TUGAS UAS

ELUSIDASI STRUKTUR
OLEH
Wahyuni W. Udi
SBF 031210036
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SETIA BUDI
SURAKARTA
2013
ISOLASI DAN ELUSIDASI STRUKTUR
SENYAWA FLAVONOIDA
DARI CROTALARIA ANAGYROIDES
ABSTRACT
Four flavonoid glycosides have been isolated from the leaves of Crotalaria
anagyroides. The glycosides are 1) apigenin 7-O---apiofuranosyl !1"#)-
gluco pyranosida$ %) apigenin 7-O---apiofuranosyl !1"%)--glucopyranoside$&)
chrysoeriol 7-O---apiofuranosyl !1"#)---glucopyranoside$ ') chrysoeriol 7-
O---apiofuranosil !1"%)---glucopyranoside. Their structures (ere elucidated
by spectroscopic methods of )*$ 1+$ 1&C and %-,-. /0T$ CO12 and
+-3C e4periments. 5ey-(ords6 Crotalaria anagyroides$ apiin$ apigenin 7-O--
-apiofuranosyl !1"#)--glucopyranosida$ Chrysoeriol 7-O---apiofuranosyl!1"
%)---glucopiranosida.
PENDAHULUAN
1enya(a flavonoida saat ini banya7 mendapat perhatian 7arena$ 7elompo7
senya(a ini dilapor7an mempunyai berbagai a7tifitas farma- 7ologis seperti6
antinflamasi$ anti-o7sidan$ antiba7teri dll. 1enya(a ini tersebar pada tumbuhan
bai7 ting7at rendah maupun tinggi$ pada hampir pada setiap bagian tanaman.
alam rang7a mencari senya(a flavonoid a7tif baru perhatian tertu8u pada
genus Crotalaria !-un9im$ et al$ %::&a dan b). ;enus ini merupa7an genus besar
diper7ira7an terdiri dari lebih dari #:: spesies. 1ebagian besar tumbuh di <fri7a
dan =ndia. ;enus ini umumnya menghasil7an senya(a al7aloida piroli>idin
!<bega> et al$ 1?@7). 1elain itu beberapa senya(a flavonoida baru berhasil
diisolasi dari tanaman genus ini !Chaturvedi et al$ 1?@7A Ban8ala and -a8inda$
1???). C. anagyroides banya7 tumbuh di daerah tropis. Tanaman ini di =ndonesia
diguna7an sebagai pupu7 hi8au dan daunnya diguna7an sebagai pa7an terna7.
+anya ada satu literatur studi fito7imia dari tanaman ini$ dimana 7ulit batangnya
dilapor7an mengandung apiin !1ubramanian and ,agara8an$ 1?7:). Tu8uan dari
penelitian ini adalah mengisolasi dan mengidentifi7asi senya(a flavonoida yang
terdapat pada daun C. anagyroides.
BAHAN DAN METODA
3ahan6
aun C. anagyroides diperoleh dari 3ogor. Tanaman dideterminasi di +erbarium
3ogoriense. 1emua bahan 7imia yang diguna7an ber7ualitas pro analisis diperoleh
dari Ba7o !Cepang).
<lat 6
1pe7trum )* dibuat dengan 1himad>u )*-&#D spe7trofotometer. 1pe7trum 1 +
!':: -+>) dan 1& C ,-. !1:: -+>) diperoleh dengan C/OE F':: dalam
-1O-d# dengan internal standar T-1. 5C5T semipreparatif dila7u7an dengan
;as7uro 5ogyo model D7# dileng7api dengan dete7tor )vide4 1::-== !7olom6
T15 gel O1-@:Ts$ %D: 4 1: mm$ eluen ':G -F dengan la8u alir 1$# mlH
menit). 5C5T analiti7 dila7u7an dengan Tosoh CC01 dileng7api dengan dete7tor
Tosoh )*-@:%: !7olom6 T15 gel O1-@:T1$ %D: 4 '$# mm$ eluen &DG -F
dengan la8u alir :$# mlHmenit).
-etoda6
/7stra7si dan =solasi aun tanaman di7ering7an dengan cara diangin-angin7an
dan terhindar dari cahaya matahari langsung. 1etelah 7ering 7emudian diserbu7.
1e8umlah!& 7g) serbu7 direflu7s dengan -eO+ D:G. /7stra7 yang diperoleh
dipe7at7an dengan rotary vacuum evaporator. .esidu yang diperoleh dicuci
dengan 7loroform ber7ali-7ali$ untu7 menghilang7an 7lorofil. +asil e7stra7s
di7ering7an dengan free>e dryer. /7stra7 !& g) yang diperoleh 7emudian
difra7sinasi dengan 7olom 1ephade4 E+-%: !'D !7 cm) mengguna7an eluen
dimetil formamida !-F) D:G. +asil fra7sinasi dimonitor serapannya dengan
spe7trofotometer )* pada pan8ang gelombang &D: nm$ diperoleh ' fra7si. Fra7si
& !%#? mg) dan ' !1$D g) dipisah7an lebih lan8ut dengan mengguna7an 5C5T
semipreparatif. Fra7si yang menun8u77an punca7yang sama di7umpul7an dan
diuap 7an dengan rotary vacuum evaporator. Cairan 7ental yang diperoleh
di7ering7an lebih lan8ut dengan free>e dryer$ dan diperoleh senya(a 1 !&% mg)$
% ! @7 mg)$ & ! '' mg) dan ' !'7mg).
HASIL DAN PEMBAHASAN
0ada e7stra7si daun C. anagyroides dengan -eO+ D:G diperoleh larutan 7ental
ber(arna 7uning 7ehi8auan. 1etalah dicuci dengan 7loroform (arna larutan
men8adi 7uning muda$ 7arena 8umlah 7lorofil ber7urang. 5andungan 7lorofil
rendah diharap7an tida7 mengganggu proses isolasi. Fra7si & dan ' dari
1ephade4 E+- %: dipisah7an lebih lan8ut 7arena memperlihat7an pola
7romatogram yang sama dan mengandung flavonoid relatif tinggi dibanding7an
dengan fra7si lainnya. Fra7si ini pada +0EC analisis memberi7an ' punca7 besar
!;ambar 1). 5eempat punca7 tersebut dipisah7an lebih lan8ut dengan 5C5T
semipreparatif.
1enya(a 1- ' berupa hablur 7uning muda. 3erdasar7an pergeseran pan8ang
gelombang pada spectrum )* pada spe7trofotometer menun8u77an adanya inti
flavonoida. =nti flavon tersebut memili7i gugus hidro7si pada posisi C-D. +al ini
ditun8u77an adanya pergeseran batochromic pada penambahan <lCl&H +Cl$ tetapi
inti tersebut tida7 menun8u77an adanya gugus o-dihidro7si pada cincin 3$ 7arena
tida7 memberi7an pergeseran 7imia pada penambahan ,aO<cH+& 3O& !-abry
et al. 1?7:). 3erdasar7an 8umlah sinyal pada spectrum 7arbon ,-. !Tabel%)$
senya(a 1- ' memili7i % gugus gula. 0ada daerah magneti7 rendah spe7trum
proton ,-. senya(a 1 !Tabel 1) menun8u77an adanya # punca7 yang berasal
proton aromatis. 1inyal pada I 7$D@ !1+$ d$ CJ 1$@ +>)$ 7$#1 !1+$ dd$ CJ 1$@ dan
@$D+>) dan #$?D !1+$ d$ CJ @$D +>) menun8u77an tipe 7ate7ol pada cincin 3
!Tabel 1).1edang7an sinyal pada I #$'' !1+$ s) dan #$@D !1+$ s) merupa7an sinyal
proton yang teri7at masing-masing pada C-# dan C-@. 3erdasar7an data tersebut
inti flavon tersebut tersubstitusi pada C-D$ C-7$ C-&K dan C-'K. 1inyal pada I &$?:
!&+$ s) merupa7an ciri 7has dari gugus meto7si. ;ugus ini berdasar7an spe7trum
+-3C teri7at pada C-&K. engan demi7ian inti flavon tersebut adalah chry
soeriol. 1pe7trum proton ,-. 8uga menun8u77an sinyal pada rentang I &$%@-
D$&1. 1inyal ini memberi7an crosspea7 dengan 11 sinyal 7arbon !I#:.% - 1%1.%)
pada spe7trum C-+ CO12. 3erdasar7an spe7trum 1 + dan 1& C ,-. senya(a
1$ sinyal tersebut berasal gugus gula apiosa dan glu7osa
;ambar 1. 0rofil 7romatogram fra7si ' e7stra7 -eO+ setelah fra7sinasi
dengan 1ephade4 E+-%:.%D *ol. ==$ ,o.1$ <pril %::D !<gra(al 1??%).
3erdasar7an spe7trum +-3C senya(a 1$ glu7osa teri7at pada C-7$ sedang7an
apiosa teri7at pada C-#L. engan demi7ian senya(a 1 dapat disimpul7an
sebagai chrysoeriol 7-O--- apiofuranosyl !1"#)---glu7opiranosida !3ucar et
al. 1??@). 1tru7turnya dapat dilihat pada ;ambar %.
1pe7trum 1 + dan 1& C ,-. senya(a % hampir sama dengan senya(a
1. +anya ter8adi pergeseran sinyal pada spectrum 1& C ,-. yang berasal dari
C-%L. +al ini dia7ibat7an pada C-%L. +al ini diper7uat dengan spe7trum +-3C
senya(a %$ yang menun8u77an adanya long-range cor- relation antara sinyal
yang berasal dari +-%L dan C-1L9. 3erdasar7an hal tersebut stru7tur senya(a %
dapat ditentu7an sebagai chrysoeriol 7-O- -- apiofuranosyl!1"%)--- glu7o
piranosida !3is(ass et al. 1?77). 1tru7tur senya(a tersebut dapat dilihat pada
;ambar %

. 1pe7trum proton ,-. senya(a & !Tabel 1) mirip dengan spe7trum
senya(a 1 dan %$ hanya pada cincin 3 senya(a % menun8u77an tipi7al para-
hidro7si$ yaitu sinyal pada I 7$?D !%+$ d$ CJ @$D +>) dan #$?' !%+$ d$ CJ @.D +>).
1edang7an sinyal inti flavon lainnya mirip dengan senya(a 1 ataupun %$ 7arena
itu inti flavon tersebut adalah apigenin. 0ergeseran 7imia sinyal pada spe7trum 1
+ dan 1& C ,-. senya(a & yang berasal dari gugus gula sama dengan sinyal
pada spectrum ,-. senya(a 1. +al ini 8uga didu7ung oleh spectrum +-+
CO12$ C-+ CO12 dan +-3C senya(a &. 3erdasar7an data tersebut senya(a &
ditentu7an sebagai apigenin 7-O---apio-furanosyl !1"#)--glu7opyranosida
!5ane7o et al. 1??D). 1tru7tur senya(a tersebut dapat dilihat pad ;ambar &.
1pe7trum proton dan 7arbon ,-. senya(a ' hampir mirip dengan senya(a &$
hanya terdapat pergeseran sinyal pada I 7D$7 yang berasal dari C-%M9. engan
demi7ian senya(a dapat disimpul7an sebagai apigenin 7-O---apiofuranosyl !1"
%)--glu7opiranosida$ atau di7enal sebagai apiin. 1tru7turnya dapat dilihat pada
;ambar %. 5eempat senya(a tersebut sudah dilapor7an sebelumnya$ tetapi belum
pernah ada laporan tentang isolasi senya(a tersebut dari daun C. anagyroides.
KESIMPULAN
3erdasar7an hasil tersebut diatas senya(a flavonoida yang terdapat pada
daun C. anagyroides adalah6 apigenin 7-O---apiofuranosil !1"#)--
glu7opiranosida$ apigenin 7-O---apiofuranosil !1"%)--glu7o- piranosida$
chrysoeriol 7-O--- ;ambar %. 1tru7tur 7imia dan 7orelasi +-3C yang penting
dari senya(a 1$ %$ &$dan '. -<C<E<+ =E-) 5/F<.-<1=<, %@ apiofuranosil
!1" #)---glu7o- piranosida dan chrysoeriol 7-O--- apiofuranosil !1" %)---
glu7o- piranosida.
1enya(a 1 )* Nma4 -eO+ nm6 %D%$ %#?$ &'#A -eO+ O ,aO+6 %#1$ ':1A
<lCl & 6 %7#$ %?# sh$ &7&sh$ &?%A <lCl & O+Cl6 %77$ %?#sh$ &D@$ &@@A ,aO<c6
%#:$ &::sh$ ':@A ,aO<c O +& 3O& 6 %D&$ %#?$ &'@.
1enya(a % )* Nma4 -eO+ nm6 %D1$ %#@$ &'#A -eO+ O ,aO+6 %D%$ ':%A
<lCl & 6 %7#$ %?7$ &?%A <lC & O +Cl6 %7@$ %?7$ &D@$ &@?A ,aO<c6 %#:$ %?'$ ':?
,aO<c O +& 3O& 6 %D&$ %#?$ &'?.
1enya(a & )* Nma4 -eO+ nm6 %#@$ &&'A -eO+O ,aO+6 %#@$ &@#A <lCl
& 6 %#@$ &@?A <lCl & O +3O& 6 %#?$ &&@A ,aO<C6 %77$ &::$ &'?$ &@'A ,aO<cO
+Cl6 %7@$ &::$ &''$ &@&.
1enya(a ' )* Nma4 -eO+ nm6 %#@$ &&'A -eO+ O ,aO+6 %#@A &@#A
,aO<c6 %#?$ &?:A ,aO<c O +& 3O& 6 %#?$ &':A <lCl &6 %7#$ &::$ &''$ &@'A
<lCl & O +Cl6 %77$ &:1$ &'?$ &@'.
<c7no(ledgements
The author than7s r. T O>a(a$ Tsu7uba )niversity$ Capan for ':: -+> ,-.
measurements.
<FT<. 0)1T<5<
<bega>$ 3$ <tnafu$ ;$ uddec7$ + and 1nat>7e$ ;$ 1?@7. -acrocy- clic
pyrroli>idine al7aloids of Crotalaria rosenii.
Tetrahedron$ '&!1')6 &%#&-&%#@. 3is(ass$ 5 -$ <li$ - / and +aPue - /$ 1?77.
=solation of chrysoe- riol-7-O--- glucopyranosidyl- !%"1)--apiofuranoside.
=ndian C. Chem.$ 1ection 3$ 1Db$ &?#.
3ucar$ F$ ,inov$ 1$ =on7ova$ =$ 5artnig$ T$ 1chubert-Qsilavec>$ -$ <senov$ = and
5onu7lugil$ 3$ 1??@. Flavonoids from 0hlomis nissolii. 0hytochemistry$ '@!&)6
D7&-D7D.
Chaturvedi$ .$ 0ant$ ,$ ;arg$ +1 and 3ha7uni$ 1$ 1?@7. =soflavonoids of
Crotalaria madurensis. C. ,at. 0rod.$ D:!%)6 %##-%#?.
5ane7o$ T$ 1a7amoto$ -$ Ohtani$ 5$ =to$ <$ 5asai$ .$ 2amasa7i$ 5$ and 0adorina$
B;$ 1??D. 1ecoiridoid and flavonoid glycosides from ;onocaryum calleryanum.
0hytochemistry &?!1)6 11D-1%:.
-abry$ TC$ -ar7ham$ 5. and Thomas$ -3$ 1?7:. The 1ystematic identification
of flavonoids. ,e( 2or7$ 1pringer$ *erlag. -un9im$ <$ ,egishi$ O and O>a(a$
T$ %::&. <ntio4idative com- pounds from Crotalaria sessiliflora. 3iosci.
3iotechnol. 3iochem.$ #7 !%)6 '1:-'1'.
-un9im$ <$ =soda$ +$ 1e7i$ -$ ,egishi$ O$ and O>a(a$ T$ %::&. /strogenic and
acetylcholinest erase-enhancement activity of a ne( isoflavone$ 7$%K$'K-trihy-
dro4y isoflavone-'K-O---glu- copyranoside from Crotalaria sessiliflora.
Cytotechnology$ '&6 1%7- 1&'.%? *ol. ==$ ,o.1$ <pril %::D
1ubramanian$ 11 and ,agara8an$ 1$ 1?7:. Flavonoids of three Crotalaria species.
0hytochemistry$ ?6%D@1-%D@'.
Ban8ala$ CCB and -a8inda ..T$ 1???. Flavonoid glycosides from Crotalaria
podocarpa. 0hytochemistry$ D16 7:D-7:7.