Fetal Programacin: Prenatal El exceso de testosterona lleva a retraso del crecimiento fetal y la recuperacin del crecimiento postnatal en

Mohan Manikkam, Erica J. Crespi, Dou las D. Doop, Carol !erkimer, James ". #ee,"unkyun $u, Morton %. %ro&n, Dou las #. Foster y 'asantha (admana)han
Departamentos de Pediatra (MM, CH, JSL, VP), Bioestadstica (MBB, SY), !stetricia " #inecologa (DL$), %cologa " Biologa %&ol'ti&a (DL$) " $isiologa (DD) " el Programa de Ciencias (eprod'cti&as (MM, C%, DL$ , CH, JSL, DD, VP) de la )ni&ersidad de Mic*igan, +nn +r!or, Mic*igan ,-./0 Direccin toda la correspondencia " solicit'des de separatas a1 Dr2 Vasant*a Padmana!*an, Departamento de Pediatra de la )ni&ersidad de Mic*igan, 3// 4orte 5ngalls constr'ccin, de *a!itaciones2 ../0 S6, +nn +r!or, Mic*igan ,-./07/,/,2 %7mail1 &asant*a8'mic*2ed'2

*esumen
Las alteraciones en el sistema endocrino materna, n'tricionales " meta)licas entorno de interr'mpir la tra"ectoria de desarrollo del 9eto, :'e cond'cen a en9ermedades de los ad'ltos2 las cras *em!ras de ratas, in9ra*'manas primates, " las o&e;as tratadas prenatalmente con la testosterona (<) el desarrollo reprod'cti&o =meta)lica de9ectos d'rante la &ida ad'lta similares a los :'e oc'rren desp'>s de 'n retraso del crecimiento intra'terino2 %n el presente est'dio se determin si prenataltratamiento < prod'ce con retraso de crecimiento descendencia2 aceite de semilla de algodn o < propionato (.// mg, im) se administr dos &eces por semana a las o&e;as em!ara?adas entre 3/70/ d de gestacin (el pla?o d @ .,AB aceite de semilla de algodn, n @ .CBprenatal <, n @ 3D)2 peso del reci>n nacido " las dimensiones del c'erpo 9'eron medidos el da desp'>s del nacimiento, " a'mento de peso desp'>s del parto 9'e monitoreada d'rante , meses en todas las m';eres " en 'n s'!gr'po de &arones2 %n consonancia con s' accin, prenatal tratamiento < prod'cido *em!ras " mac*os con ma"or distancia anogenital relati&a a los controles2 prenatal tratamiento < dismin'cin del peso corporal " la alt'rade los reci>n nacidos de am!os seEos " la circ'n9erencia de pec*o de las m';eres2 prenatal<7mente *em!ras tratadas, pero no los *om!res, eEp'esto para ponerse al da d'rante D7, meses el crecimiento de la &ida postnatal2 Plasma de 5#$7&inc'lante protena7. e 5#$7D7La 'nin a protenas, pero no de 5#$75, los ni&eles de prenatal<7mente *em!ras tratadas 9'eron ele&ados en el primer mes de &ida, 'n perodo en el prenatal<7mente 9'eron tratados *em!ras no eE*i!iendo en marc*a la rec'peracin del crecimiento2 %sto es s'gesti&o de 'na menor disponi!ilidad de 5#$ " la contri!'cin potencial al retraso del crecimiento2 %stos res'ltados apo"an el concepto de :'e el retraso del crecimiento 9etal " la rec'peracin del crecimiento postnatal, marcadores tempranos de ad'ltos en el 9't'ro las en9ermedades, tam!i>n p'ede ser programada por prenatal eEposicin a eEceso deesteroides seE'ales2

+ntroduccin
%l endocrino, n'tricionales " meta)licas medio del 9eto programas de s' anatoma " 9isiologa, " estos cam!ios persisten en la &ida postnatal (., D, 3, ,, F)2 +lg'nos de estos principios de pro ramacin p'eden prod'cir patologas2 Por e;emplo,prenatal de pro ramacin por la dia!etes materna o la desn'tricin materna o el estr>s materno prod'ce meta)licareprod'cti&a " alteraciones en la descendencia, c'"os e9ectos se mani9iestan en la edad ad'lta (., D, 3, ,, F)2 (etraso del crecimiento intra'terino, tipi9icada por los !a;os peso al nacer es 'n indicador de los trastornos ad'ltos &arios2 Ba;o al nacerel peso tiene importantes &nc'los con la in9ertilidad (C, A, -, 0)2 Por e;emplo, !a;o peso al nacer es 'n 9actor de riesgo de criptor:'idia (./), s'!9ertilidad masc'lina (..), pse'do*erma9roditismo (.D), deterioro de desarrollo o&Grico (.3, .,), oligoo&'lation " ano&'lacin (-), " de o&ario poli:'stico sndrome de (C) 2 +demGs, eEiste 'n riesgo creciente de en9ermedades de los ad'ltos, como la en9ermedad cardio&asc'lar la en9ermedad, la dia!etes tipo D, o!esidad e *ipertensin, con la dismin'cin del tamaHo al nacer (., 3, .F)2 peso al nacer con enlaces riesgo de en9ermedadmarcadores, como la resistencia a la ins'lina " la o!esidad, se estGn prod'ciendo so!re todo c'ando !a;o peso al nacer es seg'ido por 'na rGpida desp'>s del parto el a'mento de peso (la rec'peracin del crecimiento) " la o!esidad in9antil (.F, .C)2 Por e;emplo, el ma"or riesgo para la en9ermedad cardaca coronaria es o!ser&ado en pe:'eHos indi&id'os de peso de nacimiento :'e eE*i!en para ponerse al da crecimiento d'rante la in9ancia (.A)2 +s, los cam!ios en el 9eto del meta)olismo *ormonal resp'estas "a la moderacin del crecimiento intra'terino " = o adaptaciones de las cras en resp'esta a la rec'peracin del crecimiento parecen ser la cla&e en la patog>nesis temprana de la en9ermedad de ad'ltos2 4o slo prenatal retardo del crecimiento prod'cen ad&ersos d'raderos e9ectos desp'>s del nacimiento, pero prenatal eEposicin a los esteroides tam!i>n *a demostrado tener serias consec'encias en la edad ad'lta2 Los est'dios en animales *an demostrado :'e prenatales eEposicin a la testosterona (<), similar al retraso en el crecimiento, cond'ce a in9ertilidad, el comportamiento de las modi9icaciones, la o!esidad " resistencia a la ins'lina en la edad ad'lta en la descendencia res'ltante (.-, .0, D/, D., DD)2 %n el clGsico de las 9ormas de *'manos *iperplasia s'prarrenal cong>nita, andrgenos 9etales en eEceso pro&oca am!igIedad genital eEterna en el seEo 9emenino del reci>n nacido " postnatal &irili?acin progresi&a en *om!res " m';eres, :'e cond'ce a red'ccin de la 9ertilidad, pro!lemas menstr'ales en las m';eres, " testic'lar " s'prarrenal se !asa en los *om!res (D3)2+demGs, la dismin'cin de la alt'ra desp'>s del parto " el comportamiento de a'mento de la agresin *an sido reportados (D,, DF)2 La gra&edad " la similit'd de las consec'encias de ad'ltos en el prenatalmente7con retraso del crecimiento " prenatal<7mente tratados modelos s'gieren :'e el comJnmeta)lica mediadores p'eden estar in&ol'crados2 Se podra arg'mentar :'e m'c*as de las consec'encias de los ad'ltos prenatal tratamiento < tam!i>n p'ede ser mediada por el retraso del

crecimiento 9etal2 Si es as, esto proporcionara 'n marcador temprano para e&al'ar los ad'ltosconsec'encias &ida2 %stG !ien doc'mentado :'e el retraso del crecimiento 9etal sig'e la maln'tricin materna, la dia!etes o el estr>s, pero la in9ormacin acerca de siprenatal tratamiento < tiene el potencial de ca'sar retardo del crecimiento intra'terino es escasa2 %n &ista de las per;'diciales consec'encias deprenatal " el consec'ente retraso en el crecimiento de ponerse al da el crecimiento de las cras de los ad'ltos en el !ienestar, la pro ramacin de9'nciones, por prenatal de eEposicin a los esteroides es de clnica pertinente, so!re todo por:'e las madres em!ara?adas p'ede ser in&ol'ntariamente eEp'estos a los esteroides gonadales d'rante la gestacin temprana por la contin'acin de 'so de pldoras anticoncepti&as, el medio am!iente los contaminantes estrog>nicos, o los esteroides ana!oli?antes (DC, DA, D-, D0, 3/)2 + principios de los est'dios :'e a!ordan esta c'estin s'9ra de pe:'eHo tamaHo de m'estra o no t'&o en c'enta el tamaHo de camada " = o distri!'cin por seEos (DD, 3., 3D, 33, 3,)2 Para o!tener 'na perspecti&a adec'ada so!re los e9ectos de prenatal de esteroides eEposicin so!re el crecimiento 9etal, es esencial contar con 'na m'estra ma"ortamaHo " el control de todas las &aria!les, tales como tamaHo de la camada " la distri!'cin por seEo del 9eto c'ando los gemelos o trilli?os estGn in&ol'crados2 %n este est'dio pro!amos la *iptesis de :'e prenatales eEposicin a < propionato (plasma la &ida media, ,,F d) d'rante la primera mitad de la gestacin a (d 3/70/B pla?o @ .,A d) los programas de retraso del crecimiento 9etal " :'e el retraso de crecimiento corderos se mani9estarG de rec'peracin desp'>s del parto *asta el crecimiento2

Materiales y M,todos
(roduccin y mantenimiento +d'ltos o&e;as S'99olK con 9ertilidad pro!ada se compraron localmente " se traslad al cercano inspeccionada por el )SD+ " la )ni&ersidad de Mic*igan Departamento de Medicina de La!oratorio apro!ado por los animales de gran;a para la cra2<odos los procedimientos de 'tili?acin de animales 9'eron apro!ados por el Comit> de la )ni&ersidad para el )so " C'idado de los +nimales2 + partir D73 semanas antes " contin'ando *asta la >poca de cra, las o&e;as 9'eron el gr'po alimentado diariamente con /,F Kg de cGscara de ma? " al9al9a .2/7.2F Kg de *eno = o&e;a (&>ase el c'adro . de energa digesti!le " protena cr'dade admisinB para las comparaciones, los re:'isitos n'tricionales de 5n&estigacin del Conse;o tam!i>n se proporcionan) para a'mentar el !alance de energa en 'n intento de a'mentar la tasa de o&'lacin2 )n total de F. o&e;as se aparearon a los carneros con 9ertilidad pro!ada, " el da de apareamiento se registr2 Desp'>s de la reprod'ccin, todas las o&e;as 9'eron colocados en 'n 9otoperiodo nat'ral en el pasto " el gr'po alimentado con 'na dieta diaria de mantenimiento de la al9al9a .,DF Kg = !romo me?cla del *eno = o&e;a (&>ase el c'adro . )2

'er esta ta)la: L%n esta &entanaM L%n 'na n'e&a &entanaM

-.%#. /. Las concentraciones de n'trientes en las dietas de Lo&e;a, eEpresada en !ase seca a .//NB para la comparacin 4ational (esearc* Co'ncil (4(C) se proporcionan los re:'isitosM

(renatal tratamiento o&e;as preHadas 9'eron asignados a 'n control (n @ .C) o 'n prenatales tratamiento < (n @ 3D) al gr'po2 De!ido al parecer, ele&ado ndice de p>rdida 9etal :'e sig'e prenatal tratamiento < (3D), dos &eces tantas o&e;as preHadas 9'eron asignados al gr'po de tratamiento comparado con el gr'po control2 o&e;as tratadas 9'eron administrados dos &eces por semana 'na in"eccin intram'sc'lar de .// mg de propionato de < (Sigma7+ldric* Corp2,St2 Lo'is, M ) en el D,, ml de aceite de semilla de algodn (Sigma7+ldric* Corp2) 3/ a 0/ d de gestacin (pla?o @ .,A d) 2 Los controles reci!ieron'n &ol'men ig'al de &e*c'lo2 #a nutricin materna y el parto + partir de C semanas antes del parto, c'ando el crecimiento del 9eto mGEima se prod'ce, las o&e;as preHadas 9'eron el gr'po alimentado con /,F Kg de ma? desgranado, D Kg de *eno de al9al9a (&>ase el c'adro . ), Y DF/ mg a'reomicina se desmorona (clortetraciclina) = o&e;a da2 Los corderos nacidos entre el .F " D/ de a!ril D//D2 +l nacer, cada cordero reci!ieron &itamina % " selenio orales " las in"ecciones de Clostridium perfringenstipos C " D " el t>tanos2 o&e;as se alimentan de . Kg de ma? " cGscara D a D,F Kg de al9al9a *eno (&>ase el c'adro . ) Mientras esta!an amamantando a los corderos2 Del *eci,n 0acido y neonatal medidas $ec*a de nacimiento, nJmero de *i;os, el seEo de la descendencia, " el 9eto d'rante el parto mJltiple de distri!'cin se registraron2 %l seEo de los corderos se determin mediante el eEamen de los genitales eEternos2 La prenatal<7do, de *ec*o las m';eres tratadas de 'n pene " 'n escroto &aco2#>nero posteriormente 9'e con9irmado por el inicio de progestGgenos de ciclos en m'estras :'incenales o!tenidos a partir de las D/ semanas de edad en los :'e &i&i " mediante el eEamen de los rganos internos de la a'topsia en los :'e m'rieron2 pesos de los corderos " los parGmetros de crecimiento 9'eron medidos D, *oras desp'>s del nacimiento para :'e *a"a tiempo s'9iciente para esta!lecer la &inc'lacin materna2 Crecimiento medidas incl'"en la alt'ra, la circ'n9erencia de pec*o " la ca!e?a circ'n9erencia2 medidas de alt'ra *an sido calc'lados con los corderos en pie2 %n el pec*o " la circ'n9erencia de la ca!e?a se determinaron las medidas con 'na cinta de plGstico 9leEi!le2 Las m'estras de sangre se o!t'&ieron de todos los corderos *em!ra a DF O . das de edad para determinar :'e circ'lan las concentraciones de ins'lina, 5#$75,7protena de 'nin al 5#$ (5#$BP), " el cortisol, :'e se conocen meta)lica mediadores2

la nutricin y el crecimiento postnatal Cada madre " s's cras 9'eron alo;ados indi&id'almente d'rante los primeros 3 das " l'ego alo;ados en gr'po con otras madres " las cras en 'n granero en 9otoperiodo nat'ral a eEcepcin de 'na !om!illa de C/ &atios en la ?ona de 9l'encia de alimentacin de cordero d'rante las noc*es25ntensidad de la l'? d'rante la noc*e en la alt'ra de la ca!e?a de cordero sit' entre el F " C l'E2 C'ando alo;ados en gr'po, los corderos t'&ieron acceso al alimento concentrado comercial (S*'r7#ain, %lma, 4Y), :'e contiene .-N de protena cr'da " *eno de al9al9a (&>ase el c'adro . )2 Los corderos se destetaron a las - semanas de edad2 Los corderos *em!ra 9'eron trans9eridos a la 5nstalacin de 5n&estigacin de &inos (+nn +r!or, M5, ,D P, .- Q4), donde 9'eron mantenidos al aire li!re !a;o 'n 9otoperiodo nat'ral2 De!ido a limitaciones de espacio, slo 'n s'!con;'nto de los seleccionados al a?ar " el control prenatal< tratados corderos mac*os7mente (n @ C=gro'p) 9'eron trasladados a la 5nstalacin de 5n&estigacin de &inos de control de ganancia desp'>s del parto2 Los corderos se proporcionaron ad libitum acceso a alimento concentrado comercial (ig'al al anterior)2 C'ando alcan? 'n peso de aproEimadamente ,/ Kg, todos los corderos 9'eron cam!iados a 'na alimentacin de pellets con .FN de protena cr'da para e&itar la deposicin de grasa d'rante el perodo de tasa de crecimiento red'cido (&>ase el c'adro . )2 <race minerali?ada sal con selenio " &itaminas +, D " % (+rmada #rain Co2, +rmada, M5) de li!re com'nicacin en todo el est'dio2 %l crecimiento postnatal de todos los corderos *em!ra " el s'!con;'nto de los mac*os 9'e s'per&isado por la determinacin de peso corporal cada dos semanas a inter&alos antes de la alimentacin2 Efectos de prenatal tratamiento -1 enital en la distancia ano %l e9ecto de prenatal tratamiento < del cordero se e&al' - semanas desp'>s del nacimiento de la relacin de ano7'retral a om!ligo ano distancias (3C)2 Con el animal de pie, las mediciones se *icieron desde el centro del ori9icio anal *asta el om!ligo o la a!ert'ra de la 'retra en el pene, la &'l&a2 *+. Las concentraciones plasmGticas de ins'lina se midieron 'tili?ando la 5mm'C*em rec'!ierto con ins'lina t'!o de .DF5 (5+ Kit (5C4 P*armace'ticals, de Costa Mesa, C+)2 D'plicar el &ol'men de .// Rl sin eEtraer m'estras de plasma se 'tili?a en 'n solo ensa"o2 La sensi!ilidad del ensa"o 9'e 3,-C ') = ml2 %l coe9iciente de &ariacin intraensa"o 9'e del ,,-N2 Circ'lantes de 5#$75 9'eron medidos 'sando 'n &alidados ensa"o (3A)2 %n res'men las m'estras de s'ero se eEtra;eron con 'n Gcido7 etanol sol'cin de eEtraccin (.1, ratio), ne'trali?ado con /,-FF M <ris !ase2 eEtractos ne'trali?ados s'ero 9'eron procesadas por d'plicado el &ol'men de F/ Rl 'tili?ando *'mana recom!inante de 5#$75 (( S D S"stems, Minneapolis, M4) como el estGndar de ensa"o2 4ormas 9'eron normali?ados mediante la adicin de 'n mismo &ol'men de ne'trali?ado, eEtra;eron el tampn de ensa"o2 %l a'mento del &ol'men de plasma de control " de prenatalmente 7los animales tratados con < se dil'"eron en paralelo en el ensa"o de 5#$ ($ig2 . )2<odas las m'estras del est'dio 9'eron anali?adas en 'n solo ensa"o2 La sensi!ilidad del ensa"o 9'e de - pg = t'!o (D,0 ng = ml)2 Los coe9icientes de &ariacin intraensa"o " la rec'peracin de 0,AN " el 0CN, respecti&amente2 Las concentraciones circ'lantes de cortisol se midieron 'tili?ando 'na 9ase slida +7Conde Kit de ensa"o7Coat (Diagnostic Prod'cts, Los +ngeles, C+), como se descri!i

pre&iamente (3-)2 D'plicar el &ol'men de F/ Rl sin eEtraer m'estras de plasma se 'tili?a en 'n solo ensa"o2 La sensi!ilidad del ensa"o 9'e de .,/ ng = ml2 %l coe9iciente de &ariacin intraensa"o 9'e de ,,FN2

F+2. /. %st'dios de paralelismo en el 5#$75 del ensa"o2 La adicin de &olJmenes cada &e? ma"ores (DF7.// microlitros) de plasma de control " prenatal<7corderos tratados mente despla?adas L.DFM 5 5#$ en 9orma paralela a la del *'mano recom!inante de 5#$75 estGndar2

'er una versin ampliada(.AT)1 L%n esta &entanaM L%n 'na n'e&a &entanaM

+2F%( de 3estern %lot li ando Para medir las 9ormas de 5#$BP en el plasma, :'e determinan la red de 5#$75 !iodisponi!le cantidad o la accin, 6estern !lot ligando el anGlisis se reali? mediante 'na modi9icacin de 'n pre&iamente m>todo descrito (30)2 )na m'estra de plasma Rl7. de cada cordero m';er se me?cl con .0 Rl de ag'a destilada " C/ Rl (3x) no red'ctor de la m'estra SDS (/,.DF mol = litro <ris !ase, ,N de sodio dodecil s'l9ato, el D/N de glicerol, ./N D 7 mercaptoetanol, " el /,.N de a?'l de !romo9enol)2 Las m'estras 9'eron calentadas a CF C " posterior em!ar:'e en 'n /,-N stacKing=./N separacin de poliacrilamida en gel para la separacin electro9or>tica de las protenas2 <res microlitros de plasma de rata se cargaron tam!i>n en 'n carril separado como positi&o el control2 Los geles se corrieron a DF m+ d'rante F7C *2 Las protenas 9'eron trans9eridas (<rans7Blot SD, Bio7(ad La!oratories, Herc'les, C+) a mem!ranas de nitrocel'losa2 Desp'>s de la trans9erencia, las mem!ranas se remo;aron en Poncea' S manc*a d'rante F min " se la&a con ag'a para determinar si la protena de trans9erencia se *a reali?ado correctamente " para determinar las di9erencias entre los carriles de carga2 Las mem!ranas 9'eron !lo:'eadas d'rante la noc*e en 'na sol'cin tampn con .N de BS+ " se inc'!aron en F ml de tampn :'e contiene.DF57eti:'etados de 5#$75 en D//2/// cpm = ml de tampn d'rante .D *2 +'toradiogra9a se lle& a ca!o en la pelc'la BiomaE (%astman TodaK Co2, (oc*ester, 4Y) a 7-/ C d'rante F d2 imGgenes de la pelc'la 9'eron digitali?ados, " el consig'iente 5#$BP !andas se c'anti9icaron 'sando Scion 5mage so9tUare (Scion Corp2, $redericK, MD)2 intensidad de las !andas, calc'lado en 'nidades densitom>tricas ar!itrarias (+D)), 9'e 'tili?ada como 'na medida de la cantidad 5#$BP2 en 'nidades densitom>tricas 5#$BP Los datos se

eEpresan como la relacin de 5#$BP +D) +D) al &alor de CC2/// molec'lar de protenas de peso (al!Jmina), :'e 9'e la legendaria !anda de la S7manc*ada mem!rana Poncea' (,/)2 .n4lisis estad5stico Las medidas de res'ltado primarias 9'eron la distancia ano7genital (la proporcin de la 'retra al ano7distancia)B om!ligo del peso corporal7anoB alt'ra,circ'n9erencia de pec*o " ca!e?a, ins'lina, 5#$75, " el cortisol ni&eles, " la proporcin de 5#$BP +D) a el &alor de la +D) al!Jmina2 Dos tipos de anGlisis se lle&aron a ca!o, 'no :'e incl'" todos los tamaHos de las camadas " el otro con los gemelos solamente2 %n el est'dio de los gemelos slo (lo :'e e&ita la con9'sin con el tamaHo de la camada), cada medida de res'ltado se compar entre los gr'pos 'tili?ando slo la media de &alor de los dos *ermanos de gestaciones gemelares, por 'n general del modelo lineal :'e incl'" el tratamiento " el nJmero de mac*os en el par de gemelas como co&aria!le2 %sto es similar a 'n repetidas +4 V+ de medidas donde los dos *ermanos son de medidas repetidas, con el g>nero " el tratamiento de la agr'pacin &aria!les (co&aria!les)2 (epetimos el anGlisis 'tili?ando 'n modelo de e9ectos aleatorios con todas las cras, el tratamiento, el seEo " nJmero de cras por o&e;a (como 'na &aria!le categrica) se 'saron como co&aria!les2 +m!os anGlisis se o!t'&o res'ltados similares2 Para determinar el e9ecto de prenatal tratamiento posnatal < en el crecimiento, el peso se midi cada dos semanas a partir de 3D corderas " .. corderos mac*os ('no 9allecido), el D 7 " , meses de pesos 9'eron imp'tados por interpolacin lineal entre las dos mediciones mGs cercano en el tiempo para D " , meses2 Las tasas de crecimiento de la prenatalesmente tratados con corderos < se compararon con las de los corderos control por'na de dos m'estras t pr'e!a2

*esultados
lon itud de la estacin y los resultados del em)ara6o (renatal tratamiento < a partir del da 3/70/ de gestacin dismin'"e la longit'd de gestacin de .,-,33 O /,,3 a .,C,03 O/,3/ d (P V/,/.)2 %l nJmero de *i;os no t'&o ningJn e9ecto so!re la d'racin gestacional2 -ama7o de la camada y el sexo de distri)ucin nce m';eres " .- corderos mac*os nacieron a partir del .F de control de las o&e;as2 Veintic'atro m';eres " DA corderos mac*os nacieron del D- prenatal<7mente *em!ras tratadas2 )n control " c'atro prenatalmente tratados con o&e;as < no prod'cen descendencia (son a!ortados o !ien a!sor!ida en el tero)2 La proporcin de mac*os " *em!ras nacidos 9'e de .,C, " .,.D para el control de prenatal<7mente los gr'pos tratados, pero la di9erencia entre estos no 9'e estadsticamente signi9icati&a2 Para los controles, .3,3N de los nacimientos eran solteros nacidos &i&os, -/N 9'eron gemelos, " C,CAN eran trilli?os2 %n el prenatal<7gr'po tratado con mente, el 3D,.N de los nacimientos eran solteros nacidos &i&os, F3,CN eran gemelos, " .,,D0N eran trilli?os2 +'n:'e *'!o mGs nacimientos simples " menos nacimientos de gemelos en

el prenatal<7mente o&e;as tratadas, las di9erencias no 9'eron estadsticamente signi9icati&as2 %l nJmero total de descendientes nacidos " la distri!'cin por g>nero se res'men en la <a!la D 2

'er esta ta)la: -.%#. 8. &e;as clasi9icados segJn el nJmero de cras " el L%n esta &entanaM g>nero de distri!'cin L%n 'na n'e&a &entanaM

El rado de masculini6acin %l e9ecto de prenatal tratamiento < se determin mediante el cGlc'lo de distancias7ano genital, 'n ndice del grado de masc'lini?acin2 Como era de esperar, prenatal androgeni?acin res'lt en 9enotpica cam!ios en los genitales eEternos 9emeninos de corderos, :'e incl'" la presencia de 'n pene " 'n &aco escroto2 %n consonancia con la accin androg>nica de <, prenatal<7mente m';eres tratadas m'estran 'na ano7genital distancia ma"or (PV/,/.B la 9ig'ra .2 ) %n comparacin con las *em!ras control2 %l prenatal<7mente los *om!res tratados (P V/,/.) tam!i>n se m'estra 'na ma"or distancia7ano genitales en comparacin con los mac*os de controlB estas distancias 9'eron similares a los de prenatal<7mente tratados *em!ras ($ig2 D )2

'er una versin ampliada(D,T)1 L%n esta &entanaM L%n 'na n'e&a &entanaM

F+2. 8. %9ectos de prenatal tratamiento < en los genitales eEternos de corderos post7natal2 oscurecido zonasrepresentan el pene " el escroto2 %l rea rayada indica 'n escroto &aco2 Los &alores indican la media (OS%) la posicin de a!ert'ra de la 'retra (el pene o la &'l&a) en relacin con la distancia entre el ano (/) " el om!ligo (.) en el control " prenatal<7mente los &arones tratados (controles, .-B <7tratada , DA) " m';eres (controles, ..B <7tratados, D,)2 Los asteriscos indican di9erencias signi9icati&as de las *em!ras normales (P V/,/.)2

peso del reci,n nacido y el cuerpo de cordero medidas Como era de esperar, c'ando todos los corderos de am!os gr'pos de tratamiento 9'eron considerados, ma"or serG el nJmero de *i;os, menor es elpeso medio " mide el

crecimiento del cordero (P V/,///.B la 9ig'ra 32 )2 Comparacin de los pesos a;'stados por el nJmero de cras por o&e;a, :'e 'tili?an todos los animales de todos los tamaHos de las camadas, re&el :'e prenatales<7mente corderos tratados pesaron menos :'e los controles (P V/,///.B $ig2 ,2 )2 4o *'!o di9erencias en ning'na de las &aria!les medidas entre mac*os " *em!ras ($ig2 , )2 %n general, la circ'n9erencia del pec*o " las medidas de alt'ra 9'eron signi9icati&amente menores en prenatal<7mente los animales tratados :'e los controles (P V /,/.)2 C'ando distinto seEo se anali?aron por separado, prenatalmente tratados con *em!ras < se encontr :'e red';o el peso corporal (P V/,/.), alt'ra (PV/,//F), " circ'n9erencias del pec*o (P V/,//F) en comparacin con las *em!ras control2 Del mismo modo, prenatalesmente tratados con < &arones pesaron menos (P V/,/.) " los mGs cortos (P V/,//F) :'e los mac*os control2 circ'n9erencias del pec*o de prenatalmente tratados con mac*os < 9'eron similares a los controles (P @ /,/A-)2 circ'n9erencia de la ca!e?a 9'eron similares en el control " prenatal<7mente como *em!ras tratadas as como en los *om!res2 La restriccin de los anGlisis a los gemelos, mientras :'e la conta!ilidad de la distri!'cin por seEo tam!i>n re&el :'e elprenatall" < tratados con *em!ras *a!a red'cido peso al nacimiento (P V/,/.), alt'ra (P V /,/.) " la circ'n9erencia de pec*o (P V/,/.)2prenatal<7l" tratados los *om!res, a pesar del tamaHo de la m'estra, tam!i>n se *a!a red'cido peso (P V/,/.) " la alt'ra (P V/,///.)2

'er una versin ampliada (D3T)1 L%n esta &entanaM L%n 'na n'e&a &entanaM

F+2. 9. reci>n nacidos de peso corporal, alt'ra " circ'n9erencia del pec*o como 'na 9'ncin del tamaHo de la camada de corderos nacidos ( , WnicosB , Los gemelosB , <rilli?os)2 %l anGlisis incl'"e tanto el control " prenatal< tratados con *em!ras mente " es independiente del tratamiento2 Las medidas incl'"en datos de todos los *om!res (n @ ,F) " m';eres (n @ 3F) nacido2

'er una versin

F+2. :. peso corporal del reci>n nacido, la alt'ra " el permetro torGcico a;'stado por el tamaHo de camada (media O S%) de seEo 9emenino ($) o masc'lino (M) los corderos nacidos de las o&e;as tratadas con aceite de semilla de algodn (de controlB , .- &arones " .. m';eres) o de o&e;aprenatalesmente tratados d'rante d 3/70/ del em!ara?o con propionato de < (prenatal <B ,

ampliada (D/T)1 L%n esta &entanaM L%n 'na n'e&a &entanaM

DA *om!res " D, m';eres)2 Los asteriscos indican di9erencias signi9icati&as con los controles (P V/,/.) dentro de cada g>nero2

!ormonas Los ni&eles circ'lantes de cortisol no 9'eron signi9icati&amente di9erentes entre el control (0,, O .,0 ng = ml) " prenatall" <7tratado (A,3 O /,- ng = ml) *em!ras2 Los ni&eles circ'lantes de ins'lina 9'eron similares entre el control del reci>n nacido (.,,D O D,0 ') = ml) " prenatal< ml) m';eres tratadas (..,, O .,C ') = l"2 circ'lantes de 5#$75 concentraciones tampoco 9'eron estadsticamente di9erentes entre el control " prenatall" <7tratada *em!ras ($ig2 F ), 4i 9'eron a9ectados por el nJmero de cras por o&e;a2 ligando el anGlisis re&el 'n secanteN de a'mento en D0 5#$BP7D (P V/,//.), 'n a'mento del 33N en la 5#$BP75 en prenatall" < tratados con *em!ras ($ig2 F ), Sin di9erencia signi9icati&a en los ni&eles 5#$BP73 (no se m'estra)2Como era de esperar, la al!Jmina, la !anda mGs importante en el S7manc*ada Poncea' mem!rana, :'e se 'tili?arG como re9erencia la protena, no cam!i entre el control " prenatall" < tratados con *em!ras2

'er una versin ampliada (CCT)1 L%n esta &entanaM L%n 'na n'e&a &entanaM

F+2. ;. Cam!ios en la circ'lacin las concentraciones de 5#$75 " 5#$BP en corderos *em!ras nacidos de las o&e;as tratadas con aceite de semilla de algodn (de controlB , 4 @ ..) o de o&e;aprenatalesmente tratados d'rante d 3/70/ del em!ara?o con propionato de < (prenatal <B , 4 @ DD)2 Las concentraciones plasmGticas de 5#$7 5 9'eron medidos por (5+ (ilustracin inferior izquierda)2 La media de los ni&eles de 5#$BP7. " 5#$BP7D mide por ligando secante se eEpresan como la relacin de 5#$BP7. " 5#$BP +D) +D)7D con el &alor de la al!Jmina +D), la !anda prominente en el S7manc*ada mem!rana Poncea' :'e no 9'e a9ectada por prenatal tratamiento < (ilustracin inferior derecha)2 )na manc*a ligando repetir con9irmaron estos *alla?gos2 %l panel superior m'estra 'na manc*a ligando representante2 <enga en c'enta :'e las medidas incl'"en datos de todas las m';eres2 Las m'estras de sangre no se o!t'&ieron del s'!gr'po de &arones2

Crecimiento postnatal La tasa de crecimiento de corderos *em!ra de prenatall" < tratados con o&e;as 9'e

ma"or :'e la de m';eres corderos de control (P V /,/F desde el nacimiento *asta los , mesesB la 9ig'ra C2 )2 %sta en marc*a la rec'peracin del crecimiento, se de9ine como el crecimiento mGs rGpido :'e la media del control, se prod';o principalmente entre D " , meses de edad (P V/,/.)2 %l s'!con;'nto de prenatal< tratados corderos mac*os7mente :'e se monitorearon *a!a 'n tipo red'cido de crecimiento d'rante los primeros D meses, en comparacin con los de los &arones de control (P V/,/F), pero esta di9erencia 9'e :'e no son e&identes en los prEimos D meses2

F+2. <. postnatal tasa de crecimiento de /7D " D7, meses de *om!res " m';eres corderos nacidos de las o&e;as tratadas con aceite de semilla de algodn (de controlB , .. *em!ras " cinco mac*os) o de o&e;a prenatalesmente tratados d'rante d 3/70/ del em!ara?o con propionato de < (prenatal <B , DD *em!ras " seis mac*os)2 Los asteriscos indican di9erencias signi9icati&as con los controles (PV/,/.)2 'er una versin ampliada (.0T)1 L%n esta &entanaM L%n 'na n'e&a &entanaM

Discusin
Los res'ltados del presente est'dio de las o&e;as son 'n e;emplo de las consec'encias noci&as posnatal de cam!ios ad&ersosen el am!iente 'terino2 La eEposicin de los 9etos de 3/70/ d de la gestacin a <, "a sea por accin androg>nica o con&ersin a estradiol, prod'cido retraso del crecimiento 9etal, :'e se mani9iesta como peso al nacer, la alt'ra " circ'n9erencia de pec*o, como as como 'n a'mento postnatal en 5#$BP7. " 5#$BP7D ni&eles en las *em!ras (no se mide en los mac*os)2 +demGs, el prenatalmente tratados con *em!ras <, pero no los mac*os, eEp'esto en marc*a la rec'peracin del crecimiento entre los D7, meses de s' nacimiento2 %st'dios pre&ios a!ordar los e9ectos de prenatal tratamiento < en el crecimiento 9etal *an prod'cido res'ltados miEtos2 Sin tener en c'enta tamaHo de la camada " el seEo, est'dios anteriores *a!an encontrado :'e la eEposicin 9etal a < red'ce el peso al nacer en ratas (DD), pero no en ratones (3.)2 %l 'so de 'n limitado nJmero de animales " no tener en c'enta el g>nero, los est'dios en las o&e;as se *an encontrado a'mento de la mortalidad 9etal " peso al nacer en los o&inos eEp'estos a la accin a corto enantato de < d AF de gestacin a t>rmino (3D)2 )n est'dio longit'dinal siga 'sando < propionato sin a;'star por la

composicin por seEo de los gemelos report 'nared'ccin en el peso al nacer de las m';eres en dos est'dios " de los *om!res en slo 'no de los dos est'dios (33)2 %n cam!io, la eEposicin ag'da a < propionato en los das 3/, ,/ o C/ de gestacin (3,) 9'e encontrado para a'mentar el peso al nacer2 La ma"ora de estos est'dios no se comprometen 'na e&al'acin detallada de los parGmetros de crecimiento2 %ste est'dio, lo :'e representa para el g>nero " los nacimientos mJltiples, as como lle&ar a ca!o 'na detallada e&al'acin del crecimiento, 'n claro e;emplo de :'e prenatales tratamiento < a partir del da 3/70/ de gestacin en los res'ltados con retraso de crecimiento descendencia2 XC'Gles son los medios por los c'ales prenatal tratamiento < programas de retraso en el crecimientoY %st'dios pre&ios en el ser *'mano *a encontrado 'na asociacin entre altas concentraciones de cortisol 9etal d'rante la &ida " !a;o peso al nacer (,., ,D)2 %n los roedores " otros modelo de las especies, la eEposicin prenatal a los gl'cocorticoides se encontr para red'cir el peso al nacer cras (,D, ,3)2 %n n'estro est'dio, si !ien los ni&eles circ'lantes de cortisol no 9'eron di9erentes entre el control " prenatal<7mente tratados cras d'rante la &ida neonatal, la posi!ilidad de :'eprenatales < acti&arG el tratamiento materno 9etal o el estr>s del e;e d'rante la di9erenciacin del 9eto no p'ede ser eliminado2 Por otra parte, el retraso en el crecimiento o!ser&ado en los modelos de estr>s p'ede ser 9acilitado a tra&>s de los esteroides seE'ales a'ment los ni&eles2 %n los primates s'!*'manos, el a'mento de andrgenos de plasma " los meta!olitos de estrgenos se o!ser& desp'>s de la ind'ccin de *ipoEia condiciones a tra&>s de la ligad'ra arterial, lo :'e s'giere :'e 9etal materna estr>s " tienen el potencial de ca'sar importantes a'mentos en los ni&eles de esteroides seE'ales (,,)2 %n estos est'dios es claro si los e9ectos de prenatal tratamiento <, si los *a", se de!en a s' accin androg>nica o son el res'ltado de s'aromati?acin a estradiol2 Varios est'dios *an demostrado :'e la eEposicin 9etal a los res'ltados de comp'estos estrog>nicos en el crecimiento 9etalretraso (,F, ,C, ,A)2 %l !a;o peso al nacer es 'no de los negati&os res'ltados de la gestacin en m';eres eEp'estas a dietilestil!estrol en el tero (,-)2 tra posi!ilidad es :'e el retraso en el crecimiento o!ser&ado tanto en el prenatall" <7 tratadas " prenatal modelos de estr>s p'ede 9acilitarse a tra&>s de 'n mediador comJn e implican cam!ios en el meta)olismo de *ormonas2 Ha" e&idencia :'e &inc'la materna meta)lica alteracin con retardo del crecimiento 9etal (,0)2 Los modelos animales tam!i>n *an prestado apo"o a 'n papel del meta)olismo medio am!iente d'rante elprenatal &ida en la mediacin de retraso del crecimiento 9etal (,0, F/)2 sensi!ilidad a la ins'lina " el meta)olismo de la ins'lina acciones *an sido alterados en estas sit'aciones2 +'n:'e no se detectaron alteraciones en los ni&eles de ins'lina plasmGtica en prenatall" <7tratados corderos neonatal, si el mismo oc'rre en la &ida del 9eto :'eda por eEplorar2 tro meta)lica alteracin :'e sea 'n mediador de retraso del crecimiento es 'n cam!io en el sistema 5#$2 +nomalas en el e;e #H75#$ se *an o!ser&ado en otros modelos de retraso del crecimiento 9etal (F.)2 +'n:'e no se detectaron di9erencias en las concentraciones plasmGticas del total de 5#$75, encontramos ele&aciones signi9icati&as de dos 5#$BPs en prenatal<7mente tratados corderos :'e se *an asociado con el retraso del crecimiento 9etal1 5#$BP7. " 5#$BP7D2 La concentracin

plasmGtica de 5#$BP7D, el dominante :'e reg'la el crecimiento del 9eto d'rante 5#$BPdesarrollo, se *a encontrado para ser in&ersamente asociado con el crecimiento intra'terino (FD)2 Las ele&aciones de la 5#$BP7. tam!i>n se *ancorrelacionado con !a;o peso al nacer (F3)2 %n este est'dio se p'do determinar si la !anda :'e *emos identi9icado como 5#$BP7. tam!i>n contiene el tamaHo similar 5#$BP7F2 anGlisis por 6estern !lot 'tili?ando antic'erpos espec9icos se de!e e&al'ar la relacin de los dos ni&eles de 5#$BP (5#$BP7. " 5#$BP7F)2 Los ni&eles de 5#$BP73 9'eron relati&amente !a;os en los das de edad DF m';eres2 )n est'dio anterior (F,) reportaron 'na 9'erte seHal de 5#$BP73 en corderos *em!ra de similar edad2 La d>!il seHal en el presente est'dio no parece ser 'na 9'ncin de deteccin de la de9iciencia por las sig'ientes ra?ones2 %n primer l'gar, la esperada 9'erte seHal de 5#$BP73 se encontr en la rata de la m'estra (control positi&o) en cada !lot ($ig2 F )2 Seg'nda, los res'ltados reportados por #at9ord et al. (F,) se !asan en 'na sola m'estra colecti&a en contraposicin a las mJltiples medidas lle&adas a ca!o en n'estro est'dio2 %n tercer l'gar, la ra?a de o&e;as 'tili?adas en este est'dio (S'99olK) era di9erente de la ra?a miEta de Lo&e;as (Border Leicester x Merino +'straliano) x (omne"M :'e se 'tili? en el est'dio de #at9ord et al. (F,)2 %st'dios detallados de desarrollo son necesariospara o!tener 'na comprensin mGs pro9'nda de la progresin de los cam!ios en la 5#$BP732 %s interesante :'e el ligando 5#$BP per9il !lot *emos medido en das de edad los corderos DF es similar a la de 9etos de o&e;as (FF) en l'gar distinto de a:'el en o&inos ad'ltos, en el :'e 5#$BP73 es dominante (FC)2 Por otra parte, las 5#$BPs tpicamente asociados con el retraso del crecimiento en el 9eto se eEpresan en 'n patrn similar en los DF das de edad los corderos2 %s posi!le :'e el $#5 = medio am!iente 5#$BP o!ser&ados en este est'dio d'rante la 9ase de lactancia, c'ando el prenatalmente tratados con corderos < son retraso del crecimiento, es 'na eEtensin de lo :'e se o!ser&a d'rante el crecimiento 9etal2 +demGs, si prenatal < tratamiento media retraso en el crecimiento a tra&>s de a'mentos de 5#$BP7. " los ni&eles de 5#$BP7D " la consig'iente red'ccin de la !iodisponi!ilidad de 5#$, 5#$BP a'menta es pro!a!le :'e se disipan c'ando las *em!ras estGneE*i!iendo la rec'peracin del crecimiento2 Lamenta!lemente, no recogi m'estras de sangre d'rante la &ida 9etal o el crecimiento de 9ase de capt'rade las cras para compro!ar esta premisa2 )na sec'ela comJn de retraso del crecimiento intra'terino es ponerse al da el crecimiento d'rante el perodo postnatal, " es 'n 9actor de riesgo para la o!esidad in9antil, resistencia a la ins'lina, la dia!etes " coronaria en9ermedades del cora?n (.C, .A)2 %l prenatal<7mente en las m';eres tratadasn'estro est'dio, ademGs de ser de crecimiento retardado en el nacimiento " /7D meses de edad, eEp'estos en marc*a la rec'peracin del crecimiento entre los D7, meses de edad2 Los est'dios en animales *an demostrado :'e c'ando el crecimiento del 9eto es seg'ida de ins'9iciencia en marc*a la rec'peracin del crecimiento desp'>s del nacimiento, la &ida es signi9icati&amente red'cido lapso de (FA)2 XC'Gles son las pro!a!les consec'encias del retraso del crecimiento :'e se deri&a de prenatal tratamiento <Y Los est'dios epidemiolgicos *anencontrado :'e el retraso del crecimiento 9etal " postnatal en marc*a la rec'peracin del crecimiento representan 'na amena?a para el !ienestar de los *i;os, a men'do lle&ando a las ad&ersas consec'encias para la sal'd desp'>s del parto

(., 3, ,, F, C, A, -, 0, ./, .., .D, .3, .,, .F, .C, .A)2 retraso del crecimiento 9etal en el ser *'mano se *a encontrado para estar &inc'lado a 'na interr'pcin del e;e reprod'cti&o, es decir, 'na red'ccin de los 9olc'los primordiales (F-), 'na temprana edad de la menar:'ia " trastornos menstr'ales (F0), " el desarrollo de *iperandrogenismo " adolescentes poli:'stico sndrome de o&ario (C, A, 0)2 C'riosamente, prenatal tratamiento < 3/ a 0/ d de gestacin, :'e se trad'ce en el retraso del crecimiento en el nacimiento " la rec'peracin del crecimiento postnatal de D7, meses en las m';eres (este est'dio), tam!i>n da l'gar a anomalas reprod'cti&as en la edad ad'lta, como el deterioro progresi&o de reprod'cti&a ciclos :'e cond'cen a la ano&'lacin (.0, D/), menor sensi!ilidad a las acciones de retroalimentacin negati&a de la progesterona " el estradiol (C/, C.), LH de9ectos de carga (CD), *"pergonadotropism (C., CD), *iperandrogenemia 9'ncional se mani9iesta como o&arios poli9olic'lar (C3), " la a'sencia del estro de comportamiento " mani9estacin de la cond'cta de monta masc'lino (D/, C,, CF)2 X%n :'> medida el crecimiento 9etal retraso contri!'"e a ad'ltos como consec'encias reprod'cti&as :'eda por determinar2 %l retraso en el crecimiento desp'>s de la &isita prenatal tratamiento < tam!i>n p'eden contri!'ir a otras meta)lica dis9'nciones2 prenatall" <7tratados o&e;a (el mismo modelo :'e la 'tili?ada en este est'dio) tam!i>n se mani9iesta meta)licas anomalas d'rante el perodo prep'!eral " la edad ad'lta, como lo dem'estra 'n a'mento de la ni&eles de ins'lina " 'na ma"or resp'esta de la ins'lina a 'na so!recarga de gl'cosa (33, CC)2 4'estros res'ltados act'ales :'e el eEceso prenatal programa de esteroides !a;o peso al nacer en relacin con los datos epidemiolgicos " eEperimentales est'dios :'e relacionan el !a;o peso al nacer a las en9ermedades de ad'ltos de relie&e los pro!lemas de sal'd :'e la eEposicin de las madres em!ara?adas para eEgenos esteroides s'ponen para la sal'd *'mana2 los 9etos *'manos son eEp'estos a esteroides eEgenos para 'na &ariedad de ra?ones1 'na anticoncepcin 9r'strada " la contin'a eEposicin a los esteroides anticoncepti&os, el 'so de ana!licos esteroides, o la eEposicin inad&ertida a los comp'estos del medio am!iente con o androg>nica acti&idad estrog>nica (DC, DA, D-, D0, 3/)2 Del mismo modo, el c'erpo constr'ctores " atletas 9emeninas p'eden intencionalmente o no intencionalmente 'san los esteroides ana!licos d'rante el em!ara?o temprano (3/)2+demGs de la eEposicin a los esteroides sin sa!erlo = in&ol'ntariamente d'rante el em!ara?o, eEiste 'na &ariacin nat'ral de los andrgenos " los estrgenos prod'cidos por la madre en el tero2 )n cordiocentesis est'dio de .., em!ara?os en los seres *'manos en los :'e participamos encontr :'e los ni&eles s>ricos de < 9etal alrededor de mitad de la gestacin (.07DF semanas) 9'eron ele&ados en el rango de 'n *om!re del 9eto en aproEimadamente c'atro de cada ./ 9etos de seEo 9emenino en la m'estra (CA)2 Del mismo modo, las m';eres em!ara?adas madres con sndrome de o&ario poli:'stico tienen ma"or circ'lacin ni&eles de andrgenos (C-)2 <eniendo en c'enta el potencial de los andrgenos a estrgenos a aromati?adas, estos *alla?gos tam!i>n tienen so!re n'estra comprensin de las consec'encias de prenatal eEposicin a los 9itoestrgenos (C0) " Eenoestrgenos (D-, D0)2 Los de&astadores consec'encias de en el tero la eEposicin a dietilestil!estrol (A/) lle&a testimonio a esas preoc'paciones ser 'na realidad2 <eniendo en c'enta :'e gran parte de

la pro ramacin :'e se prod'ce en 'n perodo crtico del desarrollo temprano p'eden pasar inad&ertidas *asta la edad ad'lta, los primeros indicadores de los riesgos como sera de gran a"'da en la plani9icacin de la inter&encin2 Ba;o peso al nacer " el crecimiento del 'so de capt'ras p'eden ser&ir como marcadores tales2 4'estro *alla?go a!re a &arias Greas de las in&estigaciones a seg'ir2XLa eEposicin a 'n eEceso prenatal programa de esteroides di9erentes tra"ectorias de desarrollo en el 9etoY XHa" otros principios de las medidas reconoci!le :'e p'ede pro"ectar consec'encias mGs adelante en la &idaY 4o andrgenos " los estrgenos tienen e9ectos di9erentes en la pro ramacin retraso del crecimiento " el crecimiento del 'so de capt'rasY %n res'men, los *alla?gos de este est'dio dem'estran claramente :'eprenatales tratamiento < d'rante el crecimiento 9etal " el desarrollo cond'ce a 'n crecimiento retardado " m';eres *i;os &arones " la rec'peracin del crecimiento posterior d'rante la &ida neonatal de la descendencia 9emenina2 %l meta)licos " *ormonales asociados con resp'estas retraso del crecimiento " posteriores 7*asta la rec'peracin del crecimiento p'ede contri!'ir al desarrollo del ad'lto reprod'cti&os, meta)licos" anomalas de comportamiento :'e se *an o!ser&ado en este modelo2