Anda di halaman 1dari 11

PRAKTIKUM FARMASI BIOKIMIA

P2 PENETAPAN KADAR PROTEIN SECARA BIURET

TUJUAN
Mahasiswa dapat menetapkan kadar protein dengan metode biuret

DASAR TEORI
Penentuan kadar protein secara Biuret berdasarkan atas pengukuran serapan cahaya oleh ikatan kompleks yang berwarna ungu. Ini terjadi apabila protein bereaksi dengan tembaga dalam lingkungan alkali.

Pelajari . . .
Protein? Memahami mekanisme reaksi.? Metode analisis kolorimetri? Spektrofotometri visibel?mekanismenya? Manfaat menetapkan kadar protein dalam dunia medis?

ALAT & BAHAN


Alat : o Tabung Reaksi o PipetTtetes o Spuit Injeksi 1ml&5ml o Rak Tabung Reaksi o Gelas Ukur Bahan: o Lar. Standar Protein o Pereaksi Biuret o Albumin(Putih Telur) o NaOH 3 % o Aquadest

CARA KERJA
Reagen Biuret
Larutan 1,5 gr CuSO4 5H2O dalam 500ml air

+ 300ml NaOH 10% , kocok

Ad air sampai Tanda

Lar. Standar Protein


Timbang albumin murni 1 gram

Larutkan dengan air ad 100ml

+ beberapa tetes NaOH 3% untuk mempermudah melarutkan

Uji Kadar
Ambil Lar.Standar 0,1;0,3;0,4;0,5;0,7 ml + Aquadest ad 1ml

+ Reagen Biuret 4ml , vortex

Biarkan 30 menit dan ukur serapannya pada Panjang Gelombang 540nm

Sampel
1 ml sampel + 4ml Reagen Biuret , Vortex

Diamkan 30 menit, Baca serapan pada panjang gelombang 540nm

Blanko
1ml Aquadest + 4ml Reagen Biuret , vortex dan diamkan 30 menit

Ukur serapan pada panjang gelombang 540 nm

PERHITUNGAN
y = bx+a y = absorbansi x = Kadar Perhitungan kadar x=ya x f.pengenceran b