Anda di halaman 1dari 16

PREPARASI NANOPARTIKEL GAMAVUTON-0 MENGGUNAKAN KITOSAN RANTAI PENDEK DAN TRIPOLIFOSFAT SEBAGAI CROSS LINKER SERTA UJI CELLULAR

UPTAKE PADA KULTUR SEL MCF-7 SECARA IN VITRO

Wintari Taurina, Ronny Martien, Hilda Ismail Program Pascasarjana Fakultas Farmasi UGM Yogyakarta
1

Preparasi

Ionik gelasi

Nanopartikel GVT-0
TPP (Cross linker) interaksi

Pada kondisi asam akan bermuatan positif Polimer kationik yang memiliki gugus amina bebas

Muatan negatif terkonsentrasi pada gugus karbonil

GVT-0

Kitosan
3

Polimer sebagai Pembawa

Alami

Sintetik

Kitosan
*Biokompatibel *Biodegradabel *Respon imun minim *Toksisitas rendah *Larut air *Tidak mahal

Kriteria Polimer ideal sebagai pembawa nanopartikel


4

TUJUAN PENELITIAN

1. Mendapatkan preparasi nanopartikel GVT-0 menggunakan kitosan rantai pendek dengan metode ionik gelasi. 2. Mengetahui stabilitas ikatan nanopartikel GVT-0 di dalam HCL 0,1 n pH 1 dan artificial intestinal fluid. 3. Mengetahui kemampuan penetrasi nanopartikel GVT-0 pada sel MCF-7 secara in vitro.

SKEMA PENELITIAN
PREPARASI NANOPARTIKEL
Penentuan preparasi terbaik

SCALE UP & FREEZE DRY


Morfologi

KARAKTERISASI NANOPARTIKEL

Ukuran & distribusi partikel Sifat permukaan nanopartikel

UJI STABILITAS DI DALAM HCL 0,1 N pH 1 DAN AIF UJI CELLULAR UPTAKE PADA SEL MCF-7 ANALISIS DATA KESIMPULAN

Entrapment efficiency (%)

Seri Konsentrasi Kitosan-GVT-0


TPP Kitosan GVT-0 0.01% 0.02% 0.03% 0.04% A : 0.01% / B : 0.02%/ C : 0.03% 0.02% 0.04% 0.06%

A1 B1 C1 A2 B2 C2 A3 B3 C3
A4 B4 C4 A5 B5 C5 A6 B6 C6

A7 B7 C7 A8 B8 C8 A9 B9 C9
A10 B10 C10 A11 B11 C11 A12 B12 C12

Hasil
Preparasi nanopartikel GVT-0 yang dipilih untuk scale up

Preparasi
A1 A2 A3 B3 C3

Konsentrasi GVT-0 Konsentrasi kitosan Konsentrasi TPP (%) (%) (%) 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.02 0.04 0.06 0.06 0.06 0.01 0.01 0.01 0.02 0.03

KARAKTERISASI NANOPARTIKEL 1. Morfologi

Hasil Pengamatan Menggunakan Transmission Electron Microscopy (TEM) Preparasi A1, GVT-0 : Kitosan : TPP (0,01% : 0,02% : 0,01%), dengan Percepatan Voltage 120 kV, Magnifikasi 300000 (kiri)) dan Percepatan Voltage 120 kV, Magnifikasi 20000 (kanan)
9

2.

Ukuran dan distribusi ukuran GVT-0 : Kitosan : TPP (%) 0,01 : 0,02 : 0,01 0.01 : 0,04 : 0,01 0.01 : 0,06 : 0,01 0.01 : 0,06 : 0,02 0.01 : 0,06 : 0,03 Ukuran Partikel (nm) 504,7 563,8 638,2 724,4 675,1 Polydispersity Index (PI) 1,839 1,472 0,464 1,430 1,484

Preparasi A1 A2 A3 B3 C3

Hasil Pengamatan Menggunakan Particle Size Analyzer (PSA)

10

3.

Sifat permukaan

Preparasi A1

GVT-0 : Kitosan : TPP (%)


0,01 : 0,02 : 0,01

Zeta Potensial (mV)


(+) 4,91

A2
A3 B3 C3

0.01 : 0,04 : 0,01


0.01 : 0,06 : 0,01 0.01 : 0,06 : 0,02 0.01 : 0,06 : 0,03

(+) 11,32
(+) 8,60 (+) 9,54 (+) 6,53

Hasil Pengukuran Zeta Potensial Menggunakan Zeta Sizer

11

4.

Entrapment Efficiency (EE)

Kurva Preparasi vs Entrapment Efficiency (%)


Entrapment Efficiency (%)

100
80 60 40 20 0 A1 A2 A3 Preparasi B3 C3 A1 A2 A3 B3

C3

KETERANGAN:

A1 A2 A3 B3 C3

(GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,02% : 0,01%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,04% : 0,01%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,06% : 0,01%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,06% : 0,02%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,06% : 0,03%)

% EE 30,3% - 76,7%

12

STABILITAS IKATAN NANOPARTIKEL

1.

Dalam HCl 0,1 N pH 1

Kurva stabilitas dalam HCL


100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 1 2 3 % stabilitas nanopartikel

A1 A2 A3 B3 C3

Waktu (jam)

KETERANGAN:

A1 A2 A3 B3 C3

(GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,02% : 0,01%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,04% : 0,01%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,06% : 0,01%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,06% : 0,02%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,06% : 0,03%)

% STABILITAS 53,02% - 83,56%

13

2. Dalam artificial intestinal fluid (AIF)

Kurva stabilitas dalam AIF


120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 0.5 1 1.5 2 2.5 Waktu (jam) 3 3.5 4 % stabilitas nanopartikel

A1 A2 A3 B3

C3

KETERANGAN:

A1 A2 A3 B3 C3

(GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,02% : 0,01%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,04% : 0,01%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,06% : 0,01%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,06% : 0,02%) (GVT-0 : kitosan : TPP = 0,01% : 0,06% : 0,03%)

% STABILITAS 63,08% 97,07%

14

CELLULAR UPTAKE

Nanopartikel GVT-0

(GVT-0 + media DMEM + sel)

15

KESIMPULAN
1. Preparasi nanopartikel GVT-0 dengan kitosan rantai pendek dapat dibuat

dengan

metode

ionik

gelasi

menghasilkan

partikel

nanoGVT-0

yang

mempunyai ukuran nanopartikel rata-rata antara 504,7 nm - 724,4 nm, serta zeta potensial rata-rata antara (+) 4.91 mV - (+) 11.32 mV, dan umumnya mempunyai bentuk sferik. 2. Nanopartikel GVT-0 dengan kitosan rantai pendek relatif stabil dalam HCl 0,1 N pH 1 sampai jam ke-3 dengan stabilitas antara 53,03% - 83,56%. Serta dalam artificial intestinal fluid sampai jam ke-4 dengan stabilitas antara 63,08% - 97,08%. 3. Nanopartikel GVT-0 dengan kitosan rantai pendek memiliki kemampuan masuk ke dalam sel MCF-7 secara in vitro.

16

Hibah Unggulan Cluster Tahun 2011 Universitas Gadjah Mada Curcumin Research Center Universitas Gadjah Mada Dr. rer.nat. Ronny Martien, M.Si. Dr. Hilda Ismail, M.Si., Apt. Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada
17