ANALISIS SITOMETRI ALIRAN

Analisis dilakukan dengan sitometer LSR II dan data dianalisis dengan software Flow-Jo
(BD). Panel antibodi dikonjugasi dengan fluorokom untuk sitometri aliran termasuk: CD3-
PrcP, CD4-Pacific Blue, CD8-V500 atau Pacific Orange, CD45RB atau CD44-Alexa fluoro -
700, CD27-APC, CD127-PE, KLRG-1 FITC. Ketika sitokin intraseluler IFN diuji, panel
yang digunakan adalah: sel CD8-PO, KLRG-1-FITC, CD62-PrCPcy5.5, CD44 Alexa-700,
CD27-APC, IFN--PE. Dalam semua tes kelayakan pewarnaan UV juga disertakan. Sitometri
aliran antibodi dibeli dari Life Technologies.

TIGA SIKLUS HASIL INFEKSI / PENGOBATAN UNTUK PERLINDUNGAN
Untuk membuat sebuah Model infeksi dan penyembuhan C57BL / 6 tikus , hewan diinokulasi
dengan infektif Spz (sampel protein sporozoit) yang terdapat CQ seperti yang dijelaskan
dalam bagian metode, merujuk pada infeksi / pengobatan . Perbedaan dosis dan frekuensi
rejimen infeksi / kesembuhan dibandingkan ( Tabel 1 ) .
Tiga kelompok hewan ditantang 4 , 8 atau 16 minggu pasca inokulasi terakhir. Hewan yang
darahnya negatif untuk parasitemia pada 14 hari pasca tantangan dinyatakan terlindungi.
Seratus persen dari hewan yang menerima tiga suntikan 20.000 Spz tetap sepenuhnya
dilindungi ketika ditantang delapan minggu pasca inokulasi ketiga, sedangkan yang
menantang 16 minggu pasca inokulasi ketiga dipamerkan hanya 40 % yang terlindungi (
Gambar 1 ) . Semua hewan yang dirawat dengan CQ (tapi tidak diinokulasi dengan SPZ ) dan
menantang dua minggu pasca suspensi pengobatan CQ menjadi parasitemia
mengkonfirmasikan kurangnya efek perlindungan residu CQ setelah suspensi obat .
Data ini menunjukkan imunisasi infeksi/pengobatan dengan tiga kelompok, 20.000 Spz
inokulasi menghasilkan perlindungan/proteksi .