KROMATOGRAFI

Oleh : M.Amri Fauzan

Pengertian kromatografi Tujuan kromatografi Penggolongan Kromatografi

PENGERTIAN KROMATOGRAFI

Merupakan salah satu cara pemisahan berdasarkan kelarutan zat dan daya adsorpsi zat tersebut dalam dua fase yang berbeda, yaitu :
Fase gerak Fase diam Dengan kata lain, kromatografi adalah cara pemisahan berdasarkan perbedaan kecepatan migrasi dari suatu zat.

Proses yang terjadi dalam kromatografi : 1. Adsorpsi

Suatu zat yang daya adsorpsinya besar akan lebih tertahan daripada zat yang daya adsorpsinya kecil. 2. Partisi Pemisahan berdasarkan perbedaan kelarutan zat dalam suatu pelarut. Biasanya digunakan campuran pelarut yang polar dan non-polar. Contoh : butanol (non polar) dan NH4 OH serta etanol (polar)

3. Pertukaran Ion
Biasanya digunakan dalam pemurnian air dan resin. 4. Elektroforesis atau kromatografi listrik Berdasarkan pada sifat kelarutan zat dalam pelarut serta besarnya muatan zat.

TUJUAN KROMATOGRAFI
Isolasi/pemisahan zat-zat dari campurannya Pemurnian Identifikasi Analisis jumlah dalam kromatografi gas (Gas Liquid Chromatography = GLC) dan cairan (high Performance Liquid Chromatography = HPLC)

PENGGOLONGAN KROMATOGRAFI
Berdasarkan fase diam dan fase gerak yang digunakan, kromatografi dapat digolongkan menjadi : Kromatografi Kertas Kromatografi Lapis Tipis Kromatografi kolom Kromatografi gas Kromatografi cairan

1. 2. 3. 4. 5.

* Pada pelajaran ini, yang akan dipelajari hanya kromatografi

kertas dan kromatografi lapis tipis.

1. KROMATOGRAFI KERTAS

Pada kromatografi kertas, yang menjadi fase geraknya berupa cairan disebut eluent, sedangkan fase diamnya adalah kertas. Proses kromatografi kertas dibedakan atas : Kromatografi menaik Kromatografi menurun Dalam kromatografi kertas dengan cara naik, mengalirnya pelarut dikarenakan adanya gaya kapilaritas, sedangkan pada cara turun selain adanya gaya kapilaritas juga gada gaya gravitasi. x : titik penotolan sampel
SF

C
hC hB

B A x
hA

A : Noda A B : Noda B C : Noda C Jarak rambat eluen SF : Titik terdepan dari pelarut

Parameter kualitatif Harga Rf

Merupakan parameter karakteristik kromatografi kertas dan kromatografi lapisan tipis. Rf didefinisikan sebagai perbandingan antara jarak komponen pindah dengan jarak pelarut (eluent) pindah. Jarak komponen pindah Jarak pelarut pindah

Rf =

Harga Rst
Adalah perbandingan jarak tempuh senyawa sampel terhadap jarak tempuh senyawa pembanding. Jarak senyawa sampel dari awal Jarak senyawa pembanding dari awal

Rst =

2. KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (TLC)

Prinsip dari kromatografi lapis tipis sama dengan kromatografi kertas, hanya absorbennya saja yang berbeda. Dalam kromatografi ini, absorbennya berupa lapisan tipis pada lempeng kaca dimana lapisan itu merupakan suspensi dari zat organik maupun anorganik yang telah dikeringkan.

1. 2. 3.

4.
5. 6.

Pengoperasian TLC Penyiapan bejana untuk eluent Penyiapan Lempeng TLC Penotolan lempeng TLC Eluasi Lempeng TLC. Penampakan noda/bercak rambat Menentukan Rf

Penyiapan bejana untuk eluen

Bejana yang digunakan harus merupakan wadah yang kedap terhadap udara, bidang menggunakan wadah dari bahan botol kaca maupun gelas kimia yang ditutup dengan kaca arloji ataupun menggunakan bejana yang diperuntukkan untuk TLC. Lempeng kaca yang ukurannya disesuaikan dengan jumlah sampel yang akan diperiksa, dilapisi dengan suspensi zat organik maupun zat anorganik yang telah dikeringkan. Sampel yang akan dianalisis diproses sesuai prosedur hingga menjadi bentuk larutan, kemudian di tempelkan pada titik awal sampel di TLC dengan menggunakan pipet mikro. Lempeng yang telah ditotolkan sampel selanjutnya dieluasi dalam bejana yang telah disiapkan. Proses eluasi dilangsungkan hingga pelarut naik pada lempeng hingga jarak rambat sekitar 0,5 cm dari jarak maksimum yang telah ditentukan. Jika noda sampel tidak berwarna perlu menggunakan lampu UV untuk melihat rambatan noda.

Penyiapan lempeng TLC

Penotolan Lempeng TLC

Eluasi Lempeng TLC

Penampakan noda/bercak rambat

Menentukan Rf

TES FORMATIF
1. 2.

3. 4.

Jelaskan prinsip dari kromatografi kertas! Dalam pemisahan perak, timah hitam, dan air raksa secara kromatografi kertas, tinggi permukaan pelarut 18cm, sedangkan tinggi masing2 noda adalah 16, 12 dan 6 cm. hitung nilai Rf untuk semua logam. Jelaskan prinsip kerja dari TLC! Dalam analisis TLC suatu senyawa organik, tinggi permukaan pelarut adalah 18 cm, sedangkan tinggi senyawa X=16,6, Y=14,3, Z=10,2, dan W=5.7. Jika nilai Rf diketahui nilai salah satu senyawa adalah 0,79, maka tentukan senyawa tersebut!