A legnagyobb energival rendelkez anyagok, rszt vesznek a membrnrendszerek felptsben valamint az anyagcsere reakcikat irnytjk s katalizljk: enzimek, hormonok,

prosztaglandinok formjban. Felptsk szerint a zsrok lehetnek egyszerek, mint pl. a trigliceridek vagy sszetett lipidek, mint pl. a foszfolipidek, glikolipidek, amelyek fknt a membrnok felpts ben vesznek rszt. A triglicerideket megfigyelhetjk elektromikroszkppal miutn a ksztmnyt osmium tetraoxiddal (Os O4 )fixltuk. A triglicerid szemcskben osmiofil cskok vltakoznak osmiofb cskokkal. Az osmium tetraoxid egy nehz fmet tartalmaz, amely a trigliceridhez ktdik majd ezt egy elektronsugrnyalbbal bombzva, a nehzfm visszaveri az elektronokat, ezltal kimutat va a kisebb s nagyobb srsg helyeket a triglicerid szerkezetben. Fnymikroszkppal is kimutathatk a lipidek a Sudan III -al vagy Scharlach Rot-al a trigliceridek narancs sznre festdnek, mg Sudan IV-es mdszerrel a foszfolipidek feketre festdnek. FEHRJK A fehrjk a sejtekben lezajl folyamatok f irnyti. A fehrjk lehetnek: enzimek, biokataliztorok, szllt fehrjk pl. lgzsi gzokat szllt fehrjk: hemoglobin, mioglobin, valamint az sszehuzodsra kpes fehrjk: aktin, miozin, valamint a vdekezsi folyamatokban termeld antitestek szintn fehrje termszetek. A CHAPERONE FEHERJEK Az utbbi vekben vgzett biokmiai s molekulris biolgiai kutatsok rvn fny derlt egy olyan klnleges fehrjk csoportjra, amelyeknek letfontossg szerepet tltenek be a sejtek letfolyamataiban. A chaperone fehrjk ubicviterek, magasan specializlt fehrjk, amelyek az l sejtekben tallhatk s fknt a stresz helyzetekben fejtik ki hatsaikat. A chaperoning- betakarst, becsomagolst jelent, mg nevezik ksr fehrjknek vagy stresz fehrjknek, mivel elsegtik a szervezetben lev tbbi fehrjk szintzist. A chaperone fehrjk hatrozzk meg a tbbi fehrje normlis trbeli elrendezd st, (konformcijt) valamint becsomagoldsukat ezltal biztostva ezen fehrjk normlis mkdst. A stresz megsznte utn a chaperone fehrjk hatnak azokra a fehrjkre, amelyek a stresz hatsra mdosulst szenvedtek, hogy ezek a fehrjk visszanyerhessk eredeti stabil tercier szerkezetket. A chaperone fehrjkre jellemz, hogy sajt becsomagoldsukat is ellenrzik ezrt autofold zoknakis nevezik. Ezekre a fehrjkre mg jellemz , hogy ezek a fehrjk a termikus hatsokra ellenllak s szerepk az hogy megvdjk a tbbi fehrj ket is a denaturldstl. Ezek a fehrjk a sejt tartalmnak krlbell mintegy 1-2%-t kpviselik. Tevkenysgket kifejthetik nemcsak a stresszes helyzetekben hanem a normlis sejttvkenysg alatt is, gy a nvekedsi, fejldsi s differencildsi fo lyamatokat is irnytjk. A stresz hatsra bizonyos gnek trdsa indul be, amelyek az n. Termikus sokk proteineket kdoljk (heat shock protein) hsp fehrjk. A hsp fehrjket egymstl egy szm rvn klnbztetjk meg, amely a molekulatmegket jelenti kDa-ban. gy ismernk hsp 60-as, hsp 70-es s hsp 90-es fehrjket. A stresz stimulusok szrmazhatnak: - a kls krnyezetbl:- 46 0 c feletti hmrsklet - hideg - mrgek, etanol, nikotin, oxignes vz. - a bels krnyezetbl: - patolgis stimulusok: lz, gyullads, ischaemia. - hormonok - gygyszerek - infekcik: bakterilis, virlis -onkognek,protonkognek a daganatos megbetegedsekbl. Az eukarita sejtekben az endoplazms hlzat gy mkdik mint egy rzkel, amely rzkeli a klnbz stresz helyzeteket, mivel az endoplazms hlzat membrnjban tallhat egy chaperone fehrje a grp 94-es, amely a Golgi appartusban is megtallhat. Ez a grp 94-es fehrje megegyezik a citoplazmban tallhat hsp 90-es chaperone fehrjvel. gy tnik, hogy a grp 94 -es fehrje egy glikoprotein, amely tri a membrnokat teht transzmembranlis elhelyezkeds. Ennek a fehrjnek a mennyisge n bizonyos s tresszes llapotokban mind az endoplazms hlozatban mind pedig a Golgi appartusban, a sejtmagban s az extracellulris trben is, ezrt stresz marker -nek is tekintjk a grp 94-es fehrjt. A citoszlban lev hsp 90-es chaperone fehrje megvdi a mikrotubulusokat s a citoplazmban lev filamentumokat a ter mikus behatsokkal szemben. A chaperone fehrjk funkcii: 1- fokozott sejtvdelem a klnbz stresszes helyzetekben 2- elsegtik az jonnan termelt fehrjk ki s becsomagolst 3- biztostja a fehrjk szlltst 4- a nem megfelel szerkezet fehrjket elbontjk 5- rszt vesznek a mitokndriumok s a peroxizmk biogenzisben 6- rszt vesznek az immunvlaszban 7- szerepk van a DNS osztdsban 8- rszt vesznek a szteroid hormonokra rzkeny receptorok szintzisben valamint normlis mkdsk biztostsban 9- vd szerepk van a KIR-re nzve 10- a retina szintjn 3 ilyen tpus fehrje tallhat, amelyek megvdik a fnyrzkeny receptorokat a fny stimulusokkal szemben. 11- biztostjk a sejtek nvekedst, fejldst, differencildsukat valamint a sejtek regedst s apopttikus hallukat. Ujabb felfedezsek szerint a chaperone fehrjk rszt vesznek a daganatok patogenzisben. gy a ksrleti llatokban a daganatok jelenlte egy stresszes llapotot hoz ltre, ami a hsp 90-es s a grp 94-es fehrjk mennyisgnek a nvekedst vltja ki. A hsp 90-es chaperone fehrje mennyisge n leukmikban, melanomban, gyomor karcinomban, hasnylmirigy karcinomban valamint mh s eml karcinomban. A hsp 90 -es fehrje mennyisgnek a nvekedse egyenesen arnyos a malignus sejtek prolifercis fokval. Ma mr ismert, hogy a hsp 70-es fehrje gy fejti ki a hatst, hogy a tumor sejtek fehrjinek valamint a virus fehrjk hatsait semlegesti. Ezenkivl mg egy tumor szupresszor p 53-as fehrje hatst is fokozzk s ezltal a daganatok nvekedst meggtoljk. Kimutattk hogy a legtbb daganat rzkenyebb a hre, mint az egszsges szvet, ezrt az emelkedett hmrsklet elpuszttja ezeket a daganatokat. Ugyancsak nem olyan rgen mutattk ki, hogy a sejtek osztdsuk alatt is kpesek vlaszolni a stresszes llapotokra. gy arra a kvetkeztetsre jutottak, hogy a daganatok hipertermis kezelse megtudja akadlyozni a daganatok nvekedst. A hipertermis

42-430C-os kezels sorn megfigyeltk, hogy a sejtekben bizonyos vltozsok mennek vgbe mind a citoplazmban mind pedig a sejtmagban: gy az immunitsban rszt vev reakcik szintjn valamint az apopttikus reakcik szintjn. A magasabb hmrsklet hatsra fokozdik a kerings mind a daganatos mind pe dig a norml szvetekben. A kerings fokozdsa kvetkeztben pedig a daganatos szvetekben n ezen szvetek oxign elltottsga, minek hatsra a szvetek rzke nyebbek lesznek a sugr kezelsre. Ugyanakkor a kerings fokozdsa kvetkeztben n a szllt ott citosztatikumok mennyisge a daganatos szvetekben. A daganatos szvetekben a hipertermis kezels helyi hatsokon kivl ltalnos hatsokat is kivlt, azltal hogy bizonyos antigneket is aktivl. Az aktivlt antignek az NK limfocitkra hatnak, amelyek aktivldnak meggtolva a metasztzisok keletkezst. Ezzel prhuzamosan n a daganat sejtek immunogenitsa ami kedvez a tumor sejtek lzisnek a T limfocitk rvn. A hipertermi s kezels egy msik hatsa, hogy a stresz fehrjk szintzise is n, amelyek a tumor szupresszor fehrje rvn meggtolja a tumor nvekedst. A berlini Humboldt egyetemen a kismedence kiterjedt inoperbilis daganatai esetben ( vgbl karcinoma, mhnyak rk, prosztata rk) prblkoztak a hipertermis kezelst a sugr kezelssel s a citosztatikumos kezelssel kombinlni s ezltal a daganatok cskkenst elrni, azaz operbiliss tenni. A chaperone fehrjk tanulmnyozsnak fontos szerepe van a genetikai, sejtbiolgiai, bakterolgiai, neurolgiai s onkolgiai szempontbl, hogy megrthessk a stresz folyamatokat valamint a szervezetben lezajl degenercis s regedsi folyamatokat.

A sejtfelszn (szerkezet, ultrastruktura, vegyi sszettel, szerep) A sejteket a krnyezetktl elvlaszt sejtfelszn veszi krl, amelyeken keresztl trtnik az anyagcserhez szksges a tpanyagok, energia s a genetikai informci cserje. A sejtfelsznt hrom szorosan sszefgg alkotrsz alkotja : 1. A citoplazma kortiklis rsze a citoszkeletonnal 2. Plazmolemma vagy tulajdonkppeni sejthrtya 3. Glikokalix vagy glikolemma 1. A citoplazma kortiklis krgi rsze a citoplazma azon rsze amely kzvetlenl a plazmolemma alatt helyezkedik el. Kevs sejtszervecskt tartalmaz viszont a citoszkeletonhoz tartoz szmos kontraktilis elemet tartalmaz, amely rvn biztostja a sejtek plaszticitst. A citoszkeleton a sejt kontraktilis elemt kpezi, ezltal a sejt kpes alakot vltoztatni. A citoszkeleton alkot elemei a plazmolembl indulnak ki s behlozzk az egsz citoplazmt. Egyesek gy tartjk, hogy a sejtcsont s izomrendszere a citoszkeleton. A citoszkeleton felptsben rsztvev mikrofilamentumok 3 csoportba oszthatk: 1. Az aktin filamentumok (ezek tmrje 7nm) 2. Az intermedien filamentumok (ezek tmrje 10nm) 3. A mikrotubulusok (ezek tmrje 24nm) 1.1. Az aktin filamentumok sszes sejtkategriban megtallhatk.Az aktin filamentumok a plazmolemma bels felsznben lehorgonyozva tallhatk. Vegyi sszettelt tekintve majdnem azonos a sima izomsejtekben lev aktin filamentumok vegyi sszettelvel. Az aktin filamentumok szerepe: az aktin filamentumok biztostjk a plazmolemma alkot elemei s a citoszkeleton alkot rszei kztti folytonossgot. Kontraktilis tulajdonsgaik rvn az aktin filamentumok rszt vesznek a membr nokon t trtn szlltsi folyamatokban, valamint a sejtek mozgsban.Pl. a makrofgok helyvltoztatsa pseudopodiumok kibocsjtsa rvn trtnik, amit az aktin filamentumok biztostanak. 1.2. Az intermedier filamentumok-ra jellemz, hogy a legstabilabb citoszkeletlis elemek. Aszerint, hogy milyen fehrje vesz rszt a felptskben s hogy milyen sejtkategrikban tallhatk 5 csoportba oszthatjuk ket: a. Citokeratinok - megtallhatk az sszes hm sejtekben s a hm eredet sejtekben is. b. Vimetin-megtallhat a mezenchimlis sejtekben c. Desminek- az izomsejtekre jellemzk. d. Neurofilamentumok- az idegsejtekben tallhatk. e. Gliafilamentumok- a gliasejtekben tallhatk. 1988-ban Steinert s Roop az aminosavak szekvencijt tanulmnyozva az intermedier filamentum ok szerkezetbl egy msik csoportostst ajnlottak: a. savas tpus citokeratinok I tpus b. lugos tpus citokeratinok II tpus c. savas gliafehrjk, periferinek, vimetinek s desminek III tpus d. neurofilamentumok IV tpus e. maglamininek V tpus f. nestinek, amelyek a STEM neuroepitelilis sejtekben tallhatk. Az intermedier filamentumok kzl citokeratinok kpezik a legfontosabb csoportot. Feloszthatjuk: - Kemny citokeratinokra amelyek a haj, krm l sejtjeiben valamint a nyelv fona las szemlcseiben s a csecsemmirigy retikulris hmjban fordulnak el. Lgy citokeratinokra ezek a hmszvetek specifikus sejtjeiben fordulnak el. Az emberi szervezetben krlbell 20 citokeratin kategria ismert aszerint, hogy milyen sejtkategriban tallhat s az embrionlis fejlds milyen szakaszban van. A citokeratinok a sejtekben ssze vannak ktve a plazmolemma citoszkeletlis rszvel. A citokeratinok szerepe: A citokeratinok kpezik a hmsejtek differencildsnak markereit. A jelenltk meghatrozza egy sejtvonal nvekedsi s rsi folyamatban a sejtek molekulris, immunolgiai, biokmiai s fizikai tulajdonsgait, amelyeket a sejtek differencildsi folyamataik rvn szereztek. A citokeratinok azonostsra s osztlyozsra a nukleinsavak hibridizcis mdszert, a peptid trkpek elemzst s a monoklonlis antitestek mdszert hasznljk. Ezekkel a mdszerekkel egyetlen citokeratin kategria azonosthat, amely egy adott hmsejt csoportra jellemz. 1.3. Mikrotubulusok- 24 nm tmrj citoszkeletlis elemek. Elsknt Sabatini mutatta ki elektromikroszkppal 1963 -ban glutraldehiddel val rgzts utn. Az sszes eukarita sejtben megtallhat reges szerkezeti elemek, melyek hlozatot hoznak ltre. Kt nagy mikrotubulus kategrit klnbztetnk meg: - labilis mikrotubulusok- amelyek olyankor kpzdnek amikor szksg van rjuk, amikor megsznik a szerepk eltnnek. Pl. a citoplazma nyulvnyokat kibocsjt sejtek a helyvltoztats cljbl, ezek glutraldehiddel val rgzts utn kimutathatk elektronmikroszkppal. - stabil mikrotubulusok- ezek a sejtekben jelen vannak egsz letk vgig, ezek brmilyen fixl anyaggal kimutathatk pl. csillkban, sejtkzpontban. Mikrotubulusok szerkezete:

 s tubulinokbl, azaz globulris fehrje molekulkbl plnek fel. Az s tubulinok monomrek, ezek egyeslve hozzk ltre a dimrt. Ha a dimr tubulinja a szomszdos dimr tubulinjhoz ktdik s ez ismtldik kialakul a protofilamentum. A mikrotubulusokat 13 ilyen protofilamentum alkotja, amelyek egy hengert hoznak ltre. A protofilamentumokat egy nexin nev fehrje kti ssze. A mikrotubulusok szerkezete protofilamentumok

keresztmetszet A mikrotubulusok nvekedse polimerizci rvn trtnik a henger egyik vgn ez a pozitv vge, mg a msik negatv vgn a mikrotubulusok depolimerizldnak, ezltal a mikrotubulus rvidl. A mikrotubulusok hosszanti nvekedse beindul spontn amikor a citoplazma tubulin koncentrcija elr egy bizonyos szintet, amikor pedig a tubulin koncentrci egy kritkus szint al cskken a nvekeds lell. A mikrotubulusok megtallhatk a citoplazma kortiklis rszben s a citoplazma nyulvnyok tengelyben. A mikrotubulris hlozat az interfzisban lev magban a centriolum krl tallhat mg az osztod sejtben a sejt kt plusa krl ltre hozva az osztdsi ors fonalait.

1. 2. 3.

A mikrotubulusok szerepe: F szerepk az sszehuzdsban van, ami a mikrotubulusok egymson val elcsuszsa rvn valsul meg. Rszt vesznek a sejtekben trtn szltsi folyamatokban pl. Exocitzisban: az inzulin, pajzsmirigy hormonok esetben, ugyanis a mikrotubulusok irnytjk a vladk szemcsket a sejtek felszne fel. Szerepk van az inger vezetsben, ugyanis az idegsejtek axonjba lev m ikrotubulusok felsznn a meditor anyag molekuli vgig grdlnek s felhalmozdnak preszinaptikusan.

4.

A helyi rzstelentk, mint pl. a Lidokain hozzkapcsoldnak a monomrekhez, ezltal gtoljk a polimerizcit. Ezltal gtl dik a mikrotubulus kpzds, minek a vgeredmnye az lesz, hogy egy adott idre lell az ingerlet vezets. Ez a folyamat reverzibilis ugyanis az rzstelent hatsa lassan elmlik s az ingerlt vezets pedig helyre ll. Az ltalnos rzstelentk, mint pl. a halotn ezek knnyen thatolnak az idegsejtek membrnjn mivel ezek zsrban oldod anyagok s itt is reverzibilisen bntjk a mikrotubulusokat, van fjdalom de nem tudatosul, ez a narkzis. Azok az anyagok amelyek gtoljk a mikrotubulusok depolimrizcijt, mint pl. az alkohol ezek gtoljk az rzstelentst. Ilyenkor az anesztzia hatstalan. Szerepk van a sejtosztdsban ugyanis az osztdsi ors mikrotubulusokbl ll, amelyek a kromoszmk vndorlst irnytjk a sejt kt plusa fel. Depolimerizcit ltrehoz gygyszer a Colchicin- szi kikerics - , amely metafzisban rgzti az osztd sejteket, azltal, hogy az osztdsi orst kpez mikrotubulusokat depolimerizlja. A colchicint gyakorlatban felhasznljk a kromoszmk karitpusban val tanulmnyozsra, mivel a sejtek osztdst lelltja metfzisban amikor a kromoszmk a legvastagabbak a szuperszpiralizci miatt. Ugyanezen az elven alapszik a daganat kezelsban hasznlt citosztatikumok hatsa: pl. az acut limfoblasztos leukmik kezelsben hasznlt Vinca- alkaloidk: VINCRSTIN, VINBLASTIN, melyek az osztod sejteket metafzisban rgztik s ezltal a sejtciklus lell.