BAB I PENDAHULUAN A.

Latar Belakang Tswett ialah seorang botanikus Uni Sovyet yang untuk pertama kali pada tahun 1906 dengan sengaja menerapkan metoda khromatografi pada pemisahan beberapa zat warna !a dapat memisahkan zat warna yang terdapat dalam daun" daunan yang hijau dengan #ara ekstrasi memakai eter minyak tanah $leh tswett metoda ini disebut khromatografi yang dalam bahasa yunani berarti menuliskan dengan warna %chromos grafia& Definisi khromatografi 'hromatografi ialah suatu teknik analisis yang diterapkan untuk memisahkan komponen" komponen dalam #ampuran yang #ukup rumit Semua metoda khromatografi didasarkan atas pembagian zat yang harus dipisahkan kepada dua jenis fasa (asa yang pertama disebut fasa stasioner karena) dengan atau tanpa bantuan suatu medium %zat pemikul& yang padat) mempunyai tempat yang tetap dan fasa yang kedua disebut fasa mobil karena bergerak melalui fasa yang pertama 'omponen" komponen #ampuran akan bergerak dengan ke#epatan yang berbeda" beda akibat hambatan selektif dari fasa stasioner sehingga terjadi pemisahan 'ehidupan ilmu penelitian melibatkan struktur kompleks dan molekul yang berhubungan dengan bahan biologis mulai dari *+,) -+,) protein dan molekul lainnya ke organel sel ke jaringan) hingga berbagai jenis organisme .al ini dengan isolasi bahan biologis bahwa kemajuan dalam diagnosa medis dan pengobatan yang tepat dapat di#apai !solasi yang tepat dari bahan biologis menemukan aplikasi dalam diagnosa medis dan terapi) pemantauan lingkungan) pengolahan makanan) dan keperluan industri lainnya !solasi molekul biologis) seperti *+,) -+,) protein) dan analisis berikutnya mereka adalah dasar dari biologi molekuler ,nalisis berikutnya asam nukleat sangat penting untuk studi ekspresi gen dalam penelitian dasar
1

dan di bidang medis untuk aplikasi diagnostik /ontoh alat diagnostik termasuk untuk mendeteksi sekuens asam nukleat dari jumlah menit sel) jaringan) dan 0 atau bahan biopsi untuk diagnosis kanker atau untuk mendeteksi asam nukleat virus dalam darah atau plasma 1fisiensi dalam pemisahan) kuantitas) dan kualitas asam nukleat diisolasi dan dimurnikan dari sampel sangat penting untuk keberhasilan analisis selanjutnya

B.

Rumusan Masalah 2erdasarkan latar belakang di atas) maka dapat dirumuskan masalah sebagai berikut3 1 ,pa saja ma#am pemisahan molekul4 5 ,pa pengertian dari khromatografi4 6 ,pa saja ma#am" ma#am khromatografi4 7 2agaimana #ara pemisahan molekul dengan khromatografi4 8 ,pa fungsi pemisahan molekul dari bahan biologis maupun non biologis4

C. Tujuan 2erdasarkan rumusan masalah di atas) maka tujuan dari pembuatan makalah ini adalah sebagai berikut3 1 Untuk 9engetahui ma#am" ma#am pemisahan molekul 5 Untuk 9engetahui :engertian dari khromatografi 6 Untuk 9engetahui ma#am" ma#am khromatografi 7 Untuk 9engetahui #ara pemisahan molekul dengan khromatografi 8 Untuk 9engetahui keuntungan dari khromatografi

BAB II PEMBAHASAN , 9,/,9" 9,/,9 :19!S,.,+ 9$;1'U; 1 1lektroforesis Elektro ores!s adalah teknik pemisahan komponen atau molekul bermuatan berdasarkan perbedaan tingkat migrasinya dalam sebuah medan listrik 9edan listrik dialirkan pada suatu medium yang mengandung sampel yang akan dipisahkan Teknik ini dapat digunakan dengan memanfaatkan muatan listrik yang ada pada makromolekul) misalnya *+, yang bermuatan negatif <ika molekul yang bermuatan negatif dilewatkan melalui suatu medium) kemudian dialiri arus listrik dari suatu kutub ke kutub yang berlawanan muatannya maka molekul tersebut akan bergerak dari kutub negatif ke kutub positif 'e#epatan gerak molekul tersebut tergantung pada nisbah muatan terhadap massanya serta tergantung pula pada bentuk molekulnya :ergerakan ini dapat dijelaskan dengan gaya ;orentz) yang terkait dengan sifat"sifat dasar elektris bahan yang diamati dan kondisi elektris lingkungan3

( adalah gaya ;orentz) = adalah muatan yang dibawa oleh objek) 1 adalah medan listrik Se#ara umum) elektroforesis digunakan untuk memisahkan) mengidentifikasi) dan memurnikan fragmen *+, <enis elektroforesis 1 1lektroforesis kertas adalah jenis elektroforesis yang terdiri dari kertas sebagai fase diam dan partikel bermuatan yang terlarut sebagai fase gerak) terutama ialah ion"ion kompleks :emisahan ini terjadi akibat adanya gradasi konsentrasi sepanjang sistem pemisahan :ergerakan partikel dalam kertas tergantung pada muatan atau valensi zat terlarut) luas penampang) tegangan yang digunakan) konsentrasi elektrolit) kekuatan ion) p.) viskositas) dan adsorpsivitas zat terlarut
3

1lektroforesis gel ialah elektroforesis yang menggunakan gel sebagai fase diam untuk memisahkan molekul"molekul ,walnya elektoforesis gel dilakukan dengan medium gel kanji %sebagai fase diam& untuk memisahkan biomolekul yang lebih besar seperti protein"protein 'emudian elektroforesis gel berkembang dengan menjadikan agarosa dan poliakrilamida sebagai gel media

:erangkat elektroforesis gel 5 :emisahan molekul biologis menggunakan saringan molekul mesopori :emisahan selektif dan pemurnian molekul biologis adalah penting dalam sejumlah industri) terutama yang pengolahan makanan atau obat" obatan +amun) aplikasi dari saringan molekuler untuk perpisahan ini telah dibatasi oleh ukuran pori yang tersedia %>1)8 nm& *engan perkembangan molekul mesopori sintetik saringan berbagai ukuran pori yang tersedia telah diperpanjang) menyediakan pori"pori #ukup besar untuk memungkinkan akses untuk sejumlah molekul biologis 2ahan" bahan ini memiliki sifat yang unik diinginkan untuk adsorpsi termasuk struktur yang sangat teratur) ukuran pori yang seragam dan luas permukaan yang tinggi) sehingga menawarkan potensi pemisahan
4

berdasarkan ukuran eksklusi dan kimia permukaan yang ditargetkan 9ereka juga dapat disesuaikan dengan perpisahan tertentu dan diharapkan memiliki keunggulan dibandingkan adsorben saat ini digunakan) seperti bentonit dan karbon aktif 'arya ini menyelidiki penggunaan saringan molekul mesopori untuk pemisahan molekul biologis ,dsorpsi per#obaan yang melibatkan protein %lisozim dan tripsin& dan vitamin %riboflavin&) sebagai zat terlarut model biologis) telah dilakukan untuk menilai potensi 9/9"71 dan 9/9"7? sebagai adsorben selektif .asil menunjukkan potensi bahan"bahan untuk digunakan dalam pemisahan ukuran eksklusi 6 :emisahan dan :emurnian @at /air Salah satu metode untuk memurnikan zat #air adalah distilasi 9etode ini memanfaatkan perbedaan titik didih masing"masing komponen :enurunan tekanan luar menyebabkan larutan akan mendidih pada tempeeratur lebih rendah :emanasan zat #air menyebabkan molekul memasuki fase uap *estilasi ada dua ma#am) yaitu distilasi sederhana dan distilasi bertingkat 1 *istilasi Sederhana 9erupakan proses penguapan yang diikuti pengembunan *istilasi dilakukan untuk memisahkan suatu #airan dari #ampurannya apabila komponen lain tidak ikut menguap %titik didih komonen lain jauh lebih tinggi& 9isalnya pengolahan air tawar dari aiir laut 5 *istilasi 2ertingkat 9erupakan proses distilasi berulang"ulang) yang terjadi pada kolom fraksionasi 'olom fraksionasi terdiri atas beberapa plat yang lebih tinggi lebih banyak mengandung #airan yang mudah menguap) sedangkan #airan yang tidak mudah menguap lebih banyak dalam kondensat /ontoh destilasi bertingkat adalah pemisahan #ampuran alkohol"air) pemurnian minyak bumiA yaitu memisahkan gas) bensin) minyak tanah dari minyak mentah 7 :emisahan dan :emurnian @at Se#ara (isik
5

,da beberapa #ara pemisahan dan pemurnian zat se#ara fisik antara lain dengan dekantasi) sublimassi) filtrasi) ekstraksi) koagulasi) adsorpsi) dan destilasi a. Dekantas! 9erupakan proses pemisahan padatan dari #airan :adatan dibiarkan turun dari dasar labu) kemudian #airannya dituangkandengan hati"hati agar padatan tidak terganggu ". #!ltras! ,dalah proses pemisahan padatan dari #airan dngan menggunaka bahan berpori yang hanya dapat dilalui oleh #airan :enyaringan biasanya menggunakan kertas saring yaitu keertas yang porinya relatif ke#il sehingga dapat menahan partikel suspensi /ontohnya adalah menyaring suspensi kapur dalam air 'apur akan tertahan pada kertas saring sedangkan air dapat melewati kertas saring tersebut *alam hal ini kapur disebut residu dan air disebut fitrat $. Su"l!mas! ,dalah proses pemrnian suatu zat dengan jalan memanaskan #ampuran) sehingga dihasilkan sublimat %kumpulan materi pada tempat tertentu yang terbentuk dari pemanasan zat yang dapat berubah langsung dari fasa padat kefasa gas dan kembali lagi kefasa padat /ontohnya pemisahan iodin dari #ampurannya dengan pasir 'etika #ampuran dipanaskan iodin ak menguap) sedangkan komponen yang lain tidak *engan demikin dapat diperoleh iodin murni %. Ekstraks! ,dalah proses pengambilan salah satu komponen #ampuran dengan menggunakan pelarut :emisahan ini didasarkan karena salah satu komponen #airan dari #ampuran tersebut dapat larut ke dalam pelarut tersebut :roses ini sering dilakukan dalam laboratorium kimia e. &oagulas! ,dalah proses pengendapan koloid
6

. A%sor's! ,dalah kemampuan zat untuk menyeerap gas) #airan atau zat terlarut pada permukaanya g. &r!stal!sas! /ara ini berdasarkan perbedaan larutan dari komponen #ampuran dalam pelarut tertentu 'elarutan juga tergantung pada suhu) makin tinggi suhu makin tinggi kelarutan 8 (raksinasi (raksinasi merupakan suatu proses pemisahan kuantitas tertentu dari #ampuran yang dapat dibagi dalam beberapa jumlah ke#il %fraksi& komposisi perubahan berdasarkan kelandaian %.endra 19?9& (raksinasi subseluler adalah suatu metode pemisahan sel dalam beberapa fraksi menjadi organel"organel seluler :emisahan ini berdasarkan bobot jenis dari tiap fraksi 9etode yang digunakan adalah sentrifugasi Sentrifugasi merupakan suatu metode yang digunakan dalam pen#apian sedimentasi dimana partikel"partikel yang ada dalam suatu bahan dipisahkan dari #ampurannya %2oyer 5000& :rinsip yang digunakan yaitu objek yang diputar se#ara horizontal pada jarak radial dari titik yang dikenakan gaya sentrifugal 2erdasarkan prinsip yang biasa digunakan sentrifugasi terbagi menjadi dua ma#am yaitu yang pertama) berdasarkan massa) ukuran atau panjang partikel dan yang kedua) berdasarkan densitasnya Sentrifugasi bergantung pada kekuatan sedimentasi atau pengendapan partikel dengan memanfaatkan massa) ukuran dan densitas partikel Semakin #epat partikel mengendap maka semakin efektif proses sentrifugasi 'e#epatan sedimentasi atau pengendapan ini ditentukan oleh beberapa hal yaitu berat molekul dan berat partikel Semakin tinggi bobot molekulnya maka semakin tinggi pula ke#epatanya 2erat partikel akan mempengaruhi gerakan partikel ketika disentrifugasi %Buwono) 500?&

Sentrifugasi pada umumnya ada dua ma#am yaitu sentrifugasi zonal dan keseimbangan gradien densitas Sentrifugasi zonal yaitu sentrifugasi yang menggunakan massa partikel sebagai teknik untuk memisahkan molekul"molekul yang berbeda ukuran atau panjangnya dan setelah disentrifuasi partikel"partikel tersebut akan terpisah sesuai dengan ukurannya pada lapisan"lapisan atau zona"zona yang berbeda"beda Sentrifugasi keseimbangan gradient densitas merupakan sentrifugasi yang biasanya menggunakan pelarut berupa sesium 'lorida %/e/l& agar densitasnya bergradieb dari atas ke bawah dan setelah disentrifugasi partikel tersebut akan berada pada posisi yang mana densitas partikel seimbang sama dengan densitas pelarutnya :rinsip sentriguasi ini dinamakan sentrifugasi keseimbangan gradient densitas karena antara partikel dan #airan%dalam hal ini sesium klorida& berada pada posisi keseimbangan densitas yaitu keadaan isopiknik Sentrifugasi ini biasa digunakan untuk memisahkan molekul"molekul yang perbedaan densitasnya hingga 0)05 g0m;0 molekul"molekul tersebut seperti molekul protein) *+,) dan -+, yang densitasnya pada larutan sesium klorida ialah 1 6 g0m; ) 1 6"1 C g0m;) dan 1 C8"1 ? g0m;

2 :1+D1-T!,+ '.-$9,T$D-,(! 'romatografi adalah metode yang digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel) dimana komponen tersebut didistribusikan diantara dua fasa yaitu fasa diam dan fasa gerak0mobil (asa diam berupa padatan0#air yang dilapiskan pada padatan0gel :ada pemisahan ini senyawa"senyawa yang akan dipisahkan ditempatkan dalam sistem yang bergerak mengalir melalui suatu sistem yang diam) dan selama pengaliran fasa mobil akan terjadi pelarutan) adsorpsi) dan penguapan :ada prinsipnya semua #ara pemisahan kromatografi mengalami proses yang sama yaitu adanya distribusi komponen" komponen dalam fasa diam dan fasa gerak dengan memanfaatkan perbedaan" perbedaan sifat"sifat fisik komponen yang hendak dipisahkan %9ulja) 1998& :erbedaaan sifat tersebut diantaranya 3
8

1 5

'elarutan yang berbeda terhadap suatu pelarut Sifat untuk bertaut %adsorpsi& yang berbeda satu sama lain dengan suatu serbuk bahan padat

Sifat dapat menguap pada temperatur yang berbeda satu sama lain

/ 9,/,9" 9,/,9 '.-$9,T$D-,(! 1 2erdasarkan asas terjadinya proses pemisahan maka kromatografi dibedakan menjadi 7 yaitu3 a 'romatografi dengan asas adsorpsi 'romatografi jenis ini menggunakan fasa diam padat dan fasa gerak #air atau gas :emisahan komponen"komponennya akan sangat bergantung pada dipisahkan b 'romatografi dengan asas partisi 'romatografi jenis ini memakai fasa diam #air dan fasa gerak #air :emisahan komponen"komponen akan sangat tergantung pada perbedaan dipisahkan # 'romatografi dengan asas filtrasi 'romatografi jenis ini memakai fasa padat yang mempunyai sifat filtrasi terhadap komponen yang mempunyai massa molekul relatif %9r& yang tinggi dan fasa padat tersebut dimiliki oleh gel atau sejenisnya sedangkan fasa geraknya adalah #airan 'romatografi dengan dasar filtrasi ini sangat dipengaruhi oleh perbedaan bentuk %struktur dan ukuran molekul& 'd %'oefisien distribusi& molekul"molekul yang perbedaan polaritas molekul"molekul yang akan

'romatografi dengan asas suhu kritik :ada dasarnya merupakan pengembangan dari kromatografi gas) sebagai fasa mobil dipakai /$5 dalam keadaan superkritik

2edasarkan fase gerak dan fase diamnya 3 a b # d kromatografi #air padat kromatografi gas padat kromatografi #air #air kromatografi gas #air

2erdasarkan dari segi prinsip a 'hromatografi distribusi ,pabila dua #airan yang tidak dapat berbaur di#ampurkan dengan zat yang ketiga yang dapat larut dalam kedua #airan itu) maka zat yang ketiga akan terbagi begitu rupa sehingga perbandingan konsentrasi akan tetap konstan .ukum ini berlaku untuk larutan en#er yang ideal b 'hromatografi adsorbsi ,dsorbsi ialah gejala timbulnya konsentrasi zat yang lebih besar pada bidang perbatasan antara dua fasa daripada dalam masing" masing fasa Terjadinya pemisahan ialah akibat gaya tarik fasa stasioner yang kuat terhadap komponen" komponen yang harus dipisahkan Daya tarik yang kuat ini diesebabkan oleh interaksi kimiwiawi dan0 interaksi van der waals :erbandingan antara konsentrasi zat dalam fasa stasioner dan konsentrasi zat dalam fasa mobil disebut koefisien adsorbsi 'a E /s0/m

2erdasarkan alat yang digunakan a b kromatografi kertas kromatografi lapis tipis

10

# d e

kromatografi kolom kromatografi gas 1lektrokromatografi

* /,-, :19!S,.,+ 9$;1'U; *1+D,+ '.-$9,T$D-,(! 1 'hromatografi 'ertas 9ekanisme pemisahan dengan kromatografi kertas prinsipnya sama dengan mekanisme pada kromatografi kolom ,dsorben dalam kromatografi kertas adalah kertas saring) yakni selulosa Sampel yang akan dianalisis ditotolkan ke ujung kertas yang kemudian digantung dalam wadah 'emudian dasar kertas saring di#elupkan kedalam pelarut yang mengisi dasar wadah (asa mobil %pelarut& dapatsaja beragam ,ir) etanol) asam asetat atau #ampuran zat"zat ini dapat digunakan 'romatografi kertas diterapkan untuk analisis #ampuran asam amino dengansukses besar 'arena asam amino memiliki sifat yang sangat mirip) dan asam" asam amino larut dalam air dan tidak mudah menguap %tidak mungkin didistilasi&) pemisahan asam amino adalah masalah paling sukar yang dihadapi kimiawan diakhir abad 19 dan awal abad 50 <adi penemuan kromatografi kertas merupakan berita sangat baik bagi mereka 'imiawan !nggris -i#hard ;auren#e 9illington Synge %1917"1997& adalah orang pertama yang menggunakan metoda analisis asam amino dengan kromatografi kertas Saat #ampuran asam amino menaiki lembaran kertas se#ara vertikal karena ada fenomena kapiler) partisi asam amino antara fasa mobil dan fasa diam %air& yang teradsorbsi pada selulosa berlangsung berulang"ulang 'etiak pelarut men#apai ujung atas kertas proses dihentikan Setiap asam amino bergerak dari titik awal sepanjang jarak tertentu *ari nilai -) masing"masing asam amino diidentifikasi 'romatografi kertas dua"dimensi %5*& menggunakan kertas yang luas bukanlembaran ke#il) dan sampelnya diproses se#ara dua dimensi dengan dua pelarut

11

Dambar 15 7 /ontoh hasil kromatografi kertas pigmen 5 'romatografi partisi *alam kromatografi partisi) ekstraksi terjadi berulang dalam satu kali proses *alam per#obaan) zat terlarut didistribusikan antara fasa stationer dan fasa mobil (asa stationer dalam banyak kasus pelarut diadsorbsi pada adsorben dan fasa mobil adalah molekul pelarut yang mengisi ruang antar partikel yang ter adsorbsi /ontoh khas kromatografi partisi adalah kromatografi kolom yang digunakan luas karena merupakan sangat efisien untuk pemisahan senyawa organik %Dambar15 6& 'olomnya %tabung gela& diisi dengan bahan seperti alumina) silika gel atau patiyang di#ampur dengan adsorben) dan pastanya diisikan kedalam kolom ;arutan sampel kemudian diisikan kedalam kolom dari atas sehingga sampel diasorbsi oleh adsorben 'emudian pelarut %fasa mobilA pembawa& ditambahkan tetes demi tetes dari atas kolom :artisi zat terlarut berlangsung di pelarut yang turun ke bawah %fasa mobil& dan pelarut yang teradsorbsi oleh adsorben %fasa stationer& Selama perjalanan turun) zat terlarut akan mengalami proses adsorpsi dan partisi berulang" ulang ;aju penurunan berbeda untuk masing"masing zat terlarut dan bergantung pada koefisien partisi masing"masing zat terlarut ,khirnya) zat terlarut akan terpisahkan membentuk beberapa lapisan ,khirnya) masing"masing lapisan dielusi dengan pelarut yang #o#ok

12

untuk memberikan spesimen murninya +ilai - didefinisikan untuk tiap zat terlarut dengan persamaan berikut - E %jarak yang ditempuh zat terlarut& 0 %jarak yang ditempuh pelarut0fasa mobil&

Dambar 15 6 *iagram skematik kromatografi 6 'romatografi gas /ampuran gas dapat dipisahkan dengan kromatografi gas (asa stationer dapat berupa padatan %kromatografi gas"padat& atau #airan %kromatografi gas"#air& Umumnya) untuk kromatografi gas"padat) sejumlah ke#il padatan inert misalnya karbon teraktivasi) alumina teraktivasi) silika gel atau saringan molekular diisikan ke dalam tabung logam gulung yang panjang %5"10 m& dan tipis (asa mobil adalah gas sema#am hidrogen) nitrogen atau argon dan disebut gas pembawa :emisahan gas bertitik didih rendah seperti oksigen) karbon monoksida dankarbon dioksida dimungkinkan dengan teknik ini *alam kasus kromatografi gas"#air) ester seperti ftalil dodesilsulfat yang diadsorbsi di permukaan alumina teraktivasi) silika gel atau penyaring molekular) digunakan sebagai fasa diam dan diisikan ke
13

dalam kolom /ampuran senyawayang mudah menguap di#ampur dengan gas pembawa disuntikkan ke dalam kolom) dan setiap senyawa akan dipartisi antara fasa gas %mobil& dan fasa #air%diam& mengikuti hukum partisi Senyawa yang kurang larut dalam fasa diamankan keluar lebih dahulu 9etoda ini khususnya sangat baik untuk analisis senyawa organik yang mudah menguap seperti hidrokarbon dan ester ,nalisis minyak mentah dan minyak atsiri dalam buah telah dengan sukses dilakukan dengan teknik ini 1fisiensi pemisahan ditentukan dengan besarnya interaksi antara sampel dan#airannya 2erdasarkan hasil ini) #airan yang lebih khusus kemudian dapat dipilih 9etoda deteksinya) akan mempengaruhi kesensitifan teknik ini 9etoda yang dipilih akan bergantung apakah tujuannya analisik atau preparatif 7 .:;/ ,khir"akhir ini) untuk pemurnian %misalnya untuk keperluan sintesis& senyawa organik skala besar) .:;/ %high pre#ision li=uid #hromatography atau highperforman#e li=uid #hromatography& se#ara ekstensif digunakan 2ila zat melarut dengan pelarut yang #o#ok) zat tersebut dapat dianalisis /iri teknik ini adalah penggunaan tekanan tinggi untuk mengirim fasa mobil kedalam kolom *engan memberikan tekanan tinggi) laju dan efisiensi pemisahan dapat ditingkatkan dengan besar Silika gel atau oktadesilsilan yang terikat pada silika gel digunakan sebagai fasa stationer (asa stationer #air tidak populer 'olom yang digunakan untuk .:;/ lebih pendek daripada kolom yang digunakan untuk kromatografi gas Sebagian besar kolom lebih pendek dari 1 m 8 'romatografi ;apis Tipis 9erupakan kromatografi yang menggunakan lempeng gelas atau alumunium yang dilapisi dengan lapisan tipis alumina) silika gel) atau bahan serbuk lainnya 'romatografi lapis tipis pada umumnya dijadikan metode pilihan pertama pada pemisahan dengan kromatografi ';T sering digunakan untuk memisahkan senyawa" senyawa yang sifatnya hidrofobik seperti lipida" lipida danhidrokarbon 6 'romatografi :enukar !on
14

9erupakan bidang khusus kromatografi #airan"#airan Seperti namanya) system ini khusus digunakan untuk spesies ion :enemuan resin sintetik dengan sifat penukar ion sebelum perang *unia !! telah dapat mengatasi pemisahan rumit dari logam tanah jarang dan asam amino Teknik ini mengkombinasikan kekuatan pemisahan dari penukar ion dengan keuniversalan dete#tor daya hantar *alam keadaan kromatografi penukar ion biasa) dete#tor daya hantar terbatas dalam penggunaannya) karena tingginya daya hantar dari pereaksi pengelusi 'romatografi penukar ion menggunakan bahan penukar ion sebagai fasa diam dan telah berhasil digunakan untuk analisis kation) anion dan ion organik C 'romatografi 1kslusi 'romatografi eksklusi sterik adalah salah satu jenils kromatografi dimana fasa diamnya berupa penyaring molekul) penyaring molekul ini dapat berupa polimer karbilhildrat dan akrilamida yang memlpunyai struktur rantai hubung silang dalam rantai polimernya ? 'romatografi :enyaringan Del 9erupakan proses pemisahan dengan gel yang terdiri dari modifikasi dekstran"molekul polisakarida linier yang mempunyai ikatan silang 2ahan ini dapat menyerap air dan membentuk susunan seperti saringan yang dapat memisahkan molekul"molekul berdasarkan ukurannya 9olekul dengan berat antara 100 sampai beberapa juta dapat dipekatkan dan dipisahkan 'romatografi permeasi gel merupakan teknik serupa yang menggunakan polistirena yang berguna untuk pemisahan polimer 9 'romatografi 1lektroforesis 9erupakan kromatografi yang diberi medan listrik disisinya dan tegak lurus aliran fasa gerak Senyawa bermuatan positif akan menuju ke katode dan anion menuju ke anoda Sedangkan ke#epatan gerak tergantung pada besarnya muatan 9etoda elektroforesis merupakan metoda pemisahan suatu zat berdasarkan perbedaan muatan dan massa melekul relative dari komponen"komponennya :emisahan terjadi karena perbedaan laju migrasi komponen"komponen bermuatan oleh pengaruh medan listrik 1 '1U+TU+D,+ *,-! '.-$9,T$D-,(!
15

1 5 6 7 8 6

9etode pemisahan yang #epat dan mudah .anya membutuhkan #ampuran yang sedikit sekali *alam pengerjaanya dapat diulang F ulang 9etode pemisahan yang berbeda dengan metode pemisahan lainnya :emakaian #uplikan0sample sangat hemat :emakaian peralatannya sederhana

BAB III
16

PENUTUP A. &es!m'ulan 2erdasarkan pembahasan di atas) maka dapat ditarik kesimpulan sebagai berikut3 1 9a#am" ma#am pemisahan molekul antara lain elektroforesis) pemisahan molekul biologis menggunakan saringan molekul mesopori) pemisahan dan pemurnian zat #air) pemisahan dan pemurnian zat se#ara fisik) dan fraksinasi 5 'romatografi adalah metode yang digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel) dimana komponen tersebut didistribusikan diantara dua fasa yaitu fasa diam dan fasa gerak0mobil 6 9a#am khromatografi antara lain3 a b b # 7 a b # d e f g h i 8 2erdasarkan asas terjadinya proses pemisahan 2edasarkan fase gerak dan fase diamnya 2erdasarkan dari segi prinsip 2erdasarkan alat yang digunakan 'romatografi 1lektroforesis 'romatografi :enyaringan Del 'romatografi 1kslusi 'romatografi :enukar !on 'romatografi ;apis Tipis .:;/ 'romatografi gas 'romatografi partisi 'hromatografi 'ertas

/ara pemisahan molekul dengan khromatografi antara lain dengan3

*engan khromatografi kita dapat lebih mudah dan efisien dalam melakukan pemisahan molekul
17

B. Saran 2erdasarkan kesimpulan di atas) maka disarankan bagi pemba#a 3 1 5 6 7 !kutilah petunjuk) dan aturan yang berlaku saat melakukan praktikum di laboratorium .ati" hati dalam penggunaan krhomatografi *isarankan untuk men#oba fasa #air standar yang diketahui efektif untuk berbagai senyawa Dunakan perlengkapan diri saat melakukan praktikum

18

DA#TAR PUSTA&A ,stawa) ! gusti made ) dkk 5011 Sejarah Khromatografi %$nline& %http300id s#ribd #om0do#0C8916CCC0'romatografi& diakses tanggal 09 +opember 5015 1ko 5010 Laporan Praktikum Pemisahan dan Pemurnian Zat %$nline& %http300pemisahan"dan"pemurnian"zat html& diakses tanggal 0? +opember 5015 (at#hiyah 5006 Gel Elektroforesis 9alang3 2rawijaya :ress 'isler) <enny 9 ) dkk 5001 Pemisahan molekul biologis menggunakan saringan molekul mesopori %$nline& (http300translate google #o id0translate4hlEidGlangpairEenH idGuEhttp300www o#eannanote#h #om0nav phpI6(=id I6*?GeiE1r'@U:6l*#TtrJfz17*!,w) diakses tanggal 0? +opember 5015 -ahman) Syakir Cara-cara Pemisahan Campuran %$nline& %http300#ara"#ara"pemisahan"#ampuran htmlK U'wL#.pSkfw& tanggal 0? +opember 5015 Sa#hri) Sobandi 19?7 *asar" *asar !lmu !nstrumen <akarta3 2ina#ipta Safina 5011 engenal Kromatografi Dan !plc %$nline& diakses

%http300 9engenal 'romatografi dan .:;/ " +etsains htm& diakses tanggal 0? +opember 5015 Setianingrum) dewi ayu ) dkk 5015 "raksinasi Subseluler (*nl!ne) (htt'+,, Un#ategorized M devagerald htm& diakses tanggal 06 +opember 5015 Buwono T 5008 #iologi olekuler <akarta3 1rlangga

19

-anenoor. ./0/. Pengertian Elektroforesis (*nl!ne) (htt'+,,Pengert!an Elektro ores!s.htm) %!akses tanggal /1 No'em"er ./0. @ulfikar 5011 Sentrifugasi %$nline& %http+,,Sentrifugasi /hem"!s"Try $rg Situs 'imia !ndonesia htm )

diakses tanggal 06 +opember 5015 %http300netsains net050110090mengenal"kromatografi"dan"hpl#0&

20

21