Bahan baku peptida - heliks telah muncul sebagai modalitas baru yang menjanjikan untuk berbagai target terapi

i . Di sini , kami melaporkan inhibitor ganda poten dan selektif MDM2 dan MDMX , ATSP - 7041 , yang secara efektif mengaktifkan jalur p53 pada tumor in vitro dan in vivo . Secara khusus , ATSP - 7041 mengikat kedua MDM2 dan MDMX dengan afinitas nanomolar , menunjukkan submicromolar seluler kegiatan di lini sel kanker di hadapan serum , dan menunjukkan sangat spesifik , mekanisme aksi tepat sasaran . A tinggi Resolusi ( 1,7 - ) struktur kristal X - ray mengungkapkan nya molekul interaksi dengan MDMX protein target , termasuk beberapa kontak dengan asam amino utama serta peran hidrokarbon pokok itu sendiri dalam keterlibatan sasaran . Yang paling penting , ATSP 7041 menunjukkan penekanan pertumbuhan tumor tergantung p53 kuat di MDM2/MDMX-overexpressing model xenograft kanker , dengan korelasi yang tinggi dengan aktivitas farmakodinamik tepat sasaran , dan memperlihatkan distribusi jaringan farmakokinetik. Secara keseluruhan , ATSP - 7041 menunjukkan in vitro dan in vivo proofof konsep bahwa bahan baku peptida dapat dikembangkan sebagai terapi inhibitor yang relevan interaksi protein - protein dan mungkin menawarkan modalitas yang layak untuk terapi kanker . T dia transkripsi protein manusia faktor p53 menginduksi sel-siklus penangkapan dan apoptosis dalam menanggapi kerusakan DNA dan cel - stres lular dan dengan demikian memainkan peran penting dalam melindungi sel dari transformasi maligna ( 1 , 2 ) . Inaktivasi wali ini dari genom baik dengan penghapusan atau mutasi atau melalui berlebih protein penghambat adalah cacat yang paling umum di kanker pada manusia ( 1 , 2 ) . Kanker yang overexpress penghambatan yang protein MDM2 dan MDMX juga memiliki tipe liar p53 ( p53WT ) , dan dengan demikian gangguan farmakologi dari interaksi antara p53 dan MDM2 dan MDMX menawarkan kesempatan untuk memulihkan sel-siklus penangkapan tergantung p53 dan apoptosis dalam hal ini penting kelas tumor ( 3-6 ) . MDM2 negatif mengatur fungsi p53 melalui beberapa mekanisme , termasuk langsung mengikat bahwa masker transactivation p53 domain , mempengaruhi impor nuklir dari protein p53 , dan ubiquitination dan degradasi proteasomal dari p53 yang protein ( 6 , 7 ) . Akibatnya, menyimpang MDM2 berlebih dan amplifikasi gen berkontribusi terhadap perkembangan kanker dipercepat dan pertumbuhan ( 1 , 8 ) . Regulator negatif lainnya , MDMX , memiliki kegiatan p53 - mengikat sama dan juga efektif menghambat aktivitas transkripsi p53 . Amplifikasi MDMX terlihat dalam banyak tumor , termasuk melanoma , payudara , kepala dan leher , hepatoseluler , dan retinoblastoma , dan , menariknya, amplifikasi MDMX tampaknya berkorelasi dengan kedua statusnya p53WT dan adanya amplifikasi MDM2 ( 6 , 9 , 10 ) . MDMX tidak memiliki intrinsik E3 ligase ubiquitin kegiatan MDM2 dan tidak dapat mempengaruhi stabilitas p53 , tapi MDM2/MDMX heterodimer dapat meningkatkan ubiquitin ligase aktivitas relatif terhadap MDM2 mono mer . Mengingat perbedaan-perbedaan ini fungsional , MDM2 dan MDMX adalah masing-masing tidak dapat mengkompensasi hilangnya yang lain , dan mereka mengatur fungsi nonoverlapping p53 . Inhibitor yang kuat dan selektif molekul kecil dari interaksi p53 - MDM2 , yang Nutlins , memberikan bukti dari konsep bahwa pemulihan kegiatan p53 layak dan mungkin memiliki aplikasidalam terapi kanker . Meskipun tiga berbeda kelas kecil - molekul MDM2 antagonis saat ini sedang penyelidikan klinis , salah satu keterbatasan potensi molekul-molekul adalah bahwa mereka semua praktis tidak aktif terhadap MDMX . meskipun kontribusi relatif dari MDM2 dan MDMX untuk regulasi p53 tidak sepenuhnya dipahami , beberapa bukti

menunjukkan bahwa antagonis MDM2 selektif tidak akan optimal efektif pada tumor yang mengekspresikan tingkat tinggi MDMX ( 1 , 6 , 10 , 13 ) . Meskipun kesamaan struktural antara MDM2 dan MDMX , ada keragaman yang cukup dalam p53 - mengikat daerah ini protein untuk membuat pengembangan usaha kecil - molekul ganda antagonis menantang . Kami baru-baru ini melaporkan manjur dan selektif molekul kecil , RO - 5963 , yang secara efektif menghambat p53 mengikat kedua MDM2 dan MDMX melalui dimerisasi protein mekanisme aksi ( 14 ) . Namun, farmakologi miskin karakteristik molekul ini membuat tidak cocok untuk lebih lanjut makna Dijepit peptida - heliks telah muncul sebagai baru yang menjanjikan modalitas untuk berbagai target terapi . Di sini, kita menggambarkan pengembangan dijepit - heliks peptida memimpin molekul untuk pengobatan kanker yang memiliki utuh p53 tumor supresor protein tetapi resisten terhadap terapi obat karena berlebih dari penghambatan protein MDM2 dan MDMX . Molekul ATSP - 7041 adalah sangat ampuh ganda inhibitor kedua MDM2 dan MDMX yang terbukti efektif mengaktifkan p53 tumor suppressor jalur dalam sebuah mechanismdependent cara kanker p53 - positif in vitro dan in vivo . Author kontribusi : YSC , BG , VG , CT , KP , KAO , KK , PG , AM , KD , CE , ZF , FZQ , HC , EF , XES , JH , DAA , AMM , NF , HN , LTV , dan TKS dirancang penelitian; BG , VG , CT , KP , K. - HT , KAO , KK , PG , AM , TB , KD , CE , ZF , FZQ , H.C. , P.B. , E.F. , X.E.S. , dan J.H. melakukan penelitian; BG , VG , CT , KK , KD , CE , dan F.Z.Q. kontribusi reagen baru / alat analitik; YSC , BG , VG , CT , KP , K. - HT , KAO , KK , PG , AM , TB , KD , CE , ZF , FZQ , HC , PB , EF , XES , JH , DAA , AMM , NF ,

H.N. , L.T.V. , dan T.K.S. menganalisis data, dan YSC , BG , VG , KP , KAO , KK , KD , EF , D.A.A. , A.M.M. , H.N. , L.T.V. , dan T.K.S. menulis kertas . Konflik pernyataan bunga : Semua penulis adalah karyawan baik Aileron Therapeutics , Inc atau Hoffmann - La Roche , Inc dan , dalam setiap kasus , adalah pemegang saham dari perusahaan untuk tempat mereka bekerja . * Artikel Submission Langsung ini memiliki editor yang telah diatur sebelumnya . Bebas tersedia secara online melalui pilihan akses PNAS terbuka . 1 2 Y.S.C. dan B.G. kontribusi sama untuk pekerjaan ini . Untuk siapa korespondensi dapat dialamatkan . E -mail : ychang@aileronrx.com , Lyubomir . vassilev@roche.com atau sawyerkrt@aol.com . Artikel ini berisi informasi yang mendukung online di www.pnas.org/lookup/suppl/doi:10 . 1073/pnas.1303002110/-/DCSupplemental . www.pnas.org/cgi/doi/10.1073/pnas.1303002110 PNAS | Dipublikasikan secara online 14 Agustus 2013 | E3445 - E3454 sebuah a,2