AULA PRTICA: QUANTIFICAO DO AMIDO INTRODUO O amido composto por unidades de glucose,organizadas em dois homopolissacardeos, a amilose e a amilopectina.

. Dependendo da origem, o amido possui diferentes propores de amilose e de amilopectina (Nelson & Pan 1995). O amido pode ser obtido de diversas fontes vegetais, como cereais, razes e tubrculos, e tambm de frutas e legumes, no entanto, a extrao em nvel comercial de amido se restringe aos cereais, razes e tubrculos (YOUNG, 1984).

MATERIAL E MTODO ter etlico; NaOH - 50 % e 10 %; Alcool etlico a 70 % e 95%; Carbonato de Clcio; HCl ( d= 1,19); Hidrxido de brio; Hidrxido de zinco; Reativo A; Reativo B; Reativo arsenomolibdico

PROCEDIMENTO : - Pesa-se 10 g de tecido previamente triturado em erlenmeyer de 125 ou 250 ml.Adiciona-se cerca de 80 ml de lcool etlico a 70 %.Adiciona-se 0,25 g de carbonato de clcio .Agita-se e deixa em banho maria por 1 hora a 83 a 87C usando um pequeno funil de gargalo para condensar os vapores. Esfriar e deixar em repouso por 15 horas. Adicionar lcool etlico at a marca de 100ml.Filtra-se para Becker de 250 ml, lavar o resduo com 3 pores de 20 ml de lcool etilco, para retirar bem os acares. Transfere-se o resduo para o mesmo erlenmeyer com adio de 70 a 80 ml de gua destilada, lavando o papel de filtro. Adiciona-se 2 gotas de NaOH a 10 % e autoclavase por 1 hora a 1atm.Resfria-se e adiciona-se 2,5 ml de HCl concentrado.Levar ao autoclave por mais 30 minutos a 120 C.Neutraliza-se com NaOH a 10 % - 50% e transfere-se para balo de 100 ml e complete o volume com gua destilada;Filtra-se. Procede-se a desproteinizao das amostras.

DESPROTEINIZAO Desproteinizao se faz da seguinte maneira: Colocar em tubo de ensaio 3,0 ml do extrato; 9,0 ml gua destilada; 1,2 ml Hidroxido de Brio;

1,2 ml Sulfato de Zinco; 14,4 ml Volume final da desprotenizao Deixar em repouso por 10 minutos,agitar e filtrar em papel de filtro.

DETERMINAO Toma-se 2 ml do extrato desproteinizado e 1 ml do reativo cprico; Lavar para o banho maria (fervente) por 15 minutos; Esfriar em banho de gelo; Aps o resfriamento da amostra adicionar: - 1 ml do reativo Arsenomolibdico e agitando amostra; - 6 ml de gua destilada; Fazer a Leitura no espectrofotmetro a uma leitura aproximadamente 510 mn; OBS: O volume final aproximadamente 10 ml para determinao das amostras; Fazer sempre o branco(somente gua destilada) para levar ao espectrofotmetro;

REFERNCIAS Nelson, O. & Pan, D. 1995. Starch synthesis in maize endosperms. Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular Biology 46: 475-496. YOUNG, H. Fractionation of starch. In: WHISTLER, R. L.; BEMILLER, J. N.; PASCHALL, E. F. (Ed.). Starch chemistry and technology. 2.ed. Orlando,USA: Academic Press, 1984. p. 249-283