ABSTRAK

Glutathione S-transferase (GSTs) adalah salah satu enzim detoksifikasi utama yang terlibat
dalam resistensi insektisida. Dalam penelitian ini, metodologi dioptimalkan untuk pemurnian
GSTs dan lokalisasinya dalam elektroforesis gel dua dimensi dari kumbang serbuk sari. Secara
spesifik pemurnian protein GST dilakukan dengan menggunakan kolom GSTrap 4B, selanjutnya
aktivitas protein dari supernatan sebelum pemurnian dibandingkan dengan aktivitas protein pada
fraksi terikat setelah pemurnian dengan gel elektroforesis dua dimensi (2D-E ). Identitas dari
lokalisasi spot protein dilakukan dengan menggunakan MS (mass spektrofotometry) dan
dianalisis lebih lanjut dengan identifikasi protein NanoLC-ESI-QUAD-TOF-MS/MS. Hasil
penelitian menunjukkan bahwa 2 dari 5 spot protein dimana GSTs dengan wilayah untuk kelas
Delta dan Epsilon subfamilies mirip dengan serangga lain. Namun 3 spot tidak menunjukkan
setiap pertandingan di NCBInr saat ini. Kedua GSTs kelas Delta dan Epsilon spesifik terlibat
dalam resistensi insektisida dan kelimpahannya yang relatif tinggi dalam 2D-E menunjukkan
bahwa enzim ini dapat memainkan peran dalam resistensi dari Meligethes aeneus ke pyrethroids
yang paling umum digunakan. Pendekatan yang digunakan dalam penelitian ini untuk lokalisasi
spesifik dari GSTs pada 2D-E yang dapat digunakan untuk analisis serupa pada organisme lain.