UPSMP MEDICINA HUMANA EMBRIOLOGA HUMANA Y GENTICA BSICA

UNIVERSIDAD DE SAN MARTN DE PORRES FACULTAD DE

MEDICINA HUMANA DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS

ASIGNATURA: EMBRIOLOGA HUMANA Y GENTICA BSICA

GUA DE PRCTICAS

Responsable Curso: Dr. Csar A. Ibaceta Tello Coordinadora: Dr. Esteban Jacinto Isique

SEGUNDO AO
I - SEMESTRE

2014

Chiclayo - PER
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PROLOGO La Facultad de Medicina Humana de la Universidad de San Martn de Porres, presenta a ustedes, estimados Alumnos y Profesores, la Gua de Prcticas del Curso Embriologa Humana y Gentica Bsica. Las Ciencias Bsicas estn ocupando el lugar trascendente que le corresponde dentro de la formacin de nuevos Mdicos. Los avances cientficos y tecnolgicos de las ltimas

dcadas han permitido ampliar los conocimientos en embriologa y gentica. La presente gua ha ido mejorando en forma progresiva paralelo a estos avances.
La ontogenia y la filogenia se enriquecen cuando aparecen nuevos estudios experimentales que aportan nuevos conocimientos y conceptos, los cuales debemos incorporar en cada Semestre. En esta especialidad se cifra la esperanza de la terapia gnica, la que podra terminar con un sinfn de enfermedades con representacin cromosmica. El futuro es muy prometedor. Creemos a no dudarlo, que esta nuestra versin 2014 de la Gua de Practicas del Curso de Embriologa Humana y Gentica Bsica ir mejorando semestre a semestre porque hay una razn para ello, los conocimientos van apareciendo da a da y debem os estar permanentemente actualizados.

DR. LUIS KOBAYASHITSUTSUMI Profesor Responsable de la Asignatura Embriologa Humana y Gentica Bsica USMP

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INTRODUCCION Una de las Ciencias Bsicas que ms notablemente ha avanzado es la Embriologa y la Gentica. De otro lado, la informacin bibliogrfica es de tal proporcin, que faltaran horas para mantenerse actualizado permanentemente. A la fecha hay ms de 200 textos de Embriologa y de Gentica, cada uno de ellos ms completo y complejo. La Ctedra del Curso de Embriologa Humana y Gentica Bsica, comprendiendo que es importante aprovechar bien el tiempo, ha elaborado esta Gua para complementar las Clases tericas. Les presentamos en forma resumida, las Prcticas de Embriologa y Gentica, que tienen las caractersticas de ser semielaboradas, de uso personal y con un cuestionario al final de cada Prctica, con la finalidad de poder asegurar los conceptos bsicos vertidos durante la prctica y la teora. Se adjunta una pequea bibliografa, no obstante, en nuestra biblioteca tiene otros textos. No debemos dejar de nombrar a los artfices de esta Gua de Prcticas, quienes con entusiasmo se han motivado a publicar esta ayuda al interesante proceso de Enseanza aprendizaje. Son Docentes vidos de transmitirles parte de su conocimiento y experiencia. Todos son especialistas en distintas ramas de la Medicina, Pediatra, Ciruga, Gneco- obstetricia y Bilogos Genetistas. Ellos han fusionado sus conocimientos y habilidades y el producto es esta Gua de Prcticas renovada y actualizada.

Lima, 03 de Marzo 2014

Los Autores AUTORES: Dr. Lus Kobayashi Tsutsumi Dra. Mara Luisa Guevara Gil (Coordinadora) Dr. Fernando Linares Heredia Dr. Daniel Arbaiza Aldazabal Dra. Cecilia Mena Navarro Dra. Ela Alvarado Infanzn Dra. Roxana Rosadio Alzamora Dr. Elas Araujo Miranda Dr. Boris Altamirano Salcedo Dr. Omar Vivar Caballero Dr. Carlos Lozada Saco Mg. Ramss Salas Ascencios Blga. Ismenia Gamboa Or Blgo. Sergio Talavera Vargas Machuca Blga. Liza Linares Rosales

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COMPETENCIAS GAMETOGENESIS: OVOGENESIS 1. Refuerza los conocimientos tericos en el origen, evolucin y morfologa de las estructuras secuenciales en el desarrollo de la gametognesis. 2. Integra los eventos morfolgicos del ciclo ovrico con su regulacin hormonal. 3. Reconoce microscpicamente los distintos tipos de folculos del ovario adulto, relacionndolos con la capacidad de secrecin de hormonas. 4. Diferencia las caractersticas propias del ovario infantil y adulto 5. Reconoce y explica las caractersticas del cuerpo lteo y del cuerpo albicans M ATERIALES 1. Gua de prctica 2. Microscopio ptico 3. Lminas de preparados histolgicos de ovario (HE): infantil, adulto 4. Lminas de preparados histolgicos de ovario: cuerpo lteo y cuerpo albicans (HE). PROCEDIMIENTO Mediante la observacin microscpica con diferentes lentes y objetivos (x5, x10 y x40), reconocer la secuencia evolutiva celular gametogentica.

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OVARIO Epitelio ovrico: Clulas cbicas simples. Corteza ovrica: Folculos en diferentes estadios de maduracin. Mdula ovrica: Zona Central. Folculo primordial: Ovocito primario (46 cromosomas), 1 capa de clulas epiteliales planas. Folculo primario: 1 capa de clulas epiteliales cbicas. Folculo en crecimiento: Ms de 1 capa de clulas cbicas (clulas foliculares o de la granulosa). Zona pelcida, lagunas foliculares, teca interna estrgeno), teca externa. Folculo de De Graff: Folculo maduro preovulatorio (23 cromosomas). Antro folicular (licor folicular), cmulos oophorus. Tecas. Cuerpo amarillo: progesterona. Cuerpo albicans: cuerpo amarillo degenerado. Folculos atrsicos: Folculos en crecimiento degenerados. PREGUNTAS 1. Realice un esquema nominativo del folculo primordial, primario y en crecimiento. 2. Realice un esquema nominativo del folculo de De Graff. 3. Dnde se producen los estrgenos y la progesterona? 4. De qu hormonas depende el ciclo ovrico? 5. Cundo se completa la primera divisin meitica y cundo la segunda divisin meitica?

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N 02 GAMETOGENESIS: ESPERM ATOGENESIS COMPETENCIAS 1. Refuerza los conocimientos tericos en el origen, evolucin y morfologa de las estructuras secuenciales en el desarrollo de la gametognesis. 2. Integra los eventos morfolgicos de la espermatognesis al interior del tubuli seminfero 3. Reconoce microscpicamente las diferentes clulas de la serie espermtica y del espacio intersticial y su capacidad de secrecin de hormonas. 4. Identifica y esquematiza las diferentes estructuras en el desarrollo de la espermatognesis. 5. Reconoce y explica la morfologa y la funcin de las clulas de Leydig y de Sertoli M ATERIALES 1. Gua de prctica 2. Microscopio ptico 3. Lminas de preparados histolgicos de testculo (HE): infantil, adulto TESTICULO Albugnea Zona cortical Zona medular: Tubos seminferos y espacios intersticiales Tubos seminferos: Secuencia evolutiva de la espermatognesis. Membrana propia del tubo seminfero (pared del tubo seminfero) o Espermatogonio: 46 cromosomas. Adosados a la pared. o Espermatocito I: 46 cromosomas. Ms voluminosas. Ncleo fibrilar o granular. o Divisin celular. o Espermatocito II (2): 23 cromosomas. Fugases. o Espermatide (4). 23 cromosomas. Redondeadas o alargadas. Espermiognesis. o Espermatozoides (4): 23 cromosomas. Luz del tubo seminfero. o Clulas de Sertoli: Clulas sustentaculares. Citoplasma triangular con basas hacia la pared. Espacio intersticial: o Clulas de Leydig: Testosterona. o Fibroblastos. o Vasos sanguneos (capilares, vnulas).

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PREGUNTAS 1. Realice un esquema nominativo del ciclo evolutivo de la espermiognesis. 2. Qu es la espermiognesis? 3. Cul es la importancia de las clulas de Leydig? 4. Colocar el nmero de cromosomas: Espermatogonio ( ) Espermatocito I ( ) Espermatocito II ( ) Espermatide ( ) Espermatozoide ( ) 5. Cuntos espermatozoides derivan de un espermatocito primario?. BIBLIOGRAFIA 1. LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed. Interamericana, 11 edicin. 2. MOORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 8ta. Edicin 3. DI FIORI. Atlas de Histologa.

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N 03 COMPETENCIAS CICLO UTERINO 1. Recuerda los conocimientos tericos relacionados al ciclo uterino. 2. Relaciona el ciclo ovrico con el ciclo uterino y su regulacin hormonal. 3. Conoce las fases por las que atraviesa el endometrio durante el ciclo uterino de una mujer adulta. 4. Observa las caractersticas de la mucosa uterina en distintos periodos del ciclo endometrial y relaciona con su regulacin hormonal. M ATERIALES 1. Gua de prctica. 2. Microscopio ptico. 3. Lminas de preparados histolgicos de endometrio en fase proliferativa, secretora, menstrual y decidual (HE). PROCEDIMIENTO Mediante la observacin microscpica con diferentes lentes y objetivos (x5, x10 y x40), reconoce las caractersticas del endometrio en fase proliferativa y secretora. El endometrio es la mucosa que recubre el interior del tero y consiste en un epitelio simple prismtico con o sin cilios, glndulas y un estroma rico en tejido conjuntivo y altamente vascularizado. Su funcin es la de alojar al blastocito despus de la fecundacin, permitiendo su implantacin. Es el lugar donde se desarrolla la placenta y presenta modificaciones cclicas en sus glndulas y vasos sanguneos durante el ciclo menstrual en preparacin para la implantacin del embrin humano. Fase Proliferativa (Estrognica): bajo la influencia de los estrgenos, que se secretan en cantidades crecientes durante la fase proliferativa, las clulas del estroma y las clulas epiteliales proliferan rpidamente. Durante el periodo previo a la ovulacin el endometrio se engruesa, en parte debido al creciente nmero de clulas del estroma, pero primordialmente al crecimiento progresivo de las glndulas endometriales y de nuevos vasos sanguneos en el interior del endometrio. Al momento de la ovulacin el endometrio tiene unos 3 a 5 milmetros de espesor. Fase Secretora (Progestacional): posterior a la ovulacin, se secretan grandes cantidades de progesterona y estrgenos por parte del cuerpo lteo. Los estrgenos producen una ligera proliferacin adicional del endometrio, mientras que la progesterona provoca una notable tumefaccin y el desarrollo secretor del endometrio. Las glndulas se vuelven ms tortuosas; y en las clulas del epitelio glandular se acumula un exceso de sustancias secretoras. Igualmente aumenta el citoplasma de las clulas del estroma junto al depsito de lpidos y protenas; y el aporte sanguneo al endometrio sigue incrementndose de forma proporcional al desarrollo de la actividad secretora, con gran tortuosidad de los vasos sanguneos.

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Fase proliferativa: Capas del tero: Endometrio, miometrio y parametrio. Epitelio endometrial: Clulas cilndricas. Capa funcional: Glndulas en corte tansversal, oblicuo y longitudinal, lumen regular, aspecto tubular, escasa secrecin en su interior. Corion (estroma endometrial): Espacios interglandulares. Capa basal. Miometrio. Fase secretora: Glndulas tortuosas, lumen irregular en diente de serrucho. Secrecin en el lumen. Corion o estroma endometrial, con infiltrado polimorfonuclear. PREGUNTAS 1. Cules son las fases del ciclo uterino? 2. De qu hormonas depende cada una de estas fases? 3. Cules son las caractersticas del endometrio en fase proliferativa? 4. Cules son las caractersticas del endometrio en fase secretora? 5. Qu pasa con el endometrio cuando se produce una gestacin? BIBLIOGRAFIA 1. LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed. Interamericana, 11 edicin. 2. MOORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 8 Edicin. 3. DI FIORI. Atlas de Histologa. ENDOMETRIO DECIDUAL (GESTACIONAL) La decidua corresponde a un endometrio especializado muy modificado durante el embarazo, es el sitio anatmico de la yuxtaposicin del blastocisto, la implantacin y del desarrollo placentario. La formacin de decidua o transformacin del endometrio secretor en decidua depende de la accin de estrgenos y progesterona as como de factores secretados por el blastocisto en proceso de implantacin durante la invasin por el trofoblasto. La decidua del embarazo est constituida por tres partes con base en su localizacin anatmica: a) Decidua Basal: Ubicada directamente por debajo del sitio de implantacin del blastocisto. b) Decidua Capsular: Es la porcin que cubre al blastocisto en crecimiento e inicialmente lo separa del resto de la cavidad uterina. c) Decidua Parietal: Es la que reviste el resto de la cavidad uterina.

La decidua est compuesta por tres capas: 1. Superficial o Compacta: Presenta grandes clulas poligonales y otras pequeas redondas con escaso citoplasma que son los precursores de nuevos elementos deciduales.
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2. Media o Esponjosa: Presenta glndulas distendidas con acentuada hiperplasia que tienen actividad secretora y que sirven para la nutricin del huevo antes de que se desarrolle la circulacin placentaria. 3. Profunda o Basal: Persiste despus del parto y da origen al nuevo endometrio.

Detalle de la porcin compacta de la decidua formada por clulas del estroma con abundante citoplasma, de bordes netos.

Detalle de la porcin esponjosa de la decidua, con glndulas de lumen amplio, con escaso estroma entre ellas. BIBLIOGRAFIA: OBSTETRICIA DE WILLIAMS 22 EDICION

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PRACTICA N 04 COMPETENCIAS PLACENTA M ACROSCPICA 1. Aplicar los conocimientos tericos relacionados con el origen, los componentes materno y fetal, las funciones e importancia de la placenta. 2. Diferencia la cara fetal, donde se inserta el cordn umbilical, de la cara materna, donde se encuentran los cotiledones. 3. Describe la forma, peso y dimensiones de la placenta. 4. Observa, compara y describe las caractersticas anatmicas de la placenta, tanto en la cara fetal como en la cara materna. 5. Clasifica y describe la insercin del cordn umbilical. 6. Clasifica y describe anomalas placentarias. 7. Valora la importancia del examen placentario con aplicacin para la salud materna fetal: 8. calcificaciones, cotiledones. M ATERIALES 1. Gua de prctica. 2. Placentas macroscpicas frescas. 3. Placentas fijadas en formol. 4. Guantes, tijeras, pinzas (equipo de diseccin) 5. Balanza y cinta mtrica. PROCEDIMIENTO Observacin macroscpica Previa colocacin de guantes, procede a examinar la placenta diferenciando las caras materna y fetal. Describe la forma de la placenta. Pesa y mide la placenta. Describe a insercin del cordn umbilical y caractersticas de la cara fetal. Describe las caractersticas de la cara materna: surcos, cotiledones. PREGUNTAS 1. Cules son los componentes de la placenta? 2. Cules son las funciones de la placenta? 3. Qu cantidad de sangre circula por la placenta a trmino? 4. Qu es el acretismo placentario? 5. Diferencia entre placenta increta y percreta. BIBLIOGRAFIA LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed. Interamericana, 11 edicin. MOORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 8 Edicin. W ILLIAMS. Tratado de Obstetricia.

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PLACENTA MICROSCOPICA COMPETENCIAS 1. Aplica los conocimientos tericos relacionados con el origen, los componentes materno y fetal, la circulacin y la membrana placentaria. 2. Describe las caractersticas de la lmina corial. 3. Describe las caractersticas de la cara materna o decidua basal. 4. Observa, compara y describe las caractersticas de los troncos de las vellosidades coriales: primero, segundo y de tercer orden. 5. Reconoce los componentes de las vellosidades coriales. 6. Identifica y describe el espacio intervelloso, as como el contenido. 7. Describe los componentes de la Membrana Placentaria. 8. Diferencia e identifica las caractersticas de una placenta del primer trimestre de otra a trmino. M ATERIALES 1. Gua de prcticas 2. Microscopio ptico 3. Lminas de preparados histolgicos de placentas fijadas y coloreadas con HematoxilinaEosina, que comprendan desde la cara materna a la cara fetal de la placenta. PROCEDIMIENTO Observacin microscpica Mediante la observacin microscpica con diferentes lentes objetivo (x5, x10 y x40) reconoce las caractersticas microscpicas de la placenta. CARA FETAL Reconocer la membrana amnitica o amnios que recubre la Lmina o Placa corial, en la que se encuentran los vasos coriales. Identificar y diferenciar los troncos de las vellosidades coriales. Caractersticas, componentes. Reconocer las vellosidades coriales libres, componentes y membrana placentaria. Espacio intervelloso y sangre materna. CARA M ATERNA Reconocer la decidua basal y las clulas que las componen. Diferenciar los componentes y estructuras con respecto a la cara fetal. Identificar vellosidades de anclaje: Vellosidades que van de la placa corinica a la decidua basal. TROFOBLASTO EN LA PLACENTA El citotrofoblasto est constituido por clulas de ncleos relativamente grandes, vesiculosos, y citoplasma claro, de lmites netos; presenta actividad mittica. El sinciciotrofoblasto es la capa perifrica que recubre las vellosidades; est formado por clulas multinucleadas, de ncleos pequeos, densos, citoplasma granular, denso y anffilo, con algunas vacuolas lipdicas. No presenta mitosis. Las vellosidades de primer orden (tipo I) miden ms de 300 micras de dimetro; se forman en los das 12 a 13 post fecundacin y estn contenidas en el cotiledn placentario que, en nmero de 12 a 30, son consideradas como la unidad funcional de la placenta Las vellosidades o troncos de segundo orden (tipo II) tienen un dimetro de 120 a 300 micras; se ramifican en 2 a 12 vellosidades de tercer orden y se forman despus de los 16 das post fecundacin. Las vellosidades de tercer orden (tipo III) representan las ms pequeas de las vellosidades, con un dimetro de 80 a 120 micras. Se forman a partir de la tercera semana post fecundacin y terminan en ms o menos 144 vellosidades terminales. Estas vellosidades terminales conforman la membrana placentaria, lugar donde se realiza el intercambio madre feto.

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CARACTERSTICAS DE LAS VELOCIDADES CORIALES

Entre los das 13 y 21 se organizan las vellosidades coriales. El citotrofoblasto (CT) forma las vellosidades coriales hacia los tejidos maternos originando una envoltura continua, la coraza citotrofoblstica.

A partir de la 20 semana se producen cambios progresivos en las vellosidades, el CT desaparece y la barrera llega a estar formada por delgados parches de ST siendo.

Entre los das 21 y 40 es posible distinguir en el 4 mes: Clulas de Langhans escasas y discontinuas corion una regin lisa y otra frondosa, que 6to mes: adelgazamiento notable de las vellosidades. constituye el componente fetal de la placenta. 7 mes: estrato de Langhans desaparece. Sincitio y capa de Langhans* gruesos, algunas Ncleo est cubierto por una capa continua de clulas de Langhans emigran hacia el eje conectivo Sincitiotrofoblasto (ST), con pocas clulas dando origen a las clulas de Hofbauer citotrofoblasto debajo de l. de

Vellosidades gruesas (100micras) constituidas por Vellosidades ms finas (30-50 micras), cuyo ncleo tejido conectivo muy laxo, pobre en clulas y est compuesto por vasos sanguneos y mesnquima y, carente de fibras. adems, contiene histiocitos (clulas de Hofbauer) Pocos vasos con disposicin central. Membrana Placentaria: ST, CT, mesodermo y Endotelio Enriquecimiento del lecho capilar, de ubicacin perifrica en ntimo contacto con el sincitio. Membrana Placentaria: ST y endotelio.

*Capa o estrato de Langhans: constituido a partir del CT primitivo, clulas cuboideas que al inicio tienen gran actividad reproductiva y se va perdiendo a medida que madura la placenta. PREGUNTAS 1. Qu es la decidua? Tipos. 2. Qu funciones tienen el Sincitio y el Citotrofoblasto?. Explique. 3. Qu hormonas produce la placenta? 4. Qu caractersticas tiene la placa corial? 5. Qu importancia tiene la membrana placentaria? 7. Qu son las vellosidades primarias, secundarias y terciarias? BIBLIOGRAFIA 1. LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed., 11 edicin. 2. MOORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 8 Edicin. 3. BOTELLA Llusi,Jos. Tratado de ginecologa: fisiologa, obstetricia, perinatologa, ginecologa y reproduccin. 14 edicin. 4. W ILLIAMS. Tratado de Obstetricia. FUENTES ELECTRNICAS: http://www.uaz.edu.mx/histo/MorfoEmbrio/Carlson/cap06/cap06.htm http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/ginecologia/vol54_n4/pdf/A08V54N4.pdf

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PRACTICA N 05

OBSERVACION DE EMBRIONES: CAVIDAD ABDOMINAL. APARATO RENAL

COMPETENCIAS 1. Explica y ubica el origen de los rganos derivados del tubo intestinal, observados en el embrin 2. Conoce las relaciones existentes de las asas intestinales entre s en el embrin 4. Reconoce y describe las glndulas anexas al aparato digestivo: origen, caractersticas y relaciones con otras partes del tubo digestivo. 5. Reconoce y diferencia diferentes estados de desarrollo aparato urinario, as como su importancia. 6. Diferencia las gnadas y las glndulas suprarrenales 7. Identifica y relaciona los conductos genitales (mesonefrico y paramesonefrico) del embrin y su diferenciacin. M ATERIALES 1. Gua de prcticas. 2. Microscopio ptico 3. Laminas de preparados histolgicos de embriones de cerdo coloreados con hematoxilina- eosina, que comprendan desde la cavidad oral hasta el proctodeum. Se realiza el estudio en cortes longitudinales y transversales. PROCEDIMIENTO Observacin microscpica Mediante la observacin microscpica con diferentes lentes y objetivos (x5, x10 y x40) reconoce mediante las caractersticas microscpicas del preparado embriolgico Observan el septum transversum y su relacin con el hgado Identificar el estomago y las asas intestinales. Observar sus relaciones y recordar su origen embriolgico. Observar las diferencias entre mesonefros y metanefros, as como la de sus conductos y recordar las estructuras a que dan origen Observar y describir la medula espinal: Meninges, capa de la medula, epndimo, ganglios y nervios raqudeos. PREGUNTAS 1. De qu capa embrionaria proviene el hgado? Estructuras formadas a partir de cada una de ellas. 2. Qu importancia tiene el metanefros? Cmo se diferencian los conductos de W olf y de Muller? 3. Dnde se forma la placa basal y placa alar de la mdula espinal? Importancia. 4. Cmo se forma el pncreas anular? 5. Qu malformaciones pueden presentarse en el desarrollo del tubo intestinal? BIBLIOGRAFA 1. 2. 3. 4. LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed. Interamericana, 11 edicin. ORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 8 Edicin. W ILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 2000. S.W .GRAY & J.E. SKANDALAKIUS. Embriogenesis, diagnostico y tratamiento.

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ESQUEMA IJI!:L EM!SAAROLI..O EMBAIOI!.OI!CO DI:L APARATO URINAAIO

TEJIDO NeFAOBENJCO

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PRACTICA 06 OBSERVACION DE EMBRIONES: TORAX Y MEDULA ESPINAL

INTRODUCCION: Se denomina embrin al producto de la concepcin entre la cuarta y octava semana de desarrollo y es aqu donde se aprecia cambios en la formacin definitiva del futuro ser. Observaremos la cavidad torcica, la cabeza y el sistema nervioso comprendido dentro de ella. COMPETENCIAS : 1. El alumno observar en el embrin los rganos que se encuentran en el trax, identificando la mdula espinal. 2. Aplica sus conocimientos para determinar el origen blastodrmico de las estructuras observadas 3. Elabora una lista de los cambios ms importantes de los rganos y su destino final 4. Confecciona un esquema en su cuaderno de prcticas de un corte longitudinal y trasversal del embrin. 5. Compara los rganos del embrin, feto y adulto. M ATERIAL Y METODOS Se observar al microscopio cortes histolgicos de embriones en la parte que corresponde al trax, cabeza y sistema nervioso central. PROCEDIMIENTOS Al inicio se realiza una introduccin sobre el desarrollo de la prctica. Se dibuja en el pizarrn un esquema de lo que se va a observar como tambin se observa los cortes histolgicos en el televisor que son reflejados directamente del microscopio. Seguidamente los alumnos observan los cortes histolgicos en sus mesas de trabajo reconociendo las estructuras ms importantes, determinando su origen, su funcin, a que rgano dar lugar y cuando termina su maduracin. TORAX: Se observa: Corte longitudinal: Corazn: Aurculas de paredes delgadas, ventrculos paredes gruesas musculosas y los msculos pectineos, pericardio Pulmn: Bronquios, pleura. Septum trasverso que forma el diafragma. Corte trasversal: De atrs hacia adelante mdula espinal y cuerpo vertebral, luego orificio de la trquea con su cartlago hialino, esfago, grandes vasos aorta, pulmonar, cartidas. Ms adelante el corazn con sus cavidades ya mencionadas. En las paredes laterales se aprecia el cartlago hialino de las costillas y el esternn. Observa la estructura de la mdula espinal, identificando la notocorda, las races anteriores, posteriores, la sustancia gris y la sustancia blanca. Reconoce el canal del epndimo. Reconoce la meninge. CUESTIONARIO 1. De qu hoja blastodrmica deriva la mucosa de los bronquios? 2. Cundo terminan de madurar los pulmones? 3. Describa cmo es la circulacin sangunea fetal. Es igual que la del adulto? 4. Cuntas capas tiene la meninge? 5. De dnde se origina el cristalino? BIBLIOGRAFA 1. LANGMAN JAN Embriologa Mdica. 11 Edicin. Editorial Interamericana 2. MOORE PERSAUD Embriologa Clnic a. Sexta Edicin. McGraw Hill Interamericana

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PRACTICA N 07

OBSERVACION DE EMBRIONES: SISTEMA NERVIOSO CENTRAL Y MASCARILLA FETAL

INTRODUCCION: Observaremos la cabeza y el sistema nervioso comprendido dentro de ella. COMPETENCIAS : 1. El alumno observar en el embrin los rganos que se encuentran en la cabeza. 2. Elabora una lista de los cambios ms importantes de los rganos y su destino final 3. Confecciona el esquema de un corte longitudinal y trasversal del embrin. 4. Compara los rganos del embrin, feto y adulto. M ATERIAL Y METODOS Se observar al microscopio cortes histolgicos de embriones en la parte que corresponde a la cabeza, sistema nervioso central. PROCEDIMIENTOS Al inicio se realiza una introduccin sobre el desarrollo de la prctica. Se dibuja en el pizarrn un esquema de lo que se va a observar como tambin se observa los cortes histolgicos en el televisor que son reflejados directamente del microscopio. Seguidamente los alumnos observan los cortes histolgicos en sus mesas de trabajo reconociendo las estructuras ms importantes, determinando su origen, su funcin, a que rgano dar lugar y cuando termina su maduracin. CABEZA Y SISTEM A NERVIOSO Estomodeo: es la boca primitiva que se aprecia un poco ms arriba del trax identificando la lengua y al final de ella el repliegue de la epiglotis y por detrs el inicio del esfago. En la parte central de la cabeza se identifica los canales semicirculares que corresponden al odo interno. Cabeza: en la parte ms superior se aprecia las cavidades que corresponden a los ventrculos cerebrales en cuyo interior se aprecian formaciones arbreas que corresponde a los plexos coroideos. El sistema nervioso primitivo se encuentra de adelante hacia atrs el prosencfalo, mesencfalo y rombencfalo con el IV ventrculo. Ojo: tiene la forma de un cliz donde se aprecia la retina con su parte nerviosa y pigmentaria. En el centro una esfera fuertemente coloreada que es el cristalino CUESTIONARIO 1. Qu funcin tienen los plexos coroideos y donde se ubican? 2. Cmo se origina la anencefalia? 3. Qu estructuras origina el prosencfalo, mesencfalo, rombencfalo. 4. De donde se origina el cristalino? BIBLIOGRAFA 1. LANGMAN JAN Embriologa Mdic a. 11 Edicin. Editorial Interamericana 2. MOORE PERSAUD Embriologa Clnica. 8 Edicin. McGraw Hill Interamerica

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Observaremos fetos de distintas edades gestacionales, tanto normales como con algunas malformaciones congnitas. COMPETENCIAS :

1. El alumno observar los fetos, los medir y pesar para calcular su edad gestacional 2. Distinguir sus distintas partes y las diferenciar con fetos de otras edades gestacionales 3. Elabora una lista de las caractersticas externas de cada edad gestacional
M ATERIAL Y METODOS Se observar fetos de distintas edades gestacionales. PROCEDIMIENTOS Al inicio se realiza una introduccin sobre el desarrollo de la prctica. Se dibuja en el pizarrn un esquema de lo que se va a observar. Seguidamente los alumnos observarn los distintos fetos colocados en cada una de sus mesas de prcticas. CLCULO DE LA EDAD GESTACIONAL Y DE LA FPP Los Docentes explicarn el uso adecuado de las distintas reglas y mtodos para calcular tanto la Edad Gestacional como la Fecha Probable de Parto. Se realizarn ejercicios sobre estos mtodos. CUESTIONARIO 1. Escriba la frmula de la Regla de Mc Donald y explique cuando se usa. 2. Escriba la Frmula de Naguele y explique cuando se usa. 3. Menciones mtodos para determinar la edad gestacional preparto 4. Mencione los parmetros utilizados en la ecografa para determinar la edad gestacional 5. Parmetros de la Altura Uterina para determinar la edad gestacional BIBLIOGRAFA 1. LANGMAN JAN Embriologa Mdica. 11 Edicin. Editorial Interamericana 2. MOORE PERSAUD Embriologa Clnica. 8 Edicin. McGraw Hill Interamericana

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PRCTICA N 01 EL RBOL GENEALGICO FAMILIAR, HEREDOGRAM A O PEDIGRI El rbol genealgico, heredograma o pedigr es un diagrama que representa la lnea de antecesores y que incluye una compilacin cuidadosa de los registros fenotpicos de una familia en varias generaciones. COMPETENCIAS 1. Introduce a cmo se investiga la herencia de los caracteres genticos, enfermedades genticas (cmo se heredan?, Son dominantes?, Son recesivos?, Son mendelianos?, etc.) 2. Usa la simbologa caracterstica en la elaboracin del rbol genealgico. 3. Construye un rbol genealgico real utilizando como material de investigacin a su grupo familiar. M ATERIALES 1. Hoja cuadriculada tamao A4. 2. Lpiz y borrador. 3. Simbologa para la elaboracin del rbol genealgico familiar (hoja adjunta). PROCEDIMIENTO El estudio se inicia con la persona o propsitus (la persona que acude al mdico como paciente y que llama la atencin) revisando sus antecedentes familiares. La tarea en clase es construir su rbol genealgico. Los pasos a seguir son los siguientes: 1. Escribe los datos personales del propsitos: a. Nombre, sexo, edad, direccin, telfono. b. Antecedentes perinatales y postnatales. c. Antecedentes familiares y otros datos importantes.

2. La elaboracin del rbol genealgico se inicia con el propsitus. a. Los hombres son representados por smbolos cuadrados y las mujeres con smbolos circulares. b. Una lnea trazada entre el cuadrado y el crculo representa un casamiento entre el hombre y la mujer. c. Dos lneas trazadas entre el cuadrado y el crculo indica un casamiento consanguneo. (ver otras situaciones en la tabla de smbolos Apndice I). d. Cuando es posible el cuadrado deber ser colocado a la izquierda y el crculo a la derecha de la lnea de casamiento. e. Las generaciones estn conectadas por una lnea vertical que se extiende hacia abajo desde la lnea de casamiento hasta la prxima generacin. f. Los hijos de un casamiento estn conectados por una lnea horizontal unidos por lneas verticales cortas. El primer hijo es colocado a la izquierda del segundo, el segundo a la izquierda del tercero y as sucesivamente. Utilice la simbologa correspondiente para casos de abortos, gestacin, etc., ubicndoseles en el orden en que corresponden. g. Solo el hijo(a) del matrimonio que est en relacin directa con el propsitus (es decir los padres del propsitus) podrn ser colocados juntos pero sealando entre parntesis el lugar que ocupan dentro de su familia. h. Los individuos normales se representan por smbolos abiertos, cuadrados o crculos dependiendo del gnero, y los afectados por smbolos cerrados. i. Cada generacin es enumerada a la izquierda de las lneas filiales con nmeros romanos. j. Todos los individuos de cada generacin (los filiales) son enumerados desde la izquierda con nmeros arbigos.

3. Terminado de elaborar su rbol genealgico se dispondr a identificar los rasgos genticos que
usted considere caracterstico de su familia (mnimo dos rasgos). 4. Del mismo modo identificara los individuos afectados (enfermos) con smbolos cerrados. 5. En la leyenda deber indicarse el rasgo gentico y la afectacin de los individuos a cuales se ha referido. En la leyenda tambin pueden indicarse otros datos que usted considere pertinentes.
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Ejemplo: Con un slo carcter gentico: Forma de pelo En este ejemplo se seala a un individuo varn con pelo ondulado (el propsitus) primognito de un matrimonio cuyo padre fue el segundo de 4 hermanos, siendo el primero afecto de un mal sanguneo y que tiene pelo lacio. La madre fue la primera de 4 hermanos, tambin con pelo lacio. En la actualidad los padres del propsitus esperan un siguiente hijo. Se pueden ver otros detalles de esta familia. Por ejemplo, el individuo II9, que tiene pelo lacio ha tenido dos relaciones, uno con un consanguneo de pelo lacio con quien tuvo un aborto afectado y otra relacin convivencial con quien tuvo un hijo normal de pelo lacio. Etctera

I 1 II 1 III 1 2 3 2 3 4 5 6 7 8 9 4 10 11 2 3 4 (2)

LEYENDA II-1 = Afectado por leucemia III-3= Gestacin actual III-4= Aborto Carcter en estudio:
PREGUNTAS 1. Qu entiende por individuos afectados e individuos portadores? 2. Qu son caracteres genticos? 3. Qu son alelos? 4. Explicar y graficar con rboles genealgicos ejemplos de herencia autosmica dominante, Herencia autosmica recesiva, Herencia dominante ligada al cromosoma X, Herencia recesiva ligada al cromosoma X, y Herencia ligada al cromosoma Y. 5. En el ejemplo de arriba, explique por qu el propsitus tiene el pelo ondulado Si sus padres tienen el pelo lacio. Cul es la probabilidad de que el hermano o hermana que va a nacer tenga tambin el pelo ondulado? BIBLIOGRAFIA Strachan, T. & A.P. Read. Genetica Molecular Humana. Ediciones Omega. 1999. Stansfield, W . Teoria y problemas de Genetica. McGraw-Hill. 1995. http://www.uic.edu/classes/bms/bms655/lessons3.html#Sample

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APENDICE

SMBOLOS MS USADOS EN LA ELABORACION DEL RBOL GENEALGICO ECAA 1. Propsitus o probando 15. Mujer portadora de un carcter ligado al X 2. Individuo de sexo masculino 16. Individuo fallecido de 3. Individuo de sexo femenino sexo masculino 4. Individuo de sexo indefinido o desconocido 5. Aborto espontneo de sexo masculino 6. Aborto espontneo de sexo femenino 7. Aborto espontneo de sexo indefinido 8. Aborto inducido x 17. Individuo fallecido de sexo femenino 18. Representacin de varios caracteres en un mismo individuo, de sexo masculino 19. Representacin de varios caracteres en un mismo individuo, de sexo femenino 20. Gestacin actual (sexo no conocido) 21. Gestacin actual (sexo masculino) 22. Gestacin actual (sexo femenino) 23. Hijo adoptivo (interna o familiar) 24. Hija adoptiva (interna o familiar) ? N
N

9. Aborto gemelar dicigtico 10. Aborto gemelar monocigtico de sexo masculino 11. Aborto gemelar monocigtico de sexo femenino 12. Aborto gemelar de cigocidad desconocida. 13. Natimuerto de sexo masculino 14. Natimuerto de sexo femenino

25. Hijo adoptivo (externo o no familiar) 26. Hija adoptiva (externa o no familiar) 27. Nmero de hermanos sin identificar sexo

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28. Nmero de hermanos de caracteres normales, de sexo masculino 29. Nmero de hermanos de caracteres normales, de sexo femenino 30. Individuos afectados, masculino 31. Individuos afectados, Femenino 32. Individuo afectado fallecido de sexo masculino 33. Individuo afectado fallecido de sexo femenino 34. Individuo heterocigoto de sexo masculino 35. Individuo heterocigoto de sexo femenino 36. Gemelos dicigticos o fraternos 37. Gemelos monocigticos o idnticos, de sexo masculino 38. Gemelos monocigticos o idnticos, de sexo femenino 39. Gemelo de cigocidad desconocida.

40. Cruzamiento legtimo o casados 41. Cruzamiento ilegtimo o convivientes 42. Separacin 43. Divorcio 44. Unin entre consanguneos 45. Matrimonio sin descendencia

46. Azoospermia (Infertilidad) 47. Persona de sexo masculino de quien se ignora si tiene o no el rasgo 48. Persona de sexo femenino de quien se ignora si tiene o no el rasgo 49. Progenitor nico y su descendencia (pareja normal sin importancia para el anlisis) 50. Descendencia por I orden de nacimiento. 1 2 Nmeros romanos Indican generaciones, II nmeros arbigos 1 2 3 indican orden de nacimiento dentro de cada generacin ?

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PRCTICA N 02 CROMOSOMAS HUMANOS: CARIOTIPO MACROSCOPA

COMPENTENCIAS: 1. Observar cmo se presentan los cromosomas coloreados mediante mtodo convencional y bandeo GTG en cada una de las fotografas y/o fotocopias y contar el nmero total de cromosomas. 2. Identificar la morfologa de cada uno de los cromosomas segn el tamao y la posicin del centrmero (metacntrico [centrmero en el centro del cromosoma], submetacntrico [centrmero no ubicado en el centro, por lo que se observa un brazo ligeramente ms corto] y acrocntrico [centrmero cerca de un telmero]). 3. Clasificar y analizar cada uno de los cromosomas por grupos segn Convencin de Denver. 4. Confeccionar el cariograma de cada fotografa. 5. Aplicar los conocimientos tericos y Evaluar el tipo de alteracin cromosmica que se presente en cada fotografa. 6. Juzga y relaciona el cariotipo con las alteraciones fenotpicas del sndrome. M ATERIALES: Gua de Prcticas Fotografas y/o fotocopias de cariogramas. Vinifan o mica, tamao A-4 (transparente). Lpiz de cera Markin (para pintar vidrio) y/o plumn indeleble Tijera. Cinta scotch o clips Cuatro hojas de papel bond blanco A-4. PROCEDIMIENTO: Con las fotografas y/o fotocopias confeccionar los cariogramas correspondientes de cada una de ellas. Segn las siguientes pautas: 1. Realizar el recuento de los cromosomas de cada una de las metafases sealadas. 2. Colocar una hoja de vinifn sobre una fotografa y calcar o copiar con lpiz MARKIN cada uno de los cromosomas reconociendo sus elementos. 3. Transportar la copia sobre una hoja de papel bond blanco, en la que se anotarn los nombres de los cromosomas con letras. 4. RECONOCER E IDENTIFICAR los elementos: brazos p o brazo corto, brazo q o brazo largo, centrmero o constriccin primaria, satlite, tallo o talo. 5. RECORTAR los cromosomas de cada una de las fotocopias. 6. FORMAR los pares homlogos y colocarlos en orden decreciente de tamao. 7. DISTRIBUIR los cromosomas en grupos: A, B, C, D, E, F, G, y cromosomas sexuales X o Y, segn la clasificacin de DENVER. 8. Hacer el RECUENTO e IDENTIFICACION de los cromosomas autosmicos y sexuales. 9. ORDENAR LOS PARES DE CROMOSOMAS y colocarlos en una hoja de cartulina o papel bond de 80 gramos. 10. DIAGNOSTICAR el complemento cromosmico y sndrome correspondiente. Repetir la tarea con cada una de las fotografas.

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PREGUNTAS: I. Define brevemente y grafique lo siguiente o Quinetochoro o Kinetochoro o Cromosoma o Satlite o Cariograma o Haploida o Complemento cromosmico o Cromosoma acrocntrico o Mitosis o Monosoma o Aneuploida

- Cromtide - Crommera - Tallo o Talo - Cariotipo - Constriccin Secundaria - Genoma - Cromosoma Telocntrico - Tetraploida - Meiosis - Mosaico

II.

Segn el modelo de CARIOTIPO NORMAL, arme los cariogramas correspondientes a cada una de las fotocopias de las metafases sealadas. Diagnostica el complemento o Frmula cromosmica en cada caso. Menciona los sndromes correspondientes a cada uno de ellos.

III. Realiza el resumen de los caracteres fenotpicos de los sndromes diagnosticados. IV. Explique el fundamento y para qu se usan los mtodos de marca como: Bandas C, G, R, Q, NOR, ICH BIBLIOGRAFIA: Armendares Salvador. CITOGENETICA HUMANA. De Robertis Emery Alan. GENETICA MDICA. Edicin en espaol: Marbn Libros, S.L. capitulo 3 pp. 2934 Gonzles Santander Egozcue J, y colaboradores. GENETICA MDICA. Grouchy J, y colaboradores. ATLAS DE ENFERMEDADES CROMOSOMICAS. Solari A. GENETICA HUMANA. Fundamentos y aplicaciones en Medicina. Thompson & Thompson. GENETICA EN MEDICINA. Lisker, Armendares, INTRODUCCION A LA GENETICA HUMANA.

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ANEXO N 1

CARACTERSTICAS MORFOLOGCAS DE LOS CROMOSOMAS:

CROMOSOMAS AUTOSOMICOS: Grupo A: Pares 1, 2 y 3. Los pares 1 y 3 son grandes, metacntricos. El par 2 es ligeramente, submetacntrico. Pares 4 y 5 Cromosomas grandes, submetacntricos propiamente dicho. Pares 6, 7, 8, 9, 10, 11 y 12 Los pares 6, 7, 8 y 11 son medianos, ligeramente submetacntricos . Los pares 9, 10 y 12 son medianos, submetacntricos. Los cromosomas sexuales X se encuentran en este grupo. Pares 13, 14 y 15 Cromosomas grandes, acrocntricos y presentan satlites. Pares 16, 17 y 18 El par 16 es mediano, metacntrico. Los pares 17 y 18 es pequeo, submetacntrico. Pares 19 y 20 Cromosomas pequeos, metacntricos. Pares 21 y 22 Cromosomas pequeos, acrocntricos Presentan satlites. El cromosoma sexual Y se encuentra en este grupo.

Grupo B: Grupo C:

Grupo D: Grupo E:

Grupo F: Grupo G:

CROMOSOMAS SEXUALES: CROMOSOMA SEXUAL X : Es mediano, ligeramente submetacntrico. Con respecto a su tamao, es ms grande que el cromosoma N 8, y ms pequeo que el cromosoma N 7. Sus brazos p y q son rectos y paralelos entre s. CROMOSOMA SEXUAL Y : El cromosoma es pequeo, acrocntrico Es ms grande que los cromosomas de su grupo (Grupo G) Sus brazos p son compactos y gruesos, se visualizan fcilmente. Sus brazos q son rectos y paralelos entre s. No presentan satlites.

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ANEXO N 2 IDEOGRAMA DEL PATRON DE BANDAS "GTG"

.r

:,t

' i
1

1 :
6 7 8
9
10 11 12
13

14

15

16

17

18

i
19

20

21

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CARIOGRAMA Muestra: SANGRE PERIFRICA (Cultivo de Linfocitos) Tcnica de coloracin: BANDAS GTG (Banda G usando Tripsina y Giemsa) CARIOTIPO:............................................ Dx. CITOGENETICO:.....................................................................................

-----------------------------------------------------1 2 3

----------------------------------4 5

---------------------------------------------------------------------------------------------------------6 7 8 9 10 11 12

--------------------------------------------13 14 15

-------------------------------------------16 17 18

--------------------------19 20

-----------------------------21 22

SEXUALES----------------------------------------

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PRACTICA N 03

D E T E R M I N AC I O N D E L C O RP S C U L O X CROMATINA SEXUAL CORPUSCULO DE BARR

I. COMPETENCIAS: Observa en los ncleos de las clulas epiteliales en Interfase los elementos determinantes del sexo, identificando la presencia del cromosoma X en forma de corpsculo de Barr. Diferencia los ncleos positivos y negativos que le permitan diagnosticar el sexo cromatnico en la muestra estudiada. GENERALIDADES La masa cromatnica que se encuentra en las clulas de los mamferos hembras incluyendo a la especie humana, con excepcin de la zarigeya, constituye la CROMATINA SEXUAL, CUERPO DE BARR, O CORPSCULO X Puede encontrarse en diferentes tipos de clulas, pero debido a la sencillez del procedimiento y a la rapidez de la tcnica empleada se le estudia en clulas epiteliales de la mucosa oral. En las clulas epiteliales se encuentra ADHERIDA A LA MEMBRANA INTERNA DEL NCLEO COMO DESCANSANDO EN ELLA. Su tamao normal vara de 0.7 a 1.2 micras (). Su forma puede ser triangular semi-esfrica, alargada o circular. Su nmero por ncleo vara de 0-4 corpsculos. En las clulas nerviosas se encuentra ubicada al centro del ncleo. En los neutrfilos segmentados se encuentra a manera de palillo de tambor

II.

La regla para determinar el nmero de cromosomas X puede indicarse en la siguiente frmula

NCS = NCX - 1
El nmero de cromatina sexual es igual al nmero de cromosomas X menos uno Esto se puede observar en el siguiente cuadro

FENOTIPO
Varn normal Sndrome de Turner

MASA CROMATINICA

N DE CORPUSCULOS POR NUCLEO 0 0

COMPLEMENTO CROMOSOMICO 46, 45, X0 47, XYY 46, XX 47, XXY 47, XXX 48, XXXX

Varn doble Y Hembra normal Sndrome Klinefelter Sndrome Triple X Sndrome Tetra X

0 1 1 2 3

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Sndrome Penta X

49, XXXXX

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Si el corpsculo de Barr es pequeo, es decir menor de 0.7 ; o es grande es decir mayor de 1.2 , dar lugar a anomalas estructurales del cromosoma X como se observa en el siguiente cuadro: FENOTIPO Delecin Formacin de anillo Isocromacin Duplicacin Pequeo MASA CROMATINICA TAMAO DEL CORPUSCULO COMPLEMENTO CROMOSOMICO 46, X, del (X)(p) 46, X, del(X)(q) 46, X, i(X)(p) 46, X, r(X) 46, X, i(X)(q) 46, X, dup(X)(q)

Grande

Para el diagnstico debe examinarse por lo menos 100 ncleos por lmina y se obtendr el promedio expresado en porcentaje. Para la tcnica del Carbol-fucsina, de 0-5% es negativo y ms de 5% es positivo. III. MATERIALES: Lminas o porta-objetos, Laminillas o cubre-objetos Lpiz Markin o marcador de lminas, Esptulas de madera o bajalenguas. Alcohol eter al 50%, Batera completa de coloracin, Blsamo del Canad, Aceite de inmersin, Microscopio con lentes de inmersin. IV. PROCEDIMIENTO 1. OBTENCIN DE LA MUESTRA: Limpiar las lminas y marcarlas con lpiz de vidrio. Realizar el raspado de las clulas epiteliales de la mucosa oral (carrillos derecho e izquierdo). Hacer el extendido de las muestras en las lminas. Fijarlas en alcohol-ter al 50% durante 5 a 10 minutos. 2. COLORACIN: METODO DE CARBO-FUCSINA Hidrolizar las lminas con solucin de cido clorhdrico al 50% durante 10 minutos. Lavar con agua destilada o agua corriente. Colorear con carbol-fucsina durante 5 a 10 minutos. Diferenciar en alcohol absoluto de 95% (aproximadamente 10 minutos). Cambiar a alcohol absoluto por 1 minuto. Clarificar con Xilol (2 cambios) Montar en Blsamo de Canad 3. LECTURA Y DIAGNOSTICO: 3.1. OBSERVAR A 10X: Ubicar la muestra en la lmina y observar estructuras puntiformes de color fucsia o lila. 3.2. OBSERVAR A 40X: Diferenciar los ncleos buenos de los inadecuados e identificar el corpsculo X si es posible. 3.3. OBSERVAR A 100X Diferenciar los ncleos que presentan corpsculo de Barr (positivos) y los ncleos sin corpsculo (negativos). Observar la morfologa y el tamao de los corpsculos. Realizar el conteo de por lo menos 100 ncleos buenos, indicando los porcentajes analizados, luego obtener el promedio total. Diagnosticar el sexo cromatnico, segn los criterios establecidos. Esquematizar sus observaciones en el microscopio
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V.

CUESTIONARIO: 1. Defina: Cromatina Eucromatina Heterocromatina Cromatina positiva Cromatina negativa Clava o palillo de tambor Heteropicnosis Isopicnosis 2. Explique la hiptesis de Mary Lyon: Concepto, fundamento, propuesta resmen y conclusiones 3. Cules son los factores que alteran la cantidad y el tamao normal del corpsculo de Barr? 4. En qu da de formacin y desarrollo embrionario se puede observar la cromatina sexual?

VI. BIBLIOGRAFA: CUMMINGS, HERENCIA HUMANA. EGOZCUE, GENETICA MEDICA. JORDE-CAREY-W HITE. GENETICA MEDICA SOLARI, GENETICA HUMANA: FUNDAMENTOS Y APLICACIONES EN MEDICINA LISKER-ARMENDARES. INTRODUCCION A LA GENETICA HUMANA.

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CROMOSOMAS HUMANO: CARIOTIPO MICROSCOPIA

COMPETENCIAS: 1. Reconoce bajo el microscopio los elementos responsables de la herencia: LOS CROMOSOMAS EN LOS CULTIVOS CELULARES IN VITRO (CULTIVO DE LINFOCITOS) cuando las clulas estn en Interfase y en divisin (metafase). 2. Comprueba el nmero de cromosomas en la especie humana diferencindolos por grupos (A, B, C, D, E, F, G Y SEXUALES) mediante el MTODO CONVENCIONAL que podran corresponder a anomalas numricas. 1. Observa los cromosomas mediante el MTODO DE BANDAS GTG (bandeo G, Tripsina Giemsa) para identificar los cromosomas y poder averiguar anomalas estructurales. GENERALIDADES La clula en divisin est formados por elementos en form a de varillas llamados cromosomas, que viene de Chroma = color y Soma = cuerpo. Es decir que se tien intensamente con los colorantes bsicos como la fucsina, orceina, hematoxilina, etc. Cada especie animal o vegetal posee un complemento cromosmico propio y caracterstico en cuanto al nmero y forma de los cromosomas. El ser humano tiene 46 cromosomas. PROCEDIMIENTO Lmina N 1 Mtodo Convencional (Coloracin Giemsa). Lminas preparadas con cultivo de linfocitos en sangre perifrica. OBSERVAR A 10X: Corpsculos pequeos de forma esfrica, intensamente teidos de color fucsia o lila (linfocitos en Interfase) Elementos puntiformes y/o alargados e intensamente coloreados formando grupos (linfocitos en divisin o metafases). Esquematizar sus observaciones.

Linfocito en interfase

Linfocito en divisin

OBSERVAR A 40X: Realizar el recuento de los cromosomas en cada metafase. Identificar los cromosomas reconociendo la morfologa de cada uno de ellos Esquematizar sus observaciones.

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OBSERVAR A 100X: Cromosomas en metafase identificando sus cromtide y la posicin de sus centrmeros. Identificar los cromosomas por grupos (A, B, C, D, F, G y sexuales). Esquematizar sus observaciones.

Brazo p Centrmero Brazo q

Cromtide

Grupo G

Grupo A

Grupo D

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Lmina N 2 Mtodo de Bandeo: Bandas GTG Lminas preparadas con cultivo de linfocitos en sangre perifrica. Seguir el mismo procedimiento realizado en la lmina N 1 observando detenidamente a 10X y a 40X.

Cromosoma Metacntrico Cromosoma Acrocntrico

Cromosoma Submetacntrico

OBSERVAR A 100X: Cromosomas de los grupos antes mencionados. Diferenciar las bandas en cada uno de los cromosomas buscando sus pares homlogos. Comparar cada uno de los cromosomas y tratar de identificarlos con la ayuda del patrn de bandas que se presentan en la hoja adjunta. Esquematizar los cromosomas 1, 5, 13, 16, 19, 21 y el cromosoma sexual X.

Cromosoma 21

Cromosoma 13

Cromosoma

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PREGUNTAS 1. Defina los siguientes conceptos: Sitios frgiles Heteromorfismo cromosmico Heterocromatina constitutiva Microncleos 2. - Polimorfismo de los satlites - Polimorfismo del cromosoma Y - Gaps

Explique cul es el fundamento y para qu se usan las tcnicas y marcadores moleculares de: - PCR - Microarrays - RFLP - Souther Bloot - SSR - FISH - AFLP

BIBLIOGRAFIA CUMMINGS, MICHAEL. Herencia Hum ana. DE ROBERTIS, E. Biologa Celular y Molecular. GROUCHY-TURLEAU. Atlas de Enfermedades Cromosmicas LISKER-ARMENDARES. Introduccin a la Gentica Hum ana. MULLER-YOUNG. Gentica Mdic a Emerys SANCHEZ CASCOS Y COL Gentica al da Editorial Labor. THOMPSON, THOMPSON. Gentica Mdic a.

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N 04 M ARCADORES MOLECULARES PARA DETERMINAR VARIANTES INSERCIN /DELECIN (I/D) EN EL GEN ECA, ASOCIADO A ENFERMEDADES CARDIOVASCULARES INTRODUCCIN El sistema RAS (Renin Angiotensin S ystem) cumple una funcin muy importante en la homeostasis cardiovascular. La enzima ACE ( Angiotensin Converting Enzyme) ECA, cataliza la reaccin del paso de Angiotensina I a Angiotensina II. La AngII es una potente vasoconstrictiora que ejerce su influencia sobre el corazn y vasos sanguneos a travs de sus efectos hemodinmicos y celulares directos. Se ha reportado que la inhibicin farmacolgica de ECA, conduce a la mejora en un grupo de pacientes con desrdenes cardiovasculares (ej., hipertensin, enfermedades coronarias e hipertrofia ventricular izquierda). Por ello, el anlisis gentico del polimorfismo de ECA y otros genes asociados es de suma importancia, ya que conllevara a dilucidar los alelos implicados en dichas enfermedades. En algunos estudios previos en distintas poblaciones, los individuos con genotipo DD, tienen una propensin 3-4 veces mayor de sufrir algunas enfermedades cardiovasculares. Sin embargo esto no sucede en otras poblaciones, por ello se est caracterizando la distribucin de los alelos de ECA en pacientes y controles de la poblacin peruana. OBJETIVO Identificar los genotipos Insercin /Insercin (I/I), Insercin/Delecin (I/D) y Delecin/Delecin (D/D) en muestras de sangre de algunos donantes. M ATERIALES .Muestras de sangre (<1ml) .Guantes descartables .Agarosa para preparar geles al 1% .Buffer de carga (azul de bromofenol, xylene cyanol, sucrosa) .Buffer TBE 1X (Tris base, Acido brico, EDTA) .Solucin de bromuro de etidio (EtBr) .Micropipetas de 10 ul .Gradillas para tubos eppendorf de 1.5ml y 0.2ml .Equipo de electroforesis horizontal, fuente de pode, temociclador .Transiluminador UV PROCEDIMIENTO La extraccin de ADN de sangre perifrica comprende el lavado de las muestras con TE 20:5 (Tris- EDTA), lisado con lauryl sarcosine, digestin proteica con Proteinasa K, precipitacin del ADN con sales y etanol Se procede a la amplificacin por PCR de un sector del Intrn 16 del gen ECA (locus en 17q23). La tcnica de PCR se basa en la aplicacin de la enzima Taq polimerasa que sintetiza las cadenas complementarias del ADN, la misma que se inicia a partir de los oligodesoxinucletidos (primers F y R) en el rea ESPECIFICA prevista a ser amplificada. El material bsico para una reaccin de PCR incluye: desoxinucletidos (dNTPs: A,C,G,T), un buffer, cloruro de magnesio, agua ultrapura, primers, enzima (Taq polimerasa) y el ADN de cada muestra. Los dNTPs hibridan al ADN cuando ste se denatura y las cadenas se separan. Las cadenas madre sirven de molde o matriz para que se sinteticen nuevas cadenas a temperaturas especficas de cada reaccin. Se cumplen tres etapas o ciclos: denaturacin del ADN (a 94C) hibridacin de los primers (a 58C) elongacin de la cadena de AND por accin de la Taq (72C) Estos ciclos se repiten por 30 veces o ms, logrando as la amplificacin de un fragmento determinado de ADN que despus se visualiza corriendo la reaccin (electroforesis horizontal a 100 voltios) en geles de agarosa al 1%. - Tincin de geles en la solucin de bromuro de etidio. - Se visualiza los productos de PCR en el transiluminador.

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Fig. 2 Esquema del gen ECA y de la regin polimrfica (delecin insercin) El polimorfismo consta de dos fragmentos allicos: uno de 490 bp (pares de bases) denominado Insercin (I) y otro de 190 bp denominado delecin (D) Los posibles genotipos que se pueden hallar en las muestras seran: I/I = homocigoto para la Insercin I/D = heterocigoto (insercin/delecin) D/D = homocigoto para la delecin PREGUNTAS 1. Defina polimorfismo gentico 2. En la prctica realizada, identifique los genotipos de cada muestra: I/I, I/D D/D 3. Segn lo explicado, qu paciente(s) analizados en la prctica estaran en mayor riesgo de desarrollar una enfermedad cardiovascular? 4. D otro ejemplo de enfermedad gentica a sociada a un polimorfismo

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