Anda di halaman 1dari 8

ultracentrifuge The

Ada sejumlah teknik eksperimental ( misalnya,


Wiegner tabung dan keseimbangan Oden ) 29 yang memanfaatkan sedimentasi
di bawah graitasi untuk fraksi!nasi atau menentukan ukuran partikel
distribusi dalam sistem yang mengandung relatif kasar ditangguhkan
bahan seperti tanah dan pigmen " #ebuah met!de yang p!puler membawa
sebuah analisis ukuran sedimentasi kumulatif adalah met!de sald! , di
yang berat partikel menetap keluar ke panci keseimbangan
dicatat sebagai fungsi waktu " #edimentasi di bawah graitasi memiliki
batas praktis lebih rendah c " $ % &m " 'ebih kecil ( k!l!id ) partikel sedimen
Tabel 2"2 tingkat #edimentasi di bawah graitasi untuk bidang bermuatan kepadatan 2 g cm
( $
dalam air pada 2) * + , dihitung dari hukum #t!kes ,
-adius #edimentasi tingkat
$ ( T9 m ( $ nm ) 2,2 & $ . m T$2 s ( $ ( / nm h,$ )
$) 0 / m ( $) nm ) 2,2 & 1O 2 ms ( $ ( )"/%Amh ( $ )
3r4m ( $))nm ) 2,2 & 3T/ m s ( $ ( /) % % " 5 h( $ )
16 0 7m ( l 2 m ) 2,2 & 1O 2 ms ( $ ( / mm h( $ )
$) 0 8 m ( $) % am ) 2,2 & $) 0 9 m s ( $ ( ),/ m h( $ )
begitu lambat di bawah graitasi bahwa efek tersebut terhapus !leh pencampuran
kecenderungan difusi dan k!neksi "
:engan menggunakan kekuatan sentrifugal ketimbang graitasi , aplikasi
sedimentasi dapat diperpanjang untuk mempelajari sistem k!l!id ,
dan telah digunakan , khususnya , untuk karakterisasi
;at asal bi!l!gis , seperti pr!tein , asam nukleat dan
iruses<) ( <$ " 3ekuatan pend!r!ng pada m!lekul ditangguhkan atau partikel
kemudian menjadi m ( l = p ) ! > 2jt , di mana ? adalah kecepatan sudut dan &
jarak partikel dari sumbu r!tasi "
#ebuah ultracentrifuge adalah centrifuge berkecepatan tinggi yang dilengkapi dengan
sistem !ptik yang sesuai (biasanya #chlieren atau gangguan !ptik,
terakhir ini sangat berguna ketika k!nsentrasi rendah yang terlibat )
untuk merekam perilaku sedimentasi dan dengan fasilitas untuk menghilangkan
efek mengganggu arus k!neksi dan getaran " sampel
yang terkandung dalam sel = sekt!r berbentuk dipasang pada r!t!r ( biasanya c "
#ifat 3inetic <<
speed!meter
=Air turbin
r!t!r
ruang
schlieren !ptik
sistem
@ambar 2"7 Aitur penting dari ultracentrifuge udara did!r!ng
$/ cm diameter ) B ini berputar dalam ruang therm!statted mengandung
hidr!gen pada tekanan berkurang " Ceberapa mekanisme untuk mengemudi
r!t!r telah diteliti = #edberg , yang merintis bidang ini ,
dipekerjakan turbin minyak B ini telah digantikan !leh lebih sederhana dan
instrumen = udara did!r!ng dan digerakkan !leh tenaga listrik lebih murah "
Dltracentrifuge ini dapat digunakan dalam dua cara yang berbeda untuk menyelidiki
ditangguhkan materi k!l!id " :alam met!de kecepatan tinggi
bidang sentrifugal (sampai c " 9)) ))) g ) diterapkan dan perpindahan
batas dibentuk !leh sedimentasi dari m!lekul k!l!id atau
partikel diukur dari waktu ke waktu ( @ambar 2"4 ) " dalam
met!de kesetimbangan larutan k!l!id dikenai banyak
bidang sentrifugal yang lebih rendah , sampai sedimentasi dan difusi ( pencampuran )
kecenderungan keseimbangan satu sama lain dan distribusi kesetimbangan
partikel seluruh sampel tercapai "
kecepatan sedimentasi
5enyamakan kekuatan pend!r!ng di makr!m!lekul dalam field sentrifugal
dengan tahanan gesek dari media menangguhkan ,
2 E djc
dr
<9 sifat 3inetic
28h 2h
@ambar 2"4 #edimentasi dari sampel m!n!dispersed dari 'imulus haem!cyanin
diukur dengan Fhilp!t = #ens!n met!de schlieren ( $/ ))) re min 0 l ) <2 ( 1stimewa
dari American +hemical #!ciety )
dan , karena :f = kT ,
d& E m: ( l = p ) ! ) 2&
dt kT
5: ( G = p ) ! ) 2&
-T
atau 5 = H
-T
: ( l = p )
( 2"$7 )
di mana 5 adalah massa m!lar ( uns!lated ) dan s sedimentasi
k!efisien
d& % dt
mengintegrasikan ,
:alam &2l& G
a> 2 ( t2 =ti ,
( 2"$4 )
#ifat 3inetic <8
dimana & G dan &2 adalah jarak batas dari sumbu
r!tasi pada waktu t G dan t2 " Oleh karena itu ,
( 2"$/ )
Ial ini terbukti dari ekspresi di atas bahwa difusi yang sesuai
k!efisien juga harus diukur agar m!lekul atau partikel
massa dapat ditentukan dari data kecepatan sedimentasi " dalam hal ini
h!rmat , perc!baan terpisah diperlukan , karena difusi
k!efisien tidak dapat ditentukan secara akurat in situ , karena ada
tertentu self= penajaman puncak karena sedimentasi
3!efisien meningkat dengan menurunnya k!nsentrasi "
Ferawatan harus diambil untuk memastikan bahwa sistem dalam penyelidikan
tetap unc!agulated " Ial ini berlaku untuk setiap teknik untuk menentukan
m!lekul atau partikel massa " s , : dan dik!reksi dengan standar
suhu , biasanya 2) * + , dan harus diekstrap!lasikan ke n!l
k!nsentrasi "
:engan sistem p!lydispersed baik perluasan batas
( selain yang disebabkan !leh difusi ) atau pembentukan berbeda
puncak mewakili berbagai fraksi diamati " pengendapan
tidak menyediakan met!de tegas untuk menetapkan
h!m!genitas sistem k!l!id " 5isalnya, campuran serum
albumin dan hem!gl!bin adalah h!m!gen sehubungan dengan sedimentasi
kecepatan tetapi dua pr!tein yang mudah dibedakan dari masing=masing
lain dengan elektr!f!resis "
Fengetahuan tentang 5 dan memungkinkan :) dan, karenanya , rasi! : 2 % : ( yang
f rati! fiksi ) untuk dihitung "
sedimentasi ekuilibrium
Fertimbangkan aliran m!lekul atau partikel di daerah A dalam
s!lusi k!l!id di mana k!nsentrasi adalah c dan k!nsentrasi
gradien adalah dc % d& " 'aju aliran adalah cA ( d& % dt ) akibat sedimentasi ,
dan , dari hukum pertama Aick , = :A ( dc % djc ) karena difusi " kapan
sedimentasi kesetimbangan tercapai , aliran bersih adalah n!l , sehingga
d& dc
c = J : =
d K d&
<7 sifat 3inetic
dan , karena
d& E5: ( l = p ) . L > 2&
dt -T
kemudian
dc E ! ) 25 ( $ = p ) jcdjc
c -T
mengintegrasikan ,
( 2M9 )
di mana +i dan c2 adalah k!nsentrasi kesetimbangan sedimentasi di
jarak &t dan L 2 fr * m kapak r!tasi " Ferilaku ideal memiliki
telah diasumsikan "
3etika keadaan sedimentasi = difusi keseimbangan telah
tercapai, massa m!lekul atau partikel bisa, karena itu , akan diealuasi
tanpa pengetahuan tentang k!efisien difusi ( dan , karenanya ,
independen dari bentuk dan s!lasi ) dengan menentukan relatif
k!nsentrasi pada berbagai jarak dari sumbu r!tasi "
5!lekul kecil seperti gula telah dipelajari dengan teknik ini "
F!lidispersitas memperkenalkan k!mplikasi dan tercermin drift
5 dengan & " #ebaliknya, k!nsistensi 5 dengan & merupakan indikasi
h!m!genitas sampel terhadap 5"
3erugian dari teknik sedimentasi keseimbangan adalah
bahwa pembentukan keseimbangan dapat memakan waktu selama beberapa
hari , yang tidak hanya tidak nyaman secara umum , tetapi juga menekankan
pentingnya menghindari gangguan c!necti!nal "
:ari analisis te!ritis dari tahap=tahap peralihan di mana
;at terlarut sedang didistribusikan , Archibald$<7 telah mengembangkan
Teknik yang melibatkan pengukuran pada interal selama awal
tahap perc!baan sedimentasi keseimbangan sehingga tidak
memerlukan menunggu lama untuk keseimbangan yang akan didirikan " -asi! #1: dapat
dihitung dari ekspresi
dc % d& , J a> 2s ( 2=2) )
e& :
#ifat 3inetic <4
dimana dc % d L , adalah gradien k!nsentrasi pada meniskus , c , yang
3!nsentrasi pada meniskus dan & , jarak dari meniskus
dari sumbu r!tasi "
mengisi efek
Feng!batan sedimentasi dan difusi sedikit lebih
rumit ketika partikel dalam pertimbangan biaya" itu
k!ntra = i!n yang lebih kecil ( lihat Cab 4 ) cenderung sedimen pada tingkat lebih lambat
dan tertinggal di belakang partikel k!l!id sedimenting " F!tensi A dengan demikian
mengatur yang cenderung untuk mengembalikan k!ndisi asli dari keseluruhan
netralitas listrik dengan mempercepat gerakan = i!n k!ntra
dan memperlambat gerak partikel=partikel k!l!id "
#ituasi sebaliknya berlaku untuk difusi " The= i!n k!ntra kecil
cenderung menyebar lebih cepat dari partikel k!l!id dan tarik partikel
bersama dengan mereka dan meningkatkan tingkat mereka difusi "
Nfek ini dapat diatasi dengan menggunakan swamping elektr!lit
k!nsentrasi " #etiap p!tensi yang mungkin berkembang kemudian mudah
hilang !leh perpindahan yang sangat kecil dari sejumlah besar c!unteri!ns "
@erak Cr!wn -!tary
#elain translati!nai gerak , m!lekul ditangguhkan Cr!wn
atau partikel mengalami gerak r!tasi acak kapak mereka , sehingga
bahwa , dalam ketiadaan menyelaraskan kekuatan , mereka berada dalam keadaan acak
!rientasi " 3!efisien difusi r!tary dapat didefinisikan ( ellips!ids dari
re!lusi memiliki dua k!efisien tersebut mewakili r!tasi
masing=masing sumbu utama ) yang tergantung pada ukuran dan bentuk
m!lekul atau partikel dalam Ouesti!n2/ "
:i bawah pengaruh suatu keselarasan parsial kekuatan !rientating dari
partikel asimetris terjadi , yang merupakan keseimbangan antara
gaya menyelaraskan pada partikel dan difusi r!tary mereka" itu
Oleh karena itu sistem akan menjadi anis!tr!pic " Ial ini dimungkinkan untuk menarik
kesimpulan mengenai dimensi partikel dengan mempelajari berbagai
perubahan sifat fisik yang ditimbulkan !leh partikel tersebut
keselarasan "
#treaming birefringence<8
#ampel dikenai kecepatan gradien yang kuat = misalnya, dalam
silinder isk!meter k!nsentris ( @ambar 2"$2 ) = dan Iasil dari paket yang
keselarasan m!lekul atau partikel menyebabkan sebelumnya is!tr!pik
s!lusi untuk menjadi ganda pembiasan ( birefringent ) " besarnya
birefringence ini berhubungan dengan te!ri yang rumit dengan r!tasi
k!efisien difusi , dan, karenanya , ke m!lekul atau partikel
dimensi "
:alam kasus=kasus tertentu (misalnya besi ( 111 ) hidr!ksida s!l ) birefringence dapat
dihasilkan !leh aksi menyelaraskan medan listrik atau magnet "
dispersi dielektrik
3etika larutan yang mengandung m!lekul dip!le ditempatkan di antara
elektr!da dan mengalami arus b!lak=balik , m!lekul
cenderung untuk memutar dalam fase dengan arus, sehingga meningkatkan dielektrik
k!nstan dari s!lusi " #ebagai frekuensi meningkat , menjadi
lebih sulit bagi m!lekul dip!lar untuk mengatasi kental
#ifat 3inetic 98
A m!n!kr!matis
sumber
Pic! cr!ssed Q
prisma
!bserasi
telesk!p
@ambar 2"$2 Aparatus untuk mengamati streaming yang birefringence
resistensi medium cukup cepat untuk tetap dalam fase , dan
tetes k!nstanta dielektrik dalam kurang lebih bertahap fashi!n" masing=masing
frekuensi karakteristik di mana ada perubahan penting dari dielektrik
k!nstan berhubungan dengan waktu yang dibutuhkan untuk m!lekul untuk memutar tentang
sumbu tertentu , dan karenanya , untuk difusi r!tary yang sesuai
k!efisien "