Anda di halaman 1dari 8

OBJEK IX IMUNODIFUSI GANDA Tujuan Mengetahui apa yang dimaksud dengan imunodifusi ganda Untuk analisis antigen dan

antibodi membentuk sebuah kompleks antigen-antibodi Untuk mengetahui cara pemeriksaan tranfusi darah dengan uji imunodifusi ganda.

Tinjauan pustaka  Darah Darah terdiri daripada beberapa jenis korpuskula yang membentuk 45% bagian dari darah, angka ini dinyatakan dalam nilai hermatokrit atau volume sel darah merah yang dipadatkan yang berkisar antara 40 sampai 47. Bagian 55% yang lain berupa cairan kekuningan yang membentuk medium cairan darah yang disebut plasma darah. Korpuskula darah terdiri dari: o Sel darah merah atau eritrosit (sekitar 99%). Eritrosit tidak mempunyai nukleus sel ataupun organela, dan tidak dianggap sebagai sel dari segi biologi. Eritrosit mengandung hemoglobin dan mengedarkan oksigen. Sel darah merah juga berperan dalam penentuan golongan darah. Orang yang kekurangan eritrosit menderita penyakit anemia. o Keping-keping darah atau trombosit (0,6 - 1,0%) Trombosit bertanggung jawab dalam proses pembekuan darah. o Sel darah putih atau leukosit (0,2%) Leukosit bertanggung jawab terhadap sistem imun tubuh dan bertugas untuk memusnahkan benda-benda yang dianggap asing dan berbahaya oleh tubuh, misal virus atau bakteri. Leukosit bersifat amuboid atau tidak memiliki bentuk yang tetap. Orang yang kelebihan leukosit menderita penyakit leukimia, sedangkan orang yang kekurangan leukosit menderita penyakit leukopenia.

Untuk resipien ditentukan golongan darah dan cross-match antara darah donatur dan resipien. magnesium dan zat besi.0% (Albumin. . fosfor. Apabila persyaratan tersebut telah dipenuhi. Hb darah dan riwayat penyakit.serum darah atau plasma terdiri atas:    Air: 91. Transfusi dapat dilaksanakan bila memenuhi persyaratan.0% Protein: 8.9% ( natrium klorida. dll)  Garam Plasma darah pada dasarnya adalah larutan air yang mengandung :       albumin bahan pembeku darah immunoglobin (antibodi) hormon berbagai jenis protein berbagai jenis garam  Transfusi Darah Transfusi adalah suatu proses pemberian darah yang berasal dari seseorang yang diberikan langsung melalui vena penerima yang membutuhkannya. natrium bikarbonat. tekanan darah. garam dari kalsium. globulin. maka transfusi dapat dilaksanakan. golongan darah sistem ABO. untuk donatur ditentukan umur. protrombin dan fibrinogen) Mineral: 0. berat badan.

sifat dan proporsi reaktan awal. Uji ini sering digunakan untuk membandingkan persiapan antigen yang berbeda. o Pola Parsial Identitas: B Dalam pola identitas parsial. baik antigen dan antibodi yang diperbolehkan untuk berdifusi ke dalam gel. Pola garis yang dari dapat diinterpretasikan untuk menentukan apakah antigen yang sama atau berbeda seperti yang diilustrasikan di bawah ini. Antibodi tidak dapat membedakan antara dua antigen yaitu dua antigen imunologis identik. Dalam difusi ganda Ouchterlony. Dalam hal ini. serta sel darah merah bisa mencapai masa hidup maksimum setelah diberikan. Antigen bereaksi dengan antibodi spesifik untuk membentuk sebuah kompleks antigen-antibodi. masing-masing spesies yang mengandung antigen tunggal yang diizinkan untuk berdifusi dari sumur terpisah terhadap antiserum tersebut. tranfusi darah donor tidak menimbulkan reaksi apapun pada pasien. . Imunodifusi ganda adalah analisis antigen dan antibodi. Tergantung pada kesamaan antara antigen. komposisi yang tergantung pada konsentrasi. persiapan antigen uji yang berbeda. sama hal nya dengan tes cross matching Tujuan tes presipitasi adalah untuk memastikan bahwa sedapat mungkin. tetapi kurang dalam antigen lainnya. Imunodifusi ganda adalah suatu rangkaian prosedur yang diperlukan sebelum darah diberikan. pola geometris yang berbeda yang diproduksi antara antigen dan antiserum sumur. lengkap dengan kecocokannya. o Pola Identitas: A Antibodi dalam antiserum bereaksi dengan baik antigen menghasilkan garis halus endapan. diperkirakan hasil dari faktor-faktor penentu hadir dalam satu antigen. Imunodifusi dalam gel diklasifikasikan sebagai difusi tunggal dan difusi ganda. antibodi dalam antiserum bereaksi lebih dengan salah satu antigen dari yang lain.

Prosedur ini melibatkan penambahan antigen dan antibody terhadap sumur di gel agarosa.  Gel ini diinkubasi dan kemudian dilihat langsung untuk saluran precipitin.o Pola Non-Identitas: C Dalam 'pola non-identitas'.  Antigen diterapkan ke pusat dengan baik. Jenis spesifik imunodifusi disebut dua kali (Ouchterlony) microimmunodiffusion. kontrol antiserum dan sera pasien ditambahkan ke luar sumur. tidak ada antibodi dalam bereaksi dengan determinan antigen antiserum yang mungkin hadir dalam kedua antigen yaitu dua antigen terkait imunologis sejauh antiserum yang bersangkutan. Ganda (Ouchterlony) Microimmunodiffusion  Gel agarosa dibuat dengan sumur dipotong menjadi gel. Antigen dan antibodi radial berdifusi dari sumur. . Precipitin garis bentuk di mana bertemu antigen antibodi spesifik. atau template diterapkan pada permukaan gel.

Gel agarose ini digunakan sebagai matrix combining diffusion precipitasi. Reaksi yang terjadi jika antigen yang terlarut dan akan menimbulkan suatu precipitasi. Hal yang perlu diperhatikan dalam deteksi ini adalah menggunakan gel agarose. Secara teknis relatif sederhana dan murah. . bila dibandingkan dengan larutan antigen yang diketahui konsentrasinya. Diameter lingkaran dapat dipakai sebagai ukuran konsentrasi antigen. Prosedur seperti reaksi aglutinasi. Reaksi precipitasi terjadi adanya kombinasi antara antibody yang terlarut dengan substansi yang terdapat antigen. Interaksi Antigen-antibody imunodifusi Salah satu uji serologi adalah imunodifusi precipitasi test . Jika partikelpartilek dari antigen berbentuk dalam larutan maka reaksi yang terjadi adalah terbentuknya cincin precipitasi. Antibody dalam metode ini disebut precipitins. imunodifusi ganda dan presipitasi berazaskan model ini. meskipun demikian reaksi imunodifusi dapat mendeteksi 0. Assay kompleks Ag-Ab bertujuan mendeteksi antigen atau antibodi. Dalam metode ini menggunakan prinsip antigen-antibody. cara ini paling banyak digunakan di bidang diagnostik atau biomedis.005 μg protein/ml suspense. Biasanya dalam model ini tidak menggunakan label dan kepekaannya terbatas. Antigen yang dimasukkan di dalam lubang akan berdifusi dan bereaksi dengan antibodi membentuk lingkaran presipitasi putih. Imunodifusi Antibodi dicampurkan di dalam agar.

01% o Panaskan sampai agar-agar larut dan sampai larutan tampak jernih o Letakkan cawan petri diatas meja horizontal o Tuangkan larutan agarose dengan volume tertentu sehingga ketebalnya 3mm o Setelah agar membeku buat sumur-sumur dengan menggunakan gel punch .Alat dan Bahan Alat : o Cawan petri o Gel gunch o Pipet mikro o Meja horizontal Bahan : o Agar-agar biasa o o o Larutan penyangga peronal Natrium azida Serum dan larutan NaCl fisiologi Cara kerja o Larutan agar dalam larutan penyangga personal/ penyangga fosfat hingga diperoleh konsentrasi 1% o Masukkan pengawet natrium azida. beri jarak anatara sumur satu dengan sumur lainnya o Kedalam sumur yag ditengah dimasukkan antisera ( reagen comb) sebanyak 5-10 mikro dan kedalam serum yang lain dimasukkan serum uji o Inkubasi selama 24 – 48 jam o Perhatikan adanya garis presipitasi diantara sumur yang berisi antibodi dan sumur yang berisi antigen. . dengan konsentrasi akhir 0.

sama hal nya dengan tes cross matching yyang pernah dilakukan di praktikum sebelumnya Tujuan tes presipitasi adalah untuk memastikan bahwa sedapat mungkin. Reaksi yang terjadi jika antigen yang terlarut dan akan menimbulkan suatu precipitasi.imunodifusi ganda merupakan rangkaian prosedur yang diperlukan sebelum darah diberikan. Antigen bereaksi dengan antibodi spesifik untuk membentuk sebuah kompleks antigen-antibodi. serta sel darah merah bisa mencapai masa hidup maksimum setelah diberikan. Antigen yang dimasukkan di dalam lubang akan berdifusi dan bereaksi dengan antibodi membentuk lingkaran presipitasi putih.Hasil dan pembahasan Hasil Pembahasan Imunodifusi ganda adalah analisis antigen dan antibodi. Diameter lingkaran dapat dipakai sebagai ukuran konsentrasi antigen. tranfusi darah donor tidak menimbulkan reaksi apapun pada pasien. Dalam metode ini menggunakan prinsip antigen-antibody. Pada imunidifusi ganda molekul dengan berat molekular yang lebih rendah bergerak lebih cepat melalui gel. menyebabkan lengkung presipitin dapat terlihat bila antigen . lengkap dengan kecocokannya. bila dibandingkan dengan larutan antigen yang diketahui konsentrasinya. Antibody dalam metode ini disebut precipitins.

sumur yang ditengah diisi dengan reagen comb yang merupakan antisera sebanyak 5 mikronliter.com/doc/73116465/biokimia-utama http://id. sementara 5 sumur disekelilingnya diberikan dimasukkan serum ujisetelah pengerjaan selesai. dari hasil kelompok 3 tidak ada tampak garis presipitan antara sumur antigen dan antibody. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. 1997. larutan agarose telah disiapkan sebelumnya.scribd. dapat terlihat pada hasil yang dilampirkan Kesimpulan o Imunodifusi ganda adalah analisis antigen dan antibodi. maka jarak lengkung presipitin dari antigen sesuai dengan konsentrasi antigen. cawan petri yang berisi agar lengkap dengan sumur dan isinya tersebut di inkubasi selama 24 jam .scribd. Jakarta http://id. Pada praktikum imunodifusi ganda ini. sehinggga praktikan hanya membuat sumur-sumur kecil pada agar yang telah dibuat. setelah diinkubasi hasil diamti. Penerbit EGC. Pada keseimbangan lengkung presipitin tetap tidak bergerak jika konsentrasi antisera konstan.scribd. Antigen bereaksi dengan antibodi spesifik untuk membentuk sebuah kompleks antigen-antibodi o Ada 4 pola pada imunodifusi ganda ini. yaitu pola A.com/doc/143975741/Hilmy-Pemeriksaan-Laboratorium http://id. dimana ada 6 sumur kecil dengan pola melingkar dan satu sumur ditengahnya.com/doc/142471548/imuno-difusi-ganda .B. dan C o Perlakuan imunodifusi ganda ini menggunakan agar yang diberi sumur-sumur kecil dengan jarak tertentu dengan pola melingkar yang sumur ditengah diberikan reagen comb sebagai antibody dan lingkaran sekitarnya sebagai serum uji o Tidak ada garis presipitasi yang terbentuk setalah dilakukan inkubasi Daftar pustaka Guyton dan Hall.dan antibodi mendekati keseimbangan.