LAPORAN PRAKTIKUM METABOLISME DAN INFORMASI GENETIK Percobaan 5 PENENTUAN TRANSAMINASE GLUTAMAT-PIRUVAT DARI SERUM

Disusun oleh: Lailatul Nur Ayudya 10511028 Kelompok 4

Tanggal percobaan

: Kamis, 4 Maret 2014

Tanggal pengumpulan : Kamis, 4 Maret 2014 Nama Asisten : Nelson Gasper

LABORATORIUM BIOKIMIA PROGRAM STUDI KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG 2014

PENENTUAN TRANSAMINASE GLUTAMAT-PIRUVAT DARI SERUM

I.

Tujuan Menentukan kadar senyawa piruvat yang terbentuk dari aktivitas transaminase glutamatpiruvat pada serum. Teori Dasar Enzim adalah biomolekul berupa protein yang berfungsi sebagai katalis (senyawa yang mempercepat proses reaksi tanpa habis bereaksi) dalam suatu reaksi kimia organik. Molekul awal yang disebut substrat akan dipercepat perubahannya menjadi molekul lain yang disebut produk. Jenis produk yang akan dihasilkan bergantung pada suatu kondisi/zat, yang disebut promoter. Semua proses biologis sel memerlukan enzim agar dapat berlangsung dengan cukup cepat dalam suatu arah lintasan metabolisme yang ditentukan oleh hormon sebagai promoter. Transaminase adalah proses utama untuk mengeluarkan nitrogen dari asam amino. Umumnya nitrogen dipindahkan sebagai gugus amino dari asam amino ke a-ketoglutarat sehingga terbentuk glutamat, sementara asam amino semula berubah menjadi asam keto padanannya. Asam amino aspartat dapat mengalami transaminasi membentuk a-keto oksaloasetat. Dalam proses ini, gugus amino dipindahkan ke a-keto glutarat, yang berubah menjadi asam amino glutamat. Pada metabolisme asam amino, gugus a-amino dari 20 asam Lamino yang biasa dijumpai dalam protein dapat dipindahkan melalui reaksi degradasi oksidatif. Pemindahan gugus a-amino dari kebanyakn asam L-amino dikatalisis oleh enzim yang disebut transaminase atau aminotransferase. Pada resksi ini, gugus a-amino dipendahkan secara enzimatik ke atom karbon a pada a-ketoglutarat sehingga dihasilkan asam a-keto, analog dari asam amino yang bersangkutan. Reaksi ini menyebabkan aminasi a-ketoglutarat, membentuk Lglutarat. Reaksi yang terjadi adalah sebagai berikut :

II.

Gambar 1. Reaksi transaminase

III. Data Pengamatan Tabel 1. Data Absorbansi Tabung Blanko (B) Kontrol (K) Standar (S) Sampel (T) Warna Awal Kuning Kuning Kuning Kuning Akhir Coklat muda Coklat muda Coklat tua Coklat muda Absorbansi 0 0,036 1,149 0,167

Gambar 2. Hasil Pengamatan (kiri-kanan : sampel, blanko, standar, kontrol)

IV. Pengolahan Data [Sampel] = = = x [Standar] x [Piruvat] x (5 mM x 0,05 mL) x x

= 9,5 mmol menit-1.L-1 Kadar piruvat sebesar 9,5 mmol menit-1.L-1 V. Pembahasan

VI. Kesimpulan Kadar piruvat dalam sampel serum yang terbentuk adalah sebesar 9,5 mmol per menit per liter serum. VII. Daftar Pustaka Lehringer. Principles of Biochemistry, 4th ed. Page 192, 606. Ebook PDF Format. Malton., 1966, Alanine Aminotransferase, Journal of Biological Chemistry, Vol.242, 92-100 Stryer, Lubert. Biochemistry, 5th ed. Ebook PDF Format