Anda di halaman 1dari 5

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI MIKROBA ENDOFIT PADA KULIT BUAH SIRSAK PENGHASIL ANTIMIKROBA

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Teknik isolasi adalah salah satu tahapan penting dalam penelitian mengenai jamur endofit mengingat 99 % dari total jamur endofit tidak dapat tumbuh pada kondisi artifisial. Pada umumnya jamur endofit diisolasi dari organ tumbuhan yang masih segar dan telah disterilkan permukaanya. Untuk sterilisasi permukaan organ tumbuhan tersebut yang umum digunakan dengan cara merendamnya dalam alkohol (70% - 95%), kemudian dikombinasikan dengan 5,3 % larutan natrium hipoklorit (NaOCl). Disamping itu, bahan kimia yang bersifat sebagai antioksidan, seperti H2O2 (3%) dan KMnO4 (2%), juga dapat dipakai untuk mensterilkan organ tumbuhan tersebut (Pratiwi,2009). Antimikroba (AM) ialah obat obat yang digunakan untuk memberantas infeksi mikroba selain antimikroba, terdapat juga beberapa istilah yang digunakan dalam memberantas infeksi, diantaranya ialah antiseptic, desinfektan, sanitizer, germisid, kemoterapeutika dan antimikroba (Pratiwi,2009). Sirsak adalah tanaman buah tropis yang bersifat tahunan. Umurnya tidak lebih 20 tahun tanaman sirsak berbentuk semu dengan tinggi lebih dari 4 meter. Sirsak atau zuurzak ( Belanda ) dikenal juga dengan nama nangka guyabono (Filipina). Buah yang berasal dari Karibia, Amerika tengah dan Amerika selatan ini di berbagi daerah Indonesia sebagai nagka sebrang di Bali disebut srikaya Jawa, sedangkan di Lampung dikenal dengan nama jambu landa, durian Betawi (Minangkabau), Deureuyan belanda (Aceh). Pohon buah sirsak (Annona muricata Linn) tumbuh di sembarangan tempat dapat mempunyai ketinggian kurang lebih delapan meter. Batang berkayu bulat telur atau lanset dengan ujung runcing panjang 6-18 cm dan lebar 2-6 cm, pertulangan menyirip warna hijau kekuningan dan hijau. Bunga tunggal dengan daun kelopak kecil warna kuning keputihan dengan benang sari banyak, berambut, berkepala putik silindris, mahkota berdaging, bulat telur , panjang 3-5 cm,kuning muda,muncul pada batang dan ranting (Khomsan,2009).

Buah majemuk atau buah agregat terdiri dari kumpulan buah-buah dengan biji tunggal saling berdampingan sehingga tidak ada batas antara buah berkumpul menjadi satu berbentuk bulat telur dengan tekstur keras dan berwarna hitam kecokelatan, biji buah bersifat racun dan dapat digunakan sebagai insektisida alami seperti biji srikaya. Akar tanaman ini tunggang, bulat, dan cokelat muda (Khomsan,2009). Dalam 100 g buah sirsak mengandung karbohidrat cukup tinggi terutama dalam bentuk sukrosa 2,54 persen, dektrosa 5,05 persen dan levulosa 0,04 persen. Sirsak dikenal karena kandungan vitamin C-nya yang relatif tinggi. Dibanding dengan buah kandungan kimia. Akar dan batang Annona muricata Linn mengandung flavanoida, di samping itu akarnya mengandung saponin, tannin, polifenol dan alkaloida (Khomsan,2009). Endofit berasal dari bahasa yunani endo berarti di dalam dan fit (phyte) berarti tumbuhan. Beberapa peneliti telah mengusulkan beberapa definisi untuk istilah endofit Petrini (1991) mendefinisikan endofit sebagai koloni organisme hidup tanpa menimbulkan simpton pada jaringan internal inangnya, walaupun pada periode waktu akan berakibat timbulnya penyakit.

1.2 Rumusan Masalah a. Jenis mikroba apa yang dapat diisolasi pada kulit buah sirsak (Annona muricata Linn) ? b. Apakah metabolit yang dihasilkan mikroba endofit mempunyai

kemampuan sebagai antimikroba pada kulit buah sirsak (Annona muricata Linn) ? c. Bagaimana teknik isolasi yang digunakan untuk mendapatkan mikroba endofit pada kulit buah sirsak (Annona muricata Linn) ?

1.3 Tujuan Penelitian a. Mengetahui jenis mikroba yang dapat diisolasi pada kulit buah sirsak (Annona muricata Linn).

b. Mengetahui metabolit yang dihasilkan mikroba endofit yang mempunyai kemampuan sebagai antimikroba pada kulit buah sirsak (Annona muricata Linn). c. Mengetahui teknik isolasi yang digunakan untuk mendapatkan mikroba endofit pada kulit buah sirsak (Annona muricata Linn).

1.4 Hipotesis penelitian a. Terdapat beberapa jenis mikroba endofit didalm kulit buah sirsak (Annona muricata Linn).

1.5 Kerangka Pikiran Sterilisasi Permukaan

1. Mencuci kulit buah sirsak dengan air mengalir selama 5 menit 2. Merendam ke dalam larutan alkohol 70 % selama 5 menit 3. Merendam dengan NaOCl 1 % selama 5 menit 4. Dibilas dengan aquades steril selama 1 menit 5. Diulang 2 kali Isolasi jamur endofit 1. Di potong kulit buah sirsak 2. Ditempelkan kulit buah sirsak pada medium NA dan PDA 3. Diinkubasi selama 5 x 24 jam suhu 37 C untuk medium NA dan 14 x 24 jam suhu 25 C untuk medium PDA Pemurnian dan identifikasi

1. Dimurnikan mikroba berdasarkan ciri makroskopiknya dan ditumbuhkan pada medium NA dan PDA baru 2. Diidentifikasi mikroba berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis

Fermentasi

1. Ditumbuhkan isolate mikroba endofit pada medium NB dan PDB sampai tumbuh miselium 2. Dishacker inkubator selama 2 hari 3. Disentrifugasi dengan kec. 3800 rpm selama 20 menit

Uji Antimikroba
1. Direndam paper disk steril pada

metabolit mikroba endofit selama 30 menit 2. Diletakkan paper disk pada cawan petri yang telah diberi jamur dan bakteri

Pengukuran zona hambat