LAPORAN RESMI PRATIKUM MIKROBIOLOGI LAUT PENGENALAN ALAT-ALAT LABORATORIUM

Oleh: Agus Nurul K K2D 008 005

PROGRAM STUDI ILMU KELAUTAN JURUSAN ILMU KELAUTAN AKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN UNI!ERSITAS DIPONEGORO SEMARANG 200"

BAB I METODOLOGI Pada praktikum Miokrobiologi laut (pengenalan alat-alat labolatorium mikrobiologi) metode yang digunakan adalah : 1. Mengamati peralatan yang ada di laboratorium 2. Menggambar dan menyebutkan peralatan yang ada di labolatorium 3. Menyebutkan fungsi dari tiap tiap peralatan yang ada di labolatorium.

BAB II #ASIL DAN PEMBA#ASAN 2.1. Hasil Al$%-$l$% gel$s 1. !abung reaksi 2. !abung durham 3. "elas piala #. $nlenmeyer %. &a'an petri (. Pipet tetes ). *atang pengaduk +. &orong 1.

2. 3.

#.

%.

(. ).

+. Al$%-Al$% u&ur 1. 2. 3. #. "elas ukur *uret Pipet mohr Pipet ,olumetri%. .abu ukur

1.

2.

3.

#. . Al$l-$l$% S%er'l's$s' 1. /ktaf 2. *insen 3. 0ilter membrane 1) Otoklaf

2) Bunsen

3) Filter membrane

1.

M'&r(s&() 1. Mikroskop -ahaya 2. "elas *enda 3. "elas penutup

1.

Al$%-$l$% I*&ul$s' 1. 2arum ose 2. 2arum preparat Al$%-$l$% l$'* 1. Laminar Air Flow 1. .aminar air flo' 2. 3entrifugo 3. nkobato #. 4ater bath %. Hot plat (. 3heker ). &olony -ounter +. !ip 5. Pipet mikro 16. !imbang

1.

2. Santrifuge

analitik 11. 7apas 12. .ap 13. 3pider 1#. 2angka sorong 1%. *lidder 1(. /,en 1). Pisau 3. Inkubator

4. Water Bat

!. "ot #late

$. S a%ker

&. 'olon( 'ounter

). "an* 'ounter

+. ,ikro-i-et

1.. /i-

11. 0angka Sorong

12. /imbangan Analitik

2.2.

Pembahasan

T$+u*g Re$&s' : 8i dalam mikrobiologi9 tabung reaksi digunakan untuk u:i-u:i biokimia'i dan menumbuhkan mikroba.!abung reaksi dapat diisi media padat maupun -air. !utup tabung reaksi dapat berupa kapas9 tutup metal9 tutup plastik atau aluminium foil. Media padat yang dimasukkan ke tabung reaksi dapat diatur men:adi 2 bentuk menurut fungsinya9 yaitu media agar tegak (deep tube agar) dan agar miring (slants agar). ;ntuk membuat agar miring9 perlu diperhatikan tentang kemiringan media yaitu luas permukaan yang kontak dengan udara tidak terlalu sempit atau tidak terlalu lebar dan hindari :arak media yang terlalu dekat dengan mulut tabung karena memperbesar resiko kontaminasi. ;ntuk alas an efisiensi9 media yang ditambahkan berkisar 16-12 ml tiap tabung.

T$+u*g Durh$,: !abung durham berbentuk mirip dengan tabung reaksi namun ukurannya lebih ke-il dan berfungsi untuk menampung<men:ebak gas yang terbentuk akibat metabolisme pada bakteri yang diu:ikan. Penempatannya terbalik dalam tabung reaksi dan harus terendam sempurna dalam media (:angan sampai ada sisa udara).

T$+u*g Erle*,e-er: *erfungsi untuk menampung larutan9 bahan atau -airan yang. .abu $rlenmeyer dapat digunakan untuk mera-ik dan menghomogenkan bahan-bahan

komposisi media9 menampung akuades9 kulti,asi mikroba dalam kultur -air9 dll. !erdapat beberapa pilihan berdasarkan ,olume -airan yang dapat ditampungnya yaitu 2% ml9 %6 ml9 166 ml9 2%6 ml9 366 ml9 %66 ml9 1666 ml9 dsb. .$/$* Pe%r': &a'an petri berfungsi untuk membiakkan (kulti,asi) mikroorganisme. Medium dapat dituang ke -a'an bagian ba'ah dan -a'an bagian atas sebagai penutup. &a'an petri tersedia dalam berbagai ma-am ukuran9 diameter -a'an yang biasa berdiameter 1% -m dapat menampung media sebanyak 1%-26 ml9 sedangkan -a'an berdiameter 5 -m kira-kira -ukup diisi media sebanyak 16 ml. P')e% Te%es: 0ungsinya sama dengan pipet ukur9 namun ,olume yang dipindahkan tidak diketahui. 3alah satu penerapannya adalah dalam menambahkan H&l < =a/H saat mengatur pH media9 penambahan reagen ada u:i biokimia9 dll. !idak ada skala ukuran ,olumenya. B$%$*g Pe*g$0u&: ;ntuk mengaduk larutan -ampuran atau larutan murni. &ara ker:anya yaitu dengan mengadukan larutan dengan alat ini hingga terlarut semua. .(r(*g: !erbuat dari plasti-9 untuk membantu memasukan larutan ke dalam tabung reaksi9dsb. >da yang berukuran besar dan ada yang berukuran ke-il. &ara ker:anya yaitu dengan meletakan -orong ini diatas tabung reaksi kemudian tuangkan pelan-pelan larutan ke dalam tabung reaksi. 21212 Al$%-Al$% U&ur Gel$s U&ur: *erguna untuk mengukur ,olume suatu -airan9 seperti labu erlenmeyer9 gelas ukur memiliki beberapa pilihan berdasarkan skala ,olumenya. Pada saat mengukur ,olume larutan9 sebaiknya ,olume tersebut ditentukan berdasarkan meniskus -ekung larutan. Bure%:

*uret dipakai sebagai tempat titran9 biasanya yang dipakai adalah buret dengan ,olume %6 m.. 3kala 6 ada dibagian atas dan %6 ada di ba'ah. 3tatis dipakai untuk menahan buret (meletakkan buret) pada 'aktu titrasi. P')e% M(hr: ;ntuk memindahkan atau mengambil larutan dengan ukuran yang ditentukan( biassanya 26ml). Memiliki u:ung yang disertai dengan karet penghisap9agar memudahkan dalam mengambil larutan. 7aret ini disebut "ondok yang memiliki 3 tombol yang fungsinya sebagai membuang udara9 dan mengeluarkan udara dari pipet. P')e% !(lu,e%r': Pipet ukur merupakan alat untuk memindahkan larutan dengan ,olume yang diketahui. !ersedia berbagai ma-am ukuran kapasitas pipet ukur9 diantaranya pipet berukuran 1 ml9 % ml dan 16 ml. &ara penggunaanya adalah -airan disedot dengan pipet ukur dengan bantuan filler sampai dengan ,olume yang diingini. 1olume yang dipindahkan dikeluarkan menikuti skala yang tersedia (dilihat bah'a skala harus tepat se:a:ar dengan mensikus -ekung -airan) dengan -ara menyamakan tekanan filler dengan udara sekitar. L$+u U&ur: >lat ini dipakai untuk membuat larutan standar dengan ,olume tertentu misalnya 169 2%9 %6 m.. 2angan gunakan beaker glass untuk membuat larutan standar sebab labu ukur lebih presisi. !erdapat penutupnya yang terbuat dari karet atau kapas. 21212 Al$%-Al$% S%er'l's$s' O&%(&l$3: >uto-la,e adalah alat untuk mensterilkan berbagai ma-am alat dan bahan yang digunakan dalam mikrobiologi menggunakan uap air panas bertekanan. !ekanan yang digunakan pada umumnya 1% Psi atau sekitar 2 atm dan dengan suhu 121o& (2%6o0). 2adi tekanan yang beker:a ke seluruh permukaan benda adalah 1% pon tiap in-hi2 (1% Psi ? 1% pounds per s@uare in-h). .ama sterilisasi yang dilakukan biasanya 1% menit untuk 121o&. &ara Penggunaan :

1. 3ebelum melakukan sterilisasi -ek dahulu banyaknya air dalam autoklaf. 2ika air kurang dari batas yang ditentukan9 maka dapat ditambah air sampai batas tersebut. "unakan air hasil destilasi9 untuk menghindari terbentuknya kerak dan karat. 2. Masukkan peralatan dan bahan. 2ika mensterilisasi botol beretutup ulir9 maka tutup harus dikendorkan. 3. !utup autoklaf dengan rapat lalu ken-angkan baut pengaman agar tidak ada uap yang keluar dari bibir autoklaf. 7lep pengaman :angan diken-angkan terlebih dahulu. #. =yalakan autoklaf9 diatur timer dengan 'aktu minimal 1% menit pada suhu 121o&. %. !unggu samapai air mendidih sehingga uapnya memenuhi kompartemen autoklaf dan terdesak keluar dari klep pengaman. 7emudian klep pengaman ditutup (diken-angkan) dan tunggu sampai selesai. Penghitungan 'aktu 1%A dimulai se:ak tekanan men-apai 2 atm. (. 2ika alarm tanda selesai berbunyi9 maka tunggu tekanan dalam kompartemen turun hingga sama dengan tekanan udara di lingkungan (:arum pada preisure gauge menun:uk ke angka nol). 7emudian klep-klep pengaman dibuka dan keluarkan isi autoklaf dengan hati-hati. Bu*se*: Pemanas yang fungsinya untuk men-iptakan suasana steril9 bahan bakarnya ma-am-ma-am. >da yang dari al-ohol9 spiritus9 dan minyak gas. *entuknya seperti tabung yang berisi bahan bakar dan memiliki sumbu yang dapat menghasilkan api. 0ilter Membran: 3eperti kertas yang memiliki ukuran pori-pori yang berma-am-ma-am yang fungsinya untuk menyaring larutan atau menyaring -ahaya yang akan masuk. &ara ker:anya kertas tersebut dilipat kemudian ditaruh diatas tabung reaksi dan -airan yang akan disaring9di tuangkan di atasnya. 21214 M'&r(s&()

M'&r(s&() .$h$-$: 3alah satu alat untuk melihat sel mikroorganisme adalah mikroskop -ahaya. 8engan mikroskop kita dapat mengamati sel bakteri yang tidak dapat dilihat dengan mata telan:ang. Pada umumnya mata tidak mampu membedakan benda dengan diameter lebih ke-il dari 691 mm. berikut merupakan uraian tentang -ara penggunaan bagian-bagiandan spesifikasi mikroskop -ahaya merk /lympus &B21 yang dimiliki .aboratorium Mikrobiologi. Prosedur /perasi: 51 Me*-$l$&$* l$,)u a. tekan tombol on b. atur kekuatan lampu 21 Me*e,)$%&$* s)es',e* )$0$ ,e6$ +e*0$ a. .etakan ob:ek glas diatas me:a benda kemudian :epit dengan. 2ika me:a benda belum turun9 diturunkan dengan sekrup kasar . b.&ari bagian dari ob:ek glas yang terdapat preparat ulas (di-ari dan diperkirakan memiliki gambar yang :elas) dengan memutar sekrup ,ertikal dan horiContal.

Pre)$r$%7Gel$s Be*0$: !erbuat dari ka-a9 fungsinya sebagai media alas mikroorganisme yang akan diamati dengan mikroskop. &ara ker:anya mikroorganisme ditaruh di atas preparat kemudian diamati dengan menggunakan mikroskop.

21215 Al$%-Al$% I*(&ul$s'

J$ru, Ose8J$ru, I*(&ulu,9: 2arum inokulum berfungsi untuk memindahkan biakan untuk ditanam<ditumbuhkan ke media baru. 2arum inokulum biasanya terbuat dari ka'at ni-hrome atau platinum sehingga dapat berpi:ar :ika terkena panas. *entuk u:ung :arum dapat berbentuk lingkaran (loop) dan disebut ose atau ino-ulating loop<transfer loop9 dan yang berbentuk lurus disebut ino-ulating needle<!ransfer needle. no-ulating loop -o-ok untuk melakukan streak di permukaan agar9 sedangkan ino-ulating needle -o-ok digunakan untuk inokulasi se-ara tusukan

pada agar tegak (stab ino-ulating). 2arum inokulum ini akan sangat bermanfaat saat membelah agar untuk preprasi Heinri-hAs 3lide &ulture. 2151: Al$%-Al$% L$'*

L$,'*$r A'r l(/: ni adalah tempat untuk penanaman media yang men-iptakan kondisi steril pada saat penanaman mikrobia karena bentuk dari tempat ini adalah tertutup rapat namun disertai 2 lubang sebagai tempat masuknya tangan dan penanaman dilakukan di dalam alat ini. >lat ini :uga bisa dipakai untuk inkubasi.

Se*%r'3uge: >lat yang fungsinya untuk memisahkan natan dengan supernatan berdasarkan berat :enisnya. 8alam penggunaan alat ini haruslah seimbang antara berat yang ditimbang dengan berat yang ada didepanya. >lat ini memutar dengan sangat -epat sekali sehingga memisahkan natan dengan supernatant berdasarkan berat :enisnya.

nkubator adalah alat untuk menginkubasi atau memeram mikroba pada suhu yang terkontrol9 dan :uga untuk mensterilisasi pada suhu yang tinggi namun kering. >lat ini dilengkapi dengan pengatur suhu dan pengatur 'aktu. 7isaran suhu untuk inkubator produksi Heraeus *%6#2 misalnya adalah 16-)6o&. ;ntuk mengubah suhu9 panel suhu digital pada mesin harus dilihat dulu. >pabila sudah berkedip9 maka baru bisa dirubah suhunya.

;$%er +$%h: >dalah alat untuk menginkubasi bakteri karena ada pengatur 'aktunya dan ke-epatan tertentu untuk menghomogenkan media9 agar rata dan tumbuhnya bakteri dapat terkontrol dan bagus.

#(% Pl$%e: ot plate stirrer berfungsi untuk menghomogenkan suatu larutan dengan pengadukan. Pelat (plate) yang terdapat dalam alat ini dapat dipanaskan sehingga mampu memper-epat proses homogenisasi. Pengadukan dengan bantuan batang magnet Hot plate dan magneti- stirrer seri 3*3-166 dari 3*3D

misalnya mampu menghomogenkan sampai 16 .9 dengan ke-epatan sangat lambat sampai 1(66 rpm dan dapat dipanaskan sampai #2%o&. Sh$<&er: ;ntuk men-ampurkan media dengan bakteri agar pertumbuhanya dapat maksimal serta bertu:uan untuk meratakan media. .(l(*- .(u*%er: >lat ini berguna untuk mempermudah perhitungan koloni yang tumbuh setelah diinkubasi di dalam -a'ankarena adanya ka-a pembesar. 3elain itu alat tersebut dilengkapi dengan skala< kuadran yang sangat berguna untuk pengamatan pertumbuhan koloni sangat banyak. 2umlah koloni pada -a'an Petri dapat ditandai dan dihitung otomatis yang dapat di-reset. #$*0 .(u*%er: >lat penghitung koloni manual9 bentuknya seperti stop'at-h dan fungsinya untuk memudahkan dalam penghitungan koloni agar tidak lupa pada saat menghitung. M'&r()')e%: Mikropipet adalah alat untuk memindahkan -airan yang ber,olume -ukup ke-il9 biasanya kurang dari 1666 El. *anyak pilihan kapasitas dalam mikropipet9 misalnya mikropipet yang dapat diatur ,olume pengambilannya (ad:ustable ,olume pipette) antara 1El sampai 26 El9 atau mikropipet yang tidak bisa diatur ,olumenya9 hanya tersedia satu pilihan ,olume (fiFed ,olume pipette) misalnya mikropipet % El. dalam penggunaannya9 mukropipet memerlukan tip. &ara menggunakan: 1. 3ebelum digunakan Thumb Knob sebaiknya ditekan berkali-kali untuk memastikan lan-arnya mikropipet. 2. Masukkan !ip bersih ke dalam Nozzle < u:ung mikropipet. 3. !ekan Thumb Knob sampai hambatan pertama < first stop9 :angan ditekan lebih ke dalam lagi. #. Masukkan tip ke dalam -airan sedalam 3-# mm. %. !ahan pipet dalam posisi ,ertikal kemudian lepaskan tekanan dari Thumb Knob maka -airan akan masuk ke tip. (. Pindahkan u:ung tip ke tempat penampung yang diinginkan.

). !ekan Thumb Knob sampai hambatan kedua < second stop atau tekan semaksimal mungkin maka semua -airan akan keluar dari u:ung tip. +. 2ika ingin melepas tip putar Thumb Knob searah :arum :am dan ditekan maka tip akan terdorong keluar dengan sendirinya9 atau menggunakan alat tambahan yang berfungsi mendorong tip keluar. T''): 2arum bantu yang memiliki ukuran berbeda-beda dan fungsinya untuk untuk membantu mikropipet mengambil larutan. J$*g&$ S(r(*g: >lat untuk mengukur Cona hambat. T',+$*g$* A*$l'%'&: !imbangan digital yang fungsinya untuk menimbang berat sampel dan berat media. !imbangan ini bisa direset agar kembali ke 6 lagi. K$)$s: *ahan untuk menutup agar tetap stabil dan agar tidak terkontaminasi9 -ara pakainya adalah kapas dilipat seperti tabung9 kemidian ditutupkan di tabung reaksi. S)re$0er: >lat untuk meratakan bakteri di atas media agar merata. &ara pakainya yaitu dengan -ara begaruk-garukan di atas media sambil diputar media tersebut. =amun tetap didekatkan dengan api agar tetap steril. Bre$0er: >lat pemutar untuk membantu meratakan bakteri pada media. >lat ini adalah pasangan dari 3preader. O=e*: >lat untuk sterilisasi kering dan menghilangkan uap air. &ara ker:anya9 media dan bakteri dimasukan kedalam alat ini kemudian ditutup dan diatur suhu dan 'aktunya. P's$u: ;ntuk memotong.

BAB III KESIMPULAN *erdasarkan pratikum yang telah dilakukan dapat disimpulkan:

1. >lat-alat gelas9 yang terdiri dari: tabung treaksi9 tabung durham9 gelas piala9 labu $rlenmeyer9-a'an petri9 pipet tetes9 batang pengaduk9 dan -orong. 2. >lat-alat ukur9 yang terdiri dari: gelas ukur9 buret9 pipet mohr9 pipet ,olumetri-9 dan labu ukur. 3. >lat-alat sterilisasi9 yang terdiri dari: /toklaf9 *unsen9 dan filter membrane. #. Mikroskop9 yang terdiri dari: Mikroskop -ahaya dan preparat. %. >lat-alat nokulasi9 yang terdiri dari: 2arum ose dan 2arum preparat. (. >lat-alat lain9 yang terdiri dari: .aminar air flo'9 sentrifuge9 in-ubator9 'ater bath9 hot plane9 sha-ker9 -olony -ounter9 hand -ounter9 mikropipet9 tip9 :angka sorong9 timbangan analitik9 kapas9 spreader9 breader9 /,en9 dan pisau.