Anda di halaman 1dari 3

Kalibrasi Spektrofotometer UV Vis

Definisi Kalibrasi
Menurut ISO/IEC Guide 17025:2005 dan Vocabulary of International Metrology (VIM) adalah serangkaian kegiatan yang membentuk hubungan antara nilai yang ditunjukkan oleh instrumen ukur atau sistem pengukuran, atau nilai yang diwakili oleh bahan ukur, dengan nilainilai yang sudah diketahui yang berkaitan dari besaran yang diukur dalam kondisi tertentu. Dengan kata lain kalibrasi adalah kegiatan untuk menentukan kebenaran konvensional nilai penunjukkan alat ukur dan bahan ukur dengan cara membandingkan terhadap standar ukur yang mampu telusur (traceable) ke standar nasional maupun internasional untuk satuan ukuran dan/atau internasional dan bahan-bahan acuan tersertifikasi. Manfaat kalibrasi adalah sebagai berikut:
1.

Untuk mendukung sistem mutu yang diterapkan di berbagai industri pada peralatan laboratorium dan produksi yang dimiliki

2.

Dengan melakukan kalibrasi, bisa diketahui seberapa jauh perbedaan (penyimpangan) antara harga benar dengan harga yang ditunjukkan oleh alat ukur.

Kalibrasi Spektrofotometer
Spektrofotometer UV-Vis banyak digunakan untuk penentuan konsentrasi senyawasenyawa yang dapat menyerap radiasi pada daerah ultraviolet (200 400 nm) atau daerah sinar tampak (400 800 nm) (Sastrohamidjojo, 1991). Analisis dengan instrument ini dilakukan dengan penentuan absorbansi dari larutan sampel yang diukur. spektrofotometer mengukur transmitan atau absorban suatu sampel sebagai fungsi panjang gelombang. Pada spektro yang perlu dikalbrasi adalah panjang gelombang dan absorbansi

Kalibrasi panjang gelombang

menggunakan filter gelas holium oksida yang mempunyai panjang gelombang acuan (nm)

pasang filter gelas holium oksida pada kompartemen sampel dan kompartemen pembanding dibiarkan kosong (udara)

Scan spektrum serapan holium oksida, bandingkan panjang gelombang spektrum yang diperoleh dengan data panjang gelombang acuan.

Kalibrasi absorbans

Buat larutan kalium dikromat 50 + 0,5 mg dalam 1 liter 0,005 mol/L asam sulfat (larutan A) Buat larutan kalium dikromat 100 + 1 mg dalam 1 liter 0,005 mol/L asam sulfat (larutan B) Buat larutan 0,005 mol/L asam sulfat sebagai pembanding dan bandingkan hasilnya dengan data acuan (+ 2%)

Cara Menggunakan Spektrofotometer


MANUAL PROSEDUR PENGGUNAAN SPEKTROFOTOMETER GENESYS 20

1. Buka plastik pelindung alat dan nyalakan mesin dengan menekan tombol power di bagian belakang mesin (tombol di sebelah kiri bawah) 2. Tunggu hingga 30 menit untuk memanaskan mesin sebelum dilakukan pengukuran sampel. 3. Tekan tombol A/T/C, pilih absorbance (A). 4. Bersihkan cuvet dengan aquades, tiriskan dengan tisu hingga bagian dalam cuvet tidak mengandung aquades lagi. 5. Ukur absorbansi blanko dengan memasukkan larutan blanko ke dalam cuvet (volume minimal hingga dari tinggi cuvet). Bersihkan bagian luar cuvet yang transparan dari debu dan bekas jari

tangan. 6. Masukkan cuvet ke dalam cell holder pada sample chamber. Cuvet harus diletakkan hingga sampai dasar cell. 7. Tutup sample chamber 8. Tekan tombol untuk mengatur blanko pada konsentrasi 0 9. Pilih panjang gelombang yang akan digunakan untuk mengukur sampel dengan menekan tombol 10. Bersikan cuvet seperti pada metode no. 4 11. Siapkan sampel yang akan diukur, pastikan sampel homogen sebelum memasukkan ke dalam cuvet. 12. Masukkan sampel ke dalam cuvet hingga volume minimal dari tinggi cuvet. Pastikan bagian 13. luar Masukkan cuvet cuvet besih ke dari dalam debu cell dan holder, bekas tutup jari sample tangan. chamber

14. Baca absorbance-nya 15. Ambil sampel dari cuvet, bersihkan, dan ganti dengan sampel baru.

16. Jika pengukuran semua sampel sudah selesai, matikan mesin, bersihkan cuvet dan tiriskan. Tutup kembali mesin dengan plastik.