Curs 6

Compui azotai n snge

Compui azotai neproteici n investigarea funciei renale. Determinarea ureei, acidului uric, creatinei, creatininei.

Compui azotai n snge

Neproteici Uree (BUN-blood urea nitrogen) Acid uric Creatin, creatinin
Hemoglobin Bilirubin Urobilinogeni
2

Proteici Albumine Globuline Fibrinogen

(analizai pentru monitorizarea funciei renale)

Compus Uree Aminoacizi Acid uric Creatinin Creatin Amoniac Concentraia aproximativ n plasm (% din total N neproteic)

Compui azotai neproteici

45 20 20 5 1-2 0.2
3

Ureea
Generare: catabolismul proteinelor i acizilor nucleici n ficat

Proteine

Aminoacizi

Amoniac

Uree

Proteoliz enzimatic

Transaminare i dezaminare oxidativ

Sintez enzimatic

NH4NCO

NH3 + HN=C=O

(H2N)2CO 4

Whler, 1828, sinteza in vitro a ureei

Uree-Semnificaie clinic
Interval de referin:
6-20 mg/dL (2.1-7.1 mmol/L) Valorile cresc cu vrsta Peste 60 ani: 8-23 mg/dL (2.9-8.2 mmol/L) Valori mai ridicate la brbai
5

Uree - Metode de analiz

Metoda chimic: reacia cu diacetilmonoxim
, m . acid diacetilmonoxima + uree ser diazina ( galben)

cccc

Uree - Metode de analiz

Metoda enzimatic

Hidroliza ureei:

+ Uree + 2 H 2O + H + Ureaza 2 NH 4 + HCO3

Detecie conductometric Reacia Nessler Reacia Berthlot R. enzimatic

Conversia ureei neionizate n NH4+ i HCO3- ; crete conductivitatea (metod rapid)

+ NH 4 + 2 HgI 2 + 4 KI NH 2 Hg 2 I 3 + H 3O + + 4 KI + NaI

+ 2C 6 H 5 OH + OCl + NH 4 indofenol + H 2O

Tem:

reacia glutarat-glutamat

Acidul uric

C5H4N4O3
2,6,8 Trioxipurina

Proprieti:
cristale albe densitate 1.87 solubilitate n ap: slab
9

Acid uric
Generare :
La om i primate superioare: produs final de oxidare n catabolismul purinelor La multe mamifere, uricaza oxideaz n continuare acidul uric la alantoin Principalul compus azotat n excrementele psrilor i reptilelor

10

Acid uric - semnificaie clinic

Intervale de referin (metoda enzimatic):
Femei: 2.6-6.0 mg/dL (0.155-0.357 mmol/L) Brbai: 3.5-7.2 mg/dL (0.209-0.428 mmol/L)
Valorile cresc cu vrsta (10% pe an)

Guta: depunerea uratului de sodiu (cristale) n urma precipitrii n fluidul suprasaturat.

11

Purine
Purina heterociclu aromatic care const dintr-un inel pirimidinic i unul imidazolic. Termenul general de purine se refer i la compuii substituii precum i la formele tautomere. Purina este heterociclul cu azot cel mai rspndit din natur.

12

Acid uric Metode de analiza

R. cu acid fosfowolframic (H3PW12O40) Metoda enzimatic (uricaza) Metode cromatografice HPLC

13

Metoda enzimatic cu uricaza

acid uric + O 2 uricaza alantoina + CO 2 + H 2O 2
Reactia cromogena:

H 2O 2 + fenol + 4 aminoantipirin POD chinona rosie

14

Creatin, creatinin
Creatina Acid metilguanidinoacetic C4H9N3O2
- Compus azotat organic prezent n organismul
vertebratelor; ajuta la alimentarea cu energie a celulelor musculare - Identificata n muchii scheletici de ctre Chevreul n 1832 i numit astfel dup grecescul Kreas (carne)

Creatinin
rezult la descompunerea creatinfosfatului n muchi, cu vitez relativ constant, funcie de masa muscular (valori mai mari la brbai dect la femei). - Cel mai fix constituent azotat al sngelui, puin influenat de alimentaie - Investigat alaturi de BUN (blood urea nitrogen). 15

Michel Eugne Chevreul (17861889)

Chimist francez, cunoscut mai ales pentru studiul acizilor grai i aplicaiilor acestora n art i tiin. I se atribuie descoperirea acidului margaric (1813), cu rol important n obinerea margarinei i crearea primului tip de spun, realizat din grsimi animale. Chevreul studiaz culorile i formuleaz Legea contrastului culorilor.
16

Creatinina-semnificaie clinic
Intervale de referin (metoda Jaffe):
Creatinina n snge:

Femei: 0.6-1.1 mg/dL (53-97 mmol/L) Brbai: 0.9-1.3 mg/dL (80-115 mmol/L)
Excreia de creatinin este mai mare la brbai dect la femei Excreia de creatinin scade cu vrsta

17

Creatinina - analiza
Reacia Jaffee (considerat m. de referin)
creatinina + picrat complex rosu
OH

Enzimatic (tinde s nlocuiasc r. Jaffe)

za creatinina + H 2O creatinina creatina

creatina + H 2O creatinaza sarcozina + uree

sarcozinox idaza sarcozina + O 2 + H 2 O formaldehi da + glicina + H 2 O 2

peroxidaza indicator ( forma redusa ) + H 2 O2 indicator ( forma oxidata ) + 2 H 2 O

propus ca metod de referin

HPLC (cu faz invers sau cu schimb de cationi) foarte specific;

Sarcozina- acid N-Me aminoacetic; Glicina: acid aminoacetic

18

Intrebari
Care sunt principalii compui azotai neproteici din snge determinai pentru investigarea funciei renale? Artai pe scurt cum este generat ureea n organism. Prezentai o metod de determinare a ureei din snge. Prezentai o metod de determinare a acidului uric din snge. Prezentai metoda Jaffee pentru determinarea creatininei din snge

19