LABORATORIO EXTRACCIN DE ADN

DOCENTE: CRISTINA ACOSTA___________ ASIGNATURA: Biologa_______________________ DISEO: 2013.

REGLAMENTO DEL LABORATORIO: 1. Al iniciar la prctica, todos deben estar con bata blanca, guantes de ltex y tener una toalla pequea a dems deben seguir solamente las indicaciones de esta gua y en el transcurso de su realizacin ningn estudiante debe salir del laboratorio, cualquier desacato se le disminuir una unidad en su calificacin o si es de gravedad se le pedir su retiro del lugar. 2. Se requiere leer atentamente la gua, organizar los grupos de trabajo para la prctica y hacerse responsables de los materiales que utilicen en el laboratorio; cualquier material perdido o quebrado debe ser pagado por los integrantes del grupo. 3. Los estudiantes deben presentar un informe individual ocho das despus de haber realizado la prctica, debe ser escrito a mano en esfero negro, hojas blancas tamao carta por lado y lado de las hojas (ahorro de papel) y debe tener objetivos, justificacin, marco terico, solucin de la prctica, conclusiones y bibliografa. Si este informe se presenta despus solo se recibir en la misma semana y con una unidad de menos. Este laboratorio se rige de acuerdo al manual de convivencia de la Institucin. OBJETIVO: Extraer ADN de una forma sencilla para observar el proceso y lo visible de la concentracin. MATERIALES: - Alcohol. - Detergente. - Enzima proteoltica (ablandador de carne).

- Material vegetal y animal para extraer ADN: Cebollas e Hgado de pollo.

PREPARACION DE LA SOLUCIN: Adicionar y triturar el material vegetal o animal (licuadora): La finalidad de la trituracin o maceracin del material a extraer ADN siendo la primera destruccin fsica de la muestra a aislar ADN. Fuente de ADN (ms o menos 100 ml o 1/2 de taza de espinacas, Hgado, cebollas o Brcoli) Un pellizco grande de Cloruro de sodio sal de mesa (menos de un ml o 1/8 de cucharadita) Agua fra (en hielo). El doble de la cantidad de tu fuente de ADN (ms o menos 200 ml o 1 taza) Maceracin por licuado a alta velocidad por 15 segundos. El licuado separa las clulas de las unas de otras, por lo que ahora bsicamente se obtiene una solucin muy diluida de sopa de clulas (vegetal y animal). PRCTICA: 1. Vierte el concentrado de clulas a travs de un colador dentro de otro contenedor (como una taza medidora por ejemplo). Aade como 1/6 de esa cantidad de detergente lquido (ms o menos 30 ml o dos cucharadas soperas) y mzclalo. Deja reposar la mezcla entre 5 y 10 minutos. Vierte la mezcla en tubos de ensayo u en otros contenedores pequeos de vidrio, cada uno como 1/3 lleno. Prueba usar uno detergentes o el que sea que tengas a mano. 2. Aade una pequea porcin de enzima a cada tubo de ensayo y agtalo suavemente. Se cuidadoso!
GRUPO BIOQUISEMI: grupobioquisemi86@gmail.com

Si lo agitas demasiado fuerte rompers el ADN hacindolo ms difcil de ver. Usa ablandador de carne como enzima. (Si no puedes encontrar ablandador proteoltico, jugo de pia o solucin limpiadora para lentes de contacto) 3. Ladea tu tubo de ensayo y lentamente vierte el alcohol (isoproplico al 70-95% o alcohol etlico) sobre la pared del tubo de manera que forme una capa sobre la mezcla. Sigue vertiendo hasta que tengas en el tubo aproximadamente la misma cantidad de alcohol que de mezcla. El ADN se elevar desde la mezcla hasta la capa de alcohol. Puede usar pistilo de madera para arrastrar el ADN que est en el alcohol. Qu es ese material pegajoso? El alcohol es menos denso que el agua, por lo que flota en la parte superior. Debido a que se formaron dos capas separadas, toda la grasa y protena que rompimos en los dos primeros pasos. En este caso, la protena y la grasa irn al fondo, que es la capa acuosa, donde se sienten ms confortables, mientras que el ADN prefiere la capa superior, el alcohol. El ADN es una larga y pegajosa molcula a la que le gusta formar grumos. En estos momentos ustedes realizaron una extraccin de ADN PREGUNTAS: 1. Qu es una enzima proteoltica? 2. Qu es el ADN? 3. Investiga la historia del ADN. 4. Por qu el detergente destruye an ms las clulas? 5. Dibuja lo que viste en cada uno de los tres pasos y explcalos. BIBLIOGRAFA: DR. GONZLEZ Giovanni (2010). Laboratorio de extraccin de ADN. Fundacin Universitaria San Martn. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia; rea de Biologa Molecular. http://www.slideshare.net/iggm/laboratorio-2-de-extraccion-de-adn

GRUPO BIOQUISEMI: grupobioquisemi86@gmail.com