No.

Dokumen : 01
Revisi : 00
Terbitan : 05/08/2014
Berlaku : 3 tahun
PENETAPAN KADAR KAPSUL
SIPROFLOKSASIN SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI
(KCKT)
Halaman : 1 dari 4
Disetujui oleh : ..





Laboratorium Fakultas Farmasi,
Universitas Indonesia

A. TUJUAN
Untuk memberikan suatu prosedur tetap penetapan kadar Kapsul Siprofloksasin sesuai metode yang
disarankan oleh USP 32

B. RUANG LINGKUP
Prosedur ini menjelaskan tentang tatacara penetapan kadar Kapsul Siprofloksasin sesuai USP 32

C. ACUAN
The United States Pharmacopeial Convention. 2008. United States Pharmacopeia 32. (CD-ROM).
Rockville: The United States Pharmacopeial Convention

D. PRINSIP
Siprofloksasin ditetapkan kadarnya secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)

E. ALAT DAN BAHAN
1. Alat :
a. Alat sonikasi
b. Gelas ukur 500 mL
c. Pipet tetes
d. Pipet volume
e. Timbangan analitik
f. Kertas perkamen
g. Microsyringe ujung tumpul 10 L
h. Labu terukur
i. Membran filter 0,45 m
j. Sistem Kromatografi


No. Dokumen : 01
Revisi : 00
Terbitan : 05/08/2014
Berlaku : 3 tahun
PENETAPAN KADAR KAPSUL
SIPROFLOKSASIN SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI
(KCKT)
Halaman : 2 dari 4
Disetujui oleh : ..





Laboratorium Fakultas Farmasi,
Universitas Indonesia
Alat Kromatografi : Alliance Waters

2695 dilengkapi dengan UV detektor dan photodiode

array detector Water

2695
Kolom : Sunfire

C18; 4,6 mm x 250 mm, 5 m (Water

)

2. Bahan :
Reagen :
a. Aquabidestilata
b. Asam Fosforat (Analytical grade)
c. Trietanolamin (Analytical grade)
d. Asetonitril (Analytical dan HPLC grade)

Standar dan Sampel :
a. USP Siprofloksasin Hidroklorida RS (tertelusur ke SI)
b. Siprofloksasin Etilendiamin analog RS (tertelusur ke SI)
c. Kapsul Siprofloksasin

F. PROSEDUR
1. Persiapan Sampel
a. Ambil 5 kapsul dan masukkan isi kapsul ke dalam tabung volumetri 500 mL
b. Tambahkan 400 mL larutan B, sonikasi selama 20 menit
c. Encerkan dengan larutan B sampai batas volume, saring dengan membran filter 0,45 m, akan
diperoleh larutan Siprofloksasin 0,20 mg/mL

2. Pembuatan Larutan
a. Larutan A
Tambahkan Asam Fosforat 0,025 M dengan Trietanolamin hingga mencapai pH 2,0



No. Dokumen : 01
Revisi : 00
Terbitan : 05/08/2014
Berlaku : 3 tahun
PENETAPAN KADAR KAPSUL
SIPROFLOKSASIN SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI
(KCKT)
Halaman : 3 dari 4
Disetujui oleh : ..





Laboratorium Fakultas Farmasi,
Universitas Indonesia
b. Larutan B
Campurkan Asetonitril dan larutan A (13:87)
c. Larutan C
Tambahkan Asam Fosforat 0,025 M dengan Trietanolamin hingga mencapai pH 3,0
d. Larutan Kesesuaian Sistem
Larutkan Siprofloksasin Etilendiamin analog RS 0,05 mg/mL ke dalam larutan standar
e. Larutan standar
Larutkan USP Siprofloksasin Hidroklorida RS 0,20 mg/mL ke dalam larutan B

3. Sistem Kromatografi
Masing-masing larutan sampel dan standar disuntikkan ke dalam alat kromatografi dengan kondisi
sebagai berikut :
a. Kolom : Sunfire

C18; 4,6 mm x 250 mm, 5 m (Water

)
b. Suhu : 30 1
c. Fase Gerak : Asetonitril dan larutan C (13:87)
d. Volume Injeksi : 10 L
e. Laju Alir : 1,5 mL/menit
f. Detektor : UV 278 nm

4. Uji Kesesuaian Sistem
a. Digunakan sampel berupa larutan standar dan larutan kesesuaian sistem
b. Sampel disuntikkan ke dalam alat kromatografi
c. Sistem dikatakan sesuai jika memenuhi parameter:
1. Waktu retensi : 6,4 10,8 menit pada Siprofloksasin, RRT 0,7 dan 1,0 pada
Siprofloksasin Etilendiamin analog dan Siprofloksasin
2. Resolusi : 6 antara Siprofloksasin Etilendiamin analog dan Siprofloksasin
3. Efisiensi kolom : 2500 dari puncak Siprofloksasin pada larutan standar


No. Dokumen : 01
Revisi : 00
Terbitan : 05/08/2014
Berlaku : 3 tahun
PENETAPAN KADAR KAPSUL
SIPROFLOKSASIN SECARA
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI
(KCKT)
Halaman : 4 dari 4
Disetujui oleh : ..





Laboratorium Fakultas Farmasi,
Universitas Indonesia
4. Faktor ikutan (Tf) : 2,0 pada larutan standar
5. Standar deviasi relatif : 1,5 % pada larutan standar

5. Analisis Siprofloksasin
Setiap satu batch analisis terdiri dari urutan sebagai berikut :
a. Uji Kesesuaian Sistem
b. Larutan standar
c. Larutan sampel

6. Interpretasi Hasil
Jumlah Siprofloksasin per kapsul dalam % (W) :
W = (r
U
/r
S
) x (C
S
/C
U
) x (Mr
1
/Mr
2
) x (100 / L)
r
U
= luas puncak larutan sampel
r
S
= luas puncak larutan standar
C
S
= konsentrasi USP Siprofloksasin Hidroklorida RS dalam larutan standar (mg/mL), dihitung
dari basis anhidrat
C
U
= konsentrasi Siprofloksasin dalam larutan sampel (mg/mL)
Mr
1
= berat molekul Siprofloksasin; 331,34
Mr
2
= berat molekul anhidrat Siprofloksasin Hidroklorida; 367,81

7. Kriteria Keterimaan
Kandungan Siprofloksasin (C
17
H
18
FN
3
O
3
) dalam kapsul 90,0%110,0% dari jumlah yang tertera
pada etiket


G. FORMULIR ???