Analisis Sperma

ANALISIS SPERMA
Wahyu Siswandari Bagian Patologi Klinik Jurusan Kedokteran FKIK UNSOED
4/21/2014
WS_Analisis Sperma_LC14
Learning objectives :
Setelah mengikuti praktikum ini, diharapkan : Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan analisis sperma Mahasiswa mampu menginterpretasi hasil pemeriksaan sperma
4/21/2014
Referensi :
WHO Laboratory Manual for the examination of human semen and sperm-cervical mucus interaction. 4th ed. Cambridge University Press. 1999 Penuntun laboratorium WHO untuk pemeriksaan semen manusia dan interaksi semen-getah servik. Edisi 1. Balai Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta. 1988 Gandasoebrata R. Penuntun laboratorium klinik. Edisi 10. Dian Rakyat. Jakarta. 2001 Strasinger, di lorenzo. Semen. In urynalysis and body fluid. Philadhelpia. FA Davis co. 2008 WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen. 5th ed. 2010
4/21/2014 WS_Analisis Sperma_LC14 3
Pengumpulan bahan
Abstinensia min 2 hari ~ mak 7 hari Cara masturbasi Dikeluarkan di laboratorium atau sediaan dikirim ke laboratorium dalam waktu maksimal 1 jam sejak dikeluarkan Tempat botol/gelas kaca bermulut lebar atau botol plastik dgn syarat non toksik thd spermatozoa identitas penderita, tanggal pengumpulan dan lamanya abstinensia, jam ejakulasi Dikirim ke laboratorium pada suhu 20-370C
Alat dan bahan

Alat :

4/21/2014
mikroskop pipet tetes gelas / tabung / pipet ukur kaca objeck glass dan cover glass pipet leukosit bilik hitung Neubauer Improved (NI)
semen larutan Turk aquadest Larutan fikasasi metanol 96% Cat Giemsa
Bahan :
Jenis Pemeriksaan
Makroskopis Mikroskopis Antibodi yang melapisi sperma Biakan semen Analisis biokimia CASA ( computer aided sperm analysis)
4/21/2014
Pemeriksaan makroskopis
Warna Normal : putih kelabu homogen, butiran seperti jeli Abnormal : Jernih jumlah sperma sangat sedikit Merah kecoklatan sel darah merah Kuning penderita ikterus, minum vitamin Bau Normal : bau khas seperti bunga akasia Abnormal : bau busuk infeksi
Likuefaksi (mencairnya semen) Diamati pada suhu kamar dicatat waktu pencairan Normal : mencair dalam 60 menit, rata-rata 15 menit (jk semen tdk mencair dlm 60 mnt, utk pemeriksaan ditambahkan lar fisiologis atau ensim proteolitik) Volume tabung/gelas ukur dari kaca Normal : > 1.5 ml
Konsistensi
: Sampel diambil dgn pipet / ujung jarum biarkan menetes amati benang yang terbentuk Normal : benang < 2 cm atau sisa sampel di ujung pipet/ jarum hanya sedikit Cara
pH
Cara : Teteskan sampel pd kertas pH meter (stlh likuefaksi/ 30 mnt baca hasil setelah 30 dtk) Normal : pH 7,2 7,8 Abnormal : pH > 7,8 infeksi, waktu pemeriksaan pH < 7 azoospermia kemungkinan disgenesis vas deferens, vesika seminalis, atau epididimis
4/21/2014 WS_Analisis Sperma_LC14
Pemeriksaan mikroskopis
Pemeriksaan estimasi jumlah sperma Cara :
Teteskan 1 tetes sampel ke objek glass tutup dgn cover glass periksa di bawah mikroskop pembesaran 400 x px pada beberapa lapang pandang, pada suhu kamar Jumlah rata-rata sperma yang didapat dikalikan dengan 106 Jumlah rata-rata sperma yang didapat digunakan sebagai dasar pengenceran saat penghitungan dengan bilik hitung Neubauer Improved
4/21/2014
10
Tabel 1. Pengenceran berdasarkan estimasi jumlah sperma

Jumlah sperma / lapang pandang (400x) Pengenceran
< 15 15 40 40 200
1:5 1 : 10 1 : 20
> 200
1 : 50
4/21/2014
11
Motilitas sperma
Cara : 1 tetes sampel ke objek glass tutup dgn cover glass px dgn pembesaran 400x pd suhu kamar Px dlm 4 -6 lapang pandang pd 200 sperma Kecepatan gerak sperma normal 5 x panjang kepala sperma atau 0,5 x panjang ekor sperma atau 25 m/detik.
4/21/2014
12
klasifikasikan gerakan sperma : Motilitas progresif (PR) sperma bergerak aktif, lurus atau dlm lingkaran besar, dgn kecepatan adekuat Motilitas nonprogresif (NP) sperma bergerak, dalam lingkaran kecil , gerakan di tempat, atau gerakan lain di luar kriteria PR Tidak motil (IM) tidak ada pergerakan sperma Px ulang dengan tetesan sperma kedua Normal PR dan NP 40% (PR > 32%)
4/21/2014
14
4/21/2014
15
Pemeriksaan vitalitas sperma
Jika sperma motil < 40 % px vitalitas/sperma yang hidup dgn pengecatan supravital 1 tetes sampel segar + 1 tetes eosin 0,5% pd objek glass ditutup dgn cover glass 1-2 mnt diamati dgn mikroskop (pembesaran 400x) Hitung persentase jumlah sperma yang mati (terwarnai oleh cat) dengan yang hidup (tidak terwarnai oleh cat) Pemeriksaan ini untuk mengecek pemeriksaan motilitas Persentese sel mati < 58%
4/21/2014
16
D1, D2: sperma mati L : sperma hidup
4/21/2014
17
Morfologi sperma Cara :
1 tetes sampel ke salah satu ujung objek glass dibuat apusan sampel dikeringkan di udara difiksasi dgn metanol 96% keringkan Cat dgn Giemsa ( 30 mnt ) bilas dgn air bersih keringkan px dgn mikroskop pembesaran 400 x Hitung pd 200 sperma kepala, leher & ekor hasil yang didapat dibuat persentase
4/21/2014
18
Pengecatan (WHO, 2010): Papanicolaou, Shorr or DiffQuik stain is recommended

Sperma 1 2 3..dst
Normal
Abnormal Kepala / leher / ekor
200
4/21/2014
20
Neck
4/21/2014
21
4/21/2014
22
4/21/2014
23
4/21/2014
24
4/21/2014
25
Pemeriksaan elemen bukan sperma Cara :
penghitungan sel selain sperma : leukosit, sel epitel gepeng dll hitung dlm 100 sperma Penghitungan :
C=NxS 100
C : jumlah sel dalam juta / ml N : jumlah sel yang dihitung dalam 100 sperma S : jumlah sperma dalam juta / ml
Pemeriksaan hitung jumlah sperma Cara :
pipet leukosit & bilik hitung NI Pasang bilik hitung NI di miroskop dgn pembesaran 100x / 400x cari kotak hitung spt terlihat dlm gambar Penghitungan di kotak tengah yg td 25 kotak sedang masing-2 didalamnya terbagi menjadi 16 kotak kecil
WS_Analisis Sperma_LC14 27
4/21/2014
4/21/2014
28
4/21/2014
29
Hisap sampel dgn pipet leukosit sampai angka 0,5 hisap lart Turk sampai angka 11 (pengenceran 1 : 20) (Pengenceran lain berdasarkan estimasi jumlah sperma) Jumlah kotak sedang yang harus dihitung : jml sperma dlm 1 kotak sedang < 10 hitung 25 kotak jml sperma dlm 1 kotak sedang 10-40 hitung 10 kotak jml sperma dlm 1 kotak sedang > 40 hitung 5 kotak Buat rata-rata jumlah sperma hitung jumlah sperma & faktor koreksinya dgn aturan seperti tertera dalam tabel Normal : 15 jt/ ml
4/21/2014
30
Pengenceran
Jumlah kotak sedang yg dihitung
25
10
Faktor koreksi
1 : 10
1 : 20 1 : 50
10
5 2
4
2 0,8
2
1 0,4
Pengencer (WHO, 1999) : 50 gr NaHCO3, 10 ml 35% formalin, 0,25 gr tryptan blue dalam 1 l aquades
Contoh : Rata-rata ditemukan 50 sperma yang dihitung dalam 5 kotak sedang dengan pengenceran 1 : 20, maka jumlah sperma adalah : = 50/1 x 106 = 50 juta / ml Rata-rata ditemukan 20 sperma yang dihitung dalam 10 kotak sedang dengan pengenceran 1 : 20, maka jumlah sperma adalah : = 20/2 x 106 = 10 juta / ml
4/21/2014
32
Cara (menurut Gandasoebrata):

Hisap semen dengan pipet lekosit sampai angka 0,5 Kemudian, hisap aquadest sampai angka 11 kocok Teteskan ke dalam bilik hitung NI Hitung sperma dalam bilik hitung seluas 1 mm2 Jumlah yang didapat dikalikan 200.000 jumlah sperma / ml
4/21/2014
33
Interpretasi Hasil
Interpretasi hasil analisis sperma saat ini didasarkan atas 3 parameter pokok, yaitu :
Jumlah spermatozoa / ml % motilitas spermatozoa yang bergerak baik (kriteria PR dan NP) % morfologi spermatozoa normal
4/21/2014
34
Interpretasi Hasil
Normozoospermia Oligozoospermia Ekstrim Oligozoospermia Astenozoospermia Teratozoospermia
Jml sperma (juta/ml)

15 < 15 <5 15 15
% motil % morfo*
40 40 40 < 40 40 4 4 4 4 <4
Oligoastenozoospermia
Oligoastenoteratozoospermia Oligoteratozoospermia
4/21/2014
< 15
< 15 < 15
< 40
< 40 40
4
<4 <4
35
Interpretasi Hasil
Astenoteratozoospermia Polizoospermia Azoospermia
Jml sperma
15 250
% motil
< 40 40
% morfo
<4 4
Bila tidak dijumpai spermatozoa dari pemeriksaan sediment sentrifugasi sperma yang lebih dari 1 kali Bila semua spermatozoa tidak ada yang hidup, dinyatakan dalam pengecatan vital Bila ditemukan spermatozoa yang tersembunyi yaitu bila ditemukan dalam sediment sentrifugasi sperma Bila tidak ada semen /sperma yang keluar, meskipun pasien telah merasa mengeluarkan ejakulat
Nekroozoospermia
Kriptozoospermia
Aspermia
WHO, 2010
Pemeriksaan Antibodi
Ditujukanj thd Ab yg melapisi sperma infertilitas krn faktor imunologi Cara : immunobead test, mixed antiglobulin reaction test (MAR)
4/21/2014
37
Pemeriksaan biakan semen

jk didapatkan : tanda dan gejala infeksi kelenjar asesori, atau leukosit > 1 juta / ml prinsip : steril !
4/21/2014
38
Pemeriksaan analisis biokimia

Plasma semen asam sitrat, asam fosfatase, gama glutamil transpeptidase Kemampuan sekresi prostat Zn, asam sitrat Kemampuan sekresi vesika seminal fruktosa Kapasitas sekresi epididimis L karnitin
4/21/2014
39
CASA ( computer aided sperm analysis)

lebih teliti Dpt utk pemeriksaan rutin motilitas, jumlah, morfologi
4/21/2014
40
4/21/2014
41

Analisis Sperma

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Analisis Sperma

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

ANALISIS SPERMA

Wahyu Siswandari Bagian Patologi Klinik Jurusan Kedokteran FKIK UNSOED

Alat dan bahan

Tabel 1. Pengenceran berdasarkan estimasi jumlah sperma

D1, D2: sperma mati L : sperma hidup

Pengecatan (WHO, 2010): Papanicolaou, Shorr or DiffQuik stain is recommended

Abnormal Kepala / leher / ekor

Jumlah kotak sedang yg dihitung

Cara (menurut Gandasoebrata):

Jml sperma (juta/ml)

Pemeriksaan biakan semen

Pemeriksaan analisis biokimia

CASA ( computer aided sperm analysis)

Anda mungkin juga menyukai