UNIVERSIDAD DE SONORA

DIVISIN DE CIENCIAS
BIOLGICAS Y DE LA SALUD


LICENCIATURA EN MEDICINA


LABORATORIO DE BIOQUMICA

PRCTICA 2
DETERMINACIN DE CONCENTRACIN DE GLUCOSA EN SUERO


ALUMNOS:
CALVO ARVAYO ABRAHAM DAVID
CARDONA SAMANIEGO ADILENE
HERRERA BARRIOS CRUZ DENIA
QUINEZ BENZE JOS ANTONIO

GRUPO: Z02 - SEGUNDO SEMESTRE


HERMOSILLO, SONORA 08 DE MAYO DEL 2014
OBJETIVO

Aprender a cuantificar, mediante un mtodo colorimtrico, la concentracin de
glucosa de una muestra problema (suero) utilizando el mtodo colorimtrico
enzimtico para glucosa srica de RANDOX.

INTRODUCCIN

La glucosa es el carbohidrato de mayor importancia fisiolgica y biomdica. Este
hidrato de carbono es rpidamente asimilado en el intestino y transportado hacia
los tejidos, principalmente el hgado, a travs del torrente sanguneo. A partir de la
glucosa se pueden formar los dems carbohidratos. La glucosa como cualquier
carbohidrato es la va ms rpida o de fcil asimilacin y/o utilizacin como fuente
de energa. La Diabetes mellitus es la principal patologa donde el desorden en los
niveles de glucosa es su caracterstica principal.
Entre los mtodos enzimticos ms usados para cuantificar glucosa en suero y
plasma se encuentra el mtodo de la glucosa-oxidasa, que se caracteriza por su
elevada especificidad. En este mtodo, la glucosa es oxidada por la enzima
glucosa oxidasa, generando cido glucurnico y perxido de hidrgeno. El
perxido de hidrgeno formado reacciona con un aceptor de oxgeno (como el 2,4-
diclorofenol, 4-aminofenazona, 4-aminopiridina, ortodianisadina) para formar un
indicador colorido. Cuando se usa como aceptor de oxgeno a la 4-
aminofenazona, se produce un color rojo-violeta.
Este mtodo no es afectado por la presencia de cido rico, cido ascrbico,
glutation, anticoagulantes, bilirrubina o creatinina a concentraciones fisiolgicas,
por lo que puede ser utilizado en todas las aplicaciones clnicas en las que se
desee estimar la concentracin de glucosa srica y/o plasmtica.

MATERIALES

Colormetro
Celdas de plstico de 1 cm
Micropipetas de 0.01 a 100 L, de 100 a 1000 l y puntas Un vaso de
precipitados de 250 mL
1 pipeta serolgica de 1 mL
4 tubos de 13 x 100
Gradilla para tubos
Mezclador (Vrtex)

REACTIVOS Y MUESTRAS PROBLEMAS
1. Reactivo Glucosa Oxidasa: Glucosa oxidasa 1.5 kU/L, peroxidasa 1.5
kU/L y 4-aminofenazona, en amortiguador de fosfato 0.1 M/L, pH 7 y fenol
11 mM/L. Contiene tambin azida de sodio 0.02%
2. Solucin patrn de glucosa: 100 mg/100 mL (5.55 mM/L).
3. Suero o plasma problema

MTODO

1. Etiquete un tubo de ensaye con el nombre problema y otro con patrn.
2. Agregue 1 mL del reactivo de glucosa oxidasa a los dos tubos de ensaye.
3. Aplique 0.01 mL de la muestra problema y patrn, a los tubos correspondientes
mezcle e incube durante 9 minutos a 15-25C.
4. Determine la OD500 del tubo problema y del patrn, contra el blanco de reactivo
antes de que transcurran 10 min y estime la concentracin de glucosa en la
muestra problema con las siguientes ecuaciones:
5. Compare los valores que obtuvo con los Valores Normales en suero para
adultos: 70 -100 mg/dL.

RESULTADOS Y DISCUSIN

Al realizar nuestra prctica obtuvimos como resultado 37.07 mg/dL de glucosa en
nuestra muestra siendo que los rangos normales son de 70 a 100 mg/dL. Segn
el kit usado.
Segn las fuentes consultadas, los niveles de glucosa en sangre por debajo de 70
mg/dL pueden resultar peligrosos. Al comparar nuestros resultados con los dems
equipos que se encontraban en la prctica nos dimos cuenta que los resultados
que obtuvieron ellos tambin eran muy bajos as que planteamos 2 hiptesis:
1. La muestra ya tena tiempo(ms de 24 horas) , por lo cual los niveles de
glucosa se vieron alterados.
2. Un procedimiento de la prctica no se hiso adecuadamente.
Al final optamos por la segunda hiptesis pues nos dimos cuenta que no agitamos
bien el plasma junto con el reactivo. Esto lo pudimos comprobar al comparar los
resultados con la segunda particin del laboratorio pues ellos obtuvieron rangos
dentro de los normales e incluso algunos por arriba de estos.



CONCLUSIN

Con la prctica realizada podemos concluir que para calcular la concentracin de
glucosa en suero se debe seguir el procedimiento estrictamente ya que si se
cometen algunos errores, los valores resultantes pueden salir alterados, como nos
ocurri a nosotros en el laboratorio; adems se deben de tener en cuenta otros
factores que podran alterar los resultados, como en este caso el tiempo que tiene
el suero a analizarse, entre otros aspectos.
Este es un procedimiento que es de gran importancia conocer, puesto que en un
futuro, cuando estemos ejerciendo como mdicos, es uno de los principales y ms
frecuentes estudios de los que ocuparemos hacer uso.

BIBLIOGRAFA

http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003482.htm
http://www.netdoctor.es/articulo/niveles-glucosa-en-sangre