Carrera de Bioqumica Departamento de Ciencias Qumicas y Recursos Naturales Facultad de Ingeniera, Ciencias y Administracin Prof.

Felipe Gallardo Arriagada Universidad de La Frontera

Mtodo KJELDAHL

Nombre: Leonardo E. Altamirano Esparza Curso: Bioqumica

Objetivos
Dar a conocer una pequea resea de cuadro histrico del desarrollo del mtodo de Kjeldahl, y responder a las incgnitas: Quin fue Kjeldahl? A qu se debe la obtencin de la tcnica? Conocer el mtodo de Kjeldahl y su importancia en la actualidad. Estudiar el fundamento tras el mtodo. Ser capaz de comprender el mtodo y aplicacin de este. Entregar con claridad pasos y frmulas que implican el mtodo, adems de datos importantes para el desarrollo de casos/problemas.

Demostracin del mtodo a travs de un ejemplo.

Introduccin

Mtodo Kjeldahl

Destilacin

Digestin

Mtodo Kjeldahl
Ventajas
Versatilidad para varios tipos de productos Alta fiabilidad Mtodo de referencia.

Desventajas
Uso de catalizadores txicos y caros Interfieren compuestos nitrogenados no proteicos (en la industria alimentaria) Eleccin del factor de conversin

Digestin

Destilacin

Valoracin

Clculos

Donde: V: volumen, N: normalidad, f: factor de correccin, PeqN: Peso equivalente, fP: factor de conversin de nitrogeno a proteinas, mM: Masa de Muestra (g)

Tcnica operatoria
Reactivos
Sulfato de cobre (II) pentahidratado PA Sulfato de potasio anhidro PA Hidrxido de sodio PA cido sulfrico PA (96% m-m; 1.84 Kg/L) cido clorhdrico PA (30-37% m-m; 1.19 Kg/L) Etanol 96% V-V Solucin de hidrxido de sodio 40% m-V Solucin alcohlica de cido brico 4% m-V Solucin estandarizada de cido clorhdrico 0.02 N.

Materiales
Balanza analtica con capacidad mxima de 200 g y valor de divisin 0.1 mg. Aparatos de digestin o mecheros de gas Aparato de destilacin con trampa Kjeldahl Buretas Pipetas Balanza tcnica con capacidad mxima de 200 g y valor de divisin de 0.1 g Cilindro graduado Frasco lavador Erlenmeyer de 100 mL Baln Kjeldahl de 100 o 500 mL Equipo de destilacin provisto de una trampa Kjeldahl Matraz aforado de 200 o 250 mL

Solucin de Hidrxido de sodio, 40% m-V

Solucin indicadora de rojo de metilo y azul de bromocresol verde.

Tcnica operatoria

(Fig: Equipo de micro Kjeldahl)

Tcnica operatoria

(figs: digestor y destilador Kjeldahl que se encuentran en los laboratorios del dept. de agroindustrias de la universidad de la frontera)

Ejemplo
El contenido en protena de una muestra de pescado se determin pesando 1.210 g. Tras la digestin la disolucin resultante se alcaliniz con un exceso de NaOH, se destil con vapor de agua y el NH3 liberado se recogi sobre 50 mL de H3BO3 y posteriormente fue valorado con H2SO4 0.3N, gastndose 17.7 mL del mismo. Calcular el % de protena en la muestra de pescado. Equivalentes de N = Equivalentes de H2SO4: 17.7x10-3 L H2SO4 x 0.3 N H2SO4= 5.31 x10-3 g N= (5.31 x10-3 equiv N x 14 g/equiv)= 0.07434 g

g N/100 g = (0.07434 g N/ 1.21 g muestra) x 100 = 6.143 g N/100 g muestra

Para pasar a contenido de protenas corregir por el factor adecuado segn la naturaleza de la muestra (para el pescado = 6.25, tabla 1).

g protenas/100 g = 6.143 g N/100 g x 6.25= 38.39 g protenas/100 g muestra

(E. Garca y I. Fernndez, 2012)

Comentarios

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