PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM DARI AKTIVITAS EKSTRAK KASAR ENZIM SELULASE HASIL ISOLASI BEKICOT (Achatina fulica)

TERHADAP HIDROLISA SUBSTRAT SELULOSA, KERTAS HVS DAN AMPAS TEBU

SKRIPSI

DECY NOVITA SARI 070802014

DEPARTEMEN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2011

Universitas Sumatera Utara

PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM DARI AKTIVITAS EKSTRAK KASAR ENZIM SELULASE HASIL ISOLASI BEKICOT (Achatina fulica) TERHADAP HIDROLISA SUBSTRAT SELULOSA, KERTAS HVS DAN AMPAS TEBU

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkapi tugas dan memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Sains

DECY NOVITA SARI 070802014

DEPARTEMEN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2011

Universitas Sumatera Utara

PERSETUJUAN

Judul

Kategori Nama Nomor Induk Mahasiswa Program Studi Departemen Fakultas

: PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM DARI AKTIVITAS EKSTRAK KASAR ENZIM SELULASE HASIL ISOLASI BEKICOT (Achatina fulica) TERHADAP HIDROLISA SUBSTRAT SELULOSA, KERTAS HVS DAN AMPAS TEBU : SKRIPSI : DECY NOVITA SARI : 070802014 : SARJANA (S1) KIMIA : KIMIA : MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

Disetujui di Medan, 5 Agustus 2011 Komisi Pembimbing Pembimbing 2 : Pembimbing 1

Prof. Dr. Jamaran Kaban, M.Sc. NIP. 195106301980021001

Drs. Firman Sebayang, MS NIP. 195607261985031001

Diketahui/Disetujui Oleh Departemen Kimia FMIPA USU Ketua,

Dr. Rumondang Bulan Nasution, MS NIP. 1954080301985032001

Universitas Sumatera Utara

PERNYATAAN

PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM DARI AKTIVITAS EKSTRAK KASAR ENZIM SELULASE HASIL ISOLASI BEKICOT (Achatina fulica) TERHADAP HIDROLISA SUBSTRAT SELULOSA, KERTAS HVS DAN AMPAS TEBU

SKRIPSI

Saya mengakui bahwa skripsi ini adalah hasil kerja saya sendiri, kecuali beberapa kutipan dari ringkasan yang masing-masing disebutkan sumbernya.

Medan, 5 Agustus 2011

DECY NOVITA SARI 070802014

Universitas Sumatera Utara

PENGHARGAAN

Bismillahirrahmanirrahim Syukur alhamdulillah, segala puji penulis ucapkan kehidrat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-Nya sehingga skripsi ini dapat terselesaikan. Dalam hal ini penulis ucapkan terima kasih dan penghargaan kepada: 1. Kedua orang tua tercinta dan tersayang, ayahanda Emly dan ibunda Upik Yani yang dengan doa dan kerja kerasnya telah ikhlas membesarkan, membiayai, dan mendidik penulis agar dapat menjadi manusia yang berguna bagi bangsa dan agama serta bermanfaat bagi orang lain. Abang Yudha Syahputra SE yang selalu menjadi semangat dan memberi dukungan moril kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan skripsi ini. 2. Bapak Drs. Firman Sebayang,MS selaku pembimbing I dan Bapak Prof. Dr. Jamaran Kaban M.Sc selaku pembimbing II dan juga dosen wali penulis, yang telah memberikan arahan, bimbingan, dan dukungan penuh kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. 3. Ibu Dr.Rumondang Bulan,MS dan Bapak Drs.Albert Pasaribu,M.Sc selaku Ketua dan Sekretaris Departemen Kimia FMIPA USU yang telah mensahkan skripsi ini. 4. Bapak dan Ibu dosen di Departemen Kimia FMIPA USU, yang tak kenal lelah dalam mengajar dan telah banyak memberikan ilmu yang bermanfaat bagi penulis. 5. Sahabat-sahabatku Pina, Oki, Destia, Reni, Irma, Fitri, Rifky, Rya, Mariana, Mitha, kak Fitri, kak Nelvi, kak Rani, kak Tiwi, kak Febri, Bang Riri serta rekan-rekan stambuk 2006, 2007, dan 2008 atas dukungan, perhatian, keceriaan dan doa yang diberikan kepada penulis. 6. Kepada teman-teman seperjuangan di Laboratorium Biokimia/KBM FMIPA USU (asisten) : kak Nora, kak Nurmala, kak Fiah, kak Vika, bang Agung, bang Egy, bang Eko, bang Ardy, Pina, Oki, Annisa, Arini, Tiwi, Soraya dan Feri atas dorongan dan ide-ide yang diberikan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. 7. Teman-teman kos gang Pelita Sempit : Ika, Maya, Masita, Nisa, Putri, Rani, dan Ulfha atas dukungan serta semangat-semangat yang diberikan kepada penulis. 8. Teman dekat penulis Feri Wira Setiawan S.Pd yang telah memberikan semangat dan dukungan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

Universitas Sumatera Utara

9. Semua pihak yang tidak bisa disebutkan satu persatu yang telah membantu dan memberikan dukungan kepada penulis dalam menyelesaikan kuliah dan mencapai gelar Sarjana Sains, penulis mengucapkan banyak terima kasih. Semoga Allah SWT akan membahas kebaikan-kebaikan yang telah diberikan kepada penulis, Amin. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna, oleh karena itu diharapkan kritik san saran yang membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Semoga skripsi ini bermanfaat bagi kita semua. Akhirnya kepada Allah SWT jugalah kita berserah diri, semoga Allah SWT selalu menunjukkan jalan yang lurus kepada kita semua.

Universitas Sumatera Utara

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian tentang penentuan pH dan suhu optimum dari aktivitas ekstrak kasar enzim selulase hasil isolasi bekicot terhadap hidrolisa substrat selulosa, kertas HVS dan ampas tebu. Ekstrak enzim selulase diperoleh dengan dua kali sentrifugasi selama 30 menit dengan kecepatan putaran 7000 rpm dengan penambahan aseton dingin dan pengeringan dengan freeze drier. Serbuk ekstrak kasar enzim selulase yang dihasilkan diambil sebanyak 0,5 gram dan dilarutkan dalam 50 ml buffer asetat pH 4,5. Pengujian aktivitas dilakukan secara spektrofotometri dengan metode Nelson Somogyi pada variasi suhu 35oC,40oC,45oC,50oC,55oC dan pH 3,5;4,0;4,5;5,0;5,5. Dari hasil penelitian menunjukkan bahwa pH dan suhu optimum dari ekstrak kasar enzim selulase adalah 4,5 dan 45oC dengan aktivitas pada substrat selulosa sebesar 0,0166 U, pada kertas sebesar 0,0154 U dan pada ampas tebu sebesar 0,0083 U.

Universitas Sumatera Utara

DETERMINATION OF OPTIMUM pH AND OPTIMUM TEMPERATURE OF CRUDE CELLULOSE ENZYME ACTIVITY ISOLATED FROM SNAIL (Achatina fulica) IN CELLULOSE SUBSTRATE, HVS PAPER AND BAGASSE

ABSTRACT

It has been conducted determination of optimum pH and optimum temperature of crude cellulose enzyme activity isolated from snail in cellulose substrate, HVS paper and bagasse. The extract of cellulose enzyme was obtained by two times centrifugation for 30 minutes with rotation 7000 rpm by adding cold acetone and drying with using freeze drier. Cellulose enzyme powder of crude extract that resulting was taken as much as 0,5 g and dissolved in 50 ml acetate buffer pH 4,5. The activity test conducted by using spectrofotometric with Nelson Somogyi method in variant temperature 35oC, 40oC, 45oC, 50oC, 55oC and pH 3,5; 4,0; 4,5; 5,0; 5,5. From the research result indicates that the optimum pH and optimum temperature of crude cellulose enzyme activity were 4,5 and 45oC with activity in cellulose substrate was 0,0166 U, in HVS paper was 0,0154 U and bagasse was 0,0083 U.

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR ISI

Halaman Judul Persetujuan Pernyataan Penghargaan Abstrak Abstract Daftar Isi Daftar Tabel Daftar Gambar Daftar Lampiran BAB 1 PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang 1.2. Permasalahan 1.3. Pembatasan Masalah 1.4. Tujuan Penelitian 1.5. Manfaat penelitian 1.6. Lokasi Penelitian 1.7. Metode Penelitian TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Bekicot (Achatina fulica) 2.2. Enzim 2.2.1. Sifat sifat enzim 2.2.2. Dasar Kerja Enzim 2.2.3. Faktor Faktor Yang Mempengaruhi Kerja Enzim 2.2.4. Klasifikasi Enzim 2.3. Enzim Selulase 2.4. Selulosa 2.5. Kertas 2.6. Ampas Tebu 2.7. Metode Analisa Kuantitatif Glukosa 2.7.1.Metode Nelson Somogyi 2.7.2.Metode Lane Eynon 2.7.3.Metode Saffer Somogyi 2.7.4.Metode Anthrone 2.7.5.Metode Munson Walker 2.8. Spektrofotometer UV- Visible 2.8.1.Aspek Kualitatif dan Kuantitatif Spektrofotometri UV-Vis METODE PENELITIAN 3.1. Alat dan Bahan 3.1.1. Alat - Alat i ii iii iv vi vii viii xi xii xiii

1 4 4 4 5 5 5

BAB 2

7 9 10 11 11 13 15 17 20 23 23 23 23 24 24 24 24 25

BAB 3

27 27

Universitas Sumatera Utara

3.1.2. Bahan bahan 3.2. Prosedur Penelitian 3.2.1. Pembuatan Larutan Pereaksi 3.2.1.1. Pembuatan Larutan Buffer Asetat 0,2 M 3.2.1.2. Pembuatan Larutan NaOH 0,1 N 3.2.1.3. Pembuatan Larutan NaCl 1% 3.2.1.4. Pembuatan Larutan Glukosa 0,2 mg/ml 3.2.1.5. Pembuatan Larutan Pereaksi Nelson 3.2.1.6. Pembuatan Larutan Arsenomolibdat 3.2.2. Penyediaan Ekstrak Kasar Enzim Selulase 3.2.3. Pengukuran Panjang Gelombang Maksimum Larutan Glukosa 3.2.4. Penyiapan Kurva Standar Glukosa 3.2.5. Penentuan Suhu Optimum Ekstrak Kasar Enzim Selulase 3.2.6. Penentuan pH Optimum Ekstrak Kasar Enzim Selulase 3.2.7. Pegukuran Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase 3.3. Bagan Penelitian 3.3.1. Penyediaan Ekstrak Kasar Enzim Selulase 3.3.2. Penentuan Suhu Optimum Hidrolisa Selulosa oleh Enzim Selulase 3.3.3. Penentuan pH Optimum Hidrolisa Selulosa oleh Enzim Selulase 3.3.4. Pengukuran Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Kondisi Optimum BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Hasil Penelitian Dan Pembahasan 4.1.1. Isolasi Ekstrak Kasar Enzim Selulase dari Bekicot 4.1.2. Pengaruh Suhu Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Substrat Selulosa, Kertas HVS dan Ampas Tebu 4.1.3. Pengaruh pH Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase 4.1.4. Pengujian Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Kondisi Optimum Pada Substrat Selulosa, Kertas HVS dan Ampas Tebu KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan 5.2. Saran

28 28 28 28 29 29 29 29 30 30 30 31 31 31 32 33 33 34 35

36

38 38 38

41 44

BAB 5

47 47 48 50

DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1. Tabel 2.2. Tabel 3.1. Tabel 4.1 Tabel 4.2 Tabel 4.3 Tabel 4.4 Tabel 4.5 Tabel 4.6 Tabel 4.7 Tabel 4.8 Tabel 4.9

Komposisi Kimia dari Pulp Kertas Komposisi Kimia Ampas Tebu Pembuatan Larutan Buffer Asetat 0,2 M Data Pengaruh Suhu Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Substrat Selulosa Data Pengaruh Suhu Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Substrat Kertas HVS Data Pengaruh Suhu Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Substrat Ampas Tebu Data Pengaruh pH Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Substrat Selulosa Data Pengaruh pH Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Substrat Kertas HVS Data Pengaruh pH Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Substrat Ampas Tebu Data Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Kondisi Optimum Pada Substrat Selulosa Data Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Kondisi Optimum Pada Substrat Kertas HVS Data Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Pada Kondisi Optimum Pada Substrat Ampas Tebu

20 23 29 39 39 40 42 42 43 44 44 45

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Gambar 2.2. Gambar 2.3. Gambar 4.1.

Anatomi Tubuh Bekicot Struktur Dari Selulosa Mekanisme Pemecahan Selulosa menjadi Glukosa Grafik Pengaruh Suhu Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase Gambar 4.2. Grafik Pengaruh pH Terhadap Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase

7 18 19 40 43

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Lampiran 2. Lampiran 3. Lampiran 4 Lampiran 5. Lampiran 6. Lampiran 7. Lampiran 8. Lampiran 9.

Kurva Spektrum maks Larutan Standar Glukosa Kurva Kalibrasi Larutan Standar Glukosa Harga erf (t) atau ert(hx) dari harga T Data Pengukuran absorbansi Glukosa Hasil Hidrolisa Selulosa Data Pengukuran absorbansi Glukosa Hasil Hidrolisa Kertas Data Pengukuran absorbansi Glukosa Hasil Hidrolisa Ampas Tebu Perhitungan Kadar Glukosa Hasil Hidrolisis Selulosa 1%, Kertas HVS 1% dan Ampas Tebu 1% Perhitungan Kandungan Glukosa Ekstrak Hasil Isolasi Pada Kondisi Optimum Perhitungan Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Selulase

51 52 53 54 55 56 58 59 60

Universitas Sumatera Utara