22: Proliferacin celular anormal. 1 ed. Editorial LWW. 2011 COOPER G. La Clula. Cpitulo 18: Cncer. 5 ed. Editorial Marbn. 2010. DE ROBERTIS E.M.F., HIB J. Fundamentos de Biologa Celular y Molecular. Cpitulo 18: La Mitosis. 4 ed. El Ateneo, 2004: 442p KARP G. Biologa Celular y Molecular. Conceptos y Experimentos. Cpitulo 16: Cncer. 6 ed. Mxico: Editorial Mc Graw-Hill, 2011: 899p LODISH H., et. al. Biologa Celular y Molecular. Cpitulo 23: Cncer. 5. ed. Editorial Mdica Panamericana S.A., 2005: 1030p PANIAGUA, R. et al. Biologa Celular. Cpitulo 8: Ciclo vital de la clula. 3 ed. Madrid: Editorial Mc Graw HillInteramericana, 2007: 416p. El ciclo celular: Caractersticas, regulacin e importancia en el cncer http://elfosscientiae.cigb.edu.cu/PDFs/BA/2004/21/2/BA002102RV060-069.pdf Cmo se reproducen las clulas ?: http://biblio3.url.edu.gt/Libros/2011/biolo/9.pdf

Bases Moleculares del Cncer: http://www.tensiometrovirtual.com/upload/662-001_a.pdf Bases genticas y moleculares del cncer / 1a. parte http://oncocentercancun.com/wp-content/uploads/2011/10/bases-genet-y-molec-del-cancer-1ra-parte4.pdf Carcinognesis: http://www.medigraphic.com/pdfs/salpubmex/sal-2011/sal115f.pdf

Cncer de mama: http://www.scielo.org.co/pdf/cesm/v26n2/v26n2a05.pdf Cncer de mama: http://www2.univadis.net/microsites/area_salud_mujer/pdfs/41-Cancer_de_mama_II.pdf Cncer de mama: http://www.mflapaz.com/Revista_7_pdf/4%20CANCER%20DE%20MAMA.pdf Cncer de mama hereditario: http://www.coba.org.ar/archivos/mi/avances2-13.pdf Cncer de mama hereditario: http://www.incan.org.mx/revistaincan/elementos/documentosPortada/1215567331.pdf http://www.upch.edu.pe/ehas/pediatria/lactancia%20materna/Clase%20301%20-%2010.htm

Cncer

de

mama:

http://www.grupogamma.com/wp-content/uploads/2012/09/Gu%C3%ADa-del-c

%C3%A1ncer-de-mama-cancernet.pdf