Jurnal Brasil Teknik Kimia

Pengaruh Beberapa Kondisi Pengolahan Pada Karakteristik Biodegradable Mikrosfer Diperoleh Dari Emulsi Pelarut Pada Proses Evaporasi
JL Maia
I;

MHA Santana

I;

MI Re

II

II

Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Qumica, Campinas - SP IPT, Instituto de Pesquisas Tecnolgicas do Estado de Sao Paulo laboratorio de Tecnologia de Partculas / DIVISO de Qumica-Cidade Universitaria, Butanta, CEP 05508-901, So Paulo - SP, Brasil E-mail:. mire@ipt.br

Abstraksi Mikrosfer yang dibuat dari polihidroksibutirat (PHB) dan polihidroksibutirat-co-valerat (PHBHV) polimer menggunakan pelarut emulsi minyak dalam air dengan metode evaporasi. Penelitian dilakukan untuk mengevaluasi bagaimana beberapa parameter proses polimer dan mempengaruhi sifat dari mikrosfer akhir seperti ukuran partikel, daerah yang dangkal, potensi zeta, morfologi permukaan dan degradasi microsphere. Variabel meliputi konsentrasi surfaktan dalam fase air emulsi dan komposisi pelarut. Dari hasil penelitian, ditemukan bahwa parameter yang mempengaruhi ukuran microsphere yang paling berpengaruh adalah konsentrasi surfaktan dalam fase air emulsi dan komposisi pelarut. Sifat seperti potensi zeta, luas permukaan dan morfologi permukaan tetap pratically tidak berubah selama rentang kondisi pengolahan yang dipelajari di sini. Kata kunci: evaporasi, mikroenkapsulasi, poli-hydroxybutirate-hydroxyvalerate, emulsifikasi.

PENDAHULUAN Polimer dan kopolimer laktat dan asam glikolat yang paling sering digunakan untuk mengembangkan sistem pengiriman obat karena aplikasi penggunaan yang aman dan resmi mereka pada manusia (Chulia et al., 1994). Namun, polimer biodegradable lainnya telah dipelajari untuk meningkatkan jumlah bahan biodegradable yang tersedia untuk aplikasi farmasi dan medis. Poly-3-hidroksibutirat (PHB) dan kopolimer dengan hydroxyvalerate (PHB-HV) adalah anggota yang paling banyak digunakan dari kelompok biopolimer (Mengumpulkan et al., 1998). Mereka diproduksi oleh bakteri biosynthetically dari bahan baku alami dan memang dapat segera dipecah oleh mikroorganisme dalam kondisi yang berbeda. Polimer terakumulasi dalam diskrit, butiran terikat membran dalam sel bakteri, dari mana mereka dapat diekstraksi langsung oleh pelarut organik seperti kloroform atau dengan membranpecah teknik seperti mekanik, kimia dan gangguan enzimatik dinding sel.

Jurnal Brasil Teknik Kimia

Dalam studi ini, beberapa kondisi pengolahan yang akan mempengaruhi tingkat dan kecepatan ekstraksi pelarut emulsi dan tingkat evaporasi yang bervariasi untuk mengamati efeknya pada karakteristik microsphere seperti tingkat menyusut microsphere selama pembentukan, ukuran partikel, luas permukaan dan morfologi permukaan. Juga, efek bahwa konsentrasi surfaktan dalam fasa air dapat memiliki ukuran dan potensial zeta dari micropheres diperiksa di sini. BAHAN Polihidroksibutirat (PHB) dan kopolimer polihidroksibutirat-hydroxyvalerate (PHB-HV) adalah hadiah yang murah hati dari perusahaan PHB-Industri SA (Serrana, Brasil). Polivinil alkohol (88% hidrolisat) diterima dari Hoechst GAC (Jerman). Kloroform (99,8%) dibeli dari Carlo Erba Reagenti (Italy). METODE Persiapan PHB dan PHB-HV Mikro PHB dan PHB-HV mikrosfer disusun oleh emulsi prosedur ekstraksi pelarut minyak dalam air (o / w), sebagaimana schematized di Gambar 2 . Polimer (4 g) dilarutkan dalam kloroform (76mL) pada 50 C.Solusi organik kemudian diemulsikan dalam fasa berair (400 ml) yang mengandung berbagai konsentrasi polivinil alkohol (PVA) 0-4% b / v sebagai penstabil emulsi. Yang dihasilkan o / w emulsi diaduk pada 700 rpm dan 50 C selama 6 jam untuk mengekstrak kloroform. Mikrosfer dicuci dengan 1500 mL air suling dan dikeringkan di bawah vakum selama 4 jam. Mereka kemudian disimpan dalam ruang hampa pada suhu kamar. Microsphere Karakterisasi a) Berat Molekul Berat molekul rata-rata dari mikrosfer ditentukan dengan kromatografi permeasi gel (GPC), menggunakan pompa (Waters 600, MA, USA), detektor refraktometer diferensial (Waters 410, MA, USA) dan integrator (Waters 746, MA, USA). Tiga kolom HR5E dengan rentang berat molekul elektif 2000-4000000 Da yang dihubungkan secara seri. Tahap mobile kloroform (CHCl 3) dengan laju alir 1 ml / menit pada 30 C. The kering mikrosfer dilarutkan dalam CHCl 3 dan disaring. A 100 l volume larutan polimer disuntikkan. Pengumpulan data dan analisis yang dilakukan dengan software Millennium Waters. b) Zeta Potensial Pengukuran potensial zeta diperoleh dengan pengukuran elektroforesis dalam media NaCl pada pH 7,4 menggunakan instrumen Zetasizer Malvern.

Jurnal Brasil Teknik Kimia

c) Penghapusan Tarif Pelarut Tingkat penghapusan pelarut diambil dari tingkat pengurangan diameter microsphere ditentukan oleh difraksi laser selama proses pembentukan. Sampel pertama dari o / w emulsi diambil 3 menit setelah injeksi fase organik menjadi fase berair. Sampel diambil secara terus menerus dengan interval 5 menit untuk 30 menit pertama setelah pengambilan sampel pertama. Setelah ini, sampel masih sering dikumpulkan pada interval 60-min di seluruh emulsi ekstraksi pelarut prosedur. Photomicrographs optik diambil untuk semua sampel, menggunakan E400 POL mikroskop optik Nikon. d) Ukuran Partikel Distribusi ukuran partikel ditentukan dengan difraksi laser yang menggunakan laser Sizer Malvern. Rata-rata ukuran partikel dinyatakan sebagai diameter rata-rata Volume (d 4,3) dalam m. Partikel berdiameter d v, 90 (90% di bawah kisaran ini) dan diameter partikel d v, 10 (10% di bawah kisaran ini) juga dicatat. e) Morfologi Optik dan pemindaian mikroskop elektron yang digunakan untuk mengevaluasi kualitas dari mikrosfer diperoleh berdasarkan berbagai kondisi digunakan. Setelah vakum dilapisi dengan lapisan tipis emas, mikrosfer diperiksa dengan cara JEOL JSM5200 mikroskop elektron pada intensitas 10-15 kV, menggunakan berbagai perbesaran untuk mengamati morfologi permukaan. e) Luas Permukaan Permukaan spesifik sampel ditentukan dengan Micromeritics secepatnya 200 peralatan dari data adsorpsi nitrogen dan desorpsi isoterm pada titik didih nitrogen cair di bawah tekanan atmosfer (-195 C). Dalam rentang validitas BET isoterm, permukaan spesifik dihitung dari kemiringan dan intercept dari garis yang dibentuk oleh lima titik pengukuran. Sebuah berat sampel 0.6-0.7g digunakan untuk memastikan hasil yang akurat dan direproduksi, berdasarkan rekomendasi dalam literatur (Hausberger dan DeLuca, 1995). f) Differential Scanning kalorimetri (DSC) Thermograms dari sampel diperoleh dengan DSC ( TGA-50h) pada kisaran suhu -100 hingga 250 o C pada tingkat pemanasan 10 C / menit dalam suasana nitrogen. g) Degradasi in Vitro Sampel microsphere akurat ditimbang ditambahkan steril tabung sekrup-capped mengandung Hank penyangga pH 7,4 (136,900 mmol / L NaCl, 5.370 mmol / L KCl, 0,812 mmol / L MgSO4 .7 H 2 O; 1.260 mmol / L CaCl2; 0,337 mmol / L Na 2 HPO 4 .2 H 2 O, 0.441 mmol / L KH 2 PO 4 dan 4.170 mmol / L NaHCO3 dalam air bidistilled). Semua mikrosfer

Jurnal Brasil Teknik Kimia

diinkubasi selama total 30 hari di bawah agitasi dalam bak pengocok (37 C dan 50 siklus min -1). Setelah 10, 20 dan 30 hari inkubasi, sampel perwakilan kecil mikrosfer dicuci tiga kali dengan air suling dan dikeringkan dalam dessicator vakum sampai berat konstan. Persentase penurunan berat badan (PWL) dihitung sebagai berat badan kering setelah 10, 20 atau 30 hari inkubasi (g) / berat kering asli sampel x 100. HASIL DAN PEMBAHASAN Pengaruh Konsentrasi PVA pada Ukuran Partikel dan Zeta Potensi Mikro a) PVA Konsentrasi Konsentrasi PVA dalam fase air eksternal yang dikenal sebagai faktor yang mempengaruhi ukuran mikrosfer (Yang et al., 2001). Pada penelitian ini, PHB dan PHB-HV mikrosfer diproduksi dengan konsentrasi PVA dalam fase air eksternal 0-4,0% b / v dalam rangka untuk menguji pengaruh dari proses ini parameter pada karakteristik microsphere. Pertama, terbukti secara eksperimental dalam penelitian ini bahwa tanpa PVA tidak mungkin untuk menghasilkan PHB-HV atau PHB mikrosfer, karena produk yang dihasilkan dalam kedua kasus adalah massa polimer diendapkan. Pengaruh konsentrasi PVA pada volume diameter rata-rata ditunjukkan pada Tabel 1 dan 2 untuk PHB-HV dan PHB mikrosfer, masing-masing. Ukuran dari PHB-HV mikrosfer diperoleh pada 0,5, 1,0, 2,0, 3,0 dan 4,0% PVA (b / v) adalah 389.20m, 54.34m, 38.59m, 40.27m dan 39.54m, masing-masing ( Tabel 1 ). Hal ini dapat dilihat bahwa penurunan yang signifikan dalam ukuran microsphere dapat dicapai dengan meningkatkan konsentrasi PVA dari 0,5% menjadi 2,0% b / v Hasil ini dapat dijelaskan sebagai berikut: dengan meningkatkan konsentrasi PVA 0,5-2,0% b / v, tetesan emulsi yang stabil untuk menghindari koalesensi, sehingga mikrosfer kecil. b) Zeta Potensial Pengukuran Nilai potensi ini tergantung pada biaya hadir pada permukaan partikel (potensial Nernst). Peningkatan atau penurunan dalam kelompok bermuatan permukaan akan menghasilkan lebih tinggi atau lebih rendah potensial zeta (Muller et al., 1986). Dalam kasus PHB atau PHB-HV mikrosfer diproduksi dengan konsentrasi PVA yang berbeda, perubahan jumlah biaya permukaan akan karena penggabungan surfaktan ionik dan / atau adsorpsi di permukaan. Penekanannya di sini ditempatkan pada perubahan potensial zeta dari mikrosfer setelah prosedur cuci untuk menghapus PVA bebas dari permukaan mereka dan bukan pada nilai absolut potensi. Differential Scanning kalorimetri (DSC) Untuk mengevaluasi efek dari emulsi metode evaporasi pelarut minyak dalam air pada sifat termal PHB dan PHB-HV, mikrosfer dan sampel asli dari kedua polimer diserahkan ke analisis DSC.

Jurnal Brasil Teknik Kimia

Luas Permukaan Permukaan daerah dihitung dengan metode BET untuk PHB dan PHB-HV mikrosfer ditunjukkan pada Tabel 4 . Nilai-nilai, antara 19 dan 20m 2 / g, adalah 100 kali lebih besar daripada daerah dangkal dari PLGA mikrosfer disiapkan oleh Hausberger dan De Luca (1995) dengan menggunakan metode evaporasi pelarut emulsi minyak dalam air yang sama. Dengan asumsi bahwa luas permukaan mikrosfer biodegradable dapat mempengaruhi tingkat biodegradasi mereka, luas permukaan yang lebih besar dari PHB dan PHB-HV mikrosfer ditampilkan di sini dapat menguntungkan bagi pengembangan sistem pengiriman terkendali dengan mengatasi laju degradasi polimer ini, yang lebih lambat daripada bahwa dari PLGA mikrosfer. Degradasi in Vitro Meskipun keterbatasannya, gravimetri sangat berguna untuk memberikan gambaran sederhana dari tingkat relatif hilangnya polimer biodegradable dan itu digunakan dalam penelitian ini. Untuk melakukannya, fraksi PHB dan PHB-HV yang menjadi mikrosfer diperkirakan dengan memantau persentase penurunan berat badan (PWL) selama inkubasi mereka dalam Hanks penyangga 37 o C, pH 7,4 selama 30 hari. Kecenderungan yang diamati dari pengamatan SEM adalah sama, terlepas dari polimer yang digunakan. Hal ini dapat dilihat pada Gambar 5 bahwa setelah 30 hari inkubasi dalam buffer Hank, PHB-HV mikrosfer telah mempertahankan bentuk bola dan struktur pori-pori. Tidak ada bukti erosi permukaan. Hasil ini sesuai dengan hasil eksperimen lain yang diperoleh sebelumnya pada degradasi lambat polimer ini dalam media yang sama (Holland, 1986; Mengumpulkan et al, 1998.). Pengaruh Kondisi Pengolahan pada Tingkat Pelarut Removal dari Mikro Dalam komposisi studi, suhu dan pelarut, dua kondisi pengolahan yang mempengaruhi tingkat dan kecepatan ekstraksi pelarut emulsi dan tingkat evaporasi yang bervariasi untuk mengamati efeknya pada PHB-HV microsphere menyusut tingkat selama pembentukan. a) Suhu PHB-HV mikrosfer siap dengan 1% PVA b / v dalam fase air emulsi pada temperatur yang berbeda, 40 C dan 50 C. Dari data yang disajikan dalam Gambar 6 untuk 40 C, penurunan tarif dengan diameter konstan selama 7,0 menit pertama, menunjukkan fluks konstan (perpindahan massa per satuan luas permukaan) selama ini jika densitasnya diasumsikan invarian karena

Jurnal Brasil Teknik Kimia

di mana M adalah massa pelarut dalam microsphere, t adalah waktu dan adalah densitas cairan. b) Komposisi pelarut Variasi dalam emulsi ukuran tetesan dengan waktu ditunjukkan pada Gambar 9 untuk campuran biner kloroform-aseton, dibandingkan dengan data yang diperoleh dengan hanya kloroform sebagaipelarut. Perilaku yang sama dipantau oleh mikroskop optik diilustrasikan pada Gambar 10 . Hasil menunjukkan bahwa komposisi pelarut juga dapat menjadi faktor kunci dalam mengendalikan tingkat penghapusan pelarut dan ukuran akhir dari mikrosfer. KESIMPULAN Sebuah proses minyak-dalam-air emulsifikasi dengan evaporasi pelarut digunakan untuk membuat PHB dan PHB-HV mikrosfer ditandai dengan volume diameter rata-rata berkisar antara 31-390 pM. Beberapa kondisi pengolahan seperti suhu, komposisi pelarut dan konsentrasi surfaktan dalam fasa berair yang bervariasi dan pengaruhnya terhadap sifat fisik resultan mikrosfer dipelajari. Beberapa properti seperti daerah yang potensial dan dangkal zeta tetap praktis tidak berubah, terlepas dari variasi dalam parameter diselidiki, sedangkan ukuran microsphere dipengaruhi oleh semua kondisi pengolahan. Kontrol dari ukuran mikrosfer ini penting karena ukuran mempengaruhi laju degradasi, pemuatan dan meledak rilis awal dari mikrosfer. Luas permukaan yang besar dan degradasi lambat in vitro dari mikrosfer yang diperoleh dari kedua polimer menunjukkan potensi mereka untuk digunakan sebagai sistem pengiriman terkendali untuk obat atau bahan aktif lainnya. Penelitian lebih lanjut akan melibatkan penggabungan model obat untuk mempelajari kinetika rilis dari mikrosfer.