Matriz extracelular Las eélulas de los microorganismos multicelulares se inte- gran para formar relaciones estructurales y funcionales conocidas como tejidos. Cada uno de los cuatro tejidos bisicos del cuerpo -epitelio, tejido conectivo, miiscula y tejido nervioso- posee caracteristicas especificas y definidas que se detallan en eapitulos subsecuentes, Sin embargo, todas los tejidos estin compuestos de eélulas y una matriz extracelular, un complejo de macromoléculas inanimadas elaborado por las células y eliminado por ellas hacia el espacio extracelular: Algunos tejidos, como el epitelio, forman Miminas de células con séio una eantidad eseasa de matriz extracelu- lar. En el extremo opuesto se encuentra el tejido conec- tivo, constituido prineipalmente de matriz extracelular, con un nimero limitado de células diseminadas en toda Ja matriz. Las eélulas conservan sus relaciones con la matriz extracelular y forman uniones especializadas que Jas unen con las macromoléculas circundantes. En este capitulo se analizan la naturaleza de la matriz extracelu- lar y las relaciones de unién que forman entre sf las ¢€- Jus, La matriz extracelular del tejido conectivo, el tejido conectivo mas comrin del cuerpo, se compone de una sustaneia fundamental hidratada similar a un gel, eon fibras incluidas en ella. La sustancia fundamental resiste fuerzas de compresién y las fibras soportan fuerzas de tensién. El agua de hidratacién permite el intercambio répido de nutrientes y productos de desecho transportados gor el guido watracelar a medida quo se fife’ amv le la sustancia fundamental (fig. 4-1). SUSTANCIA FUNDAMENTAL 1a sustancia fundamental es un material amorfo semejante 2 ge! compuesto de glucosaminoglicanos, proteoglicanos y glucoproteinas La sustancia fundamental se integra con glucosa- minoglicanos (GAG), proteoglicanos y glucoproteinas de adhereneia. Estas tres familias de macromoléculas forman diversas interacciones entre si, con fibras y las células de tejido conectivo y epitelio (fig. 4-2). Glucosaminoglicanos Los GAG son cadenas parecidas a bastones, largas, con carga negativa y de disacaridos repetidos que tienen fa capacidad de unir grandes cantidades de agua. Los GAG son polisacéridos largos, inflexibles, sin rami- ficaciones, compuestos de cadenas de unidades repetidas de disaciridos. Uno de los dos disacéridos de repeticién siempre es un aztear amino (N-acetilglucosamina o V-acetilgalactosamina); el otro es de manera caracteristica un deido urénico (idurénico o glucurénico) (cuadro 4-1). Debido a que el azticar amino suele sulfatarse y dado que estos aziicares también tienen grupos carboxilo que se proyectan desde ellos, tienen una carga negativa y por tanto atraen cationes, como sodio (Na*). Una concentracién alta de sodio en la sustancia fundamental atrae Kquido extracelular, que (por hidratacién de la matriz intercelu- Ins) favorece la resistencia a fucrzas de compresion. A medida que estas moléculas entran en proximidad cercana entre si, su carga negativa las repele, lo qe da lugar a que tengan una textura resbaladiza, como lo demuestran el lustre del moco, el humor vitreo del ojo y el liquide sinovial. ‘Con excepcién de uno de los GAG mayores de la matriz extracelular, todos los demas son sulfatados y consisten en menos de 300 unidades de disacaridos repetidas (cuadro 441). Los GAG sulfatados inelayen sulfato de queratén, ulfato de heparén, heparina, sulfato de condroitina 4, sul- fato de condroitina 6 y sulfato de dermatan. Estos GAG se unen a menudo dé manera covalente a moléculas de proteinas para formar proteoglicanos. EI tinico GAG no sulfatado es el éeido hialurénico, que puede tener hasta 25.000 unidades de disacésidos repetidas. Es una macro- molécula enorme que no forma enlaces covalentes eon moléculas de protefnas (aunque los proteoglicanos se unen a ella mediante proteinas de enlace). 6970 == Matriz extracelular Esquema del luo de liquide tsar EI plasma de capilares y ‘nls penetra en espacios de tejdo coneetivo com aque se fitra através de la sustancia fundamental El liquide extrucelular regres nuevanente a las wénulas y tambign alos eapilares lnftien, Proteoglicanos Los proteaglicanos constituyen una familia de ‘macromoléculas; cada una de ellas esta compuesta de un centro proteico al cual se unen de manera covalente los {glucosaminogiicanos. Cuando los GAG sulfatados forman uniones covalen- tes con un centro proteico, constituyen una familia de ‘macromoléculas conocida como proteoglieanos, muchos de los cuales ocupan dominios enormes. Estas estructuras grandes se ven como una brocha en un frasco, con el centro proteico que semeja el tallo de alambre y los diversos GAG sulfatados proyectindose desde su superficie en el espacio tridimensional, igual que las cerdas de la brocha (fig. 4-3). Los proteoglicanos pueden tener un tamafio variable, de unos 50000 daltones (decorin y betaglicdn) hasta 3 millones de daltones (agrecén). Los centros proteicos de Ins peomoglicanon se eldhscaa oa ol tain cadaplienion rugoso (RER) y los grupos GAG se unen de manera covalente ala protefna en el aparato de Golgi. En este tiltimo también cure la sulfatacidn, catalizada por sulfotransferasas, y la epimerizacién (reordenamiento de diversos grupos alrededor de dtomos de carbono de las unidades de wsieur) Muchos proteoglicanos, en especial el agreesin, una macromolécula que se encuentra en cartilago y tejido conectivo, se unen al écido hialurénico (fig. 4-3). La forma de uni6n incluye una interaccién i6nica no covalente entre Jos grupos azsiear del cide hialurénico y la proteina central de la molécula de proteoglucano. La unién se refuerza por petetans de esdace pepuutas Gro foram uxiones te protefna central del agrecén y los grupos de aziicar del {cido hialurénico. Puesto que este siltimo puede tener 20 jim de largo, el resultado de su vinculacién es un compuesto de agreciin que ocupa un volumen enorme y puede tener una masa molecular tan grande como varios cientos de millones de déltones. Esta molécula inmensu tiene a su cargo el estado de gel de la matriz. extracelular y actia como una barrera para la difusién rapida de depositos acuosos, por ejemplo cuando se observa la desaparicién lente de una burbuja acuosa después de inyectarla en forma subdérmica. CORRELACIONES CLINICAS Muchas bacterias patégenas, como Staphylococcus ‘qureus, secretan hialuronidasa, una enzima que segmenta écido hialurénico en miiltiples fragmentos Peduefios y que convierte con frecuencia el estado de gel de la matriz extracelular en un estado de sol. La consecuencia de esta reaceién es permitir la diseminacién répida de las bacterias a través de los espacios del tejido conectivo. Fig. 4-2. Fotomicrografia de luz de tejido concetiva areolar que muestra céluas, bras de coligena (Co), bras eléstcas (EF) y sustancia fandamental (GS) (> 182),Matriz extracelular = Cuadro 4-1. Tipos de glucosaminoglicanos (GAG) Enlace Masa Repeticion de Azticar amino cocalente cac molecular (Da) disacdridas sulfatcda a proteina —_—_Localizavién en el ewerpo Acido hae 10-10° —— Ghucuronato y Ninguna No Casi todo el tejido conectivo, Inrénico ‘N-acetilghacosamina Tiquido sinovial, earilago, der- Sulfato de que- 10 000-30 000 Galactosay N-acetilghi- N-acetilgluco- St Cartflago, eGmea, disco inter- ratén cosaminia samina vertebral Sulfato de 15 000-120 000 Glucuronato (0 iduro-_N-aeetilgalac- Si —_Vasos sangufneos, palinén, heparin rato) y N-acetilgalac- tosamina ‘émina basal tosamina Heeparina 125.000-20 000 Glucuronato (0 iduro-_Nvacetilglu- No Grinulo de célula cebada, nato) y N-acetilgluco- cosamina hfgado, pulmén, piel Sulfato de con- 10 000-30 000 Glucuronato y N-acetilgalae- Sf Cartilago, hueso, c6rnea, vasos Neacetigalactosamina —tosamina sangurineos 10 000-30 000 Glucuronato y ‘N-acetilgalac- Si Cartflago, gelatina de Wharton, N-acetilgalactosa- tosamina, vvasos sanguneos Sulfato de der 10.000-30 000 Ghucaronato (o iduro-_ N-acetilgalac- Si Valvulas eardiaeas, piel, vasos matin nato) y N-acetilyalae- tosamina sanguineos tosamina Funciones de los proteoglicanos Los proteoglicanos tienen miltiples funciones. Al ocu- par un gran volumen, resisten la compresién y retrasan el movimiento répido de microorganismos y eéhilas metasté- sieas. Ademas, en vineulo con ki mina basal, forman filtros moleculares con poros de tamafios y distribuciones de carga variables que seleceionan y retardan maeromoléculas dle manera seleetiva a su paso por ellos. {Los proteolcaos también tienen sito de ann para ciertas moléculas de sefialamiento, como el factor beta de transformacién del erecimiento, Mediante la unién de estas moléculas de sefialamiento, los proteoglicanos pueden impedir su fineién evitando que las moléeulas Heguen a sus destinos o concentriindolas en un sitio espectfico Algunos proteoglicanos, como los sindeeanos, en lugar de liberarse hacia la matriz extracelular, permanecen unidos ala membrana de la célula, Las proteinas centrales de los sindecanos actiian como protefnas transmembranales yy se unen a los filamentos de actina del citosqueleto. Sus moléculas extracelulares se unen a componentes de la matriz. extracelular y permiten asf que la eélula se fije a componentes macromoleculares de la matriz. Ademés, los sindecanos de los fibroblastos funcionan como correcep- tores porque unen el factor de ereeimiento de fibroblastos y lo presentan a receptores de la membrana celular en Su eereania, Glucoproteinas Las glucoproteinas de adhesion celular tienen sitios de Uunién para varios componentes de la matriz extracelular y moléculas de integrina de la membrana celular que facilitan la union de células a la matriz extracelular. La capacidad de las eélulas para adherirse a com- ponentes de la matriz extracelular es mediada en gran parte por glucoproteinas de adhesion celular. Estas ‘macromoléculas grandes tienen varios dominios, uno de los euales cuando menos suele unirse a proteinas de la superficie celular lamadas integrinas, una para fibras de coligena y otra para proteoglicanos. En esta forma, las glucoproteinas de adhesin unen entre sf los diversos componentes de los tejidos. Los principales tipos de ghuco- protefnas de adhesin son fibronectina, laminina, entactina, tenascina, condronectina y osteonectina, La fibroneetina es un dimero grande compuesto de dos subunidades polipeptidicas similares, cada una de al- rededor de 220 000 diltones, unidas entre sf en sus extre- ‘mos carboxilo mediante enluees disulfuro, Cada brazo de esta macromolécula en forma de V tiene sitios de unién para diversos componentes extracelulares (p. e, colagena, heparina, sulfato de heparin y dcido hialurénico) y para Integrinas de la membrana cellar. La regi6n de la fibrone- ctina especifica para adherirse a lt membrana celular tiene72 == Matrie extracelular Motécula de deide hialurénica Fibres de colégena ‘Acido Pialurénico Proteina de enlace Proteogiicano __Cakégena tipo 1) Fig. 4-3. Esquems de la relacién de moléeulas de agrecén con fibras fe coligena, El recuadro muestra una amplificacion de la moleeula de agreed, que indica la proteina central de la moleula de proteoglieano ala cua se fjan los glucosaminoglicanos, La proteina central esta unida al écido hislurSnieo por proteinas de enlace. (Adaptado de Faweett DW Bloom and Faweetts A Textbook of Histology. 11th ed. Philadelphia, WB Seunders, 1956.) la seeuencia de tres residuos arginina, glicina y aspartato, y se conoce como secuencia RGD. Esta secuencia de aminoécidos es caructeristica del sitio de unién de inte~ gun muchas glucoprotefnas de adhesion. Aunque la ibronectina la producen prineipalmente células de tejido conectivo, que se denominan fbroblastos, también se encuentra en Ja sangre como fibronectina del plasma. Ademés, puede unirse de manera temporal a la membrana plasmatica como fibronectina de la superficie celular. La fibronectina marca las vias migratorias para células embrionarias de tal manera que las células én migracién del microorganismo en desarrollo pueden llegar a su des- tino, La laminina es una glucoproteina muy grande (950 000 daltones), compuesta de tres cadenas polipeptidicas gran- des, A, B, y Bs. Las cadenas B se envuelven alrededor de la cadena A para formar un patrén de tipo transversal de uuna cadena larga y tres cortas. Las tres cadenas se conservan en posicién por enlaces disulfuro, La localizacién de la laminina casi siempre se limita rigidamente a la Kimina basal; por consiguiente, esta glucoprotefna tiene sitios de unién para sulfato de heparan, cokigena tipo IV, entactina y la membrana celular. La gucoproteina sulfatada entactina se une a la molé- cula de laminina en donde se encuentran entre sf los tres brazos eortos de dicha molécula. La entactina también se tune a la colgena tipo IV y facilita ast la uni6n de Taminina a la malla de cokigena. La tenaseina es una gucoproteina grande compuesta de seis cadenas polipeptidicas unidas entre sf por enlaces disulfuro. Esta macromolécula, que semeja un insecto cuyas seis patas se proyectan en forma radial desde un cuerpo central, tiene sitios de unién para los proteogli- anos sindecanos transmembranales y para fibronectina. La distribucién de la tenascina suele limitarse a tejido embrionario, en donde marca vias migratorias para células especificas La eondronectina y la osteonectina son similares a la fibronectina, La primera tiene sitios de unién para colagena tipo I, sulfato de condroitina, éeido hialurdnico e integrinas de condroblastos y condrocitos. La osteonectina posee dominios para coliigena tipo I, proteoglicanos ¢ Integrinas de osteoblastos y osteocitos. Ademas, puede facilitar la unién de cristales de hidroxiapatita de calcio a coldgena tipo T en el hueso, FIBRAS las fibras de colagena y las elasticas, las dos proteinas fibrosas principales del tejido conectivo, tienen propiedades bioquimicas y mecénicas distintivas como consecuencia de sus caracteristicas estructurales. Las fibras de la matriz extracelular proporcionan fuerza de tensién y elasticidad a esta sustancia. Los histélogos clasicos describieron tres tipos de fibras con base en su morfologia y reactividad con colorantes histol6gicos coligena, reticular y elistiea (fig. 4-2), Aunque hoy en dia se sabe que las fibras reticulares son de hecho un tipo de fibras de colégena, muchos histélogos conservan el término fibras reticulares no sé6lo por razones hist6ricas sino también por conveniencia euando describen drganos que poseen grandes cantidades de este tipo particular de colgena. Fibras de colagena: estructura y funcion Las fibras de colagena estan compuestas de subunidades de tropocolégena cuya cadena alfa de secuencias de ‘aminodcidos permite fa clasificacion de colégena cuando menos en 15 tipos de fibras diferentesLa capacidad de la matriz extracelular para soportar fuerzas de compresion se debe a la presencia de la matriz hidratada formada por GAG y proteoglicanos. Las fuerzas da tansén lat resison films dela protstna waldgena 30 elistica, correosas y fuertes. Esta familia de protefnas es muy abundante y constituye alrededor del 20% del total de protefnas en‘el cuerpo. La colégena forma una fibra flexible (fig. 4-4), cuya fuerza de tensién es mayor que la del acero inoxidable de didmetro comparable. Las grandes acumulaciones de fibras de coligena ap. recen de color blanco brillante en un individuo vivo; en consecuencia, los haces de fibra de colégena también se denominan fibras blancas. Las fibras de coliigena del tejido conectivo suelen tener un didametro menor de 10 pm y son incoloras cuando no estén tefiidas. Cuando se tifien con hematoxilina y eosina, aparecen como haces de fibras de color rosa, largas y onduladas. Las fotomicrografias de fibras de colégena contrastadas con metales pesados muestran bandas transversales a intervalos regulares de 67 nm, una propiedad tipica de estas fibras formadas por agregados paralelos de fibrillas nds delgadas de 10 a 300 nm de diémetro (fig. 4-5). Las fibrillas estén formadas por un ensamble altamente regular de subunidades més pequenias y uniformes, las moléculas de tropocolgena, cada una de 280 nm de largo y 1.5 nm. de didmetro. Las moléculas individuales de tropocolagena estin compuestas de tres cadenas polipeptidicas, llamadas cadenas alfa, envueltas entre sf en una configuracién heli- coidal triple. Cada cadena alfa posee alrededor de 1.000 residuos aminodeidos, Cada tercer aminoécido es glicina y la mayor parte de los aminodcidos restantes esti compuesta de prolina, hidroxiprolina e hidroxilisina. Se piensa que, en virtud de su tamano pequeno, la glicina permite la vineulacién estrecha de las tres cadenas alfa; los enla- ces de hidrégeno de la hidroxiprolina conservan juntas las tres cadenas alfa; y la hidroxilisina permite la forma. 4-4, Fotomicrografla electisnica de bare de haces de fibra de coldgena del epi neurio del nervio citico de rata, El hz de colégenaesté compuesto de haces de fbras més finas (2 054). (Tomado de Ushiki T, Ide C: Three.dimensional organization of the collages, Abril in the rat sciatic nerve as revealed by transmission and scanning electron meroscopy Gell Tissue Res 260:175-184, 1990. Copyright Springer-Verlag Matriz extracelular = «= 73 cidn de fbrillas por la unién de moléculas de coligena en- tre si Aunque se conocen cuando menos 15 tipos diferentes de colgena, de acuerdo con la seeuencia de aminosci- dos de sus cadenas alfa, en este texto s6lo tienen interés seis de ellas, Cada cadena alfa esté codificada por un iicido ribonucleico mensajero (mRNA) separado. Estos diferentes tipos de colégena se localizan en regiones especificas del ‘cuerpo, en donde tienen varias funciones (cuadro 4-2) = La coligena tipo I, el tipo més comin, forma fibras gruesas y se encuentra en tejido conectivo, hueso, dentina y cemento (fig. 4-6) = La colagena tipo II forma fibras més delgadas y se encuentra casi de manera exclusiva en las matrices de cartilago hialino y elastico = La coligena tipo IIT también se denomina fibra reticular porque se pens6 que diferfa de la colége- na, Hoy en dfa se sabe que la fibra reticular es un tipo de colgena que se_glucosila intensamente y forma fibras delgadas de 0.5 a 2.0 pm de diametro. Debido al gran contenido de carbohidratos, las fbras de colégena tipo IIT se tiften de manera preferencial por sales argénticas 0 la reaccién del Acido peryédico de Schiff (PAS) = La coldgena tipo IV no forma fibras ni muestra la periodicidad de 67 nm, En Ingar de ello, crea una malla de moléculas de procoligena entremezcladas entre s para formar una alfombra de sostén de la mina basal = La colagena tipo V forma fibrillas muy delgadas, posee periodicidad de 67 nm y se relaciona con la coligena tipo I = La colagena tipo VII forma agregados pequefios, que a somion ences Metin de fanclaje, que aseguran a lamina basal a los haces subyacentes de fibra de coligena tipos Ty TIL74 wa Matriz extracelular Musoulo Fibila Tiple nélice de ‘ropocolagena Fig. 4-5. Esquema de los eomponentes de unaibrade coligena, Ladisposicin dened de las molgeutas de tropocoligena da hug las regiones iperpuesta qu explican las bandas transversles de 67 nm de Ia coligena tipo I. Regién de imersioo Fig. 4-6. Fotomicrografa clectrénica de fibras de coli endoneusio; P, perineur (22.463), (Tomado de UshikiT, Ide C: Three-dimensional onganization of the collagen fibrils in the rat selatie nerve, as teveaed by teensiseey and scanning electron microscopy. Cell Tissue Res 260-175-181 1990. Copyright Springer-Verlag) ena del perineutio del nervioelitica de rata. Ep, epineurio:EMatriz extracelular Cuadro 4-2. Principales tipos de colagena y sus caracteristi Tipo Formula Cétulas que las molecular molecular sintetizan Puncién Localizacién en el cuerpo 1 [al(1)]:020) —Fibroblasto, osteo- Resiste la tensién Dermis, tendén, ligamen- blasto, odontoblasto, tos, capsulas de drganos, ‘cementoblasto Ineso, dentina, cemento in fait, ‘Condroblastos Resiste la presicn Cantlago hialino, eartilago listico m [ali], Fibroblasto, oélula reti-- Forma el marco estructural del bazo, Sistema linfitico, bazo, calar,eélula de mis-—higado, ganglios linfiticos, més- Ijgado, sistema cardio- ero so, hepatocto el iso teido aiposo, vascular, pulmén, piel IV [alilV)j,a201V) _Cétulas epiteliales, Forma la malla de la limina densa Lamina basal células musculares, de la lamina basal para proporeio- células de Schwann nar soporte y fltracin v [al(V)],a2(V) Fibroblastos, eélulas Se relaciona con coldgena tipo ly Dermis, tendon, ligamen- rmesenquimatosas también eon la sustancia fundae tos, capsulas de érganos, mental de la placenta hhueso, cemento, placenta Vil [al(VIDJs Células epidérmicas Forma fibrillas de anclaje que fijan la Unién de epidermis y der- lamina densa ala lamina reticular mis subyacente =. La sintesis de coligena se leva a cabo en el RER cn la forma de cadenas individuales de preprocoligena (fig, 4-7), que son cadenas alfa que poseen secuencias waliouiles Be wiitasseidod eames Goo propéptidos, en los extremos amino y carboxilo. A medida que se sintetiza una molécula de préprocoligena, entra en In cisterna del RER, en donde se modifica, Primero se remueve la secuencia de seftal que dirige la molécula al RER; a continuacién se hidroxilan algunos de los residuos de prolina y lisina (por las enzimas hidrosilasa de peptidilprolina ¢ hidroxilasa de peptidil-lisina) en un proceso que se co- noce como modificacién de postransduceién para formar hidroxiprolina e hidroxilisina, respectivamente. Més ade- lante se glucosilan hidroxilisinas seleccionadas por la adicién de glucosa y galactosa, Se alinean entre sf tres moléculas de preprocokigena y se ensamblan para formar una configuracién helicoidal ‘ajustada que se conoce como molécula de procoligena. Se piensa que la precisién de su alineacién se leva a cabo por los propéptidos. Debido a que éstos no se envuelven entre sf, la molécula de procokigena semeja una cuerda enrollada apretadamente con extremos deshilachados. Al parecer, los propéptidos tienen la funcién adicional de Eonservarsolubles as molécula de procolégena y prevenit ee ot a agregacién espontinea en fibras de colégena lentro de la célula. CORRELACIONES CLINICAS Al final de una operacién se suturan cuidadosa- mente las supeficessecionadas de pil: por Io general, una semana después se quitan las suturas, La fuerza de tensidn de la dermis en ese punto slo 5 un 10% de la de la piel normal. En el transeurso de las cuatro semanas siguientes aumenta la fuer- za de tensién a un 80% aproximadamente resp to de lo normal, pero en muchos casos nunca Tega al 100%. La debilidad inicial se atribuye a la formacién de coligena tipo HT durante la ci- catrizacién inicial de la herida, en tanto que la mejoria ulterior de la fuerza de tensién se debe a Ja maduracién de la cicatriz en la que la colagena tipo III se reemplaza por coligena tipo I. Algunos individuos, en especial los de raza negra, estin predispuestos a una acumulaci6n exce- siva de colagena durante la cicatrizacién de heridas. En estos pacientes, la cicatriz forma un crecimiento elevado que se conace como queloide. Sintesis de colagena la sintesis de colagena acurre en el reticulo endoplasmic rugoso como cadenas individuales de preprocoldgena (cadenas alfa). Las moléculas de procolagena salen del RER mediante vesiculas de transferencia que las transportan al aparato de Golgi, en donde se modifican otra vez. por la adicién de oligosaedridos. Las moléculas de procolégena modificadasMatriz extracelular ® Tanserocén en el nico © Tacvecin do preprecolagona en FER Hidroxilacion (&@) 9 en RER sans Gtucosiacion (9) en RER Femacin do en ® ‘de procolagena en RER- © Secrecién de rocoigona a ‘raves dla red de Gog rans ! t “8 @ Soqmentacon de propépidos t | t Satopecatgera DL QDI @ Autoonsambisje espontineo DON. GODIN — e Nopeenigene pera WRN ROU — calgon Exquema de la secueneia de fenémenos en la sintesis de tipo | se empaquetan en la red de Golgi trans y se transportan de inmediato fuera de la célula. ‘A medida que la procoligena entra en el ambiente extracelulat, enzimas proteoliticas, las peptidasas de rocoliigena, segmentan los propéptidos (removiendo los extremos deshilachados) de las terminales amino y carboxilo (fig. 4-7). La molécula recién formada es més corta (260 nm de longitud) y se conoce como molécula de tropocolagena (colégena). Las moléeulas de tropo- coligena se autoensamblan de manera esponténea (fg. 4-7) en una direccién especifica cabeza con cola, en una disposicién escalonada con regularidad, formando fibrillas con bandas a 67 nm representativas de la cokigena de tipos 1, I, III, Vy VIL (fig. 4-5). La formacién y conservacin de la estructura fibrilar aumenta por enlices covalentes formados entre los residuos de lisina © hidroxilisina de moléculas de tropocokigena adyacentes. A medida que se autoensamblan las moléculas de tropocolégena en una disposici6n tridimensional, se alinean los espacios entre las cabezas y las colas de moléculas sucesivas en una sola hilera como regiones intersticiales repetidas (cada 67 nm), no en hileras adjuntas sino préximas (figs. 4-5 y 4-7). De igual forma, las superposiciones de cabezas y colas en hileras vecinas se encuentran en registro entre sf como las regiones superpuestas. Los metales pesados que se utilizan en microscopia electronica se depositan de manera preferencial en las regiones inters- ticiales, Por Io tanto, en la microscopia electronica la coligena muestra bandas oscuras y claras altermadas; las primeras presentan regiones del intersticio llenas con el ‘metal pesado y las bandas claras indican regiones super- puestas, en donde no puede depositarse el metal pesado (fig, 46). Laalineacién de las fibrillas de cokigena y los haces de fibras est determinada por las eélulas que los sintetizan, La procoligena se libera hacia los pliegues y grietas del plasmalems, que actiian como moldes que disponen las Rbrillas en formacién en una direceién apropiada, La orientacién de la fibrilla se incrementa adicionalmente a medida que las células remolean las fibrillas y las arrastran ieamente para ajustarse al patron requerido. En la colgena tipo IV no existe estructura fibrilar porque no se eliminan los propéptidos de la molécula de procoligena, Sus moléculas de procolagena se ensamblan en dimeros, que a continuacién forman una malla similar aun fieltro, CORRELACIONES CLINICAS La hidroxilaci6n de residuos de prolina exige la presencia de vitamina C. En individuos con una deficiencia de esta vitamina, las cadenas alfa de las moléculas de tropocolagena son incapaces de formar helices estables y las moléculas de tropocoligena no pueden agregarse en fibrillas. El trastorno, que se conoce como escorbuto, afecta primero los tejidos conectivos con un recambio elevado de coligena, como el ligamento periodontal y las encfas (fig 4-8). Debido a que estas dos estructuras tienen a su cargo la conservacién de los dientes en sus alveolos, los sintomas de escorbuto incluyen enefas con hemorragia y dientes flojos. Si la deficiencia de vitamina C es prolongada, también se afectan otros sitios. Estos sintomas pueden aliviarse consumiendo alimentos ricos en vitamina C. La deficiencia de la enzima hidroxilasa de lisilo, un trastorno genético que se conoce comosindrome de Ehlers-Danlos, produce un enlace transversal anormal entre moléculas de tropocolt gema. Los individuos afectados con esta anormalidad poseen fibras de cokigena anormales que dan lugar = articulaclones hipermovibles y piel hiperestens- ble. En muchos esos, Ia piel de los pacientes se tranmatiza con facilidad y el enfermo esti sujeto a luxaciones de las articulaciones afectadas. Fibras elasticas A diferencia de la coldgena, las flbras elasticas son sumamente ajustables y pueden estirarse una y media veces su longitud en reposo sin romperse. Cuando se libera la fuerza, las fibras elasticas regresan a su longitud en reposo. La elasticidad del tejido conectivo se debe, en gran parte, a la presencia de fibras elistieas en la matriz extracelular (figs. 4-9 y 4-10; véase fig, 4-2). Estas fibras suelen ser més delgadas, largas y ramificadas en el tejido conectivo laxo, pero pueden forinar haces mas gruesos en ligamentos y vainas fenestradas. Estos haces se encuentran en el ligamento amarillo de la columna vertebral y ocu- ren en vainas coneéntricas en las paredes de los vasos sanguneos mas grandes, Las fibras elisticas son elaboradas por fibroblastos y tejido coneetivo y también por células de miisculo liso de vasos sanguineos. Estin compuestas de elastina, una proteina rica en glicina, lisina, alanina, valina y prolina, pero que carece de hidroxilisina. Las cadenas de elastina se conservan juntas en forma tal que enatro moléculas de lisina, cada una perteneciente a una cadena de elastina diferente, forman enlaces covalentes entre si para constituir enlaces eruzados de desmosina. Estos residuos de desmosina son muy deformables y confieren una gran elasticidad alas fibras elisticas a tal grado que estas tiltimas pueden estirarse casi un 150% respeeto de sus longitudes en reposo antes de romperse. Después de estirarse, las fibras eldsticas regresan a sn longitud de reposo. Matriz extracelular #«= 77 Elcentro de las fibras elisticas se compone de elastina y lo rodea una vaina de mierofibrillas; cada microfibrlla tiene alrededor de 10 nm de démeto y se intogra con la glucoproteina fibrilina (fig. 4-11). Durante la formacién de fibras elisticas se elaboran primero las microfibrillas y continuacién se deposita elastina en el espacio rodeado por las microfibrillas (fig. 4-12). CORRELACIONES CLINICAS La integridad de las fibras elisticas depende de la presencia de microfibrillas. Los paciente con sindrome de Marfan tienen un defecto en el gen del cromosoma 15 que codifica fibrilina; en conse- cuencia, sus fibras elisticas no se desarrollan de manera normal. Las personas afectadas gravemente ccon este trastorno estén predispuestas a una rotura mortal de la aorta, MEMBRANA BASAL La membrana basal, observable con la microscopia de luz, revela en la microscopia electrénica una composicién que incluye la lamina basal y la lémina reticular La interfaz entre el epitelio y el tejido conectivo esta ‘ocupada por una region acelular y estrecha, la membrana basal, que se tiie bien mediante la reacci6n PAS y con otros colorantes histolégicos que detecta GAG. Una estructura similar a lt membrana basal, la Kimina externa, rodea ccélulas de mriseulo liso y esquelético, adipocitos y eélulas de Schwann, La membrana basal, aunque visible con la microscopia de luz, se define mejor mediante la microscopia electrénica y revela dos constituyentes: la Iimina basal, elaborada por cehulas epiteliales, y la Kimina reticular, formada por células del tejido conectivo (fig. 4-13). Fig. 4-8. «hed. St. Lonis, Mosby-Yeer Book, 1994.) Degradacién de coligena tipo I por fibroblasts, (Tomado de Ten Cate AR: Oral Histology: Development, Structure, and Function,78 «=» Matri2 extracelular Fig. 4-9. Obsérvese la presencia de fibras elisticas (flechas) en la rmatriz en esta fotomierograila de cartlag elisteo (270), Microfbriias| Fig. 4-11. Esquema de una fra clistica, Las microfibrillas dean Ia elastin aorta. Lamina basal 4a lamina basal elaborada por el epitelio se integra con la lamina licida y la Iémina reticular. Las fotomierografias de la imina basal muestran sus dos regiones: la limina licida, una regién electrolticida de 50 nm de grosor, justo abajo del epitelio, y la lamina densa, una regién electrodensa de 50 nm de grosor (figs. 4-13 a 4-15). La kimina licida consiste principalmente en las glu- coproteinas extracelulares laminina y entactina y también de integrinas y distroglucanos, receptores transmem- branales de laminina (ambos se comentan més adelante), que se proyectan desde la membrana de la célula epitelial hasta la lamina basal. Fig. 4-10. Tejido concetivo denso, regular y elistico. Observese que las fbras elisticas Son cortas y estan dispuestas en forma paral entreE 9 q WAFL G Hn Fig. 4-12. Fotomierogrataeletrnica del desarcll del lr eli tem Observes a presenta de mcrofblis que rodean a mati tl elastina puntat de flecha) CTemad de Fukuda, Ferrans VC TRG: Development of elastic filers of chal lgument, srt, tnd Tang of fetal and postnatal sheep: An ultrastructural and electron mleroscopie imiminchistohemial sty. Am J Anat 170397-625, 1984, Copy 1984 Reimpreso con autoracioa de Wiley-Liss In, una subsiiaria de John Wiley & Sons, Ine La limina densa incluye una malla de colégena tipo IV recubierta tanto en el lado de la lamina hicida como en. el de la lémina reticular por el proteoglucano perlacano. Las cadenas laterales de sulfato de heparan, que se proyectan del centro proteinico del perlacino, forman un polianién, La superficie de la Kimina reticular de la lamina densa también posee fibronectina. La laminina tiene dominios que se umen a la cokigena tipo IV, sulfato de heparén y las integrinas y distroglucanos de la membrana de la oélula epitelial, anclando asi esta ‘iltima a la imina basal. Al parecer, la kimina basal esta unida bien a la kimina reticular por varias sustancias, entre ellas fibronectina, fibrillas de anclaje (colégena tipo VII) y microfibrillas (fibrilina), todas elaboradas por fibroblastos de tejido conectivo (fig. 4-1 La Iimina basal acta como un filtro molecular y un sostén flexible para el epitelio suprayacente. El aspecto de filtracién no sélo se debe a la colégena tipo IV, cuya malla entremezclada forma un filtro fisico de poros de tamafo espectfico, sino también a las cargas negativas de su constituyente sulfato de heparan, que restringe de manera Matriz extracelular «= 79 preferencial el paso de moléculas de cargas negativas Una funcién adicional de la Kamina basal es dirigir la igracién de células a lo largo de su superficie, como en 1h reepitelizacion durante la reparacién de una herida 0 en el restablecimiento de uniones neuromusculares durante la regeneracién de nervios motores. Lamina reticular La lamina reticular deriva del componente del tejido conectivo y se encarga de fijar la lémina densa al tejido conectivo subyacente. La Kimina reticular (figs. 4-13, 4-14 y 4-16), una regién de grosor variable, es elaborada por fibroblastos y se compone de cokigena tipos I y III. Es la interfuz entre la Idmina basal y el tejido conectivo subyacente y su grosor varfa con el grado de fuerza de friecién del epitelio suprayacente. En consecuencia, es muy gruesa en la piel y muy delgada debajo de la trinica epitelial de los alveolos pulmonares. Las fibras de colégena tipos I y III de tejido conectivo forman asas hacia la kimina reticular, en donde interactiian con las microfibrillas y fibrillas de anclaje de la Kimina reticular y se unen a ellas. Mas atin, los grupos basicos de las fibras de colagena forman enlaces con los grupos icidos de los GAG de la lamina densa. Ademés, los dominios de unién de colégena y los dominios GAG de fibronectina ayudan adicionalmente a fijar la lamina basal a la limina reticular. Por consigniente, la vaina epitelial esta unida al tejido conectivo subyacente por estas interfaces acelulares y resistentes, la Kamina basal y la kimina reticular. Fig. 413. Fotomicrorai lectin de lamina basa de la mea humana: Obsérese los hemidesmosomas (fechas grandes y la plac de auclije entre la de snl fechs pein (<0 O80) Toma de Alber D, Jacabice FA: Principles an Practice of Ophthalmology Base Sciences Philadelphia, WD Sanders, 1994)80 «== Matriz extracelular rn 7 Praca de actin (colagena tipo Vi) Fitrilas de facisn ~ (colégena tipo Iv) INTEGRINAS Y iSTROGLUCANOS: Las integrinas y los distroglucanos son glucoproteinas transmembranales que actian como receptores de laminina y tembién organizadores del ensamble de Ia lamina basal Fibra reticulares (colégena tipo I) Lamina >) Nelda b Lamina a Lamina {basal @-14. Esquema de ls himinas baal y eti- a) cular. (Adaptado de Fawcett DW: Bloom and Fawoott’s A Textbook of Histology, 12th ed. Nev York, Chapman and Hall, 1994 Las integrinas son proteinas transmembranales simi- lares a los receptores de la membrana celular porque forman enlaces con ligandos. Sin embargo, a diferencia de las de los receptores, sus regiones citophismicas estin unidas al citosqneleto y sus ligandos no son moléculas de sefialamiento sino miembros estructurales de la matriz extracelular como colagena, laminina y fibronectina, Atin Fig. 4-15. La imagen corresponde a una eérnes de embrién de un palo de sels dis de tendo ls alas eptlias en ls mebrana en forma parcal, dejando al descubiero el pesto de fibilas de eolgena dispestas en Korma ortogonal. La barre blanca en la pare inferior inguerda ela area de 10 xm (© Robert L. Trelstad)Fllamentos intermedios “Queratinas Hemidesmosom: Antigeno pentigoide Buloso Intogrina ah, Fllamentos de facién Taminina Proteoglicane de sulfato de heparan Dominio globular de coldgena Vit Fibrila de fiacién ‘Dominio Reliceidal de eolagena Vit ae a Sane é Domine god caliene Fig. 4-16. Fotomicrogratia clectrénica dela limina basal del epitelio comieal (165 000). (Tomado de Albert D, Jukobiee FA: Principles and Practice of Ophthalmology: Basie Sciences. Philadelphia, WB Saunders, 1994.) inds, la relacién entre una integrina y su ligando es mucho mds débil que la que existe entre un receptor y su ligando, Las integrinas son mucho més numerosas que los receptores por tanto compensan la debilidad del enlace y permiten asimismo la migracién de eélulas a lo largo de una superficie de matriz extracelular. Las integrinas son heterodimeros (~ 250 000 daltones) compuestos de cadenas de glucoproteinas alfa y beta, cuyos extremos carboxilo se unen a talina y actinina alfa del citosqueleto. Sus terminales amino poseen sitios de unién para macromoléculas de la matriz extracelular (cap. 2, fig 2-32). Debido a que las integrinas unen el citosqueleto a la matriz extracelular, también se denominan enlazado- res transmembranales, La cadena alfa de la molécula de integrina une Ca** 0 Mg, cationes divalentes necesa- ios para la conservacién de la unién apropiada con el ligand Muchas integrinas difieren en su especificidad de li- gando, distribucisn celular y funcién. Algunas se conocen Matriz extracelular «=» 81 habitualmente como receptores para su ligando (p. ej., receptor de laminina, receptor de fibronectina). Las células pueden modular la afinidad de su receptor por su ligando al regular la disponibilidad de cationes divalentes, modificar la conformacién de la integrina o alterar de otra mane- rala afinidad de esta tltima por el ligando. De este modo, las células no estan sujetas en una posicién particular una ver que se unen sus integrinas a las macromoléculas de la matriz extracelular, pero pueden liberar sus enlaces integrina-ligando y alejarse de dicho sitio particular Ademés de sus funciones en la adherencia, las integri- nas actiian en la transdueeién de sefales bioquimicas en fenémenos intracelulares activando el sistema en easeadas de segundo mensajero. La funcionalidad de las integrinas en la transduccidn bioquimica se manifiesta por su capacidad para estimular diversas vfas de sefialamiento, incluyendo Ginasa de protefna activada por mitégeno, cinasa de protefna Cy vias de fosfoinositida, que conducen a la activacién del ciclo celular, la difereneiacisn de las eélulas, reorganizacién del citosqueleto, regulacién de la expresi6n de gen e incluso la muerte celular programada a través de apoptosis. Los distroglucanos son ghicoprotefnas que también estén compuestas de dos subunidades, un distroglueano beta transmembranal y un distroglucano alfa extracelular. El distroglucano alfa se une ala laminina de la kémina basal pero en diferentes sitios que la molécula de integrina, La molécula intracelular del distroglucano beta se une a la protefna de unién de actina distrofina que, a su vez, se tne a la actinina alfa del citosqueleto, Los distroglucanos y las integrinas tienen funciones importantes en el ensamble de las laminas basales porque los embriones que earecen de cualquiera de ellos o estas dos glucoprotefnas son incapaces de formar liminas basales normales. CORRELACIONES CLINICAS Los individuos con el trastorno autos6mico recesivo deficiencia de adhereneia de leucocitos no son capaces de sintetizar la eadena beta de las integrinas de los globulos blancos. Sus leucocitos no pueden adherirse a las células endoteliales de los vasos sanguineos y en consecuencia no pueden migrar a sitios de inflamacién. Los pacientes con esta enfer- mera tienen difeutad para combatir nfecctones waeterianas,