Dokudan DNAizolasyonu Parafin bloktan 5 mikron kalnlnda elde edilen 5 adet kesit adet kesite 500 l Xylen eklendi

ve 10 sn vortekslendi. Sonrasnda 5 dk oda ssnda bekletilen rneklere 500 l etenol eklenerek tekrardan vortekslendi ve maksimum devirde 2 dk santrifj edilerek spernatant atld. Tplerde kalan pletlerin zerine 1 mL % 100 etanol konarak tekrardan maksimum hzda santrifj yapld. Sonrasinda 56 0Cde nkbe edilen peletlere 180 l DNA-TLB (DNA-Tissue Lysis Buffer) ve 70 l Proteinaz K ilave edilerek vortekslendi. Vortekslenen rnekler 11. 56 0Cde 60 dk inkbe edildikten sonra tekrardan vortekslendi. Daha sonrasinda 90 0Cde 60 dk inkbasyonu sa[lanan rneklerin oda ssna kadar soumas beklendikten sonra 13. 200 l DNA-PBB ilave edildi.

1. Parafin bloktan 5 mikron kalnlnda kesilen 5 adet doku zerine 500 l Xylene efklenir. 2. 10 sn vortekslenir. 3. 5 dk oda RT de bekletilir. 4. zerine 500 l etanol eklenip 10 sn vortekslenir. 5. 5 dk oda RT de bekletilir. 6. Maksimum devirde 2 dk spin sonras spernatant atlr. 7. zerine 1 mL % 100 etanol eklendikten sonra 10 sn vortekslenir. 8. Maksimum devirde 2 dk spin sonras spernatant atlr. 9. Pellet 10 dk 56 0Cde inkbe edilir zerine 180 l DNA-TLB ilave edilir. 10. Bunun zerine 70 l Proteinaz K ilave edilerek 30 sn vortekslenir. 11. 56 0Cde 60 dk inkbe edilir sonrasnda 10 sn vortekslenir. 12. 90 0Cde 60 dk inkbe edilir ve RT de soutulur. 13. 200 l DNA-PBB ilave edilir. 14. Pipetaj yaplr ve RT de 10 dk inkbe edilir. 15. 100 l izopropil alkol ilave edilir. 16. Pipetaj yaplarak kolona aktarlr 8000 gde 1 dk spin yaplr. 17. Kolon her spin sonras yeni toplama ependorfuna aktarlr. 18. 500 l WB-1 ilave edilir ve 8000 gde 1 dk spin yaplr. 19. 500 500 l WB-1 ilave edilir ve 8000 gde 1 dk spin yaplr.

20. WB-2 ilave edilir ve 8000 gde 1 dk spin yaplr. 21. Maksimum devirde 2 dk spin sonras kolon yeni bir ependorfa aktarlp zerine 100 DNA-EB ilave edilerek 5 dk RT de bekletildikten sonra 8000 gde 1 dk spin sonras DNA izole edilmi olur.